7个野生云芝基于ITS序列和ISSR的亲缘关系分析

以湖南省的7个野生云芝菌株为试验材料,基于ITS序列进行分子鉴定以确定样品的种属关系,以MEGA 11.0软件中的邻接法构建系统发育树,采用ISSR分子标记技术对样品进行遗传多样性分析并构建DNA指纹图谱,同时辅以拮抗及栽培试验对结果进行验证。结果表明,7个野生菌株与云芝的同源性为95%～100%;构建的系统发育树显示7个菌株均与云芝聚为1支,且菌株NX4和NX6高度同源。筛选到6条重复性好且条带清晰的ISSR引物,平均每条引物扩增出11条谱带,多态位点百分率为95.5%;ISSR遗传聚类图谱显示在相似性为67%时,7个云芝菌株可聚为2类,其中NX4、NX6归于一类,其他5个菌株归于一类且NX3和NX18遗传差异较小。结合拮抗和栽培试验结果,基于子实体半径尺寸可将NX4和NX6归于一类。     

云南羊肚菌rDNA的ITS序列与亲缘关系分析

采用ITS(Internal Transcribed Spacers)序列比对技术分析了根据形态挑选的14个羊肚菌子实体(其中11个来自云南,3个来自浙江)。结果表明,云南的11个羊肚菌子实体(M1~M11)可分为4个种:高羊肚菌(Morchella elata),尖顶羊肚菌(Morchella conica),粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)和大孔(宽肋)羊肚菌(Morchella costata)。浙江的3个羊肚菌子实体(M12~M14)经鉴定为未知羊肚菌种。14个羊肚菌子实体样品和GenBank中黑脉(小顶)羊肚菌[Morchella angusticeps(AJ698476)]、美味羊肚菌[Morchella esculenta(AJ698475)]以及羊肚菌科常见属钟菌属Verpa conica(AJ544206)的ITS序列聚类,以钟菌(AJ544206)作为外类群,可分为三大聚类群:高羊肚菌、大孔(宽肋)羊肚菌和黑脉(小顶)羊肚菌为第1类群(Group1);美味羊肚菌和尖顶羊肚菌为第2类群(Group2);粗柄羊肚菌和浙江的3个羊肚菌为第3类群(Group3)。     

野生硫磺菌分离株ITS序列分析

采用组织分离的方法从野生硫磺菌(Laetiporus sulphureus)子实体上分离得到菌株ts,以其基因组为模板扩增获得该菌株的ITS序列,序列分析结果表明:该菌株与GenBank中Laetiporus sulphureus var.sulphureus的3个日本分离株聚为一簇,ITS核苷酸一致率为98.31%～99.25%,而与其它22个来自不同国家的硫磺菌属菌株的ITS核苷酸一致率为91.93%～98.12%,依此结果,ts菌株应为L.sulphureus var.sulphureus。     

秦巴山区野生桑黄rDNA ITS序列及亲缘关系分析

对采自秦巴山区的6株野生桑黄菌,进行r DNA ITS区段克隆测序和序列特征比较分析,并对其r DNA ITS序列进行核酸序列数据库Gen Bank同源性检索比对,将从Gen Bank检索获得的18个最相似物种的ITS序列连同6个不同桑黄菌株的ITS序列一起用于系统发育分析。结果表明,桑-W、桑-F、桑-D、桑-Y、桑-H与Inonotus linteus亲缘关系最近,相似性分别为98.23%、98.23%、98.10%、98.23%、98.23%,其序列长度均为757 bp;桑-H1与Fuscoporia qilva亲缘关系最近,相似性为95.90%,其序列长度均为796 bp。     

基于ITS序列分析对秦岭冷水沟羊肚菌的鉴定

在秦岭中段宁陕县冷水沟采集10株野生羊肚菌,获得菌丝体,扩增其rDNA的ITS区,并进行分析比对,构建分子系统树,鉴定这10株羊肚菌都为粗腿羊肚菌(Morchella crassipes)。     

滇西北地区5种羊肚菌遗传多样性的ISSR分析

以滇西北地区11个羊肚茵居群56个羊肚菌样品为研究材料,应用ISSR分子标记方法,进行了遗传多样性与亲缘关系分析。结果表明,11个多态性ISSR引物对全部试验样品进行PCR扩增,共获得88条稳定的条带,其中多态性条带70务（占79．55％）。应用软件POPGENE32分析得出11个羊肚菌居群间遗传距离的变化范围在0．1715～0．4853之间,相似系数的变化范围在0．6155～0．8424之间。遗传分化分析表明,61．35％的变异存在于居群间,38．65％的变异存在于居群内。对56个羊肚菌样品进行分子系统聚类分析（UPGMA）将资源分为三大组,对11个羊肚菌居群进行亲缘关系聚类分析将居群分为两大类群,聚类结果与地理距离有明显的相关性。     

野生香蘑属菌株的ITS序列分析

以6个野生香蘑属菌株为研究材料,进行ITS测序,并以10个GenBank香蘑属菌株ITS序列为参照,应用DNA—MAN、MEGA4软件构建系统发育树状图。研究结果表明,No．1、2、4、5、6与GenBank花脸香蘑菌株聚为一类,应视为花脸香蘑菌株,而No．3菌株与肉色香蘑及GenBank中3个水粉杯伞AY521248、DQ149727、DQ149728都具有0．308的遗传距离,其分类地位有待予进一步研究。     

不同地区松茸ITS序列分析及系统发育研究

对吉林省延吉市和云南省昆明市松茸子实体的ITS序列进行遗传多样性研究。提取两个地区松茸子实体的基因组DNA,应用特异引物对其ITS序列进行PCR扩增及测序,并对云南省昆明市松茸样品进行克隆及测序。之后从GenBank上获取5个地区7条松茸ITS序列,并利用MEGA、BLAST、DNAMAN和ClustalX软件进行对比分析和构建系统发育树。对云南松茸样品克隆发现,ITS序列中有A与G、T与c的颠换,并插入1个碱基T。序列对比发现,松茸ITS序列长度在600bp～604bp范围内,G＋C含量在43．0％～44．2％之间,共有41个变异位点,ITS2变异位点数要多于ITSl的变异位点数。同时,多个位点存在着转换、颠换、插入和缺失,表明不同产地松茸ITS序列在进化过程中存在差异,为真菌分类、鉴定等研究提供了重要的资料和依据。     

利用ISSR标记及rDNA-ITS序列分析河北省野生铁线莲的亲缘关系

通过ISSR和rDNA-ITS两种分子标记方法对河北省17个类群的野生铁线莲种间亲缘关系进行了鉴定。利用UPGMA法对ISSR扩增的条带结果进行聚类分析,并用PCR法扩增ITS,通过Clustal X,MEGA等软件比较和分析ITS的序列特征,最后对两种分子标记的结果综合分析。结果表明,利用筛选出的ISSR引物扩增出多态性条带104条,多态性百分比为100%,等位基因数(Na)为2.00,有效等位基因数(Ne)为1.3069,Nei’s基因多样性(H)为0.2196,Shannon’s多样性信息指数(I)为0.3675。聚类结果显示,在遗传距离为0.66处,17种野生铁线莲被分为5类;铁线莲的17个铁线莲样本ITS序列长度为543～561 bp,含变异位点87个,信息位点37个,特异性鉴别位点50个。其中,长瓣铁线莲与半钟铁线莲、太行铁线莲与狭裂太行铁线莲遗传距离为0,槭叶铁线莲与其他种的遗传距离较大,亲缘关系较远。     

延边地区一株野生羊肚菌的鉴定及其驯化栽培研究

以延边地区一株野生羊肚菌资源为研究对象,母种分离后采用分子生物学鉴定法明确其品种,并设计6个母种培养基配方、14个原种培养料配方、8个外源营养瓶配方、7个栽培基质配方,筛选其母种、原种、外源营养瓶及栽培的适宜基质。鉴定结果显示,该野生菌株“23-1”为六妹羊肚菌。配方筛选试验结果表明,“23-1”母种培养适宜PDA培养基,菌丝生长快、长势强,接种后96 h即出现菌核;原种培养料以13号配方（硬杂木屑38%、麦粒40%、麦麸10%、草炭土10%、生石灰1%、石膏1%）菌丝生长表现好,接种后15天满袋,菌丝粗壮;外源营养瓶配方中麦粒所含比例高,表现菌丝长势强、满瓶时间长,综合考虑原基形成时间及产量,适宜配方为麦粒50%～60%、硬杂木屑29%～39%、草炭土0～10%、生石灰1%;栽培基质各配方出菇时间接近,平均产量以6号配方（园土88%、珍珠岩10%、生石灰2%）显著高于其他处理,为107.46 g/筐。     

长白山野生白耙齿菌菌株ITS序列鉴定及其人工驯化栽培试验

试验以长白山野生白耙齿菌菌株为试验材料,进行ITS序列鉴定及人工驯化栽培试验。利用通用引物ITS1和ITS4进行ITS序列鉴定,同时利用农作物下脚料对白耙齿菌进行人工驯化栽培。原种培养料设置6个处理,栽培种培养料设置8个处理,通过ITS序列分析结果得出该菌株ITS序列与NCBI中登录号为JX290578.1、FJ462768.1、EU301643.1等9个白耙齿菌菌株相似性达100%,验证了其为白耙齿菌(Irpex lacteus);最佳原种培养料配方为木屑41.5%、豆秸41.5%、麦麸10%、黄豆粉5%、石膏1%、白糖1%,菌丝生长速度最快,为7.571 mm·d-1,且菌丝浓密,洁白,粗壮;最佳栽培种培养料配方为木屑54%、玉米芯29%、麦麸10%、黄豆粉5%、石膏1%、白糖1%,菌丝生长速度及长势显著高于其他处理。     

辽阳地区野生羊肚菌及其菌丝培养试验

考察辽阳长白山余脉千山太子河流域羊肚菌,发现有野生羊肚菌7个种类(其中,两个尚未定名),并对野生羊肚菌菌种进行培育试验。     

屏南野生羊肚菌及生态环境调查

屏南地处鹫峰山脉中段 ,境内群峰耸峙 ,山岭蜿蜒 ,平均海拔在 80 0ｍ以上 ,属中亚热带山地气候 ,冬不严寒 ,夏无酷暑 ,雨量充沛 ,年平均气温 14 .9℃ ,独特的气候和丰富的森林资源为多种食用菌提供良好条件 ,也极适合野生羊肚菌的生长。现将屏南县羊肚菌分布、生态环境调查情况总结如下 :1.3　分　布　全县从海拔 5 0 0ｍ的果园、竹林、草地到 10 0 0ｍ的高山林间均有羊肚菌分布 ,多年的调查表明其主要集中在甘棠、代溪、棠口三个乡镇 ,现将主要发生地分述如下 :①甘棠乡上山口村 ,海拔 780ｍ ,发生在旧屋坪的果园桃、梨树下 (桃、梨的树龄…     

宝鸡地区羊肚菌无基料栽培关键技术

<正>食用菌具有营养、益智、医疗、保健四大功能,科学家认为是人类最有发展前途、最有希望的健康食品之一。羊肚菌性平,味甘寒,无毒,有益肠胃、助消化、化痰理气、补肾壮阳、补脑提神等功效。陕西宝鸡市从2013年引进羊肚菌并栽培成功,2018年栽培规模达200 hm²,现已成为宝鸡市农业增效、农民增收的亮点和脱贫攻坚的热点项目。现将宝鸡地区羊肚菌的无基料栽培关键技术总结如下。     

野生羊肚菌Mel-21的系统发育分析和驯化

对采集自四川和重庆的4个野生羊肚菌(Morchella spp.)菌株进行组织分离及多基因系统发育分析,研究表明:供试菌株均为羊肚菌属的Mel-21系统发育种。依据当前羊肚菌以外源营养袋提供营养的大田栽培模式,对其中2个分离菌株16-4J2和16-A1进行驯化,发现供试菌株的原基在地温约10℃时开始发生(数量均较少),形状短粗;成熟子囊果卵圆锥形至锥形,中等偏小,平均单菇重8～20 g;16-4J2和16-A1的平均产量分别为(82±10)g·m~(-2)和(106±14)g·m~(-2),在当前栽培模式下,2个菌株均达不到商业化栽培的要求。     

河南地区设施羊肚菌与甜瓜高效栽培模式及效益分析

总结了2016—2022年河南地区设施羊肚菌与甜瓜高效栽培技术要点,提出了科学的整地施肥方式,详细阐述了羊肚菌与甜瓜栽培田间管理措施,并对该模式进行了效益分析。该模式每667 m²羊肚菌产量约400 kg,甜瓜产量约2 000 kg,按照近3年市场均价,每667 m²产值达5.6万元,投入生产成本1.4万元,总效益可达4.2万元。     

运城地区冷棚和温室大棚栽培羊肚菌比较试验

采用冷棚和温室大棚栽培羊肚菌进行比较试验。观察比较供试羊肚菌菌株菌丝生长,菌核、原基形成,子实体品质及产量。结果表明:温室大棚中的羊肚菌比在冷棚中生长周期短、产量高、经济效益高。     

大理地区栽培羊肚菌菌株适应性试验

探讨大理地区不同宏观和微观环境条件下,LMD、LME、LMF、TL16四个羊肚菌菌株的适应性。采用分组对比试验方法,观察不同羊肚菌菌株在红壤、黄壤、腐殖土和稻田土小环境,大棚、林下(核桃)、大田(水稻梯田)大环境的适应性。结果表明:LMD、LME、LMF、TL16四个菌株在腐殖土中产量最高,单株鲜品质量依次为林下>大棚>大田;供试的6个菌株菌盖∶菌柄长依次为LMD=LME>CL5>LMF>CL1>TL16,其中LME和LMF产量最高、适应性强,可作为优良菌株在大理州推广。     

基于ITS序列分析探讨我国栽培凤尾菇的分类地位

针对我国栽培凤尾菇(Pleurotus sajor-caju)及其近缘种共10个菌株的ITS序列,应用特异引物进行PCR扩增,对其产物进行测序,并从GenBank上下载侧耳属(Pleurotus)3个种7条ITS序列、韧伞属(Lentinus)的4条ITS序列和香菇属(Lentinula)的3条ITS序列,以冬虫夏草(Cordyceps sinensis)和蛹虫草(Cordyceps militaris)为外类群,用NJ(Neighbor-joining)法构建系统发育树,结果表明:凤尾菇在侧耳属分支上与侧耳属内种的相似性达98.5%以上,韧伞属和香菇属的属内相似性也均为98%以上,而侧耳属和韧伞属、香菇属的属间相似性仅约80%,故凤尾菇应归于侧耳属;在进一步研究中,将该凤尾菇与其近缘种的ITS1-5.8S-ITS2序列作碱基完全比对,结果发现它与肺形侧耳(Pleurotus pulmonarius)的碱基完全一致,而与其它近缘种均存在较大碱基差异,因此,目前我国广泛栽培的凤尾菇与肺形侧耳可能是同物异名种,建议订正其名称,将其拉丁名统一为P. pulmonarius.本研究首次将ITS序列分析和碱基比对结合对凤尾菇的分类地位及拉丁名进行研究,结果表明ITS序列分析在近缘种的分类鉴定上很有价值.     

娄烦、襄汾野生羊肚菌比较分析

为了调查山西省野生羊肚菌资源及其生境,对山西省娄烦县和襄汾县两处野生羊肚菌资源进行了生境和子实体分析比较,并且测定了子实体、土壤和地上覆盖物的养分含量。结果表明,两处羊肚菌的生境相似,土壤pH为中性偏碱或弱碱性,适宜羊肚菌的发生,其子实体均富含氮、磷、钾、铁、钙等元素;两处羊肚菌的子实体形态不同,可能与地上覆盖物的养分和土壤的理化性质有关;此外,还发现襄汾羊肚菌会产生大量孢子,为下一步利用孢子培养单孢菌丝、制备羊肚菌菌种提供了方向。