禽舍熏蒸消毒八注意

鸡新城疫(ND)和鸡传染性法氏囊病(IBD)都是由病毒所引起的传染病,因尚无特异性药物进行治疗,所以采用高免卵黄抗体仍是临床上唯一特异性治疗措施。在使用高免卵黄抗体时,提醒广大养殖场(户)注意以下事项。1要明确卵黄抗体的治疗作用高免卵黄抗体属外源性特异性抗体,其使用为人工被动免疫,因此不能过分依赖高免卵黄抗体,而忽视疫苗的正确使用。高免卵黄抗体只是在确诊的情况下“万不得已”的一种补救措施,不能把其当“疫苗”频繁地注射使用。2正确诊断是关键抗新城疫和法氏囊高免卵黄抗体只能分别中和新城疫和法氏囊病抗原。因此只有在确诊…     

抗鸡新城疫和传染性法氏囊病高免卵黄抗体的正确应用

１明确卵黄抗体的治疗作用高免卵黄抗体在免疫学上属外源性特异性抗体，其作用为人工被动免疫。因为卵黄液是一种蛋白制剂，注射后可能会有变态反应，因此不能过分依赖高免卵黄抗体，而忽视养殖过程中疫苗的正确使用。２正确确诊是关键抗新城疫和法氏囊高免卵黄抗体只能中和新城疫和法氏囊病原。因此，只有在确诊的情况下，才能使用。对其它症状类似的疫病，则丝毫没有治疗作用。相反，由于注射过程的应激反应等因素，还会加重病情，延误最佳的治疗时机，造成更大的经济损失。３治疗的时机宜早不宜晚有资料表明，卵黄抗体对发病早期病鸡的治…     

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制

本文利用鸭病毒性肝炎(DVH)弱毒活疫苗和DVH灭活油乳剂疫苗制备高免卵黄抗体,研究表明,高免卵黄抗体具有治疗鸭病毒性肝炎的临床疗效。在治疗过程中发现,高免卵黄抗体对鸭病毒性肝炎的疗效,主要决定于卵黄抗体当中的中和抗体效价与免疫途径。卵黄抗体当中的中和抗体效价一般都会在28.5之上。研究说明高免卵黄抗体对于雏鸭感染鸭病毒性肝炎病毒的24h以内完成肌肉注射,能够达到的免疫疗效最佳。     

新城疫人工主动与被动联合免疫的效果观察

新城疫仍然是影响我国养禽业的主要传染病之一，而且多趋向于非典型化。目前控制该病的主要措施是疫苗的接种和高免卵黄抗体的应用。后者的应用极大地提高了该病的治疗和紧急预防的效果。注射高免卵黄抗体属于人工被动免疫，它的优点是见效快，注射后即可产生作用，而且无任何毒副作用。缺点是维持时间短。因此在被动免疫之后，仍然需要进行人工主动免疫。一般的做法是注射高免卵黄抗体一周后再应用疫苗进行人工主动免疫。本文作者应用新城疫Ⅳ系弱毒苗与灭活油佐剂苗分别与新城疫高免卵黄抗体联合免疫；表明新城疫Ⅳ系弱毒苗与高免卵黄抗体联合免疫可出现一个抗体阴性期，而新城疫灭活油佐剂苗与高免卵黄抗体联合免疫则不出现这个抗体阴性期。因此，在新城疫发生时，可以采用灭活油佐剂苗与高免卵黄抗体联合应用，以达到治疗和紧急预防的双重目的，而不宜采用新城疫Ⅳ系弱毒苗与高免卵黄抗体联合应用。     

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制

用DVH弱毒疫苗和DVH油乳剂苗免疫健康高产蛋鸡，可以制备高免卵黄抗体。高免卵黄抗体治疗雏鸭病毒性肝炎疗效的试验表明，用卵黄抗体治疗DVH的疗效取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间。卵黄抗体的中和效价应达2^8.5以上，并且在感染DVH24h以内对雏鸭进行肌肉注射，免疫效果为最适宜。     

鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制及应用

应用雏鸭病毒性肝炎病毒（DHV）弱毒疫苗和DHV油乳剂灭活苗多次免疫产蛋鸡，制备鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体，自制鸭病毒性肝炎病毒高免卵黄抗体的疗效取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间。实验室试验及临床应用结果表明，卵黄抗体的中和效价应达2^8以上，并且在感染DHV 24h以内对雏鸭进行肌肉注射，治疗效果最为理想。     

应用高免卵黄抗体防治鸭病毒性肝炎的研究

应用雏鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）鸡胚化弱毒株（ＱＬ７９）和鸭病毒性肝炎油剂苗免疫鸡制备了高免卵黄抗体，考察了使用高兔卵黄抗体治疗雏鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）的疗效。结果表明，用卵黄抗体治疗ＤＶＨ的疗交取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间，卵黄抗体的中和效应应达２＾８．５以上，治疗最佳时间应在ＤＨＶ强毒进入鸭体后２８小时内，抗体效价在２＾８．５以上或过最佳时间或超过３６小时，则治疗效果极差。     

鸭坦布苏病毒冻干高免卵黄抗体的研制

本研究用鸭坦布苏病毒病灭活苗三次免疫SPF蛋鸡,收取高免鸡蛋,制备成冻干高免卵黄抗体;用鸡胚中和试验和间接ELISA方法进行效价检测。试验结果显示,第3次免疫后2周,卵黄抗体中和效价为1∶103.5,4、5周达到最高值1∶104.5;间接ELISA方法检测冻干前后的抗体效价结果均为阳性;对鸭坦布苏病毒强毒的攻毒保护率达100%,可为鸭坦布苏病毒的防控提供一种有效的冻干高免卵黄抗体制剂。     

由免疫而引起火鸡新城疫复发的原因分析

新城疫是危害养鸡 (火鸡 )业最为严重的一种传染病。该病发生后 ,最有效的扑灭措施 ,一是用新城疫疫苗进行紧急免疫 ;二是用新城疫高免血清或新城疫高免卵黄抗体治疗。当用高免血清或高免卵黄抗体治疗 ,使火鸡新城疫得到控制以后 ,何时进行新城疫免疫 ,目前尚无成文记载 ,一些养殖场往往是盲目进行。从理论上讲 ,如果免疫过晚可使火鸡群再次感染新城疫 ;如果免疫过早 ,可因在治疗时注射到鸡 (火鸡 )体内的高免血清或高免卵黄抗体还有较高的效价 ,会把新城疫疫苗毒中和掉 ,这样不仅造成免疫失败 ,而且因消耗了火鸡体内的高免血清或高免卵黄抗…     

猪链球菌Ⅱ型高免卵黄抗体粉的研制

试验用猪链球菌Ⅱ型CVCC606株制备疫苗免疫产蛋鸡,首免后7d检测到低水平的卵黄抗体,再经3次强化免疫,于末次免疫后7d卵黄抗体效价达到9log2,最高效价达到10log2,高水平卵黄抗体可维持到末次免疫后50d,随后出现下降。收集抗体效价大于9log2的高免蛋卵黄,经喷雾干燥成卵黄抗体粉,效价在10log2以上,卵黄抗体粉质量稳定,于室温(25℃)保存6个月抗体水平无明显降低。体外抑菌试验表明,高免卵黄抗体粉可有效抑制猪链球菌Ⅱ型CVCC606株和猪链球菌II型强毒分离株。高免卵黄抗体粉可有效预防猪链球菌Ⅱ型菌株对BALB/c小鼠的致死性感染。     

鸡新城疫卵黄抗体IgY的分离提纯研究

本文对母鸡经鸡新城疫疫苗免疫接种后产生并富集在卵黄中的抗体IgY的提取纯化工艺条件进行了研究与优化，确定了去脂、提取抗体最佳工艺为：卵黄液用0．05mol／L,pH5.0的乙酸一乙酸钠缓冲液1：9倍稀释，搅拌15min，4℃静置10小时，抗体回收率为90％，去脂率为99％；该提取液用40％饱和度的硫酸铵盐析，得到的盐析液抗体回收率为82％，纯度达到69％。盐析液经截留分子量为100KD的有机陶瓷膜超滤后，截留液抗体回收率达到92％。纯度为85％。     

Egg yolk IgY against RHDV capsid protein VP60 promotes rabbit defense against RHDV infection

VP60 capsid protein is the major structural and immunogenicity protein of RHDV (Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV), and has been implicated as a main protein antigen in RHDV diagnosis and vaccine design. In this report, egg yolk antibody (IgY) against N-terminal of VP60 was evaluated and developed as a new strategy for RHDV therapy. Briefly, N-terminal of VP60 (～250aa) fragment was cloned and inserted into pET28a expression vector, and then the resultant plasmid, pET28a/VP60-N, was transformed into E. coli BL21(DE3) for recombinant VP60-N protein (rVP60-N) expression. Next, the rVP60-N was purified by Ni⁺-affinity purification chromatography and identified by Western blotting with RHDV antiserum. After immunizing the chickens with rVP60-N, the anti-rVP60-N IgY was isolated, and the activity and specificity of the IgY antibody were analyzed by ELISA and Western blotting. In our results, the rVP60-N could be expressed in E. coli as soluble fraction, and the isolated anti-rVP60-N IgY demonstrated a high specificity and titer (1:22,000) against rVP60-N antigen. For further evaluation of the IgY efficacy in vivo, rabbits were grouped randomly and challenged with RHDV, and the results showed that anti-rVP60-N IgY could significantly protect rabbits from virus infection and promote the host survival after a sustained treatment with anti-rVP60-N IgY for 5 days. Taken together, our study demonstrates evidence that production of IgY against VP60 could be as a novel strategy for the RHDV therapy.     

抗猪流行性腹泻病毒卵黄抗体的制备及应用

本试验利用猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)SC株免疫产蛋鸡,收集高免卵黄,采用水稀释法和水稀释-盐析法获得鸡源抗PEDV卵黄抗体,采用已建立的ELISA方法对卵黄抗体效价进行测定。以3日龄无母源抗体的易感仔猪为试验动物,对抗PEDV卵黄抗体的治疗效果及安全性进行测定,并进一步利用自然发病猪场的治疗效果进行验证。结果表明,经PEDV SC株细胞毒免疫的鸡可在2次加强免疫后15 d产生高水平的特异性抗体。在实验室治疗试验中,攻毒治疗组仔猪的存活率达60%,攻毒对照组存活率为20%;用于自然发病猪场时,饲喂抗PEDV卵黄抗体饲料的仔猪存活率亦为60%,而自然发病对照组的存活率为10%。以上结果表明抗PEDV卵黄抗体对感染PEDV的仔猪有一定治疗作用。     

鸡抗鹿链球菌卵黄抗体的研制与初步治疗实验

用链球菌灭活菌苗免疫产蛋母鸡，监测卵黄抗体效价达到试验要求收集鸡蛋，提取卵黄中的卵黄免疫球蛋白（IgY）。临床发病鹿群用药物和IgY配合治疗，观察IgY的作用和疗效。     

猪硒蛋白W的原核表达及IgY多克隆抗体制备

试验旨在优化硒蛋白W （selenoprotein W，SelW）的原核表达系统，并评估SelW的免疫原性和基于IgY抗体检测猪体内SelW的可行性。将获得的猪SelW基因序列密码子进行优化、合成并连接至pET-32a （+）表达载体中，构建原核表达重组质粒pET32a （+）-SelW，转化E.coli BL21（DE3）宿主菌中，进行IPTG诱导表达，SDS-PAGE鉴定重组猪SelW的表达情况，并免疫产蛋鸡制备抗SelW的IgY多克隆抗体，通过间接ELISA检测IgY抗体滴度，采用Western blotting检测IgY识别抗原的特异性。SDS-PAGE结果显示，SelW基因在原核细胞中成功表达，得到了大小约为33 ku的重组蛋白，IPTG最佳诱导浓度及时间分别为0.5 mmol/L和6 h；可溶性分析结果显示，重组蛋白SelW主要以包涵体形式存在。间接ELISA检测结果显示，免疫后45 d的IgY多克隆抗体的效价可达1：51 200。Western blotting检测结果显示，重组蛋白具有良好的免疫原性，所制备的IgY抗体与SelW的亲和力较高。本试验成功构建并优化了SelW蛋白的原核表达系统，提高了SelW蛋白的表达量，获得了具有良好免疫原性的SelW蛋白，制备的IgY抗体能特异性识别猪肌肉组织中的SelW，可用于检测猪组织中SelW的表达、预防硒中毒和缺硒性疾病的监测等，为进一步探究SelW的生物学功能奠定基础。     

抗猪流行性腹泻病毒变异株卵黄抗体的制备、纯化及其活性影响因素的研究

为制备抗猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）变异株卵黄抗体并探索卵黄抗体的纯化方法，本试验采用灭活的PEDV变异株CH/JX01全病毒免疫蛋鸡，收集免疫后所产的鸡蛋，分别用水稀释法、PEG-6000法和水稀释-硫酸铵二次沉淀法对鸡蛋中IgY进行提纯，然后运用间接ELISA和Western blotting方法鉴定和比较3种方法的提纯效果，获得可用于规模化生产的提纯方法；同时研究不同温度、pH条件下抗体活性，寻找对提纯IgY活性具有保护作用的物质。结果显示，本试验成功制备了抗PEDV变异株的卵黄抗体。浓度检测结果表明，水稀释法提取的IgY浓度最高，为6.204 mg/mL；PEG-6000方法提纯的IgY浓度次之，为4.673 mg/mL；水稀释-硫酸铵二次沉淀法IgY浓度最低，为3.359 mg/mL。间接ELISA检测结果表明，水稀释-硫酸铵二次沉淀法提纯的IgY效价最高，为1：12 800；其次是PEG-6000，为1：6 400；而水稀释法最低，为1：1 600。综合3种方法所提纯的卵黄抗体浓度与效价，发现水稀释-硫酸铵二次沉淀法的提纯效果优于其他两种方法。活性影响因素试验结果表明，提纯的IgY在37~60℃活性稳定；pH为4.0~11.0时具有良好的活性；在酸性条件下，20%硫糖铝对IgY活性具有较好的保护作用。本试验结果将为卵黄抗体的大规模生产运用与储存提供了有效的参考依据。     

卵黄抗体在疾病防制中的应用研究进展

卵黄抗体（immunoglobulin of yolk,IgY）是指从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体,是存在于卵黄中的最主要免疫球蛋白,具有化学性质稳定、产量高、成本低、特异性强且无任何毒副作用等特点;且由于动物种系发生距离远,不会发生交叉血清学反应。IgY在动物及人的疾病防制中具有显著优势。作者对IgY的结构特点、理化性质、作用机理及其在各类动物疾病防制方面的应用及发展前景进行了综述,尤其是在动物疾病的治疗方面,如治疗畜禽腹泻及烈性、急性、危害性大的病毒疫病;治疗人类疾病特别是严重危害人类财产安全的人畜共患病;其他方面如水产、皮毛动物等重大疾病。IgY在有效治疗动物疫病的同时,也减少了人畜共患病的可能,从人身安全方面考虑,也必将具有重大发展前景。     

卵黄抗体提取方法及其在畜禽细菌性肠道疾病防治中的应用

细菌性肠道感染是畜禽养殖过程中的常见疾病，易引起畜禽采食量下降、生产性能降低等问题，严重者甚至造成死亡。在养殖过程中多采用抗生素对其进行治疗，但由于抗生素长期大量使用，特别是不合理使用，使药物残留和细菌耐药性问题日益凸显。因此，发展安全可靠的抗生素替代品已然成为当今畜牧行业的研究热点。卵黄抗体（egg yolk immunoglobulins，IgY）是通过免疫接种产蛋鸡后，在蛋黄中表达的一种免疫球蛋白，可用于相应疾病的预防和治疗。IgY具有产量大、性质稳定、安全高效等诸多优点，目前IgY作为抗生素替代品已被广泛用于畜禽养殖过程中，并取得了显著的效果。文章介绍了IgY的分子结构、理化性质和作用机理，总结并比较了5种IgY提取方法的去脂率、抗体效价、总蛋白含量等指标，最后详细介绍了IgY在防治畜禽常见细菌性感染中的研究现状和应用前景，以期为IgY的高效生产及疾病防治提供研究依据和技术支持。     

Research Progress on Immunoglobulin of Yolk in the Prevention and Treatment of Various Diseases

Immunoglobulin of yolk (IgY) refers to the specific antibodies from the immune eggs, is the most important immunoglobulin in the yolk,which has the characteristics of stable chemical properties, high yield, low cost, high specificity and no toxic side effects, there was no cross serological reaction among animals breeds because of a long distance. IgY has a significant advantage in animal and human disease prevention and treatment. In this research,we reviewed the application of structural characteristics, physicochemical property and action mechanism of IgY in prevention treatment of animal disease and developing prospect, especially in the treatment of animal diseases, such as diarrhea and acute treatment of animal spirit, harm, large virus disease; zoonosis seriously endanger the safety of human property; Other aspects such as aquaculture, animal fur and other major diseases. IgY could effectively prevent and treat animal diseases, but also reduce the possibility of zoonosis, which will be of great significance for the protection of personal safety.     

鸡新城疫－传染性支气管炎－传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究

为评估鸡新城疫（ND）-传染性支气管炎（IB）-传染性法氏囊病（IBD）三联灭活疫苗对不同日龄和不同水平母源抗体雏鸡的免疫效力和持续期,本试验用该疫苗免疫7、14、21日龄SPF雏鸡和有母源抗体的普通雏鸡,免疫后采血测定ND血凝抑制抗体（HI Ab）、IB血凝抑制抗体（HI Ab）及IBD中和抗体（NA）,并用传染性法氏囊病病毒（IBDV）强毒攻击。结果显示,7日龄SPF雏鸡免疫后21 d ND HI抗体、IB HI抗体及IBD中和抗体效价分别为7.9log2、6.9log2和14.1log2,SPF鸡日龄越大,抗体水平越高;28日龄SPF鸡免疫后3个月,0.3 mL免疫剂量组试验鸡ND HI、IB HI及IBD中和抗体效价分别达6.5log2、6.1log2和13.6log2,IBDV攻毒保护率均为100%（10/10）;不同日龄普通雏鸡免疫效果与SPF鸡试验一致,抗体水平随鸡日龄增大而升高,IBD攻毒保护率也都达到100%（10/10）。试验结果证实,鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗可使7、14及21日龄SPF雏鸡和普通雏鸡产生良好的免疫力,对雏鸡的免疫期至少为3个月。