IL-17细胞因子家族调节黏膜免疫的研究进展

皮肤和黏膜上皮细胞既是机体的物理屏障,又是机体防御微生物的第一道防线。上皮细胞与白细胞、树突细胞(DCs)等之间的相互作用,是机体产生适应性免疫反应的重要因素。IL-17细胞因子家族是最近新发现的具有强大的促炎症作用的细胞因子,它们在机体的固有和适应性免疫中发挥着重要作用,IL-17A、IL-17C和IL-17F能够直接作用于组织的上皮细胞,诱导各种免疫反应来对抗病原体,且能够促进组织的修复。IL-17E最基本的作用是作用于白细胞和诱导Ⅱ型免疫,这在其对抗寄生虫的作用中是非常关键的,此外,IL-17E还可以反向调节白细胞对IL-17A和IL-17F的产生;而对于IL-17B和IL-17D的研究则相对较少一些。     

产肠毒素大肠杆菌感染IPEC-J2细胞后IL-17细胞因子表达变化及其功能初探

产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic E.coli, ETEC)是引起新生和断奶仔猪腹泻(post-weaning diarrhea, PWD)的最重要的病原之一。ETEC进入肠道后与肠上皮细胞的相互作用既是该细菌致病的前提条件,也是激发宿主免疫反应的基础。本研究旨在分析ETEC感染猪肠上皮细胞后IL-17细胞因子表达变化,同时探索细胞因子在抵抗ETEC感染中的免疫防御机制。本研究采用猪肠上皮细胞系IPEC-J2和产肠毒素大肠杆菌标准株(C83901)为主要研究材料,通过RT-PCR、ELISA、免疫荧光及免疫印迹的方法分析了IL-17细胞因子及肠黏膜免疫防御相关基因在感染前后的变化。同时,进一步研究了IPEC-J2细胞中相关IL-17细胞因子刺激对肠黏膜防御相关基因的调控作用。结果表明,除IL-17D未检测到外,C83901能促进所有IL-17细胞因子mRNA的转录,尤其能显著上调IL-17A、IL-17C在基因和蛋白水平的表达。ETEC感染或者体外添加IL-17A/IL-17C有利于IPEC-J2细胞中黏蛋白(mucin-2)、紧密连接蛋白(claudin-1、 claudin-2)及防御素pBD-2的表达。结果提示,ETEC感染后,肠上皮细胞通过调节IL-17细胞因子的表达进而增强肠黏膜屏障功能以抵抗该细菌的入侵。     

Th17细胞和IL-17在小鼠寄生虫免疫中的作用

Th17细胞（T helper 17 cells,Th17）是CD4~＋T细胞分化的亚群细胞之一,能够特异性地分泌细胞因子IL-17（interleukin-17,IL-17）,通过IL-17、IL-21、IL-23等细胞因子介导炎症反应和针对细菌的抗感染免疫,同时在寄生虫免疫中发挥重要作用。     

石膏样小孢子菌感染小鼠的Dectin-1、TLR-2和TLR-4及细胞因子动态变化

本试验旨在研究石膏样小孢子菌经皮肤感染小鼠后皮肤损伤组织中模式识别受体Dectin-1、TLR-2和TLR-4及细胞因子动态变化规律。通过对C57BL/6小鼠皮下接种大熊猫源石膏样小孢子菌,分别在第3、7和14天取病变皮肤组织,经PAS染色和HE染色观察孢子定植部位和病理损伤;分别在第3、6和12小时取病变皮肤组织,用荧光定量PCR检测受体mRNA的转录表达量;分别在第1、3、7和14天取样,用荧光定量PCR检测细胞因子mRNA的转录表达量。结果表明:石膏样小孢子菌感染小鼠后导致皮下脓肿,大量的炎性细胞浸润,并伴有角质层增厚。试验中模式识别受体Dectin-1、TLR-2和TLR-4的转录表达量增加(P0.01),细胞因子IL-6、IL-1β、IL-23、 TGF-β、IL-17A、IL-17F和IL-22的转录表达量增加(P0.01)。模式识别受体通过识别病原菌表面模式识别分子而引发免疫反应。本研究表明,机体感染石膏样小孢子菌后,模式识别受体表达显著增加,并通过识别菌体表面模式识别分子从而激活Th17途径,分化成熟的Th17细胞分泌细胞因子IL-22、IL-17A和IL-17F,从而发挥抗菌作用。     

白细胞介素-2对犬瘟热疫苗免疫效果的影响

白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)是由激活的T淋巴细胞产生的具有广泛生物活性的细胞因子,能激活T淋巴细胞,增强CTL的细胞毒活性,刺激细胞分泌IFN-γ等细胞因子,促进机体的细胞免疫反应;同时也能激活B淋巴细胞,参与机体的体液免疫反应.     

白细胞介素21及其免疫调节研究进展

白细胞介素21(IL-21)是新近发现的一种细胞因子,主要由激活的CD4+T细胞产生。IL-21通过其受体IL-21R发挥多种生物作用。IL-21R属于I型细胞因子受体家族,与IL-2、IL-4、IL-7、IL-9和IL-15受体共同享有γ链(γc)。许多研究表明IL-21独自或与其他细胞因子协同影响多种免疫细胞的增殖、生存、分化和功能,参与对免疫反应稳态平衡的调节。为了更全面了解IL-21研究进展,论文对IL-21与IR-21R的发现、结构特征、表达分布、信号通路以及IL-21对免疫细胞的调节作用进行综述。     

羊口疮病毒刺激山羊淋巴细胞增殖及细胞因子产生特性的研究

为研究促炎性细胞因子IL-17是否参与羊口疮炎症的发生,用羊口疮强、弱毒株分别体外刺激山羊外周血单个核淋巴细胞(PBMCs),采用real-time PCR方法检测IL-17及与Th17细胞分化并活化相关的细胞因子mRNA水平。结果表明用羊口疮病毒强毒株刺激山羊PBMCs后,IL-17转录水平升高;与Th17细胞分化并活化相关的细胞因子如TGF-β、IL-1β、IL-6和IL-23P19转录水平变化明显。证明羊口疮病毒强毒株能刺激羊PBMCs增殖,使初始T细胞分化为Th17细胞并活化分泌IL-17,从而介导炎症反应。     

氨基酸代谢与免疫反应

炎症反应和感染性疾病均可改变机体的蛋白质和氨基酸需要,导致动物采食量下降、生长受阻和肌肉消耗,这主要是因细胞因子(如IL-1、IL-6、TNF-α)的增加而改变了蛋白质代谢。在免疫反应中,氨基酸将发生重分配并主要用于合成参与炎症和免疫反应的蛋白质以及参与免疫细胞增殖和其他免疫反应的重要化合物。免疫系统的活化可干扰机体正常的生理反应并导致对某些特殊氨基酸的需要量增加。本文主要综述了某些特殊氨基酸(通常是必需氨基酸)在免疫反应中的重要作用。     

白细胞介素18研究概况

IL-18是一种重要的免疫调节因子,主要由单核巨噬细胞系统的细胞分泌,在结构上属于IL-1家族,在功能上与IL-12相似,且二者有协同效应。IL-18具有多种生物学功能,它不仅可以增强Th1型免疫反应,而且在Th2型免疫反应中也发挥一定的作用,在抗病原微生物感染,抗肿瘤等方面有着潜在的应用前景。在集约化畜禽养殖业中,包括IL-18在内的细胞因子作为天然的免疫调节剂和疫苗佐剂,目前已被公认为是一种可以替代传统疗法的新型免疫调节剂。     

猪附红细胞体感染树突状细胞对Th17相关因子表达的影响

为检测树突状细胞(DC)受猪附红细胞体(M.suis)刺激并接种于感染M.suis小鼠后细胞因子IL-6、IL-23、IL-17、转化生长因子-β(TGF-β)量的变化,将感染M.suis的C57BL/6小鼠分为2组,用M.suis致敏的DC2.4和未致敏的DC2.4接种于2组小鼠后,采用ELISA方法检测第1、3、5、7天细胞因子IL-6、IL-23、IL-17、TGF-β的变化.结果显示:M.suis小鼠模型接种致敏DC2.4后第1、3、5和7天,外周血中IL-6水平高于对照组(第3～5天,P＜0.05),第5天水平达高峰;IL-23和IL-17水平高于对照组(P＜0.05),第3天水平达高峰;TGF-β水平高于对照组(P＜0.05),第1天水平达高峰.IL-17与IL-6表达量两者呈正相关,r=0.848且P＜0.01;IL-17与IL-23呈正相关,r=0.604且P＜0.01;IL-17与TGF-β呈正相关,r=0.683＞0,且P＜0.01.结论:致敏DC可通过细胞因子的分泌促进Th0向Th17分化,TGF-β、IL-6协同IL-23共同作用促进Th17分泌IL-17,进一步为Th17亚群在附红细胞体感染过程中的作用提供理论数据.     

3类CpG ODNs正调节猪IP-10基因的表达研究

CpG ODN诱导不同物种先天性免疫反应的分析结果表明,诱导细胞因子(CK)分布的种类和水平存在明显的异同。试验对3类CpG ODNs(A、B、C类)如何激活猪先天性免疫生物标记及猪免疫细胞在体内外培养(含CpGODNs)中的先天性免疫反应动力学进行了研究。利用实时定量PCR(SYBR Green)分析了细胞因子和趋化因子基因的mRNA表达水平。结果发现,A-类CpG ODN可显著诱发IFN-γ、IL-12(P40)、IL-6、IL-4、TNF-αmRNA的瞬间表达;C-类CpG ODN可显著诱发IFN-γ、IFN-α、IL-12 mRNA的表达,并使IL-4(Th-2型)mRNA降至最低表达水平,GCODNs可刺激使一些细胞因子的表达水平降至最低;B-classGpC ODN7909能显著影响IL-12(P35)mRNA表达水平。值得注意的是,12 h时3类CpG ODNs刺激均可显著诱导IP-10的mRNA表达。体内外试验结果表明,IP-10可作为CpG ODNs诱发猪免疫活性的生物标记。     

金黄色葡萄球菌诱导的亚临床乳房炎小鼠血清IL-17研究

细胞因子与乳腺免疫紧密相关,IL-17是否是介导乳腺免疫的重要细胞因子对深入研究乳腺免疫机制和乳房炎防控具有重要意义。研究以分娩后7~12d的C57BL/6小鼠为模型动物,将从隐性乳房炎的奶牛乳汁分离的金黄色葡萄球菌(S.aureus)50μL(1×107CFU)或等量的无菌生理盐水通过乳导管缓慢注入小鼠第四、五对乳腺,分别于感染后2h、4h、8h、12h、18h、24h、36h、48h、60h和72h摘眼球采血并分离血清,通过ELISA法测定血清中IL-17A、IL-6、TGF-β的含量。结果显示IL-17在S.aureus感染后8~24h含量升高,其中18h时显著高于对照小鼠,48h和时60hIL-17低于对照小鼠,而IL-6和TGF-β含量无明显变化。研究结果表明,这小鼠存在已分化的记忆性IL-17分泌细胞,S.aureus的感染诱导其快速的分泌了IL-17,也证实IL-17也是乳房炎病理过程中的细胞因子之一。     

金华猪与长白猪肠道IL-17C表达差异研究

白介素-17C(IL-17C)是IL-17细胞因子家族成员之一,在宿主先天免疫防御和炎症中发挥重要的作用。研究IL-17C在金华猪与长白猪肠道中的表达特性对于了解不同品种猪抗病力差异的分子机制具有一定的意义。本研究利用RT-PCR及免疫荧光的方法分析了IL-17C基因及其蛋白在金华猪与长白猪空肠及回肠中的表达情况。结果表明,金华猪及长白猪回肠中IL-17C的表达量均高于其在空肠中的表达量,金华猪IL-17C基因在空肠的表达量显著高于长白猪。     

浅黄分枝杆菌感染鼠细胞免疫应答的特征分析

非结核分枝杆菌与结核杆菌同属分枝杆菌属,在自然环境中分布广泛,是一种环境致病菌。本研究将分离的浅黄分枝杆菌感染C57BL/6J小鼠,应用病理切片分析肝脏的病理变化,并采用荧光定量PCR检测肝脏中细胞因子IFN-γ,IL-12b,TNF-α,IL-10,NLRP3和TGF-β表达量的变化。结果发现,肝脏组织出现少量的炎性细胞浸润,而且感染组小鼠肝脏IFN-γ,IL-12b的表达量明显高于对照组,IL-10只有微弱的表达。上述结果表明,抗浅黄分枝杆菌感染免疫反应主要以Th1免疫反应为主。     

鸡GM-CSF基因对传染性法氏囊病病毒VP2 DNA疫苗的免疫调节作用

为了探讨鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因对鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2 DNA疫苗诱导的免疫反应的影响,将pTriEx-4-VP2-GM-CSF质粒免疫SPF鸡,加强免疫2周后,进行IBDV强毒攻击,检测机体免疫相关指标。结果表明:鸡GM-CSF基因能够增强VP2 DNA疫苗诱导的特异性免疫反应,影响细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10的表达水平,对外周血淋巴细胞的增殖没有显著影响。这一结果提示鸡GM-CSF基因对IBDV VP2 DNA疫苗具有一定的免疫调节作用。     

骨髓源肥大细胞通过甘露糖受体识别FMDV-VLPs的细胞因子应答

为了研究骨髓源肥大细胞（BMMCs）通过甘露糖受体对口蹄疫病毒样颗粒（FMDV-VLPs）的细胞因子应答效应，本研究构建了重组pCMV-HA-HBcAg-VP1-VP4质粒，并转染CHO-K1细胞以制备FMDV-VLPs。用FMDV-VLPs负载经甘露糖受体（MR）抑制剂Mannan处理的BMMCs （iMR-VLP组），并设置只负载FMDV-VLPs组（VLP组）和单纯细胞组（Control组）作为对照，收集细胞上清液，用细胞因子芯片检测不同处理组BMMCs细胞上清中细胞因子的含量。结果显示：与Control组相比，VLPs组BMMCs表达IL-1α、IL-2、IL-4、IL-15、IL-17A、IL-21、TNF-α、IFN-γ、CC17和CCL21均显著上调（P<0.05），而IL-10没有显著变化，iMR-VLP组BMMCs表达IL-1α、IL-2、IL-4、IL-15、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、CCL-17和L-Selectin显著下调（P<0.05），而IL-9、IL-10、CCL19和CCL21的表达则呈上调变化。综上所述，FMDV-VLPs可以促进BMMCs一系列细胞因子的分泌，而抑制MR后，BMMCs分泌细胞因子能力受到了一定程度的抑制，表明FMDV-VLPs可能通过BMMCs的甘露糖受体增强Th1型细胞因子分泌、有效抑制能引起免疫抑制的IL-10的分泌，并降低介导T细胞的再循环的CCL19和CCL21的形成。研究结果为基于肥大细胞甘露糖受体应答效应的口蹄疫新型疫苗的研发提供了理论依据和新思路。     

IL-10对感染口蹄疫病毒的树突状细胞的影响

树突状细胞(dendritic cells,DC)是机体中重要的抗原递呈细胞,在病毒感染机体后的免疫调节过程中具有重要作用。为研究调节IL-10的分泌是否会影响DC感染病毒后的免疫反应,本研究用FMDV感染DC后发现,IL-10的分泌量可以影响DC在免疫过程中各种细胞因子的表达,故认为IL-10在口蹄疫病毒感染过程中对机体的免疫调节具有重要的影响。     

堪萨斯分枝杆菌感染食蟹猴的临床及免疫特征研究

观察食蟹猴人工感染堪萨斯分枝杆菌的临床及免疫反应变化。通过气管注射法接种3只食蟹猴堪萨斯分枝杆菌,观察临床症状,每2～4周进行结核菌素试验、血常规检测、流式细胞分析、细胞因子和抗体检测,评价感染状态,在第16周对动物实施安乐死和尸检。感染后,动物体重出现一过性降低,2周后结核菌素试验阳性;白细胞及其亚群、T淋巴细胞亚群数量均出现升高;促炎症因子TNF-α、IFN-"、IL-1β、IL-17A和抑炎症因子IL-4、IL-10浓度在2周后开始升高,并维持较高水平;尸检仅1只猴肺左中叶出现实变,HE染色见间质性肺炎伴肉芽肿,病灶肺组织载菌量为5 000 CFU/g。3只食蟹猴均成功感染堪萨斯分枝杆菌,其中2只为一过性感染,所示动态免疫反应与抗感染过程相关。     

鸡免疫器官中Th1和Th2型细胞因子mRNA转录水平的比较

为了研究鸡免疫器官中细胞因子的基础转录水平,本试验采用SYBR Green I实时荧光定量PCR方法,检测56日龄鸡免疫器官中Th1类细胞因子及Th2类细胞因子的m RNA相对表达量并进行比较。结果显示,4种细胞因子在盲肠扁桃体中的表达水平均高于腔上囊。脾脏中细胞因子表达水平总体上较同为外周免疫器官的盲肠扁桃体低。胸腺、脾脏与腔上囊中IFN-γ与IL-4的表达呈负相关性。研究表明,盲肠扁桃体作为可直接参与免疫反应的外周免疫器官,其免疫活性可能较中枢免疫器官腔上囊更高。IFN-γ与IL-4作为最具代表性的Th1与Th2类细胞因子,其表达表现为相互抑制。     

皂树皂苷QS21增强猪支原体肺炎活疫苗滴鼻免疫小鼠效果评价

为提高猪支原体肺炎活疫苗的滴鼻免疫效果,以猪支原体肺炎(168株)活疫苗为抗原,以QS21为免疫佐剂混合后滴鼻免疫小鼠,ELISA 法检测免疫效果,包括血清和支气管肺泡灌洗液中抗原特异性抗体水平,并测定了Th1型细胞因子IFN-γ、Th2型细胞因子IL-4和Th17型细胞因子IL-17的分泌情况。结果表明,QS21能激活黏膜和全身性的体液免疫,显著升高血清和支气管肺泡灌洗液中IgG,IgG1、IgG2a抗体含量,并能提高支气管肺泡灌洗液中黏膜免疫抗体sIgA的含量。QS21还能显著增加支气管肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ和IL-17的分泌,激活Th1、Th2和Th17型细胞免疫应答。以上结果表明QS21能全面激活免疫系统,具有开发为猪支原体肺炎活疫苗黏膜免疫佐剂的应用前景。