西瓜‘SM1’高效遗传转化体系的构建

为构建高效的西瓜再生和遗传转化体系,本研究以西瓜‘SM1’材料子叶节为外植体,研究不同激素配比对子叶节再生的影响。在此基础上,通过农杆菌介导法导入外源基因,研究潮霉素浓度、农杆菌侵染时间、共培养时间等因素对遗传转化效率的影响,建立遗传转化体系。结果表明,‘SM1’不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L,不定芽分化率为91.7%。最优遗传转化组合为农杆菌侵染时间15 min,共培养3 d,之后进行选择培养。外植体不定芽分化潮霉素最适浓度为10 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.01 mg/L。通过潮霉素筛选和PCR鉴定,获得12株阳性转化株系,转化率为6.5%。本研究建立了高效西瓜‘SM1’再生及遗传转化体系,为进一步开展基因功能研究及西瓜遗传改良提供了技术支撑。     

小对叶植株再生及遗传转化体系构建

为了利用生物技术方法开发及改良水生植物小对叶,以小对叶（Bacopa monnieri）叶片为外植体,建立其组织培养再生体系及根癌农杆菌介导的遗传转化体系。结果表明：小对叶叶盘最佳愈伤组织诱导培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.02 mg/L;最佳分化培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;最佳生根培养基是1/2MS+IBA 0.1 mg/L。最佳的根癌农杆菌介导的小对叶遗传转化条件是：外植体预培养2天,侵染菌液OD600为0.5,侵染时间7 min、共培养4天和延迟筛选4天,可获得最高转化率21.4%。     

番茄遗传转化体系的建立及LC和GFP标记基因的表达

本研究以小型番茄(miniature Lycopersicon esculentum Mill.)Micro-Tom为试材,建立其以子叶、下胚轴为外植体的高效、稳定再生体系及遗传转化体系。结果表明,以子叶、下胚轴为外植体时,诱导愈伤组织和芽分化的适宜培养基均为MS 6-BA2.0mg/L IAA0.2mg/L,芽分化率均可高达92%。两种外植体适宜的生根培养基均为MS NAA0.1mg/L。同时,通过根癌农杆菌介导法,建立了Micro-Tom的遗传转化体系。而乙酰丁香酮能大大提高根癌农杆菌转化番茄的效率,当AS=180μm/L时,芽分化率为52.8%;OD600=0.14是转化的最佳菌液浓度;子叶外植体与农杆菌共培养后,经过诱导,根的再生,获得了抗性苗,利用绿色荧光蛋白(GFP)检测和整株表型为紫色(Lc)基因的表达,初步证明外源基因已经整合到Micro-Tom中,为番茄激活标签体系的建立奠定了基础。     

普那菊苣高效再生体系建立和遗传转化研究

普那菊苣为菊科多年生草本植物,从国外引种后已在我国得到广泛种植。普那菊苣草质柔嫩,适口性优良,营养丰富,牛、羊、猪、鱼、兔极喜食,是一种非常优良的牧草,具有广阔的发展前景。本研究通过对不同激素浓度配比实验,建立普那菊苣的高频再生体系,结果表明MS 6-BA2.0mg/L IBA0.1mg/L培养基可高效诱导愈伤组织和芽的分化,1/2MS培养基可快速诱导根的生成,形成再生植株。通过构建植物表达载体pBI121-GFP,利用农杆菌介导转化普那菊苣以探寻高效的普那菊苣转化体系,结果显示以农杆菌LBA4404为介导菌株、以叶片为转化受体、3d预培养时间和3d共培养时间以及350mg/L羧苄青霉素和40mg/L卡那霉素筛选浓度转化效果较好,为利用普那菊苣生产动物口服型疫苗建立了初步的技术基础。     

根癌农杆菌介导的番茄高效遗传转化体系的研究

以番茄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,通过农杆菌介导法,对其遗传转化条件进行了优化,建立了高效番茄子叶和下胚轴农杆菌介导的遗传转化体系.结果表明:在农杆菌浸染前(浸染浓度为OD600=0.3)进行2 d的预培养浸染6 min的外植体在MS+2.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L IAA的培养基上转化效率最高.PCR检测初步证明,NPTII基因已整合到番茄再生植株中.     

紫薇腋芽高效遗传转化技术体系构建

紫薇(Lagerstroemia indica)是中国及世界上重要的木本观花植物,高效的遗传转化技术是开展紫薇基因功能验证和分子育种的关键技术之一。因此,为构建紫薇高效的遗传转化技术体系,本研究以紫薇腋芽为受体材料,探究了卡那霉素浓度、农杆菌菌液浓度和侵染时间对紫薇遗传转化效率的影响。结果表明,腋芽萌发筛选最适的卡那霉素浓度为300 mg/L,最优转化条件为农杆菌菌液浓度OD₆₀₀=0.2～0.8、侵染时间10～15 min,遗传转化效率最高为25.93%。预培养、共培养及筛选培养的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L Sugar。本研究建立了不依赖愈伤组织的紫薇高效遗传转化技术体系,为紫薇重要性状基因的功能验证及分子育种提供了重要工具。     

百脉根离体再生体系的优化

本研究以百脉根叶片、叶柄、茎段、花柄和根组织为外植体,比较了它们在不同激素配比培养基中的愈伤组织、不定芽及不定根的分化情况,优化并建立百脉根组织培养再生体系。研究结果显示:除根外,其它组织均可通过组织培养获得再生植株;外植体类型是影响愈伤组织、不定芽及不定根诱导的主要因素,叶片外植体的诱导效果最好。优化的百脉根组织培养再生体系为:使用叶片外植体,愈伤组织诱导培养基为MS+3.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA、芽分化培养基为MS+0.3 mg/L KT、生根培养基为1/2 MS+0.4 mg/L IBA。通过该体系60~75 d可获得百脉根再生植株,约为无性繁殖周期的1/3~1/2。     

罗汉果遗传转化受体再生体系的建立及发根农杆菌转化初探

以罗汉果品种“青皮果”试管苗的茎段和叶片为外植体,研究适合于遗传转化的受体再生系统,并进行了发根农杆菌转化的初步研究。试验结果表明茎段的再生能力强于叶片,且对农杆菌敏感,是进行遗传转化合适的受体材料。在MS基本培养基附加BA 1mg/L、KT 1mg./L、NAA 0.2mg./L、蔗糖30 mg/L培养基中,20d龄的茎段不定芽诱导率为100%,平均每个外植体诱导的不定芽数达到9.7个,移苗成活率90%以上;外植体培养前的割伤处理有利于提高出芽数;发根农杆菌转化茎段诱导出毛状根。罗汉果毛状根的诱导和培养将为罗汉果药用成分的研究和开发提供新的途径。     

多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)高效再生体系的建立

为建立多花黄精高效再生体系,试验以多花黄精种子无菌萌发后形成的幼芽为材料,采用正交试验设计,筛选其愈伤组织和不定芽诱导的较优配方,并进一步开展了不定芽增殖、生根和移栽驯化试验。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L有利于诱导无菌幼芽形成愈伤组织,诱导率达83.5%;不定芽诱导较好的培养基配方为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L和MS+6-BA3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,诱导率均为100%;不定芽增殖较好的培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,增殖系数达4.7;适宜的生根培养基配方为1/2MS+NAA 0.1 mg/L;组培苗移栽到蛭石∶泥炭土∶珍珠岩=1∶2∶1的混合基质中,成活率达100%。试验构建了以多花黄精种子为外植体的离体高效再生体系,为多花黄精种苗快速繁殖提供技术途径。     

龙牙百合的植株再生与遗传转化

以龙牙百合鳞片叶切块为外植体，通过多种培养基的比较试验，得出MS 2，4-D 2mg／L 6-BA 0．2mg／L是诱导愈伤的最佳培养基，MS 6-BA 1mg／L NAA 0．05mg／L是不定芽诱导及伸长的适宜培养基。MS N_AA2mg／L是生根的最佳培养基。本试验已建立了适用于龙牙百合遗传转化的快速高频再生系统。用携带有几丁质酶基因和β—1、3葡聚糖酶基因的工程菌，通过农杆菌介导法和基因枪转化法转化龙牙百合，经PCR和点杂交检测证明外源基因已经整合到植物染色体中。同时对农杆菌介导法和基因枪法进行比较，发现农杆菌介导法的转化率为16．7％，基因枪法的转化率为50％，因此可能基因枪转化法更适于龙牙百合的遗传转化。     

莲心酒的研制

研究了以莲心浸泡液和中草药浸泡液为辅料制备的莲心酒。该产品不仅营养价值高,风味独特,而且还具有一定的保健作用。     

莲藕保鲜技术研究

研究了不同温度下保鲜剂、保鲜膜等对莲藕保鲜效果的影响。结果表明,3号保鲜剂处理后装入0.045±0.005mmPVC保鲜袋,并结合抽真空处理,于1±0.5℃下贮藏是莲藕贮藏保鲜的最佳条件。在该条件下莲藕可保鲜2～3个月,商品率在90%以上。     

功能性复方荷叶袋泡茶的研制

采用荷叶、菊花和茶叶三种原料,通过两两组合选优、再三者组合优化配比,试图筛选出口感好、营养成分搭配合理的最佳配方。结果表明：组合chj2营养保健成分氨基酸和茶多酚含量较高,含水量较低,感官评定茶汤绿色清澈、香气清新、口感纯正,是一种较理想的配比组合。包装袋大小、冲茶水温、制作原料等因素对袋泡茶茶水品质有较大影响,要求包装袋大小适中,以容纳3～4g的规格大小为宜;水温一般以80～90℃比较好,冲泡后茶汤香气清新、汤色清绿、味道纯正;原料要求新鲜无霉变、品质纯正,确保袋泡茶质量。     

莲的利用价值和产品开发思路

综述了莲的营养成分、药理作用与产品开发状况。莲具有降脂减肥、抗氧化、抗衰老、抑制脂肪肝和抑菌等药理作用,可以用于相关功能食品和药品的开发。     

莲藕红枣保健果冻的研制

以红枣莲藕为主要原料,对莲藕红枣果冻的配方及加工工艺进行研究。通过正交试验得出产品的最佳工艺配方为：红枣汁100ml,莲藕汁150ml,果冻粉1％,在此参数下可研制出色泽均匀、口感细腻、香气协调、酸甜适宜的营养保健型莲藕红枣果冻。     

水煮莲藕片研制工艺学探讨

对水煮莲藕片的加工工艺进行了研究,特别针对非酶褐变关键步骤,应用不同浓度草酸、EDTA、抗坏血酸、曲酸和柠檬酸纳进行了试验.研究结果表明,在环境温度为25℃条件下0.1%的抗坏血酸和0.25%的柠檬酸钠作为汤汁对抑制非酶褐变有很好的效果.     

莲子的营养价值及加工利用

介绍了莲子的营养价值、保健功能和药用价值,以及莲子产品的开发现状及研究趋势。     

表面处理对莲藕保鲜的影响

莲藕极易发生褐变和腐败变质,从而失去食用价值,涂膜可以有效地延长莲藕的保质期。研究了酸、化学杀菌剂等表面处理对莲藕涂膜保鲜效果的影响。结果表明,浓度为0.06～0.07mol/L柠檬酸处理和0.04～0.07mol/L的磷酸处理均对莲藕保鲜效果明显;质量分数为2%的H2O2处理10min,不能有效抑制莲藕褐变,但可以控制其腐败变质;ClO2不宜用于莲藕的表面处理;涂膜前用质量分数2%的H2O2处理,有利于提高莲藕短期贮藏的感官品质,但会使长期贮藏莲藕变质速度加快。     

莲藕粥罐头生产工艺的研究

以鲜莲藕为原料,生产粥罐头。探讨了莲藕粥罐头的加工工艺,试验结果表明,莲藕去皮后,应使用柠檬酸0.05%,乙二胺四乙酸二钠0.03%,氯化钠0.2%配比的混合护色液进行护色,能有效避免莲藕发生一系列的酶促褐变和非酶促褐变,保证成品的感观色泽。莲藕粥罐头内容物配方为:藕丁6%,糯米6%,大麦仁1.5%,银耳1.5%,其粥体呈现莲藕应有的清香和滋味,且香气协调。莲藕粥罐头产品在贮存的24个月内不色变,不分层,符合商业销售的食品安全标准。