维生素、矿物质与能量蛋白质水平对浙东白鹅母鹅繁殖性能、血液生殖激素浓度及生殖轴相关基因mRNA相对表达量的影响

本试验通过在饲粮中添加维生素与矿物质、调整饲粮能量蛋白质水平,旨在研究其对浙东白鹅母鹅繁殖性能、血液生殖激素浓度和生殖轴相关基因mRNA相对表达量的影响.选择138只月龄相近的浙东白鹅种母鹅,按体重相近原则分为3组,分别饲喂不同的饲粮,试验期150 d,测定繁殖性能(平均产蛋数、平均蛋重、受精率和孵化率)、血液生殖激素[卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)]浓度和生殖轴相关基因[促性腺激素释放激素(GnRH)、卵泡刺激素-β(FSHβ)、雌激素受体1(ESR1)、雌激素受体2(ESR2)、卵泡刺激素受体(FSHR)、催乳素(PRL)、催乳素受体(PRLR)] mRNA相对表达量的变化.结果表明:1)添加维生素与矿物质可显著提高浙东白鹅母鹅第1产蛋周期平均蛋重和受精率(P＜0.05);提高第2产蛋周期内血液FSH和P4的浓度,降低LH浓度,改变E2、P4和PRL浓度波动(P＜0.05);下调下丘脑PRLR、垂体PRL和卵巢PRLR基因的mRNA相对表达量(P＜0.05),上调卵巢ESR2基因的mRNA相对表达量(P＜0.05).2)调整饲粮能量蛋白质水平可显著提高浙东白鹅母鹅第2产蛋周期平均蛋重(P＜0.05);提高浙东白鹅第2产蛋周期内血液LH浓度,降低FSH浓度,改变E2和P4浓度波动(P＜0.05);上调下丘脑GnRH、垂体PRL和PRLR基因的mRNA相对表达量(P＜0.05),下调卵巢FSHR基因的mRNA相对表达量(P＜0.05).由此得出,添加维生素与矿物质、调整饲粮能量蛋白质水平可通过影响产蛋周期内部分血液生殖激素浓度和波动,局部调节生殖轴相关基因的mRNA相对表达量,改善浙东白鹅母鹅的繁殖性能.     

突触素在鸡产蛋前后下丘脑内生殖核团的表达和发育

应用免疫组织化学方法研究了突触素 (SVP- 38)免疫反应产物在鸡产蛋前后下丘脑中生殖内分泌核团内的表达和发育情况。结果显示 ,前联合区、视前室旁核、室周弓状核、下丘脑室旁核、乳头体内侧核、乳头体外侧核等生殖核团内突触素免疫反应强度 ,在 3个年龄组间差异显著。 2 40 d组反应强度最高 ,70 d组次之 ,5 0 0 d组最低。结果表明 ,产蛋高峰期下丘脑内的突触可塑性增强 ,突触素产蛋高峰期表达强度最高 ,后随日龄增加而强度下降。说明突触素的表达与生殖内分泌激素的分泌有依赖性。     

类固醇合成急性调节蛋白的生物学特性及作用研究概况

类固醇合成急性调节蛋白(StAR)是胆固醇的一种转运蛋白,在类固醇激素合成过程中StAR作为限速酶起着特别关键的作用。类固醇激素合成主要在肾上腺、性腺和胎盘等组织中进行,对于维持正常生殖功能和机体内环境的稳定非常重要。有关StAR的发现和特性在以往的文献中已有报道,在此基础上,论文对StAR的生物学特征、作用机制及其与生殖疾病的关系等方面进行综述。     

α-亚麻酸对猪颗粒细胞胆固醇合成、类固醇激素合成和凋亡的影响

本试验旨在探究α-亚麻酸(ALA)对猪颗粒细胞(GCs)胆固醇合成、类固醇激素合成和凋亡的影响。试验收集150日龄健康母猪卵巢GCs，通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)、Western blot和流式细胞术探究ALA对猪GCs胆固醇合成、类固醇激素分泌及其凋亡的影响。结果表明：1)50μmol/L ALA处理极显著抑制了雌二醇(E₂)的合成(P<0.01)，但对孕酮(P₄)的合成没有显著影响(P>0.05);2)50μmol/L ALA处理显著下调了胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)和3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的mRNA相对表达量(P<0.05)，同时显著下调了CYP11A1和类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)的蛋白相对表达量(P<0.05);3)50μmol/L ALA处理显著下调了关键胆固醇合成基因3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、清道夫受体B类成员1 (SCARB1)和胆固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)的mRNA相对表达量(P<0....     

不同产蛋水平五龙鹅的血清生化指标、抗氧化能力、激素水平与卵巢差异表达基因分析

本实验通过研究不同产蛋水平的五龙鹅在血清生化指标、抗氧化能力、激素水平及卵巢转录组学方面的差异,旨在为五龙鹅产蛋性能的精准鉴定和高产性状的辅助选育提供理论依据。选择300只具有系谱记录的、同一群体、同批次孵化的34周龄五龙鹅种鹅,采用单笼饲养连续记录产蛋高峰期（34～51周龄）70 d产蛋量,根据产蛋水平不同选取高、中、低产蛋量五龙鹅各10只,其中以产蛋量大于30枚定为高产组,10～30枚为中产组,低于10枚为低产组。结果表明：在机体抗氧化和代谢方面,高产组五龙鹅超氧化物歧化酶活性（P<0.01）、谷丙转氨酶活性（P<0.05）高于低产组,高密度脂蛋白含量低于低产组（P<0.05）;在血清生殖激素方面,高产组的促卵泡素、孕酮活性高于低产组（P<0.01）,催乳素活性低于低产组（P<0.05）;在卵巢转录组测序方面,共检测出833个差异表达基因（DEGs）,其中203个上调基因,630个下调基因,通过对比发现PRL、PRLHR、MAPK1 3个差异基因可能参与了调节鹅产蛋性能;不同产蛋水平五龙鹅卵巢中“神经活动配体-受体相互作用”通路（Neuroactive...     

StAR蛋白与生殖

类固醇激素生物合成的调节机制,尤其是快速调节机制是近半个世纪研究的热点.StAR蛋白(steroidogemc acuteregulatory protein)在这一过程中发挥了重要作用.StAR蛋白首先由Clark等[1]从MA-10鼠间质肿瘤细胞中分离,其能在人、小鼠、大鼠、牛、绵羊和猪的卵巢、黄体、睾丸等类固醇合成组织中表达.     

鹅不同繁殖时期GnRH和GnIH基因表达和激素浓度变化分析

旨在研究GnRH和GnIH基因和激素在鹅繁殖过程中的重要作用,本研究以产蛋性能差异显著的四川白鹅和溆浦鹅为试验材料,利用Real-time RCR方法检测产蛋前期、产蛋期和休产期两种鹅的下丘脑、垂体和卵巢组织中GnRH和GnIH mRNA的表达量;利用放射性免疫和酶联免疫吸附测定法测定血清中的GnRH和GnIH激素变化情况。结果表明:GnRH和GnIH基因在四川白鹅和溆浦鹅的下丘脑、垂体和卵巢组织中均有表达;产蛋前期和产蛋高峰期的下丘脑和卵巢组织中,四川白鹅的GnRH mRNA表达量显著(P0.05)或极显著(P0.01)高于溆浦鹅,在产蛋高峰期和休产期四川白鹅GnRH激素浓度也极显著(P0.01)或显著高于(P0.05)溆浦鹅,在高峰期和休产期四川白鹅GnRH血清浓度分别为51.13和51.10pg·mL-1,溆浦鹅分别为49.52和49.94pg·mL-1;GnIH在两种鹅的变化比较一致,仅在产蛋高峰期,四川白鹅下丘脑组织中GnIH mRNA表达水平极显著低于(P0.01)溆浦鹅,而两种鹅之间的GnIH激素在各个时期均无显著差异。这提示随着繁殖阶段的改变,在调控两种鹅产蛋性能的作用过程中GnRH可能较GnIH发挥着更为重要的作用,为进一步研究鹅繁殖分子机制奠定基础。     

下丘脑-垂体-性腺轴在调控鸡产蛋性能中的核心作用

产蛋性能是蛋鸡养殖的主要指标,鸡生殖系统发育以及体内内分泌激素分泌直接影响产蛋性能,而调控生殖激素分泌的中心是下丘脑-垂体-性腺轴(HPG)。文章以HPG为主体,论述了HPG调控的生殖激素及其作用机制(促性腺激素释放激素、促性腺激素抑制激素、促卵泡素、催乳素、促黄体素、雌激素、孕酮和雄激素)、影响HPG的因素(光照和药物)及其作用机理,为HPG调节鸡产蛋性能的研究提供参考。     

籽鹅卵巢组织中雌激素受体基因表达模式的研究

雌激素是重要的生殖激素之一,其作用的发挥受雌激素受体(estrogen receptor,ESR)介导.因此,研究雌激素受体表达的动态变化规律对阐明鹅卵巢发育和产蛋的分子调控机制具有重要意义.研究利用实时定量PCR技术检测发育期和产蛋期籽鹅卵巢组织中雌激素受体1(ESR1)和雌激素受体2(ESR2)表达的动态变化,为鹅卵巢组织中雌激素及其受体调控机理的研究奠定基础.     

生殖激素免疫在肉羊繁殖中的应用

上世纪六十年代末,在免疫学、生物化学、内分泌等学科的基础上,逐渐兴起了一门新兴学科—激素免疫学。即以激素抗体主动或被动地中和动物体内相应的激素,使该激素的生物活性全部或部分丧失,引起内分泌平衡的改变,从而发生各种生理效应,产生有意义的可以被人们利用的效果,在这一领域,目前较为成功的是生殖激素免疫在肉羊繁殖中的应用。1调节激素浓度疫苗的产生由于类固醇激素的分子量远低于蛋白质或肽类激素,不具有抗原性,但可以大分子的血清蛋蛋白等作为载体与类固醇相偶联,再将其与佐剂混合处理,注入动物体内,才能刺激机体产生高效价的抗体…     

LRH-1的小分子激活剂DLPC对牛卵巢颗粒细胞类固醇合成基因表达的影响

LRH-1(nuclear receptor subfamily 5, group A, member 2),是核受体家族的成员之一,作为转录共激活子调控相关基因的表达,对类固醇激素的分泌及细胞代谢有重要影响。为探究LRH-1对牛卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的影响,以体外培养的牛卵巢颗粒细胞为试验材料,使用不同浓度(20μM、50μM、100μM、150μM、200μM)LRH-1的激活剂DLPC激活LRH-1的表达,通过免疫荧光、免疫组织化学和RT-qPCR方法,检测LRH-1在牛卵巢组织中的表达定位及其对牛卵巢颗粒细胞类固醇合成相关基因表达水平的影响。试验结果表明,LRH-1在牛卵巢颗粒细胞中高度表达,50μM DLPC可显著提高STAR、LRH-1、CYP17基因的表达,20μM DLPC可显著抑制CYP11基因的表达。研究结果揭示了LRH-1表达的上调可以显著提高类固醇激素合成相关基因的表达。     

高、低产双黄蛋高邮鸭卵巢组织差异分析

本试验以高邮鸭为研究对象,选择双黄蛋高、低产组高邮鸭各6只,颈动脉放血致死后立即采集下丘脑、垂体、肝脏、输卵管及卵巢组织,将采集的卵巢组织通过组织切片、HE染色观察卵巢形态结构,并对双黄蛋高、低产组高邮鸭卵巢中等级卵泡进行统计对比;进行特异性标记蛋白卵泡刺激素受体(FSHR)免疫组化染色,观察两组高邮鸭卵巢阳性细胞表达情况及卵巢颗粒细胞分布;同时提取下丘脑、垂体、肝脏、输卵管及卵巢组织RNA,采用实时荧光定量PCR技术检测FSHR基因的表达。结果显示,双黄蛋高产和低产组高邮鸭卵巢在组织结构及卵泡发育上存在明显差异,高产组卵巢上的卵泡繁密且发育良好,密布着众多小黄卵泡、大白卵泡及小白卵泡,各级卵泡大小差异明显;而低产组卵巢上的卵泡稀疏且发育较为迟缓,小黄卵泡、大白卵泡及小白卵泡数量较少。实时荧光定量PCR检测结果表明,高产组高邮鸭下丘脑、垂体、肝脏及输卵管中的FSHR基因表达量极显著高于低产组(P0.01),而卵巢中FSHR基因表达量在两组中差异不显著(P0.05)。本试验结果表明,双黄蛋高、低产组高邮鸭的卵巢结构及卵泡发育存在显著差异,卵巢上的微环境可能是影响高邮鸭双黄蛋产蛋性能的影响因素。     

伊犁鹅产蛋前后各期卵巢转录谱的构建及卵泡发育相关基因的分析

【目的】构建产蛋前后各期伊犁鹅卵巢转录组文库,结合生物信息学分析揭示不同产蛋期伊犁鹅卵巢组织差异表达基因,并鉴定出影响鹅卵巢发育的关键基因,为伊犁鹅的繁殖调控提供理论参考。【方法】选择处于开产期（KL组）、产蛋期（CL组）及休产期（XL组）的伊犁鹅各4只,屠宰后取其卵巢组织,用于构建卵巢转录组文库。通过新基因挖掘、基因差异表达、基因注释以及蛋白互作网络分析筛选出与鹅卵泡发育相关的候选基因;随机挑选8个差异表达基因,应用实时荧光定量PCR验证其表达情况。【结果】伊犁鹅卵巢组织学结果表明,在开产期时,伊犁鹅卵巢表面有大量初级卵泡,而产蛋期卵巢则显示出卵泡的层级性,在休产期卵巢中可观察到卵泡出现向内凹陷、闭锁的现象。通过转录组测序（RNA-Seq）,从构建的12个伊犁鹅卵巢cDNA文库中获得有效读数57 811 186~85 328 377条,Q30值均>93.38%,每个样品所产的测序读数于鹅参考基因组上的比对率在82.79%~89.24%。在卵巢中注释的新基因共有1 112个,单核苷酸多态性（SNP）位点总数为1 642 273~2 425 069个;SNP和插入缺失（InDel）均主要注释于内含子区域;各时期的可变剪切类型主要集中为最后1个外显子可变剪切（TSS）及第1个外显子可变剪切（TTS）。在KL vs CL、XL vs CL及XL vs KL组中分别有337、1 136和525个差异表达基因,共有差异表达基因为α2A肾上腺素能受体（ADRA2A）、表皮蛋白（CP）、非转移性黑色素瘤糖蛋白B （GPNMB）及α-1-抗胰蛋白酶样（LOC106033756）。GO功能富集分析发现,差异表达基因主要富集在肽基酪氨酸磷酸化的正调控、细胞黏附及质膜外侧等过程。KEGG通路富集分析发现,差异表达基因主要显著富集于神经活性配体-受体相互作用、ECM-受体相互作用及类固醇生物合成等。结合蛋白互作网络分析,筛选到与鹅卵巢发育相关的潜在调控因子Bruton’s酪氨酸激酶（BTK）、血小板源性生长因子受体α（PDGFRA）、整合素β3（ITGB3）等。实时荧光定量PCR结果显示,RNA-Seq结果准确可靠。【结论】本研究揭示了产蛋前后各期伊犁鹅卵巢组织中的基因表达差异,筛选到影响伊犁鹅卵巢发育的神经活性配体-受体相互作用、ECM-受体相互作用、类固醇生物合成等重要通路与BTK、PDGFRA和ITGB3等关键候选基因,为了解鹅卵巢组织调控产蛋性能的分子机制提供了理论支撑。     

YWHA蛋白在番鸭不同繁殖状态下卵巢组织中的表达情况分析

本试验旨在探讨YWHA蛋白家族成员YWHAB、WHAE和YWHAG在番鸭卵巢组织的表达特征,以期明确YWHAB、YWHAE和YWHAG与卵巢组织细胞生长、发育的关系;本试验利用免疫组织化学的方法检测YWHAB、YWHAE和YWHAG基因在产蛋和就巢状态下卵巢组织的阳性细胞率和H-Score的变化情况,试验结果发现80%以上的细胞均表达YWHAB、YWHAE和YWHAG蛋白,就巢状态下和产蛋状态下细胞阳性率没有显著差异;在就巢状态下卵巢组织的H-Score均显著或极显著高于产蛋状态下的卵巢组织,表明该蛋白家族可能参与就巢状态下卵巢细胞的发育调控。     

发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴差异表达基因筛选及分析

研究旨在分析发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴基因表达的差异,探讨母猪乏情调控的分子机制。选用6头健康的断奶初产母猪,分为发情组（3头）和乏情组（3头）,屠宰后分别采集下丘脑、垂体、卵巢进行转录组测序（RNA-Seq）、GO功能富集、KEGG通路及相关蛋白的Western blotting分析。结果发现,发情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52 432 800、52 573 730和52 209 252条clean reads,与猪参考基因组（Sus scrofa 11.1）的比对率分别为78.69%、81.49%和79.26%;乏情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52 516 724,52 476 820和52 195 962条clean reads,与猪参考基因组的比对率分别为82.38%、83.05%和80.20%。与发情组母猪相比,乏情组母猪下丘脑中共有710个差异表达基因,其中上调基因392个,下调基因318个;垂体中共有707个差异表达基因,其中上调基因283个,下调基因424个;卵巢中共有956个差异表达基因,其中上调基因635个,下调基因321个。3种组织中的共有差异表达基因为36个。与母猪情期调控相关的亲吻素-1（KISS1）、G-蛋白偶联受体54（GPR54）、速激肽3（TAC3）、速激肽3受体（TACR3）、17-α-羟化酶/17,20碳链裂解酶（CYP17A1）、芳香化酶（CYP19A1）、类固醇激素合成急性调节蛋白（STAR）、促性腺激素释放激素受体（GnRHR）和雌激素受体1（ESR1）基因在乏情组母猪体内显著下调（P<0.05;P<0.01）。Western blotting分析结果显示,TAC3、TAC3R、KISS1和GPR54相关蛋白在乏情组母猪下丘脑中也显著下调（P<0.05）。GO和KEGG通路分析发现,差异表达基因显著富集于正调控胆固醇酯化反应、卵巢类固醇生成、GnRH信号通路、FoxO信号等一些与类固醇激素生成和卵泡发育相关的信号通路。本研究结果表明,发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴上与情期调控相关的基因存在差异表达,尤其是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR3两大系统的mRNA及蛋白表达水平在乏情组母猪下丘脑中均显著下调,推测可能是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR表达受损导致了下丘脑调节功能障碍,进而导致了初产母猪乏情。该研究为揭示初产母猪乏情分子调控机制提供了重要支持,为今后利用分子技术改善母猪乏情问题提供了重要理论依据。     

抗缪勒氏管激素抑制山麻鸭卵泡发育分子机制的研究

【目的】探究抗缪勒氏管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)抑制山麻鸭卵泡发育的分子调控机制。【方法】选取40只29周龄产蛋山麻鸭,随机分为4组：AMH1、AMH2、AMH3和对照组,AMH1、AMH2和AMH3组给予2、20和200μg/d AMH多肽;对照组给予同等体积的生理盐水,整个试验持续21 d;每天记录产蛋量,在试验末采集卵巢和卵泡进行计数,称重计算卵巢指数,测定血清促黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、孕酮(progesterone, P₄)和雌二醇(estradiol, E₂)水平,检测等级卵泡(F6)、小黄卵泡(SYF)和大白卵泡(LWF)中卵泡刺激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)、类固醇生成急性调节蛋白(StAR)、3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、雌激素合成酶(CYP19A1)、生长分化因子9(GDF9)、骨形态发生蛋白15(BMP15)基因表达量,以及F6和SYF中StAR、GDF9蛋白表达水平。【结果】与对照组相比,AMH2和AMH3组的产蛋率显著下...     

CYP11A1基因在藏猪和藏梅猪卵巢、子宫和输卵管组织表达差异

CYP11A1基因是催化类固醇激素生成过程中的第一个水解酶,也是该过程的限速酶,对于受到激素调节的动物繁殖生理过程有重要作用。本文研究了CYP11A1基因在产仔数有明显差异两个猪种卵巢、子宫和输卵管三个组织中的表达差异,结果发现CYP11A1基因在卵巢组织中表达最丰富,且在两个不同猪种中有显著差异(P<0.05)。这说明CYP11A1基因猪卵巢功能发挥具有重要作用。     

栀子对产蛋后期蛋鸡生产性能和蛋品质的调控作用及其机制

旨在研究日粮中添加不同质量分数(1.0%,1.5%,2.0%)栀子对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生殖激素以及肝脏和卵巢中卵黄沉积与卵泡发育相关基因表达的影响。试验选取144只360日龄健康状态良好的海兰褐蛋鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复6只。空白组饲喂基础日粮,各试验组在基础日粮中添加相应质量分数的栀子粉,预饲期2周,试验期8周。试验期间以重复为单位,每天记录产蛋数和蛋质量,每2周随机选取蛋样测定蛋品质;于第0,4,8周末进行翅下静脉采血,以测定血清生殖激素水平;试验结束时,每个重复选取3只鸡常规处死,采集肝脏和卵巢组织,用于制作石蜡切片观察组织形态结构和荧光定量PCR分析相关基因表达量。结果表明,2.0%栀子组的产蛋率和平均蛋质量显著提升(P<0.05);各栀子组蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳质量差异不显著,但1.5%,2.0%栀子组的蛋黄颜色在试验全程均显著加深(P<0.05),2.0%栀子组哈夫值和蛋黄比率在第4和8周显著增加(P<0.05);第8周各栀子组血清E2、P4、FSH、LH水平明显升高(P<0.05或P<0.01);各栀子组中,...     

类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)的研究进展

类固醇激素合成过程中,需要急性调节蛋白(StAR)将细胞质中的胆固醇转运到线粒体中,而StAR基因的表达及相关反应物通过调节细胞中的StAR水平,来调控类固醇激素的合成过程.本文结合大量相关文献资料,首先综述了当前研究者对急性调节蛋白(StAR)的分子结构、编码基因及同源性的研究成果,包括StAR的分子质量、分类类型和...     

Notch家族及其配体在绵羊卵巢黄体组织和颗粒细胞中的表达及对激素合成的影响

为了明确Notch家族及其配体在绵羊卵巢黄体组织和颗粒细胞中的表达及对激素合成的影响,试验采用实时荧光定量PCR、免疫荧光染色等方法,对绵羊卵巢不同时期黄体组织及颗粒细胞中Notch家族及其配体的表达差异,以及在添加Notch抑制剂后类固醇激素的变化进行了研究。结果表明：在体外成功培养了绵羊卵巢颗粒细胞。Notch2基因在颗粒细胞中相对表达量显著或极显著高于不同时期的黄体(P<0.05或P<0.01),而Notch1和Notch3基因在不同时期黄体中的相对表达量显著或极显著高于颗粒细胞(P<0.05或P<0.01);配体中Jag1基因在中期黄体及晚期黄体中的相对表达量极显著高于颗粒细胞(P<0.01),Jag2、Dll1基因在各时期黄体中的相对表达量均显著或极显著高于颗粒细胞(P<0.05或P<0.01)。在添加Notch抑制剂后,孕酮含量显著上调(P<0.05),而雌二醇含量没有明显变化(P>0.05)。说明Notch不同受体及其配体在绵羊卵巢黄体组织和颗粒细胞中的表达不尽相同,并且Notch信号通路对孕酮的合成发挥负调控作用。