从山金柑试管实生苗直接诱导胚性愈伤组织的研究

山金柑(Forrunella hindisti Swingle)种子在MT培养基上培养50天,可从幼苗子叶下0.1—2.0厘米处产生胚性愈伤组织,并能在无激素的基本培养基中继代保存,仍有胚性再生能力。取自田间植株的种子,其试管苗产生胚性愈伤组织的频率为16.7％,显著地低于温室盆栽树种子试管苗愈伤组织的发生频率37.1％,不同年份之间这种频率没有显著差异。产生愈伤组织的实生苗高度只有未产生愈伤组织苗高的66.4％,叶片数也只有后者的1/3,将子叶以下0.5厘米的茎段在基本培养基上进行离体培养,38.5％的外植体产生了胚性愈伤组织。     

钩藤毛状根的诱导及其钩藤碱含量的测定

为建立钩藤毛状根的培养体系,以钩藤组培无菌苗为试材,利用发根农杆菌A4、ATCC15834、R16011侵染钩藤外植体,探讨了不同钩藤外植体、菌液浓度、AS浓度、干燥处理时间对毛状根诱导率的影响。结果表明:以钩藤叶片作为外植体,预培养3 d,以OD600=0.6的A4菌株浸泡30 min后,干燥处理1 h,转入含100μmol·L-1乙酰丁香酮无激素WPM培养基中共培养3 d,在含600 mg·L-1头孢克肟筛选培养基上能获得较高的毛状根诱导率,毛状根诱导率达53.66%。PCR扩增鉴定表明,钩藤细胞核基因组中已成功整合发根农杆菌的发根基因。钩藤毛状根在无激素1/2MS液体培养基中培养20 d后,部分毛状根中钩藤碱含量明显提高,最高含量是带钩枝条中的2.06倍,达1.211 mg·g-1。     

草木樨PUTNHX基因的转化及转基因苗的耐盐性

以草木樨破坏生长点的茎尖作为外植体,在含有不同浓度激素的分化培养基上诱导新生芽.获得最佳分化培养基配方MS+4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IAA.利用农杆菌侵染的方法进行PUTNHX基因的转化,获得大量转基因苗.在含盐量分别为0.4%、0.8%、1.2%的培养基中测定转化苗的耐盐性.结果表明:在0.8%浓度下,转化苗生长时间明显高于野生苗.野生苗第3周已全部死亡,而转化苗仅有个别叶片变黄,说明转基因苗可以耐0.8%的盐.PUTNHX基因的转化确实提高了草木樨的耐盐性.     

彩色马蹄莲的离体快繁技术研究

以彩色马蹄莲的叶片和块茎作为外植体进行离体快繁研究,研究外源激素6-BA、NAA对彩色马蹄莲不同外植体诱导愈伤组织和分化的影响,筛选出适宜的培养基配方,建立彩色马蹄莲离体快繁体系.结果表明:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L是适宜的继代增殖培养基;在培养基1/2 MS+0.5 mg/L NAA上可诱导无根系植株产生大量根系,形成完整植株.     

甜瓜品种GT-1植株再生体系的建立(英文)

为了建立高效稳定的甜瓜作物的植株再生体系,研究了甜瓜品种CT-1在16种培养基上的植株再生情况。结果显示:将从5 d龄甜瓜无菌苗上切取的子叶外植体接种在MS+6-BA1 mg／L的不定芽诱导培养基上,黑暗条件培养3 d,再转至光下继续培养,诱导出高效不定芽丛。再经过在MS+6-BA0．05mg/L伸长培养基上培养后,将无根不定苗转到不含激素的MS培养基上进行生根诱导,获得完整植株。通过这种培养程序,获得了高达100％的不定芽诱导率,平均每个外植体上诱导出14株健壮植株。这项研究为甜瓜的遗传转化打下良好的基础。     

多花蔷薇假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生

 以多花蔷薇‘无刺3号’成熟种子为外植体,探讨了假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生的方法。结果表明,种子的子叶在添加2, 4-D 0.5～2 mg·L-1的1/2 MS培养基上暗培养30 d后所产生的愈伤组织,接种到添加TDZ 5～20 mg·L-1的1/2 MS培养基上光培养20 d产生初级假珠芽。假珠芽在添加TDZ 10 mg·L-1和GA3 0.1 mg·L-1的诱导培养基上暗培养20 d后,在含麦芽糖的无激素培养基上光培养产生少量次级假珠芽和胚性愈伤组织。假珠芽保存在诱导培养基上。胚性愈伤组织可发育成大量正常体细胞胚,继而再生正常植物。假珠芽可通过上述方法不断诱导体细胞胚和假珠芽,通过这种方法假珠芽已经保存了2年。     

BA和激素对试管番茄愈伤组织形态发生的影响

用番茄‘Bonny Best’品种的子叶和下胚轴作为外植体,在MS附加不同水平的BA和激素的培养基中,愈伤组织形态发生的情况是不同的。本试验结果表明:在相同的植物生长调节剂水平下,番茄子叶外植体较下胚轴外植体更容易形成愈伤组织和生根;番茄子叶和下胚轴愈伤组织的形成要求不同的激素水平,较高的水平适合于子叶愈伤组织的生长,而下胚轴愈伤组织的生长要求较低的激素水平;较高浓度的BA诱导子叶和下胚轴外植体形成白色紧密的愈伤组织,而且茎的分化出现较早,较低水平的BA产生疏松的愈伤组织,分化效迟;在MS BA22.2-44.4μM IAA1-5μM的培养基上,番茄子叶和下胚轴切段可直接分化成茎;在无激素MS培养基上,下胚轴切段可直接成苗;疏松的愈伤组织是进行悬浮培养的良好材料,可利用它们进行原生质体培养和抗性克隆的筛选。     

以花椰菜花球为外植体的离体再生体系的建立

以花椰菜花球切片为外植体,在含有不同激素的培养基上进行再生芽的诱导、伸长和生根培养,从中筛选出最适的培养基配方。结果表明:最适的分化培养基为MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L IAA;最适的伸长培养基为MS+0.5mg/L IAA;最适的生根培养基为1/2MS+1.0mg/L IAA。该试验结果为花椰菜基因转化及其进一步组培研究奠定了基础。     

菊花愈伤组织诱导的影响因素研究

以市售盆栽菊花为试材,研究了离体条件下不同外植体来源、外植体大小和不同激素浓度培养基对菊花愈伤组织诱导的影响.结果表明:2mm长的茎段作为外植体诱导愈伤组织分化最佳;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5mg/L,出愈率可以达到100％,且愈伤组织生长良好,适于进行根苗分化.     

切花菊组织培养与栽培技术

切花菊分别取脚芽、茎尖、幼蕾作为外植体，在不同激素水平的培养基上诱导产生愈伤组织、丛生芽和根，完成植株再生。研究发现：3种外植体以茎尖最好，其愈伤组织产生的芽的分化速度较快。最后移入生根培养基上长成完整植株。同时，对栽培管理技术进行研究和探讨。     

提高苹果基因转化效率的研究

采用根瘤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）强株系ＥＨＡ１０５（ｐ３５ｓＧＵＳ－ｉｎｔｒｏｎ）研究了影响‘皇家嘎拉’苹果（Ｍａｉｎｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ Ｂｏｒｋｈ．）外植体的β-葡萄糖醛酸酶（ＧＵＳ）基因的瞬时、稳定表达水平和转基因植株的再生。证明在培养基生长素（ＩＢＡ、ＮＡＡ）存在的条件下,外植体的ＧＵＳ基因的瞬时表达水平提高了３－４倍,而共培养两周后稳定表达水平提高２倍以上,产生９．８个ＧＵＳ愈伤组织表达区域。白化处理促进外植体的基因转化,白化处理的新梢顶端第一节间外植体ＧＵＳ表达区域比常用的叶片外植体高４倍。在生长素存在的条件下 ２％外植体获得了转基因植株。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ　ＢｌｏｔＤＮＡ杂交和组织化学染色分析证明ＧＵＳ基因已整合到苹果的染色体上,并得以表达。     

梨韧皮部特异表达启动子AtSUC2驱动下的GUS基因的转化和表达

 以 ‘Old Home’ 梨无菌苗叶片为外植体, 利用根癌农杆菌介导将专一在韧皮部表达启动子AtSUC2 驱动下的GUS 基因转入 ‘Old Home’中。筛选出了‘Old Home’ 梨叶片高效遗传转化的最佳条件：农杆菌和外植体在液体培养基上共培比在固体培养基上共培转化率提高5倍。 PCR分析和Southern 杂交鉴定表明GUS 基因已整合到转基因植株的基因组中,组织化学检测和Western 杂交鉴定证明了GUS 基因在转基因植株韧皮部中的表达。     

花椰菜未受精子房、花托、花序轴离体培养诱导成苗研究

以花椰菜的花托、花序轴和未受了房为外植体,诱导出不定芽,并进行继代增殖培养,在工增殖培养基上每隔２５～３０天,不定芽可以增殖５～６倍,不加激素的１／２ＭＳ培养基上,试管苗生根率达到９８％以上,移栽成活率达到９５％以上。经观察,花托和未受精了再生植株是由外植体直接分化而来,不经过愈伤组织阶段,这样可避免不良变异,保持材料的遗传稳定性。     

藏药植物川西獐牙菜的快速繁殖技术研究

以川西獐牙菜的茎尖和茎节为外植体,研究了不同激素配比对其丛生芽诱导和生根培养的影响,以期建立川西獐牙菜的快速繁殖技术.结果表明:茎尖为川西獐牙菜丛生芽诱导的适宜外植体;芽诱导的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA,在该培养基上,丛生芽诱导率为96.1％,且每个外植体平均产生6.1个丛生芽;最适生根培养基为1/2MS+0.50 mg/L IAA,此时生根率可达83.7％,且每个苗平均形成11.4条根.     

小西葫芦黄花叶病毒外壳蛋白基因导入西瓜的遗传转化

研究了西瓜品种ZKM的再生体系和农杆菌介导小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellowmosaic virus,ZYMV)的外壳蛋白(cp)基因导入西瓜的遗传转化体系。结果表明,质量分数0.6%琼脂是适宜种子萌发的基本培养基,切取5d龄的西瓜无菌苗子叶为外植体,接种在MS+BA2.0mg/L诱导培养基上,诱导不定芽效率最高。选用75mg/L卡那霉素筛选西瓜抗性芽较为合适,外植体经预培养2～3d,菌液浓度以OD600nm值为0.4,共侵染10min有利于提高西瓜转化的效率。经PCR检测,ZYMVcp基因已经导入西瓜植株,转化频率为0.15%。     

金银花愈伤组织的诱导及继代培养研究

以金银花优良品种“金丰一号”为试材,研究了不同外植体及不同浓度激素组合对金银花愈伤组织诱导和继代的影响.结果表明:愈伤组织诱导时,最佳外植体为花蕾下部,最佳培养基为MS+NAA 2.0 mg/L+6-BA 0.01 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,诱导率可达100％,且愈伤组织生长较快,量多,质地疏松、湿润,颜色鲜亮;愈伤组织继代时,最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.75 mg/L+NAA 0.25 mg/L,在此继代培养基上,经过3～5次继代后可以得到4种不同类型的愈伤组织.     

唐菖蒲体细胞胚发生和植株再生

唐菖蒲体细胞胚发生和植株再生师素恩（译）一、概述在ＭＳ培养基上获得了４个品种的唐菖蒲的松脆胚性愈伤组织和体细胞胚。培养基附加不同浓度的生长素，外植体如下：球茎切片、幼叶基部和整叶，完整的小植株。体细胞胚转移到无激素的ＭＳ培养基上后再形成小植株。所有体...     

番茄叶片外植体再生成苗技术

烟草、马铃薯和番茄等茄科植物的组织和细胞具有较强的再生能力。只要在适宜的光照、温度培养条件下,利用它们的叶片、茎段或花器作外植体,接入含有丰富营养元素和适量激素的培养基中,都能再生成一株完整的试管苗。80年代国外利用叶盘法把改造过的农杆菌质粒转移到烟草再生植株中去,使它获得了新的性状,这种方法成功地使基因转化技术变得比较简单容易了。最近体细胞无性系变异的研究引起了国内外的重视。通过组织或细胞培养途径,外植体在分化过     

银杏成熟胚乳愈伤组织的诱导研究

以银杏成熟胚乳为外植体,在附加不同激素的的培养基上进行愈伤组织的诱导,筛选出诱导愈伤组织的最佳激素组合培养基,即MS+2 mg/L NAA+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT,获得绿色、紧密的愈伤组织.     

朝天椒子叶离体培养与植株再生体系的建立

以贵州黎平朝天椒地方种为试材,取其无菌苗子叶作外植体,采用植物固体培养基组织培养法,研究了培养基激素配比、无菌苗生理年龄、子叶部位等对朝天椒子叶的离体接种、诱导愈伤、不定芽分化、芽茎伸长、诱导生根、驯化移栽、成苗等离体培养及植株再生阶段的影响。结果表明:朝天椒子叶适宜芽诱导分化的培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.1mg/L,芽分化率达100%;适宜芽伸长的培养基为MS+KT 2mg/L,芽伸长率可达50%;适宜生根的培养基为MS无激素培养基,生根率可达44%。单个外植体平均分化含15~18个不定芽的芽丛(14~16个芽茎),出苗6~7株。从子叶外植体接种至再生苗出瓶需50~55d,再生苗移栽成活率达98%。该研究构建了贵州朝天椒的高效离体培养植株再生体系,为朝天椒的组织快繁和遗传转化奠定了重要的基础。