桑树桑黄发酵菌粉在新型培养方法下的性能分析

将抗菌肽基因导入桑树苗,获取抗病新型桑树苗,发酵新型桑树苗培养基,提取桑黄发酵菌粉,对比研究新型桑黄发酵菌粉与原始桑树桑黄子的性状,以及新型培养过程中碳源、氮源以及pH值对桑树桑黄发酵菌粉产量的影响。研究结果表明,新型桑树苗导入不同浓度的青枯菌后,成活率最低是12.6%,树苗的抗病性增强,成活率提高;新型桑黄发酵菌粉中,氨基酸总含量和Ca、Na、Fe、Zn、Mg的含量都高于原始桑树桑黄子实体,说明桑树桑黄发酵菌粉的新型培养方法可行;在实验过程中,选取碳氮含量是0.6%的氮源和4.0%的碳源,桑黄发酵菌在弱酸性环境中的产量更高。     

杭州野生桑黄与引进桑黄亲缘关系和生物学特性研究

对采集于杭州地区的3个野生桑黄菌株与引进的4个桑黄菌株,进行生物学特性研究。结果表明,除桑5引进菌株和桑6引进菌株亲缘关系具有较近亲缘关系外,其它菌株间的亲缘关系较远。所有菌株最适生长温度为30~35℃;最适合氮源为蛋白胨或硝酸钾。野生桑黄最适碳源为葡萄糖,适宜生长的p H为8;引进桑黄菌株最适碳源为蔗糖,适宜生长的p H为6。     

秋水仙素诱变对桑黄菌丝生长及活性成分的影响

以1.0%纤维素酶和0.5%蜗牛酶不同处理时间的桑黄菌丝为试材,采用0.1%秋水仙素诱变桑黄菌丝研究其诱变下桑黄菌丝再生菌株的生长速率以及多糖、黄酮和三萜等活性成分含量变化,以期获得生长快且活性成分含量高的菌种,以期为桑黄菌株选育、种质资源创新和应用奠定基础。结果表明:秋水仙素诱变后桑黄菌丝再生菌株的生长速率以及多糖、黄酮和三萜等活性成分含量基本呈增加趋势。其中,与对照相比,诱变酶解桑黄菌丝20 min获得的再生菌株20-1生长速率最快,增加了366.67%;三萜和多糖含量最高的再生菌株为10-5,分别增加了1069.73%和281.85%;多酚含量最高的再生菌株为5-1,增加了530.56%;黄酮含量最高的再生菌株为30-1,增加了3771.43%。     

秦巴山区野生桑黄rDNA ITS序列及亲缘关系分析

对采自秦巴山区的6株野生桑黄菌,进行r DNA ITS区段克隆测序和序列特征比较分析,并对其r DNA ITS序列进行核酸序列数据库Gen Bank同源性检索比对,将从Gen Bank检索获得的18个最相似物种的ITS序列连同6个不同桑黄菌株的ITS序列一起用于系统发育分析。结果表明,桑-W、桑-F、桑-D、桑-Y、桑-H与Inonotus linteus亲缘关系最近,相似性分别为98.23%、98.23%、98.10%、98.23%、98.23%,其序列长度均为757 bp;桑-H1与Fuscoporia qilva亲缘关系最近,相似性为95.90%,其序列长度均为796 bp。     

桑黄菌株比较试验初报

对延边大学农学院食用菌实验室分离得到的7个桑黄菌株进行了种性比较试验，结果表明：各菌株在母种、液体、原种及栽培种培养基上的菌丝日生长速度存在较大差异。桑6、桑7菌丝浓密、粗壮、长速快，有子实体原基形成，是人工驯化栽培首选菌株且桑6优于桑7。     

七个桑黄菌株酯酶同工酶的研究

选取7个均称为桑黄的不同形态的子实体,对子实体分离后得到的纯化菌丝体进行酯酶同工酶研究。结果表明,所有菌株在Rf=0.805处出现一条稳定一致的共有酶带,而桑6和桑7具有较近的亲缘关系,其它菌株间的亲缘关系较远或者没有。     

桑黄优良菌株的筛选

对引进的10个桑黄菌株进行农艺性状对比,通过在试管、培养料等不同条件下对桑黄菌的性状进行分析,得出综合性状优劣排序:SH2＞SH4＞SH7＞SH6＞SH3＞SH9＞SH 10＞SH8＞SH1 ＞SH5;出菇材质杨木优于硬木,并对筛选出的优良菌株进行段木栽培.     

四种桑黄的培养特性及主要活性成分的比较分析

以金桑黄JS1、龙桑黄LS2、杨桑黄YS3和桑黄S6 4种桑黄菌种为试材，采用紫外比色法比较不同桑黄子实体中总三萜、总黄酮和总多糖的含量，通过对桑黄母种、原种和子实体栽培进行优选，分析不同阶段各桑黄菌丝体生长情况及子实体中活性成分的差异，以期为桑黄功能活性物质的研究及子实体品质控制提供参考依据。结果表明：不同阶段菌丝萌发速度呈显著性差异，4种桑黄母种均在以蔗糖为碳源的PDA加富培养基上生长最快，在玉米粉和麸皮培养基上生长相对缓慢，而在桑枝滤液培养基上生长最慢，YS3菌丝生长表型综合最佳。桑黄原种菌丝在第3天的生长速度均最快，JS1、YS3和S6在麸皮培养基中菌丝生长均最快，分别为4.78、4.60 mm·d^-1和3.08 mm·d^-1;LS2在4种培养基中生长速度差异不显著，其中在玉米粉培养基中最快为4.17 mm·d^-1。对比分析不同桑黄子实体活性成分含量，LS2子实体多糖含量最高，YS3子实体总黄酮和三萜含量最高，S6子实体黄酮、三萜及多糖含量均最低。综合考虑菌丝生长速度、农艺性状、子实体活性成分含量，桑黄YS3和L...     

桑黄近缘种过氧化物同工酶比较分析

本文对7个桑黄菌株菌丝体进行了拮抗试验及过氧化物酶同工酶电泳研究。拮抗试验结果表明，桑1、桑4、桑5各菌株问有亲缘关系；同工酶结果表明，它们的酶谱具有相似的酶带，但其酶带数目、宽窄及颜色的深浅存在着差异，其酶带数目一般为4～7条，其中基本酶带只有1条，Rf为0．317，并通过对各品种间相似系数（S）的分析，比较了它们之问的亲缘关系。     

利用常压室温等离子体诱变技术选育高产黄酮的桑黄菌株

为提高桑黄(Phellinus baumii)黄酮生产能力,利用常压室温等离子体(atmospheric room temperature plasma,ARTP)技术诱变桑黄菌株SH1(出发菌株)的原生质体,经过筛选获得了3株高产胞内黄酮的优势菌株A67、A130、A157,与出发菌株相比,菌株A67、A130、A157液体发酵胞内总黄酮产量分别提高了86.7%、20.0%和60.0%。拮抗实验和RAPD分析显示3株优势菌株与出发菌株间存在遗传差异。TEAC(Trolox equivalent antioxidant capacity)和FRAP(ferric reducing antioxidant power)实验结果表明,A67菌丝体醇提物比出发菌株具有更好的体外抗氧化活性。本研究为桑黄属菌株的选育提供了高效可行的诱变方法,并为桑黄黄酮相关产品的开发和应用提供了优良的新菌株。     

桑树桑黄子实体和发酵菌粉有效成分分析

对桑树桑黄的子实体和发酵菌粉的氨基酸、矿物质元素以及多糖等主要活性成分的含量进行了分析比较。结果表明,桑树桑黄子实体和发酵菌粉均含有17种氨基酸,均以谷氨酸含量最高,必须氨基酸中都以亮氨酸含量最高。桑树桑黄子实体和发酵菌粉中都含有人体必不可少的钙、铁、锌等8种矿物质元素。桑树桑黄发酵菌粉多糖、黄酮含量均高于子实体。桑树桑黄发酵菌粉黄酮含量为3.97%,多糖含量为12.8%;子实体黄酮含量为0.1%,多糖含量为4.76%。     

桑黄航天诱变菌株的筛选及黄酮提取工艺的优化

以桑黄菌株为试材,采用航天诱变的方法,通过多代分离、纯化得到109株诱变菌株。对诱变菌株编号后培养,通过宏观菌落观察、微观菌丝比较和拮抗试验,初步筛选出47株桑黄诱变菌株,比较诱变菌株与出发菌株H0母种生长速度,发现9株诱变菌株的速度显著大于出发菌株。采用液体发酵培养方法比较菌丝生物量,优化桑黄液体发酵菌丝黄酮的提取工艺后比较诱变菌株的黄酮产量,以期为桑黄航天诱变育种提供参考依据。结果表明：诱变菌株H68具有生长速度快、长势好、菌丝黄酮产量显著高于出发菌株的特点。经鉴定,H68属于桑黄孔菌属,GenBank登陆号MN153566.1,同源性99.85%,判定为出发菌株H0的航天诱变株。     

莲子壳栽培桑黄及子实体抑菌活性研究

通过对比不同培养料配方对桑黄（Inonotus hispidus）菌丝萌发、子实体生长及多糖、黄酮类、三萜类活性成分含量的影响,筛选出利用莲子壳人工栽培桑黄的培养料配方,同时开展桑黄子实体不同溶剂提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及白色念珠菌的抑菌效果研究。结果表明,木屑、木屑棉籽壳和麦粒培养料均可用于桑黄原种培养;相同培养条件下,莲子壳粉40%、木屑30%、麦麸16%、玉米粉10%、葡萄糖2%、石灰1%、石膏1%的配方为最适栽培培养料,此条件下桑黄菌丝生长最快,产量最高,并且子实体粗多糖、黄酮类含量最高。对该配方栽培的桑黄子实体开展了抑菌效果试验,4种不同溶剂提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及白色念珠菌3种指示菌都具有一定抑制效果,不同溶剂提取物对不同指示菌的抑菌效果存在一定差异。     

桑黄原生质体的制备与再生研究

为了了解不同桑黄分离的原生质体活力、产量和再生能力是否相同,采用酶解法处理桑黄菌株菌丝体获得原生质体。比较分析五种生长在不同树种上的桑黄菌丝的原生质体活力和产量、葡萄糖和p H对原生质体再生的影响,并对暴马丁香桑黄原生质体释放与再生过程进行显微摄影观察。结果显示:暴马丁香桑黄的活力与产量最高分别为81.82%和3.85×105个/m L。在p H 7、葡萄糖浓度为30 mg/m L时,暴马丁香桑黄原生质体再生率达最高,分别为23.67%和19.33%。初步摸索通过酶解法制备桑黄原生质体和原生质体释放与再生的过程。     

桑黄菌的酯酶同工酶分析

对4个不同桑黄菌株进行了聚丙烯酰胺凝胶电泳酯酶同工酶分析、拮抗试验和菌丝培养观察。结果表明:酯酶同工酶电泳共检出迁移率不同的谱带16条,其中日本桑黄菌株、华中桑黄菌株与山东桑黄菌株和韩国桑黄菌株之间的酶谱差异明显;山东桑黄菌株和韩国桑黄菌株的酯酶同工酶谱相似。酯酶同工酶分析结果与拮抗试验和菌丝培养观察结果一致。     

桑黄多糖抗疲劳及耐缺氧实验研究

研究采用水提醇沉法得到桑黄菌丝多糖(大分子量粗多糖),通过小鼠抗疲劳、耐缺氧能力实验,研究桑黄菌丝多糖的生理活性。以小鼠游泳力竭时间、游泳前后血乳酸、肝糖原以及血清尿素氮含量的变化为指标,考察桑黄多糖抗疲劳能力,以小鼠在缺氧和亚硝酸钠中毒环境下的存活时间为指标,考察桑黄多糖耐缺氧能力。结果表明,灌胃桑黄多糖可以显著延长小鼠游泳时间达70.62%,降低游泳后乳酸曲线下面积22.89%,提高肝糖原储备33.36%,减少游泳后血清尿素氮含量23.17%,延长小鼠在缺氧环境下42.08%和亚硝酸钠中毒环境下35.29%的存活时间。因此,桑黄多糖具有提高小鼠抗疲劳和耐缺氧能力的作用,且在一定剂量范围内,实验效果与灌胃剂量呈正效应关系。     

珍稀药用真菌桑黄菌丝体粉中黄酮含量测定

对桑黄菌丝体粉中总黄酮含量测定及方法学考察,为其质量标准的制定提供科学依据。方法:以70%乙醇溶液对桑黄菌丝体粉中黄酮进行回流提取,采用NaNO2-Al3+-NaOH体系吸光光度法,对桑黄菌丝体粉中黄酮含量测定及方法学考察。结果:获得的芦丁标准曲线在0~0.04 mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,线性方程为:y=0.010x-0.016,线性相关系数R2=0.994;5批桑黄菌丝体粉中黄酮含量(mg/g)分别为:8.363、6.236、8.761、7.532、6.851,桑黄菌丝体粉中黄酮含量均在6.2 mg/g以上,平均含量为7.549 mg/g,相对标准差RSD为13.8%。结论:试验范围内,将桑黄菌丝体粉中黄酮含量的限度定为不少于6.0 mg/g;测定方法具有操作简单,回收率良好,专属性更强、精密度高的优点,可作为桑黄菌丝体粉中黄酮含量测定方法。     

桑黄子实体中硒元素及重金属含量分析

以桑黄子实体为试材，采用电感耦合等离子发射光谱-质谱联用仪法，研究了不同种、产地、生长年限、栽培基质和栽培方式之间的硒和砷、汞、铅、镉、铬5种重金属差异性，以期为桑黄的栽培及资源开发利用提供参考依据。结果表明：桑黄子实体中硒元素检出率为83.3%,种和产地间桑黄子实体中硒元素含量有显著差异（P<0.05）;生长年限、栽培基质和栽培方式间桑黄子实体中硒元素含量差异不显著（P>0.05）,种以暴马丁香桑黄硒含量最高，为0.160 0 mg·kg^-1;产地以浙江硒含量最高，为0.054 0 mg·kg^-1;5种重金属检出率均为100%,不同产地、种、生长年限、栽培基质和栽培方式的桑黄子实体中5种重金属含量有显著差异（P<0.05）,5种重金属均以铬元素含量最高，最高达5.06 mg·kg^-1,而砷、汞、铅、镉含量均低于食品安全国家标准。但变异系数均小于1,离散程度低。     

漳耳43-28菌株多年多点示范综合评价

为了进一步鉴定白背毛木耳新品种"漳耳43-28"的丰产性、适应性、抗逆性等方面表现,为该菌株的示范推广提供参考依据。在漳州3个主产地进行连续3年的示范栽培,以当地主栽菌株"43-26"为对照(CK),观察、测定供试菌株的菌丝生长情况、污染率、耳片形态特征、产量,并分析不同供试菌株的主要营养成分和功能氨基酸含量。"漳耳43-28"菌丝生长势强,洁白,浓密,菌丝生长速度比对照提高20.43%。商品性状好,耳片厚、大,绒毛多,晒干后绒毛更白。"漳耳43-28"菌株抗性明显优于对照,污染率比对照降低13.58%。平均单袋干耳产量比对照提高22.26%,增产达极显著水平。与CK相比,"漳耳43-28"子实体的蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量提高,还原糖、蔗糖、粗纤维含量降低。"漳耳43-28"氨基酸总量、必需氨基酸含量、鲜味氨基酸含量分别比对照提高6.48%、4.94%、9.59%。"漳耳43-28"各方面表现优良,值得进一步示范推广。     

桑黄菌原生质体紫外线诱变及高产菌株选育

采用紫外线诱变桑黄菌原生质体,经过初筛、复筛,得到10株变异株。选生长速度最快的5株进行瓶发酵,发酵产量均有所提高,产量最高的菌株比出发菌株提高20.78%。经平板传代,5代以后,变异株的生长速度仍较稳定,无明显回复突变。结果表明,桑黄菌原生质体紫外线诱变是桑黄菌菌株选育的一种行之有效的方法。