鸡抗鹅副粘病毒病高免蛋黄抗体的研制和应用

1　抗原制备鹅副粘病毒油乳剂灭活苗 ,本所通过分离毒鹅胚增殖 ,经甲醛灭活、加白油等乳化而成。2　蛋鸡免疫方法选择健康蛋鸡 2 0 0只 ,供免疫用。2 1　基础免疫　每只蛋鸡肌注 1 .0ｍｌ鹅副粘病毒油乳剂灭活苗。2 2　加强免疫　基础免疫后 1 0天 ,肌注鹅副粘病毒油乳剂灭活苗 1 .5ｍｌ/只。2 3　强化免疫　加强免疫后 1 0天 ,再肌注鹅副粘病毒油乳剂灭活苗 2ｍｌ/只。免疫后 1 5天抽检卵黄 ,抗体效价达 6(ｌｏｇ2 )以上 ,可用作制备抗体 ,若效价低于 6(ｌｏｇ2 ) ,再免疫一次灭活油乳苗。3　鸡抗鹅副粘病毒病高免卵黄抗体的制备3 1　高…     

鸽瘟高免卵黄抗体的制备及应用

用鸽I型副粘病毒（pigeon paramyxo virus,PPMV-I）油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疫注射,并加强免疫,收集高免蛋,制备高免卵黄抗体,制备的高免卵黄抗体经血凝抑制（HI）试验测定效价为1∶1024。用制备的高免卵黄抗体对3个地方病鸽进行肌注治疗,剂量为1 ml/只,总治愈率达95%以上。结果表明,鸽瘟高免卵黄抗体具有特异性好、治愈率高,取材方便,制备简便和使用方便等特点,适用于基层推广应用。     

鸡抗小鹅瘟精致高免蛋黄抗体的研制

利用发生小鹅瘟死亡的鹅的病料分离病毒,经处理后制备抗原,以制备的小鹅瘟灭活油乳剂抗原对试验鸡颈部皮下注射0.5ml/只;2周后加倍量进行强化免疫;间隔2周后用灭活油乳剂抗原再次强化免疫1次,颈部皮下注射2.0ml/只;以后间隔8周进行1次强化免疫,每次颈部皮下注射2.0ml/只;用琼扩方法检测萃提蛋黄上清液中抗小鹅瘟特异抗体效价,直到抗体效价达到1：64以上即可集蛋,用于制备琼扩抗体效价达到1：32及以上小鹅瘟蛋黄抗体;并对抗体进行无菌检验、安全试验、效力试验、临床治疗试验等,效果明显。     

乳酸杆菌肽聚糖对鸡新城疫油苗和禽流感油苗的免疫增强作用的研究

该试验提取2株乳酸杆菌L．casei zhang和MC2-1的肽聚糖作为佐剂,按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用此2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疫,每组20只,分别于15日龄和28日龄进行新城疫组和禽流感组首免,再分别于首免后2周加强免疫,在二免后的第7天与第14天检测血清抗体HI水平。结果表明,与对照组相比试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平2^0.33-2^2.50。随着细菌肽聚糖量的增加,各试验组在提高抗体水平上也增加。2株乳酸杆菌肽聚糖对鸡接种新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

鹅抗鸡法氏囊病高免血清的研制和应用

本试验利用自然发生法氏囊（ＩＢＤ）病鸡的法氏囊、脾脏和肾脏等制成ＩＢＤ灭活油乳剂苗，经二次免疫皖西白鹅后，可获得琼扩（ＡＧＰ）抗体效价为１：６４的鹅抗鸡ＩＢＤ高免血清。鹅体在第二次免疫后１５天，抗体效价可达高峰，并至少可维持１０天以上。用鹅源抗血清对自然发生ＩＢＤ的病鸡群进行肌注１．０ｍｌ／只，其有效治愈率为９５％，对人工感染３０日龄雏鸡的保护率为１００％。     

鸽源和鸡源油乳剂灭活苗对比试验

采用鸽新城疫ND-GS01株毒为种毒制备的油乳剂灭活疫苗和进口鸡源油乳剂灭活苗各免疫10只鸽,免疫后的第15、30、45和60天,每组每种疫苗中分别采取5只鸽血样,分离血清,测定HI抗体,同时在15d每组每种疫苗中各取5只鸽,用鸽强毒1000ELD50/mL肌注攻毒。结果表明,鸽ND油乳剂灭活疫苗保护率为100%,鸡ND油乳剂灭活疫苗保护率为65%。     

新剂型兔瘟疫苗的研究

经血凝抑制和攻毒试验结果表明，在含有相同抗原量制备的疫苗，兔瘟油乳剂灭活疫苗比兔瘟组织灭活苗免疫后血清ＨＩ抗体效价高３．２５￣６．０ｌｏｇ２，即使油乳剂灭活疫苗仅为组织灭活苗四分之一的抗原量，免疫后血清ＨＩ抗体效价还高１ｌｏｇ２。油乳剂灭活苗免疫兔第５０天其血清ＨＩ抗体未见下降，而组织灭活苗免疫后第２６天已开始下降。虽然接种二种剂型的疫苗攻毒后均具有１００％的保护率，但血清ＨＩ抗体效价消长情况证明     

乳酸杆菌DNA对鸡新城疫油苗和禽流感油苗免疫增强作用的研究

提取2株乳酸杆菌L.casei zhang和MG2-1的DNA作佐剂，按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用上述2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疲，每组20只，分别于15日龄和28日龄进行新城疫（ND）组和禽流感（AV）组首免，再分别于首免台2周加强免疫，在二免的第7天与第14天检测血清HI抗体水平。结果表明，与对照组相比，试验各组抗体水平达到显著或极显著水平，可提高抗体水平2^0.16～2^2.67。说明，2株乳酸杆菌DNA对新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

鸡新城疫卵黄抗体效价动态变化情况研究

选取150日龄健康产蛋母鸡40羽,肌肉注射鸡新城疫Lasota疫苗2倍剂量/羽,10 d后再注射鸡新城疫油乳剂灭活苗4倍剂量/羽,自由采食和饮水。分别收集免疫前、免疫后10、20、30、40和50 d,母鸡所产鸡蛋提取卵黄抗体,测定不同时间卵黄抗体效价。结果发现免疫前卵黄抗体效价较低,鸡新城疫Lasota疫苗免疫后卵黄抗体效价开始缓慢升高,鸡新城疫油乳剂灭活苗加强免疫后卵黄抗体效价大幅度提高,并在二免后20 d卵黄抗体效价达到高峰,维持一段时间后卵黄抗体效价开始逐步下降。表明收集鸡新城疫疫苗二免后20 d左右的鸡蛋提取卵黄抗体效价高。     

三黄鸡禽流感免疫抗体消长变化规律的研究

对禽流感免疫抗体的消长变化进行了初步研究。将150只三黄鸡随机分为5组,用禽流感灭活油乳剂疫苗和禽流感灭活疫苗免疫试验组三黄鸡;14日龄时,对试验一、二、三、四组鸡进行首免,剂量为0.3mL/只;在35日龄时,对试验二、四组鸡进行二免,剂量为0.2mL/只;在21、28、35、42、49、56、63、70、77日龄采血,用血凝抑制(HI)试验测定各组三黄鸡血清中HI抗体效价。结果表明,禽流感灭活疫苗一次免疫即可使三黄鸡产生高效价的HI抗体,且持续时间较长;禽流感灭活油乳剂疫苗需要二次免疫才能使三黄鸡产生较高效价的HI抗体。     

禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究

为系统评估禽流感病毒(AIV)H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对家禽的免疫效果,本研究将Re-4株油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡和商品蛋鸡、商品鸭及商品鹅。免疫后每周采集血清测定HI抗体,绘制抗体消长曲线,免疫SPF鸡在免疫后2周、3周和50周时以105EID50剂量的强毒株(CK/SX/2/06)进行攻毒。研究结果显示,该疫苗对蛋鸡、鸭、鹅均具有良好的免疫效果,而且SPF免疫鸡血清HI抗体在4log2以上时能够完全抵抗CK/SX/2/06强毒的攻击。因此,根据实验结果推荐该油乳剂灭活疫苗的对上述禽类的免疫程序:商品蛋鸡10日龄颈部皮下注射0.3mL,60日龄和110日龄(开产前)时依次胸肌注射0.5mL和1.0mL进行免疫;商品鸭、鹅在2周龄均以0.5mL首免,5周龄和4月龄左右时以1mL的剂量肌肉注射方式进行加强免疫。     

兔自家大肠杆菌高免卵黄抗体的研制与应用

采用灭活菌苗进行基础免疫、加强免疫,灭活油乳剂疫苗进行超强化免疫和维持免疫程序。通过微量凝集试验方法,研究了鸡抗兔大肠杆菌高免卵黄抗体的消长规律及临床应用。结果表明,超强化免疫5周后,抗体效价达到高峰,9周后抗体效价逐渐下降。同一剂量卵黄抗体效价达26时,肌注2 mL/kg体重,连用3 d对兔大肠杆菌感染的治愈率达90%。成品卵黄抗体的效价应达到26、安全性检验、无菌检验阴性方可用于临床治疗。卵黄抗体在血清中维持高浓度可持续1周,然后逐渐下降。在冷冻环境下可保存1年,其抗体效价保持在有效水平。与头孢噻肟进行的对比田间治疗试验,卵黄抗体的治愈率显著高于头孢噻肟。     

鸡安卡拉病卵黄抗体的制备与治疗效果研究

制备鸡安卡拉病油乳剂灭活疫苗,多次强化免疫高产蛋鸡,采集高免蛋,制备卵黄抗体,该卵黄抗体的琼扩抗体效价达1:64,0.25、0.5、1.0 m L使用剂量对人工感染I亚群禽腺病毒的治愈率分别达30%、90%和100%。表明制备的安卡拉病卵黄抗体具有良好的治疗效果,可应用于临床安卡拉病的预防与治疗。     

不同免疫方法制备IBD卵黄抗体的效果比较

用6种不同的免疫方法接种健康产蛋母鸡所制备的卵黄抗体,用琼扩法测定免疫后不同时期的卵黄抗体效价,并将其作1:4稀释后用于临床治疗试验。结果表明,以第5组(首免肌注自制油乳剂灭活苗2 ml/只,1周后同上法二免)效价最高,总有效率达98％以上,12h后症状即见明显好转。     

不同免疫方法制备IBD卵黄抗体的效果比较

用6种不同的免疫方法接种健康产蛋母鸡所制备的卵黄抗体,用琼扩法测定免疫后不同时期的卵黄抗体效价,并将其作1：4稀释后用于临床治疗试验。结果表明,以第5组(首免肌注自制油乳剂灭活苗2mL／只,一周后同上法二免)效价最高,总有效率达98％以上,12h后症状即见明显好转。     

新城疫病毒TS09-C耐热株灭活疫苗研究

选用β丙内酯对新城疫病毒TS09-C耐热株进行灭活处理,探索该毒株的最适灭活条件,并对灭活后病毒的耐热特性和保存期进行检测,同时制备油乳剂灭活疫苗接种2周龄健康SPF鸡,免疫后14d检测其新城疫抗体水平。结果显示,经0.25g/Lβ丙内酯37℃灭活2h,可彻底灭活TS09-C株,同时可保证其良好的HA血凝效价和耐热特性,灭活后的TS09-C株在42℃条件下保存60d,其HA效价未见显著下降,而灭活的La Sota非耐热株已经降为0。TS09-C株和La Sota株利用同样方法制备的油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡后产生的新城疫抗体水平分别为27.3和26.7。该研究为研发抗原稳定性强的新城疫灭活疫苗打下了良好的前期基础。     

不同免疫方法制备IBD卵黄抗体的效果比较

用6种不同的免疫方法接种健康产蛋母鸡所制备的卵黄抗体，用琼扩法测定免疫后不同时期的卵黄抗体效价，并将其作1：4稀释后用于临床治疗试验。结果表明，以第5组（首免肌注自制油乳剂灭活苗2ml/只，1周后同上法二免）效价最高，总有效率达98%以上，12h后症状即见明显好转。     

小鹅瘟蛋黄抗体的制造及免疫效果观察

母鹅的抗体可以经蛋传给子代,使雏鹅得到保护,据此我们制造了小鹅瘟蛋黄抗体,在孵坊给雏鹅进行免疫,1日龄鹅皮下注射1毫升,经过4万余只鹅的免疫,免疫鹅100%得到保护,初步观察,保护期为20日龄以上。现报道如下: 1.种鹅免疫:在种鹅产蛋前一个月首免,小鹅瘟病毒由江苏农学院提供,按1:50稀释,皮下注射1毫升。二免在首免后第10天进行,皮下注射小鹅瘟病毒原液1毫升。三免在二免后第10天进行,注射小鹅瘟病毒原液4毫升,三免后一个月内产的蛋留作制备蛋黄抗体用。     

猪抗鸡传染性法氏囊病高免血清的制备及应用

作者采用自然发病鸡法氏囊组织制作鸡IBD油佐剂灭活苗;用鸡IBD油佐剂灭活苗多点肌注商品育肥猪,首免剂量10ml/头,10天后二免剂量为20ml/头;二免后20天AGP法检测供试猪血清,IBDV抗体效价1：32;用1：8猪抗鸡IBD高免血清治疗2400只IBD发病鸡,治愈率88．33％。     

鸡减蛋综合征病毒EDSV-HX株的分离鉴定与免疫原性评价

为研究某发病鸡群病料中所分离病毒的遗传特性、致病性及免疫原性,通过流行病学、基因序列测定、血凝和血凝抑制试验,确定所分离的病毒为鸡减蛋综合征病毒(EDSV),并命名为EDSV-HX株。随后制备该毒株的油乳剂灭活疫苗,分别以不同剂量免疫蛋鸡,并根据HI抗体效价将免疫蛋鸡重新分为不同的抗体水平组进行攻毒试验。结果显示:当免疫鸡HI抗体效价不低于7 log2时,可为免疫蛋鸡提供有效攻毒保护,且产蛋不受影响。研究表明EDSV-HX株具有高致病性和良好的免疫原性,可作为效力检验用毒及灭活疫苗的候选株。