甘蓝型油菜黄籽基因RAPD标记的初步研究

采用RAPD技术,以甘蓝型油菜近等基因系03 L 1(黑籽)和03 L 2(黄籽)为材料,对200个10 nt的RAPD引物进行了筛选.有18个引物能在近等基因系间扩增出差异片段,其中6个引物在重复实验中表现出很好的重复性.这6个引物扩增出的6个特异片段可能是甘蓝型油菜黄籽基因的RAPD标记.     

利用mRNA差异显示技术寻找甘蓝型油菜黄籽基因

 以两组不同来源的甘蓝型黄籽油菜近等基因系为材料,利用mRNA差异显示技术对90对随机引物和锚定引物组合进行筛选,获得1个能稳定重复出现的差异cDNA片段。以该差异片段为探针经Northern杂交验证了上述结果,推测该差异片段可能和种皮色泽差异形成有关。对该差异片段进行了克隆、测序,并根据此序列设计了2个嵌套特异引物,利用PCR-Walking技术延伸该差异片段,对该延伸序列进行克隆、测序及序列同源性分析。同时对mRNA差异显示技术应用过程中的相关问题进行了探讨。     

甘蓝型黄籽油菜RAPD和种皮色素遗传多样性

 以不同遗传背景的 14个甘蓝型黄籽油菜为材料 ,通过分析种皮内色素的种类、色素含量、蛋白质与含油量、RAPD标记等 ,研究了甘蓝型黄籽油菜资源的遗传多样性。结果表明 ,影响种皮色泽的色素主要为黑色素和花色素 ,根据其含量的不同 ,可分为高花色素类、高黑色素类和低色素类等 3个类群。其中 ,高花色素类的种子种皮花色素含量 >2 .5 4mg·g-1DW ,种子呈纯黄或橙黄色 ;高黑色素类种子的种皮色素含量 >178.4U(A2 90mm) ,种皮呈浅黑色 ,种子颜色为黑黄色 ;低色素类种子种皮的黑色素和花色素含量均较低 ,种皮半透明 ,种子部分因显现出胚的颜色而呈纯黄、绿黄或褐黄色。种子含油量为 36 .2 %～ 45 .5 %,蛋白质含量达 2 1.1%～ 2 7.7%,二者呈极显著负相关。对RAPD扩增结果进行UPGMA分析 ,发现甘蓝型黄籽油菜DNA存在着丰富的多态性 ,遗传相似系数为0 .2 5～ 0 .90 9,14个甘蓝型黄籽油菜材料可被划分为 2个类群。     

甘蓝型黄籽油菜黄籽外显率及其含油量

研究了甘蓝型黄籽油菜不同品系材料、不同单株间千粒黄籽外显率及其与含油量、黄籽级数和千粒重的关系。结果表明，甘蓝型黄籽油菜是一个不同黄色程度的黄籽组合体，甘蓝型黄籽油菜黄籽外显率品系间差异显著，单株间差异较大。黄籽外显率与含油量呈极弱相关关系，与黄籽级数（最低级）呈显著负相关关系，与千粒重呈弱相关关系。综合分析表明，甘蓝型黄籽油菜黄籽外显率应在85％以上，才能作为育种选择对象和高油分含量的菜籽色泽检测指标。     

甘蓝型油菜黄籽基因的分离研究Ⅰ.自交

从黑籽亲本“秦油3号”中分离出黄籽株系931155，其S1代群体的黄、黑籽植株比例约为3：1，黄籽株率为78.3%；S2、S3和S4代群体平均黄籽频率分别为81.7%、84.6%和96.5%，一些株系达90%以上，个别株系达100%，来源于浅黄和中黄的株系后代相比较，前者浅色黄籽株率比后者高。     

甘蓝型黄籽油菜下胚轴再生体系的初步研究

以4个甘蓝型黄籽油菜品系为试验对象，采用正交设计，研究了预培养基中2，4-D和6-BA浓度、预培养天数、分化培养基中NAA和6-BA浓度组合、AgNO3浓度等对下胚轴芽再生频率的影响；同时研究了萌发培养基中添加6-BA和NAA对再生频率的影响。结果表明：预培养基中2，4-D及6-BA浓度是影响再生的主要因素；不同材料和不同处理间芽再生频率差异显著，且材料与处理间有明显的互作效应；萌发培养基中添加6-BA和NAA对再生频率无明显影响，但对芽苗的正常形态建成不利。     

甘蓝型油菜核不育材料育性基因的RAPD标记

通过ＢＳＡ法，对甘蓝型油菜核不育材料Ｓ４５Ａ的育性基因进行分子标记，在９８０个随机引物中，找到了与可育基因连锁的２个ＲＡＰＤ标记ＵＢＣ１５８－６００，ＵＢＣ１８７－６００，其遗传图距分别为９．５６４ｃＭ、１７．７００ｃＭ。     

甘蓝型油菜白花基因的RAPD标记

以甘蓝型白花油菜及其分离群体为材料,对甘蓝型油菜白花性状的遗传规律进行了研究。结果表明,白花对黄花是一对由不完全显性基因(WW)控制的不完全显性遗传性状;利用集群分离法(BSA)对该白花基因进行RAPD分析,在1 200个随机引物中,获得了引物S1092(5-CCC AGG CTA C-3),在白花基因库和黄花基因库间扩增出多态性产物S-10921250;对该分离群体及其姊妹系和其他白花油菜进行的单株验证表明,S-10921250与甘蓝型油菜白花基因相连锁,遗传距离为0.84 cM。     

我国甘蓝型黄籽油菜育种研究进展

甘蓝型（Ｂ．ｎａｐｕｓ）黄籽油菜育种工作,在我国已进行了２０多年。育种实践表明,其黄籽色泽遗传复杂,籽粒呈“杂黄”色,长期自交不能纯化,并不断分离出黑籽。已培育出的 黄籽品种,尚不能完全适应生产的需要。黄籽育种必须与优质育种、杂交育种、生物技术相结合,才能适应育种科技发展的需要。     

甘蓝型黄籽油菜下胚轴再生体系的初步研究

以4个甘蓝型黄籽油菜品系为试验对象,采用正交设计,研究了预培养基中2,4-D和6-BA浓度、预培养天数、分化培养基中NAA和6-BA浓度组合、AgNO3浓度等对下胚轴芽再生频率的影响;同时研究了萌发培养基中添加6-BA和NAA对再生频率的影响.结果表明:预培养基中2,4-D及6-BA浓度是影响再生的主要因素;不同材料和不同处理间芽再生频率差异显著,且材料与处理间有明显的互作效应;萌发培养基中添加6-BA和NAA对再生频率无明显影响,但对芽苗的正常形态建成不利.     

甘蓝型油菜核不育基因的PCR标记初报

用Ｏｐｅｒｏｎ公司ＯＰＡ－０１－ＯＰＪ－２０ ２００个１０个碱基对随机序列引物对甘蓝型油菜隐性核不育涪优ＡＢ,显性核不育３７ＡＢ,广恢系９８－８０２６,９８－３７４９及Ｆ１材料基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增的结果,共获得１３３４条扩增带,平均每引物扩增带约６．７条扩增带表明油菜存在较为丰富的遗传多样性。引物ＯＰＡ－０５,ＯＰＡ－１２,ＯＰＡ－１３,ＯＰＡ－２０等分别扩增出了大小不同的多态性带,初步认     

甘蓝型黄籽油菜种子皮壳率的遗传研究

应用植物数量性状遗传体系的主-多基因混合遗传模型对甘蓝型黄籽油菜(GH 06)与甘蓝型黑籽油菜(A 800)杂交组合(GH 06×A 800)的R,F1,R2,B1,B2和F2 6个世代群体种子皮壳率进行了多世代联合分析,结果表明该组合种子皮壳率受1对加性主基因+加性-显性多基因控制遗传.主基因的加性效应为-1.0483,多基因加性效应为-1.2001,显性效应不明显,为-0.0580,表明主基因和多基因的加性效应对种子皮壳率性状的表现起主要作用.该杂交组合的B1,B2和F2群体种子皮壳率主基因遗传率分别为32.34%,44.77%和66.64,多基因遗传率分别为46.82%,47.76%和22.54%,表明该组合种子皮壳率主要是由1对主基因+多基因相互配合控制遗传的,环境对种子皮壳率有一定的影响,但影响较小.选择种皮颜色纯黄的种子有望得到低皮壳率的甘蓝型黄籽油菜.     

油菜青海制种种子异地优势初探

为了探明甘蓝型油菜杂交种云油杂l号青海制种是否具有异地优势，以及能否减轻不育系的微花粉，降低杂交种不育株率，以云油杂l号的亲本为材料，分别在青海和云南昆明两地制种，然后在昆明作杂种F。的比较试验。结果表明：青海种子播种后出苗整齐、出苗率高，苗期表现一定的营养优势。青海种子不育株率显著降低，但结角层变薄、单株有效角果数变少，其它经济性状没有显著性差异。初步探明：青海制的杂交油菜种子不育株率显著降低，但不具有产量上的异地优势。     

离体筛选油菜耐草酸变异体研究

用ＮａＮ３对甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓ）茎尖进行诱变处理,以草酸作为筛选压力,采用多步正筛选系统,获是的变异体及其再生植株在培养物水平上,对草酸的耐性比野生型明显提高,过氧化物酶,多酚氧化酶活性均与野生型有明显差异,说明经过诱变处理后,基因及其表达产物发生了变化。     

地理位置与甘蓝型黄籽油菜粒色关系的研究

供试材料甘蓝型黄籽油菜杂交种“渝黄1号”分别种植在7个不同经纬度的生态点,研究了地理位置对甘蓝型黄籽油菜粒色的影响。结果表明,纬度与甘蓝型黄籽油菜粒色的变化有一定关系,随着纬度的升高,甘蓝型黄籽油菜黄籽度逐渐增加,粒色变淡,表明高纬度可能不利于种皮色素的形成。     

胭脂萝卜种子纯度的RAPD检测研究

用80个随机引物对胭脂萝卜及杂株（花心萝卜和白心萝卜）的总DNA进行了RAPD分析,发现引物S50可在胭脂萝卜和杂株（花心萝卜和白心萝卜）的RAPD图谱中形成多态性差异,可用于胭脂萝卜种子的纯度检测。对1份胭脂萝卜种子进行RAPD检测,其结果与田间形态鉴定结果一致。     

与太谷核不育小麦Tal基因连锁的RAPD标记的筛选

本试验采用599个引物对太谷核不育小麦的一对近等基因系进行RAPD分析，筛选到一个稳定的特异引物OPO01，用该引物对太谷核不育小麦的杂交后代育性分离群体进行RAPD分析，从而确定了OPO01900与Tal基因的遗传距离为14.7±0.87cM。     

甘蓝型油菜雄性不育突变体S 1A的等位性分析

对甘蓝型油菜核不育材料S1A进行遗传分析,以核不育两用系S1AB,S45AB,15AB,117AB互相杂交,结果表明,S1A核不育受隐性基因控制,S45A,15A,117A核不育基因等位,但S1A与S45A,15A,117A核不育基因不等位,S1A可能是1个新的隐性核不育突变体。