苹果褪绿叶斑病毒的分离提纯和酶联免疫吸附法检测

<正> 苹果褪绿叶斑病毒CLSV是影响苹果生产的主要潜隐病毒之一。目前在培育繁殖苹果无病毒苗木的工作中,普遍采用木本指示植物二重芽接法检测病毒,但这种方法费工费时。因此,我们从1987年开始进行病毒的分离提纯和抗血清制备工作,旨在为苹果潜隐病毒的大规模检测,建立简便、快速、灵敏的血清学方法。     

几种木本指示植物对苹果潜隐病毒敏感性的研究

苹果潜隐病毒的鉴定和检测,主要是靠木本指示植物的症状反应。国际上虽然提出了几种鉴定苹果潜隐病毒的标准木本指示植物,但是,由于指示植物症状表现因病毒株系及气候条件的不同而有很大差异,所以,各国都在筛选适合于本国条件的指示植物。我们为了提出适于我国苹果潜隐病毒鉴定的最佳指示植物,于1989～1991年在田间对几种国外引进的木本指示植物的症状反应敏感性,进行了试验,现将试验结果总结如下:     

A蛋白酶联法检测苹果褪绿叶斑病毒和茎沟病毒的研究

<正> 苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是苹果的两种主要潜隐病毒,严重影响苹果的产量和质量。检测苹果潜隐病毒的传统方法是木本指示植物二重芽接鉴定法,但这种方法耗工费时。由于两种病毒不稳定和在苹果树中含量低,用经典的血清学方法不能直接检测苹果植株粗汁液中的病毒。近几年国外采用酶联免疫吸附法(EL     

苹果潜隐病毒的温室鉴定

目前,已知的苹果潜隐病毒都不能或难于接种到草本植物上。因此,病毒种类的鉴定,主要是利用木本指示植物二重嫁接法在田间进行。虽然木本指示植物田间鉴定法可以鉴定所有已知的苹果潜隐病毒,但其缺点是所需时间长,若将所有病毒种类鉴定清楚,则需要2～4     

小金海棠高效脱毒检测体系的探讨

 以小金海棠组培苗为试材，对其进行苹果潜隐病毒接种、脱毒及检测方法的研究，探讨了一种针对小金海棠的快速高效的脱毒检测体系。结果表明，恒温38℃处理20 d或变温38／22℃处理30 d并结合茎尖培养，对脱除小金海棠苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒的效果较好。离体条件下，指示植物‘苏俄苹果’和‘弗琴尼苹果’不适合检测该两种病毒，而用PAS—ELISA法检测结果较灵敏。     

山东几个苹果主产区三种潜隐病毒的鉴定

对山东省6个生产苹果县(市)的果园部分主栽品种和近年来引进的北斗、红富士等苹果新品种及M26等矮化砧木中主要潜隐病毒种类进行了木本指示植物鉴定。木本指示植物是苏俄苹果(R12740-7A)、光辉(Radient)、司派227(SPY227)和弗吉尼亚小苹果(Virginia crab)。检测方法采取双重芽接法,即被检品种的接芽嫁接在检测圃内实生海棠砧木的基部,约离地面5cm,其上3～5cm处嫁接指示植物的芽片。嫁接1周后检查成活率,未嫁接成活的再行补接;10天后剪除接芽上砧木部分,待被检芽生长到10cm以上时,剪除顶尖促使指示植物芽的生长,观察症状的出现和带毒率。…     

苹果潜隐病毒检测技术的研究

1986～1989年,对国内已有的三种主要苹果潜隐病毒,进行了温室与田间检测技术的研究。结果表明,将木本指示植物检测法,由田间改在温室内进行,可将检测周期由1～3年缩短到2～5周;同时因采用了温室与田间检测技术相结合,仅在一年内即可准确地确定一个被检样品是否带有病毒。     

苹果潜隐病毒的温室鉴定

本文介绍苹果潜隐病毒在温室内的鉴定结果和所需时间。根据这一试验资料,可以把已知的三种苹果潜隐病毒的鉴定由田间改在16～27℃的温室内进行。从而,将在木本指示植物上进行鉴定所需的时间,由1～3年缩短到2～5周,鉴定结果准确、效果好。并初步选出Radiant(光辉)可以取代Spy227(司派227),作为茎痘病毒的指示植物。     

苹果潜隐病毒脱除技术的改进研究

<正> 目前,已报道侵染苹果的病毒有30余种,其中大部分可在苹果的叶、果实和枝条上引起明显症状。另外,有些病毒在栽培品种上呈潜伏性感染,又称潜隐病毒。已经鉴定出我国苹果潜隐病毒有3种:苹果褪绿叶斑病毒(A-CLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)和苹果茎痘病毒(ASPV)。潜隐病毒由于其潜隐性,在栽培中不易被发现清除,我国苹果主要栽培区上述3种苹果潜隐病毒的感染株率达90％以上,每年使苹果减产约40％～73％。     

山东省苹果无病毒苗木引种繁育程序及其管理意见

长期以来,我国由于对苹果病毒,特别是对潜隐病毒研究较少,在育苗时不自觉地从带毒树上采取接穗,致使病毒不断扩散蔓延。据调查鉴定,我国目前的苹果主栽品种普通带有病毒,主要有显性的苹果锈果病毒、花叶病毒、绿皱果病毒;潜隐性的有苹果褪绿叶斑病毒、茎痘病毒、茎沟槽病毒共六种。带毒树与无病毒树一般生长量减少16～36%,产量降低16.9～40%,氮肥需用量增加 30～40%,且果实品质下降。为尽快发展苹果无毒化栽培,保证向社会提供更多的优质纯正无病毒苹果苗木,1991年农业部与山东省联合建立苹果无病毒苗木繁育基地,从脱毒检测、组培以及大田育…     

苹果无融合生殖型砧木对潜隐病毒的抗性鉴定

通过1985～1988年鉴定研究,明确无融合生殖型苹果砧木红果三叶、威宁海棠、花红茶、卢氏海棠、泰山海棠、德钦海棠、栾川山定子和巴东海棠不抗苹果茎痘病毒、褪绿叶斑病毒和茎沟病毒。病毒浸染后,苗木接芽不萌发而枯死,或接芽萌发但植株严重矮化,节间缩短,叶片卷缩扭曲,枝梢顶端枯死。若3种病毒混合侵染,病势更加严重。上述鉴定品种因对苹果潜隐病毒敏感而不抗病,用作苹果砧木受到很大限制,只有在苹果接穗无病毒情况下,才得以繁殖苗木推广应用。平邑甜茶和石屏野海棠对潜隐病毒的抗病性,尚需进一步观察鉴定。     

茎培养草莓无毒苗及其繁殖

近年来,利用分生组织培养,快速繁殖草莓无病毒苗的技术,已普遍受到国内外人们的重视,无病毒苗的利用也越来越广泛。我国利用草莓茎尖培养无毒苗也获成功,并开始在生产上大面积应用。 草莓无毒苗培养有三个阶段,即草莓茎尖培养成脱毒苗;利用指示植物叶片嫁接方法检测和鉴定病毒;得到无毒苗,在无毒条件下快速繁殖。     

用离体微嫁接法快速检测苹果潜隐病毒

用离体微嫁接法同时检测了苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒和苹果茎痘病毒。由于苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒，症状是在叶部表现黄斑，试管内不易观察，病毒检出率较低，检测带毒率分别为37.5%和61.1%，在检测苹果茎痘病毒上取得成功，检出率达81.3%以上。用木本指示植物跟踪检测了带毒品种，试验证明采用离体微嫁接法检测果树病毒比用木本指示植物检测所需时间短，病毒检出率基本一致。     

核果类果树病毒病检测研究进展

综述了国内外指示植物法、电镜技术、血清学法、分子生物学等方法检测核果类果树病毒的进展,提出了国内核果类果树病毒的研究方向。     

通辽市塞外红苹果中3种苹果潜隐病毒的检测及变异分析

【目的】明确通辽地区塞外红苹果（Malus pumila ‘Saiwaihong’）中苹果褪绿叶斑病毒（ACLSV）、苹果茎痘病毒（ASPV）和苹果茎沟病毒（ASGV）3种苹果潜隐病毒的普遍率和遗传多样性。【方法】从通辽市开鲁县8个乡镇随机采集了96份塞外红苹果枝条，采用RT-PCR法对样品进行3种苹果潜隐病毒检测。对检测为阳性的样品进行病毒基因克隆、测序，并进行序列一致性分析和系统发育分析。【结果】检测结果表明，被检测的塞外红苹果中3种苹果潜隐病毒均有不同程度的发生，并且存在2种或3种病毒的复合侵染。基于CP基因对病毒一致性和变异情况进行分析，结果表明，来源于塞外红苹果的29个ACLSV分离物的核苷酸序列一致性为78.1%～99.9%，与其他15个已知的ACLSV分离物的一致性为69.1%～93.6%；来源于塞外红苹果的12个ASPV分离物的核苷酸序列一致性为83.6%～99.7%，与其他15个已知的ASPV分离物的一致性为75.4%～91.5%；来源于塞外红苹果的21个ASGV分离物的核苷酸序列一致性为96.4%～100.0%，与其他已知的40个ASGV分离物的一致性为89.9%～...     

苹果无融合生殖砧木病毒检测

利用RT-PCR方法检测无融合生殖砧木采种母树的带毒状况。结果表明,平邑甜茶、小金海棠、青砧一号、青砧二号等砧木的采种母树不同程度带有苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)等3种潜隐病毒,带毒株率0~13%。应当重视由此可能给苗木繁殖和研究利用带来的不良影响。     

诊断果树病毒的新方法—dsRNA分析法

大多数果树植株,由于经过长期的无性繁殖,都不同程度地受到病毒的侵染。在目前条件下,防治病毒病最根本的措施,是栽种无病毒的果树苗木,而培育无病苗的最大障碍是病毒的检测和鉴定。 在果树上常用的诊断病毒方法是指示植物法,但这种方法需要时间长(草本数月以上,木本1年以上),同时还需要同室、温室等设施,因此繁琐而不经济。其他血清学方法、免疫电镜法、荧光抗体法、酶联免疫吸附法虽较快速简便,但这对于受病毒系统和混合侵染的木本果树来说,纯化病毒和制备抗血清往往难于完成。这些方法另一缺陷是仅能检测具有蛋白质外壳的病毒,而对无蛋白…     

鉴定柑桔病毒病的三种指示植物秋季嫁接适宜温湿度初探

指示植物鉴定是柑桔病毒病鉴定的传统方法。由于其结果观察的直观性、鉴定结果的可靠性和能准确地反映病毒的生物学特性,指示植物鉴定目前仍在广泛应用。柑桔多采用嫁接接种病原,常用的嫁接接种法有双重芽接法和指示植物直接嫁接法。广西柑桔研究所通常采用双重芽接法,即在无病砧木上同时嫁接1个指示植物芽片和2个待检芽片（皮或枝段）。接种类似繁育柑桔苗木,     

草莓病毒病研究进展

综述了草莓皱缩病毒(SCV)、草莓斑驳病毒(SMV)、草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓轻型黄边伴随病毒(SMYEaV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)和草莓潜隐环斑病毒(SLRSV)等6种主要草莓病毒的分类地位、地理分布、传播途径、理化及分子生物学特性,介绍了23种草莓病毒病检测方法、控制手段。应用指示植物小叶嫁接法检测草莓病毒病仍是特异、灵敏的标准方法,但更快捷、准确、灵敏的血清学检测(ELISA)和分子生物学检测(PCR)近年来取得了很大进展。目前,草莓病毒病的控制方法主要有培育无病毒苗木、选育抗蚜虫、抗病毒品种和应用转基因技术获得抗病毒植株。     

苹果的无病毒栽培(续)

<正>(续前)5苹果脱病毒技术据调查,我国栽培苹果中3种主要潜隐型病毒的感染株率达60%～100%。树体本身没有对病毒的免疫能力,到目前又没有特效药剂或其他有效方法治愈苹果病毒病,实现苹果无病毒栽培的有效途径只有栽培无病毒苗木。而繁育无病毒苹果苗首先必需有无病毒砧木和品种的原种母树。当前,获得无病毒原种母树的有效方法是应用脱病毒技术脱除树体中的病毒。