枇杷原生质体培养再生植株（简报）

枇杷原生质体培养再生植株（简报）林顺权，陈振光（福建农业大学园艺系，福州３５０００２）关键词普通枇杷；原生质体；再生植株中国分类号５６６７．３以普通批把（Ｅｒｉｏｂｏｔｐｅ声ｐｏｎｉｃａＬｉｎｄｌ．）的球形胚、鱼雷形胚和子叶形胚作为胚培养接种材料诱导...     

长期继代培养柑桔愈伤组织原生质体植株再生

长期继代培养柑桔愈伤组织原生质体植株再生①林定波沈德绪（１浙江农业大学园艺系，杭州３１００２９）ＰｌａｎｔＲｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎＦｒｏｍＰｒｏｔｏｐｌａｓｔｏｆＣｉｔｒｕｓＣａｌｕｓＳｕｂｃｕｌｔｕｒｅｄＦｏｒＬｏｎｇ┐ＴｉｍｅＬｉｎＤｉｎｇｂｏＳ...     

一个新的柑桔属间体细胞杂种

通过ＰＥＧ（聚乙二醇）诱导原生质体融合，进行了伏令夏橙（ＣｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓＯｓｂ．ｃｖ．‘ｖａｌｅｎｃｉａ’）＋枳橙（ＰｏｎｃｉｒｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔａＲａｆ．×Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓＯｓｂ．）的体细胞杂交，培养获得了５０株再生植株．经细胞学检查和同工酶分析鉴定，确认有６株为伏令夏橙和枳橙的体细胞杂种，它们均为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝３６），具有双亲综合的ＧＯＴ和ＳＫＤＨ同工酶带型．融合后原生质体经３种培养方式比较结果表明，以ＬＭＴ（低熔点琼脂糖）软包埋培养效果最好．     

龙眼原生质体培养高效再生体系的研究（简报）

龙眼原生质体培养高效再生体系的研究（简报）赖钟雄陈振光（福建农业大学亚热带果树研究所，福州３５０００２）关键词龙眼；原生质体培养，再生植株；高效体系中图分类号Ｓ６６７．３从龙眼（ＥｕｐｈｏｒｉａｌｏｎｇａｎａＬａｍ．）品种红核仔、东壁等开花后４０—...     

柑桔原生质体抗热性及自由基清除剂对其影响

山金柑（ＦｏｒｔｕｎｅｌａｈｉｎｄｓｉＯｓｄ．ｃｖｓｗｉｎｇｌｅ）,伏令夏橙（ＣｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓＯｓｂ．ｃｖｖａｌｅｎｃｉａ）和种间杂种Ｍｕｒｃｏｔ桔橙（Ｃ．ｒｅｔｉｃｕｌａｔａＢｌａｎｃｅⅹＣ．ＳｉｎｅｎｓｉｓＯｓｂ．ｃｖｍｕｒｃｏｔ）的胚性愈伤组织经酶法分离原生质体,测定原生质体在不同高温下的完整率和活性率。结果表明：耐热性不同的柑桔胚性愈伤组织原生体在细胞膜热稳定性上存在明显差异,山金柑（５２．４９℃）＞伏令夏橙（５０．４２℃）。由原生质体活性率的变化计算出的半致死温度（ＬＴ５０）可用于柑桔原生质体耐热力的测定。超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的拮抗剂二乙基二硫化氨基甲酸钠（ＤＤＣ）能显著降低柑桔原生质体的抗热性;自由基清除剂苯甲酸钠（ＳＢＮ）则显著提高了柑桔原生质体的抗热性;ＳＢＮ对耐热性弱的品种的保护效果高于对耐热性强品种的保护效果。     

野大麦幼根和幼叶悬浮细胞系的原生质体培养

以野大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍｂｒｅｖｉｓｕｂｕｌａｔｕｍ（Ｔｒｉｎ．）Ｌｉｎｋ）的幼根、幼叶为外植体,诱导愈伤组织,建立悬浮细胞系。利用胚性悬浮细胞系进行质壁分离处理再游离原生质体,在不同的光照条件下进行原生质体培养,并由原生质体再生出小细胞团。     

不同供体原生质体前处理方法对甘蓝与萝卜属间原生质体融合植株？…

用酶法分离甘蓝下胚轴原生质体和萝卜叶肉原生质体，对供体原原质体（萝卜）进行融合前单因素（酶ＥｃｏＲＩ）或双因素复合处理（酶ＥｃｏＲＩ＋ＵＶ０．０３５～０．１０５Ｊ／ｃｍ＾２），用ＰＥＧ法诱导甘蓝与萝卜属间非对称性原生质体融合。结果表明，（１）不同处理方法对植株再生率有明显影响，对称性融合植株再生率为８．５％，非对称性融合植株再生率低３个百分点；单因素处理植株再生率达１１％，双因素复合处理植株再生率     

龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus)原生质体制备与再生条件研究

报道了龟裂链霉菌（ Ｓｔｒｅｐｔｏｍ ｙｃｅｓ ｒｉｍｏｓｕｓ） 原生质体制备与再生最佳条件和该原生质体对抗生素的抗性结果。在 Ｓ生长培养基中加入φ＝ １ ％ 甘氨酸进行菌丝体培养２４ ｈ ,原生质体制备最佳条件为：溶菌酶浓度φ＝ ３ ％ 、酶解温度２８ ℃、酶解时间９０ ｍｉｎ ,其制备的原生质体数达到６ ．０ 亿个／ ｍ Ｌ 以上;原生质体最佳再生培养基为 Ｒ５ 再生培养,其再生率达到４６ ％ 。     

禾谷镰孢原生质体的形成与再生

研究报道了制备禾谷镰孢（ＦｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍＳｃｈｗ．）原生质体的方法及影响原生质体再生的条件。ＰＤＳ培养液中培养的菌丝和５％绿豆汁中产生的分生孢子，在２８℃下通过蜗牛酶（３％）、蜗牛酶＋纤维素酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％＋１．５％）酶解，２ｈ开始有原生质体释放，５ｈ左右达释放高峰，后趋于稳定。而以纤维素酶（３％）、溶菌酶（３％）、蜗牛酶＋纤维素酶（１．５％＋１．５％）、蜗牛酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％）、纤维素酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％）处理，原生质体形成效果较差。原生质体在ＰＤＡＳ高渗培养基上再生频率较高（２０％～３０％），在ＭＭＳ上再生频率较低，而在ＮＭＳ上原生质体则不能再生。在ＰＤＡＳ中加入ＫＣｌＯ３和ＭＮＮＧ对原生质体再生有一定影响     

大豆体细胞胚胎发生及植株再生

以野生大豆（ＧｌｙｃｉｎｅｓｏｊａｓｉｅｂｅｔＺｕｃｃ）三个品系、半野生大豆（Ｇｌｙｃｉｎｅｇｒａｃｉｌｉｓｓｋｖ）１个品系、栽培大豆（ＧｌｙｃｉｎｅｍａｘＬＭｅｒｒｉｌ）４个品系为材料，进行组织培养．探讨了大豆体细胞组织再生植株的主要影响因素，并以器官分化和体细胞胚两种不同方式再生完整大豆植株。     

酿酒酵母与糖化酵母的核倍性融合株的构建

在探讨原生质体制备、融合及再生条件的基础上，采用聚乙二醇（ＰＥＧ）对耐高温的酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＨＵ－ＴＹ－１Ａ菌株和淀粉发酵力最强的糖化酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｄｉ－ａｓｔａｔｉｃｕｓ）５２０６－１Ｂ菌株进行种间或同株间的原生质体融合，获得了数株ＨＵ－ＴＹ－１Ａ和５２０６－１Ｂ的同株以及种间融合株，融合率为（１．３～９．０）×１０￣（－６）．通过测定融合株的细胞体积大小、ＤＮＡ含量、遗传稳定性和营养要求等表明：融合株细胞体积和ＤＮＡ含量约为两亲株之和；种间融会株具有双亲株的遗传特性；融合株的倍性为２ｎ，３ｎ，４ｎ及５ｎ。     

几种组织培养植物的染色体分析

本文报道了紫参（ＳａｌｖｉａｃｈｉｎｅｎｓｉｓＢｅｎｔｈ）、马铃薯（ＳｏｌａｎｕｍｔｕｂｅｒｏｓｕｍＬ．）、水稻（ＯｒｙｚａＳａｔｉｖｅＬ．）佛手（Ｃ、ＭｅｄｉｃａＬ．ｖａｒｓａｒｃｏｄａｃｔｙｌｉｓＳｗｉｎｇｌｅ）组织培养再生植株的染色体研究。结果表明：组培植物茎尖中的分裂相多于根尖。组培植物取材方便、材料丰富、不受生长周期限制，适用范围广。佛手染色体数属首次报道。     

黑曲霉和里氏木霉原生质体形成与再生条件选择──Ⅱ．菌龄、酶配比及酶解温度和时间的选择

用正交试验比较了菌龄、酶种类及浓度配比、酶解温度和酶解时间４个主要因素，对黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）ＡＭＳ１１和里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）ＱＭ９４１４两菌株原生质体形成与再生的影响。结果表明，ＡＭＳ１１和ＱＭ９４１４两菌株原生质体形成与再生的４个因素的合理参数分别是：菌龄１４～１６小时和１８～２０小时；三种酶配比（纤维素酶：蜗牛酶：溶菌酶）（ｍｇ／ｍｌ）为（８：４：２）和（５：２．５：２．５）；酶解温度均为３２℃；酶解时间均为２～３小时。     

疣粒野生稻原生质体再生小植株

 以我国特有的疣粒野生稻成熟胚和幼穗作外植体诱导愈伤组织 ,挑选致密颗粒状愈伤组织建立胚性细胞悬浮系并分离原生质体 ,将原生质体固体包埋后添加液体培养基进行培养。在培养过程中调节培养体系渗透压诱导产生胚状体 ,成功得到疣粒野生稻的原生质体再生植株 ,对提高原生质体再生频率的途径进行了探讨。     

广西玉米骨干自交系幼胚培养研究

对6个玉米育种骨干自交系幼胚组织培养进行了研究。结果表明：H99、CML161、7239的幼胚在添加了2．0～3.0mg／ml 2，4-D的改良正14诱导培养基上，其胚性愈伤组织诱导率分别为35．5％、38．5％、60．7%；在优化的植株再生培养系统中（改良正14大量元素＋B5微量元素＋N6维生素＋0．5～2．0mg／ml 6-BA），植株再生率高达90％以上。     

新疆大赖草胚性细胞系的建立及植株再生

以ＭＳ和Ｃ１７培养基对大赖草幼穗、子房、成熟胚、花药等外植体进行培养，通过不断改变培养基中的２，４－Ｄ浓度（２．０—６．０ｍｇ／ｌ），得到了生长旺盛、具有高度分化能力的胚性细胞系。将其转入ＮＴ５培养基进行分化培养，再生率达９８％，再生植株为丛苗状，无畸形苗和白苗。     

家兔胚胎细胞核移植的研究

兔超排后收集卵母细胞和１６细胞胚，以Ｍｃ－Ｇｒａｔｈ－Ｓｏｌｔｅｒ和Ｗｉｌｌａｄｓｅｎ两种去（注）核方法，将１６细胞胚细胞核经电融合植入去核成熟卵母细胞内，经体外培养或中间受体培养，使移核胚发育．结果表明：（１）兔胚核移植中上述两种去（注）法的成功率无差异；（２）ｈｃＧ注射后１３～１５ｈ，６７．８％的卵母细胞保留有第一极体；（３）强度为０．６３ｋＶ／ｃｍ，持续１６０μｓ的一次电脉冲可使７０．８％的注核胚融合，同样的电脉冲刺激卵母细胞的活化率为６１．１％；（４）兔移核胚在中间受体内或体外均可发育，在中间受体内有２３．０％可以发育到桑椹胚或囊胚．     

多花黑麦草胚性悬浮系的建立及原生质培养

以多花原麦草（Ｌｏｌｉｕｍ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ Ｌａｍ．）幼穗为外植诱导愈伤组织,经高有机态氮培养基改造得到易碎型胚性愈伤组织,在１／２ＡＡ培养＋１／２ＭＳＤＬ培养基中得到了生长迅速、分散的胚性悬浮系。分离原生质体经培养后得到了再生白化苗。     

不结球白菜OguCMS下胚轴原生质体的核失活研究

为了利用非对称细胞融合改良不结球白菜 (Ｂｒａｓｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｓｓｐ .ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ)ＯｇｕＣＭＳ (萝卜胞质雄性不育 )系统的苗期低温黄化和蜜腺发育不良缺陷 ,本试验在ＯｇｕＣＭＳ原生质体培养再生植株[1～ 2 ] 的基础上 ,对不结球白菜ＯｇｕＣＭＳ下胚轴原生质体核失活技术进行了研究。1　材料与方法1 1　材料以南京农业大学园艺学院白菜课题组经多代回交转育的不结球白菜ＯｇｕＣＭＳ‘91Ｈ秋 1 0 0’ (ＢＣ7)为试材 ,无菌播种后暗培养 ,取 5ｄ苗龄的下胚轴游离原生质体。1 2　下胚轴原生质体的制备ＯｇｕＣ…     

马铃薯原生质体融合技术的研究

采用聚乙二醇（ＰＥＧ）、电融合和ＰＥＧ－电融合三种诱导融合的方法，对马铃薯双单倍体品系８２－３６和二倍体野生种Ｓｏｌａｎｕｍｍｉｃｒｏｄｏｎｔｕｍ无菌苗叶肉原生质体的融合技术进行了研究，建立了三种融合方法的适宜条件。结果表明，使用镀金平行多电极的电融合法融合效果最好，在交流场强１５０Ｖ／ｃｍ、正弦波频率１．０ＭＨＺ和直流脉冲场强１．２ＫＶ／ｃｍ、宽幅６３７．５μｓ下，施加１次脉冲，原生质体的融合频率可达３０％。在对融合细胞的培养中发现：经过异质融合处理后的原生质体形成的愈伤组织具有较强的分化能力，其中有少数愈伤组织再生出了绿色植株。