染色体原位杂交技术在植物研究中的应用

染色体原位杂交(chromosome in situ hybridization,CISH)是一种新兴的日趋完善的技术。本文从以下几个方面对其在植物研究中的应用进行了综述:(1)外源染色质及远缘杂种的鉴定;(2)多倍体起源、非整倍体的鉴定;(3)植物基因工程及基因表达研究;(4)物种进化及亲缘关系的探讨;(5)植物基因物理图谱的构建等。     

分子原位杂交技术及在植物染色体上的应用

分子原位杂交技术及在植物染色体上的应用马有志徐琼芳辛志勇（中国农业科学院作物育种栽培研究所北京１０００８１）分子原位杂交（Ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，简称ＩＳＨ）是把用生物素等标记物质标记的ＤＮＡ片段做为探针（ｐｒｏｂｅ），与染色体ＤＮＡ...     

植物荧光原位杂交技术的发展及在基因工程育种中的应用

荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)在植物的研究中已被广泛应用,它是20世纪80年代发展起来的一种非放射性原位杂交技术,是将特定的DNA序列定位在染色体或染色质上的一门新兴的分子细胞遗传学方法.该技术的灵敏度和准确性较高并且安全、直观.本文简单介绍了该技术的基本原理,重点从染色体制片、探针标记技术、染色质的凝缩程度、与分带技术相结合和单拷贝或低拷贝基因的检测等方面,阐述了近些年该技术的发展状况,最后本文概述了该技术在基因工程育种中的应用,并展望其应用前景.     

生物素标记的重复DNA序列与黑麦染色体的原位杂交

本研究以两个黑麦重复ＤＮＡ序列ｐＳｃ１１９．１和ｐＳｃ１１９．２作探针进行原位杂交，研究其在小麦和黑麦杂色体上的分布及在检测黑麦染色质中的应用。实验结果表明：ｐＳｃ１１９．１分布于所有黑麦染色体的长短臂上，但在小麦染色体上几乎检测不到杂交信号，证明ｐＳｃ１１９．１对黑麦染色体具有专化性。进一步用该探针与小麦品种“Ａｍｉｇｏ”的体细胞染色体进行原位杂交，可明显检测出其中一对含ＩＲＳ的染色体。ｐＳｃ１     

基因组原位杂交技术在植物研究中的应用

基因组原位杂交是以亲本之一的总基因组DNA做探针,另一亲本的基因组DNA做封阻,在荧光原位杂交技术的基础上发展起来的一种染色体/染色质检测技术。在其发展的十几年里,已在植物的基因组研究中发挥了重要的作用。应用这一技术可对多倍体中基因组之间的亲缘关系、基因组组成及起源进行研究;对杂交种中染色体组的组成进行分析;对代换系、附加系和易位系进行有效的鉴定,并对其中的外源染色体或染色体片段的来源、大小、数目及发生位点进行检测和定位。此外,利用基因组原位杂交技术还有助于确定物种间的同源性;研究杂交种中来源不同的染色质在核中的分布;探索B染色体的起源、染色体间的配对、重组、交换等现象。随着基因组荧光原位杂交技术体系的不断发展、完善和改进,其应用范围不断拓展,在植物基因组研究领域中发挥了越来越重要的作用。     

基于改进的多色荧光原位杂交技术的染色体分析

为了提高多色荧光原位杂交(M-FISH)技术的鉴定效率,简化M-FISH操作程序,探索和建立新的M-FISH实验及观察体系,本研究以‘荆辉1号’（普通小麦辉县红-荆州黑麦双二倍体）、‘南农9918’（普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6AL）、‘扬麦22’（普通小麦-簇毛麦整臂易位系T6VS.6DL）以及‘ST5V#4S-1’（普通小麦-簇毛麦小片段易位系）等为试验材料,以2个寡核苷酸探针[(GAA)₁₀、pAs1-1]和物种基因组DNA探针作混合探针进行M-FISH分析。结果表明在一次原位杂交中同时使用3种探针,既可以识别出小麦背景中所有的外源染色体或染色体片段,又可以根据(GAA)₁₀和pAs1-1在染色体上的杂交信号分布精确鉴定出小麦和外源染色体（片段）的具体身份。这种改进的M-FISH技术可有效用于小麦及其近缘植物染色体的鉴定,并有助于快速构建物种基于FISH的分子核型。     

水仙荧光原位杂交体系的建立

摘要：建立以水仙染色体为靶、rDNA为探针的荧光原位杂交实验技术,为进一步利用荧光原位杂交技术分析水仙的亲缘和进化关系奠定了基础。水仙的染色体制片以去壁低渗-火焰干燥法较好,容易获得大量清晰、分散的有丝分裂中期相;切刻平移法地高辛标记探针、染色体和探针共变性90℃ 5 min能有效的进行水仙rDNA的染色体荧光原位杂交定位。     

植物染色体C-显带技术及其在小麦育种中的应用研究进展

本文就染色体C－显带技术及其在小麦近缘种属中的核型分析、亲缘关系和染色体组进化及外源染色质的鉴定等方面国内外研究新近动态做一简述和探讨。     

用基因组原位杂交方法分析甘蔗-斑茅杂种及回交后代的染色体组成

斑茅(Erianthus arundinaceus Retz)是甘蔗的近缘属植物,具有多种优良特性,是甘蔗育种的重要种质资源之一。本实验使用基因组原位杂交(GISH)技术分析了甘蔗-斑茅杂种及回交后代F1、BC1和BC2的染色体构成与传递行为。结果表明:在F1代,来自斑茅HN92-77的染色体数目介于28～30条,来自热带种Badila的染色体数目介于38～40条,体细胞染色体数为2n=68～70,基本符合n+n的染色体传递方式;在BC1和BC2代,来自斑茅的染色体数分别为22～28条和13～15条,来自甘蔗的染色体数分别是87～94条和98～101条,其体细胞染色体数2n分别为110～121条和112～115条,基本上分别符合2n+n和n+n的染色体传递方式。在所观察的渐渗系中,均存在有染色体丢失的现象,但未观察到染色体发生交换与重组。     

贵州省桑属（Morus）植物染色体倍数性的研究

本文运用酶解去壁低渗法,对贵州省桑属植物种质资源材料27份进行了染色体倍数性研究。结果如下:1.二倍体(2n=2x=28)5个。2.三倍体(2n=3x=42)1个。3.六倍体(2n=6x=84)21个。丰富了桑属植物染色体研究内容,为桑树遗传育种提供了理论和实践依据。     

染色体原位杂交的发展及其应用

原位杂交是由放射性同位素或非放射性标记的核酸探针与细胞学制片上的染色体ＤＮＡ或组织切片上的ＲＮＡ杂交,通过放射自显影或酶促生色反应、抗原抗体反应检测具有特定序列的ＤＮＡ或ＲＮＡ,从而在细胞内进行外源染色体或特定序列定位。１原位杂交技术的发展原位杂交技...     

细菌人工染色体文库及其应用

细菌人工染色体是1992年以来发展起来的一种新型克隆载体，用于构建人、动物、植物核基因组DNA大片段插入文库。细菌人工染色体在文库构建中具有转化效率高、构建文库简单、嵌合体少、插入片段容易回收、在寄主细胞中插入片段稳定性好、插入片段较大等优点。细菌人工染色体文库的构建对于基因组较大的真核生物基因组学研究具有重要作用，该文库可用于真核生物重要性状基因及全基因组的物理作图、重要农艺性状基因的图位克隆、基因结构及功能分析等研究。本文主要综述了细菌人工染色体文库的构建及其在图位克隆基因、荧光原位杂交、全基因组物理作图等研究中的应用进展。     

研究人员制成植物人工染色体

日本冈山大学资源植物研究所教授村田稔率领的研究小组近日宣布,他们成功的在植物细胞内人工制造出了带有遗传信息的染色体。这一成果将有助于开发新的作物品种。成果的相关论文已刊登在英国《植物杂志》上。研究小组使用拟南芥,利用"自顶向下分析法",通过操控细胞内原有的染色体,并进行改编,     

研究人员制成植物人工染色体

日本冈山大学资源植物研究所教授村田稔率领的研究小组近日宣布,他们成功在植物细胞内人工制造出了带有遗传信息的染色体。这一成果将有助于开发新的作物品种。     

两个肾茶属植物的染色体核型分析

肾茶属(Clerodendranthus)属于唇形科,中国植物志中记载中国仅有肾茶Clerodendranthus spicatus1个种。本研究采用植物常规压片法,对海南引种肾茶C. spicatus (编号JD)和霸王岭发现的肾茶属植物(编号BW)进行了染色体数目及核型分析研究。结果表明,JD的染色体数目为2n=2x=46,染色体相对长度组成2n=4L+7M2+7M1+5S,核型公式2n=1st+4sm+18m,核型不对称系数为58.10%,核型类型为2B型。BW的染色体数目为2n=2x=50,染色体相对长度组成2n=3L+6M2+14M1+2S,核型公式2n=1sm+24m,核型不对称系数为46.59%,核型类型为1B型。根据研究结果,结合地理分布区域及相同生长环境下两个肾茶属植物的外形特征,可判断BW与JD并不是同一个物种,应当将BW作为中国新纪录的肾茶属植物予以确定。本研究不仅可以为其分类提供细胞学证据,同时也为利用这些种质资源提供指导。     

棉花体细胞染色体rDNA-FISH技术

介绍了棉花体细胞染色体为靶、r DNA为探针的荧光原位杂交实验技术 ,并着重分析和讨论了棉花 r DNA- FISH技术的关键因素 ,包括染色体制片、探针与染色体共变性等。作为靶染色体的棉种包括陆地棉、海岛棉、草棉、亚洲棉、克劳茨基棉和比克氏棉等 ,作为封阻的是鲑鱼精 DNA。     

百合染色体细胞学研究进展

百合属绝大多数种是2n=24的二倍体,其核型具有稳定性,一般为3B型,存在少数多倍化现象,但广泛存在B染色体,百合染色体核型的差异正是环境因素和结构变异共同作用的结果。通过百合属C-带带型中单套染色体条带数及特征染色体可以清晰地区分形态学相似的百合属植物,但采用尿素法进行G带带纹的鉴定有更高的分辨率。原位杂交技术已运用于百合属植物的区分和杂种后代的鉴定,而GISH较FISH更适用于杂种百合的鉴定。