用愈伤组织测定杨树对溃疡病的抗性

用溃疡病菌接种１１个杨树品种和无性系，病菌在愈伤组织上的扩展速度、愈伤组织内过氧化物酶和多酚氧化酶的活性变化幅度与各相应树种的田间抗病性有明显的相关性，可以反映出不同树种对溃疡病的抗性。     

桉树愈伤组织抗病性的测定及其快速繁殖研究

为了探索桉树抗青枯病树种的无性系快速筛选和繁殖技术,配制了3种类型的培养基,采用组培方法对桉树愈伤组织的抗病性和桉树无性系的快速繁殖方法进行了研究。结果表明:诱导愈伤组织形成的以MS+6-BA0.25mg/L+NAA0.5mg/L培养基最好;对愈伤组织芽的分化,最好的培养基是MS+6-BA0.25mg/L+NAA5mg/L;诱导生根以White+IBA0.5mg/L+2%蔗糖培养基为最佳;分别对桉树愈伤组织刺伤、幼苗伤根、幼苗截顶后接种青枯病,并测定它们的抗病性,其测定结果相同,说明可用桉树愈伤组织筛选抗青枯病树种。     

桉树青枯病研究的发现和创新

报导我国1991年后,桉树青枯病研究的发现和创新.即,桉树青枯病的流行是寄主为主导的流行病;病菌生理小种、生物型组成复什;病菌在病株残体和土壤中可存活3年以上,除从根部侵入外,还可从根茎部侵入;筛选出一批抗青枯病树种和无性系,并在生产中推广应用;研制成桉树青枯病流行测报模型;开创应用桉愈伤组织筛选抗病树种和无性系获得成功;应用基因工程技术培育桉树转基因抗病苗;应用外生菌根防治桉树青枯病取得一定效果.     

促进桧柏老化愈伤组织插穗的生根试验

<正> 桧柏扦插繁殖过程中,愈伤组织老化使插穗长时间处于不死也不生根的状态(长达1年)。为了解决这个问题,我们进行了促使桧柏插穗老化愈伤组织生根的研究。一、材料和方法(一)材料当年老化愈伤组织取自扦插的木质化插穗,隔年老化愈伤组织取自前1年扦插的嫩枝插穗,采条母株均为3年生植株。(二)方法1.插穗的老化愈伤组织切割取插穗增大的老化愈伤组织进行4种切割处理: (1)切愈:在愈伤组织正中切成“+”     

温度对文冠果枝条愈伤组织形成的影响

<正> 在嫁接繁殖时,砧木和接穗各自在接口处产生愈伤组织使二者融合为一体,因此,控制适宜条件,保证愈伤组织的形成是决定嫁接成活的关键。在砧木和接穗健壮,又有一定湿度保持砧、穗水份的情况下,温度便成了影响嫁接愈合的主要因子。但不同树种形成愈伤组织所要求的温度差异较大,例如苹果、桃和梨等,在15℃时即能产生愈伤组织,而核桃一般要求的愈伤温度为28℃左右。本试验旨在掌握文冠果形成愈伤组织的适宜温度,为确定嫁接最佳时机提供依据。     

桉属植物子叶培养的形态发生及植株再生

愈伤组织的培养物是从柠檬按幼苗的下胚轴及子叶培养中取得。在麦雷许戈(Murashige)和斯高(Skoog)基本培养基内加入玉米素(1毫克/升)和吲哚乙酸(0.2毫克/升)从子叶愈伤组织上在六周内成功地产生了小植株0从一年生苗木上取得的叶愈伤组织和茎愈伤组织上并没有分化。本文所报导的研究成果提供了对愈伤组织生长和小植株形成的最适宜条件。     

花旗松扦插中愈伤组织的形成

花旗松扦插诱导愈伤组织试验结果表明:硬枝扦插形成愈伤组织好于嫩枝扦插,3月份(树液流动前)是花旗松硬枝扦插形成愈伤组织的最佳时间.扦插基质以河沙1 黄土1为佳.扦插地点的地表温度低于20℃不利于愈伤组织产生,花旗松形成愈伤组织需要2个月时间.     

农杆菌介导高羊茅基因转化体系的建立

以高羊茅(FestucaarundinaceaSchrebb)品系宾哥(Bingo)为材料,建立了农杆菌介导的基因转化方法。高羊茅种子在9mgL-12,4-D作用下,获得胚性愈伤组织。愈伤组织经农杆菌侵染,在30和50mgL-1的潮霉素浓度梯度下筛选,得抗性愈伤组织。组织化学染色法证实,uidA基因在抗性愈伤组织中表达:抗性愈伤组织在分化培养基中分化得到转基因植株。PCR、Southern杂交法证实外源基因已导入到高羊茅植株中。图5参37。     

芍药愈伤组织诱导及遗传转化技术的初步研究

利用正交设计法诱导形成愈伤组织,并探讨6-BA,NAA,2,4-D等外源激素对芍药成熟胚愈伤诱导的影响。通过根癌农杆菌介导法将衰老抑制基因(IPT)转入芍药的愈伤组织:共处理72个愈伤组织块,用含除草剂的D4培养基进行选择培养,筛选出18个生长和增殖良好的愈伤组织块;经PCR鉴定,确认其中17个愈伤组织块中导入进IPT基因。     

胡杨愈伤组织继代增殖和器官发生中蛋白分子标记的研究

利用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和等电聚焦双向电泳 (IEF 2D)对胡杨不同类型愈伤组织和愈伤组织分化不定芽过程中表达的蛋白进行了研究。发现 :不同类型愈伤组织中表达的蛋白存在着明显的差异。在光照和培养基中BA NAA值为 1时诱导产生的有极强器官发生能力的茎基愈伤组织 ,其蛋白组分明显地少于经过继代培养、器官发生能力明显下降的愈伤组织 ,表明了茎基愈伤组织本身分化程度低。实验获得了不同类型愈伤组织和愈伤组织分化不定芽过程中不同阶段所表达的特异蛋白 ,表现为经过黑暗和培养基中BA NAA值为 0 5的继代增殖培养 ,愈伤组织产生了特异的 2 4 5kDa和 5 8 6kDa的标记蛋白带 ,并且也表达了其器官发生时表达的 19kDa和 31kDa蛋白带。茎基愈伤组织在光照和BA NAA值为 0 5的条件下进行器官发生诱导并且随着愈伤组织形成分生细胞团块和不定芽原基 ,明显地表达了 2 0kDa和 5 5kDa蛋白带 ,在 2 0kDa蛋白带中含有pI为 5 5～ 6 5的特异蛋白。pI为 6 5～ 7 5的 4 3kDa为不定芽发生前期表达的特异蛋白。文中就愈伤组织器官发生能力与其表达蛋白的关系进行了讨论。     

愈合剂对苹果树体损伤修复的影响

针对苹果修剪后伤口易感染病菌、造成腐烂等问题展开研究,探索出一种使伤口快速愈合、防治腐烂的药剂.以15年生的‘金帅’为研究对象,配制由不同浓度纯松烟墨液、NAA和6-BA组成的药剂,采用L9(34)正交试验设计,对苹果树体的机械损伤进行修复试验.分析了伤口大小、着生位置及不同药剂处理对愈伤组织形成的影响规律,结果表明,促进愈伤组织快速形成的最优处理为松烟墨原液、300 mg/L NAA和50 mg/L 6-BA.在药剂的3个组成成分中,NAA是影响愈伤组织快速形成的最主要因素,6-BA、松烟墨汁的影响次之.     

无患子愈伤组织诱导与分化培养技术研究

为解决无患子组织培养中的难题,对愈伤组织诱导最佳外植体与基本培养基类型先进行筛选,再通过正交试验设计,筛选愈伤组织诱导植物生长调节剂、生长及分化培养最佳抗褐化剂和植物生长调节剂种类与浓度水平。结果显示：(1)1 a生嫩茎段是无患子愈伤组织诱导最佳外植体;(2)培养基中添加20.0 mg/L抗坏血酸和10.0 mg/L半胱氨酸能有效抑制愈伤组织褐化现象的发生;(3)以改良MS作为基本培养基,外加6-苄基腺嘌呤(6-BA)0.6 mg/L+糠基腺嘌呤(KT)0.15 mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)3.0 mg/L植物生长调节剂浓度组合,愈伤组织诱导率最高,结构致密;(4)愈伤组织团在改良MS外加6-BA 3.0 mg/L+萘乙酸(NAA)0.4 mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.25 mg/L植物生长调节剂浓度组合下,不定芽诱导率最高,芽苗健壮。     

绿竹花期生物学特性与愈伤组织诱导

为了建立绿竹高效愈伤组织诱导体系,研究了小穗的生物学特性,以及不同激素种类及浓度组合、单独添加2,4-D(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid)浓度、有机添加物、甘露醇预处理等对小穗愈伤组织诱导的影响。结果表明:0.8～1 cm的小穗是诱导愈伤组织的最适宜材料;2,4-D与NAA组合小穗的愈伤组织诱导率最高,愈伤组织的质量也较好;小穗愈伤组织诱导以MS基本培养基添加3 mg·L-12,4-D、1 mg·L-1NAA和500 mg·L-1Proline、500 mg·L-1Glutamine、300 mg·L-1Casein Hydrolysate较好,愈伤组织诱导率最高,质量也相对较好;甘露醇预处理小穗愈伤组织出现时间推迟,愈伤组织质量与未处理的没有显著差异。     

黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究

为建立高效的黑荆树快速繁殖体系,以黑荆树叶片、茎段和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行了愈伤组织的诱导和不定芽的分化研究。结果表明:综合最高诱导率结果和愈伤组织的生长状况,外植体的愈伤组织诱导能力顺序为叶片(44.83%)下胚轴(36.35%)茎段(30.05%);愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.005 mg/L TDZ+1.0 mg/L IBA。叶片和下胚轴所诱导的愈伤组织均可分化出不定芽,但芽诱导率差异达极显著水平;不定芽分化最佳培养基为MS+0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,叶片愈伤组织的芽分化率最高可达32.60%。     

几种丛生竹愈伤组织诱导与防褐变技术研究

利用小佛肚竹、凤尾竹和孝顺竹幼竹的茎尖和带节茎段研究了愈伤组织诱导和控制褐变的方法.试验结果表明:在3种生长调节剂(2,4-D、KT、IBA)的组合中,以2,4-D(2～3 mg·L-1)效果最好,愈伤组织的诱导率最高,大部分外植体都能诱导出愈伤组织,生长良好;2,4-D 2 mg·L-1 KT0.5 mg·L-1能使部分茎段诱导出愈伤组织,而茎尖诱导的愈伤组织水渍化,易褐变;KT 4 mg·L-1能使个别茎段有愈伤组织产生,但易褐化;KT 4 mg·L-1 IBA0.5 mg·L-1能诱导出愈伤组织,但生长缓慢.添加抗氧化剂控制愈伤组织褐变的效果要优于吸附剂,其防褐化能力:抗坏血酸(5 mg·L-1)＞半胱氨酸(100 mg·L-1)＞PVP(1 g·L-1)＞活性炭(1 g·L-1).在培养基中加入抗坏血酸(5 mg·L-1),使小佛肚竹、凤尾竹、孝顺竹的茎尖和茎段的褐变率分别比对照下降了51.3%、43.3%、36.8%和62.7%、42.7%、30.8%.外植体在无菌水或半胱氨酸(100 mg·L-1)溶液中浸泡2～4 h也有利于控制褐化.暗培养有利于愈伤组织生长,对控制褐化也有一定作用.     

楸树不同类型胚性和非胚性愈伤组织的细胞学观察

以楸树幼嫩茎段为外植体,接种在诱导培养基上诱导初始愈伤组织,以初始愈伤组织诱导胚性和非胚性愈伤组织,分别利用扫描电镜和透射电镜对愈伤组织进行了观察。结果表明:不同类型愈伤组织在形态学和细胞学特性方面存在显著差异。III型白色愈伤组织I、V型褐色愈伤组织为非胚性愈伤组织;I型绿色愈伤组织、II型紫色愈伤组织可能为楸树胚性愈伤组织。为楸树体细胞胚胎发生提供了理论基础。     

种坯处理、不同激素浓度在暗培养条件下对多年生黑麦草愈伤组织诱导的影响

以多年生黑麦草种子为外随体，研究了在暗培养条件下，不同浓度2，4—D、BA及种胚处理对愈伤组织诱导的影响，试验表明：(1)切胚处理对多年生黑麦草愈伤组织诱导起到很大的促进作用；(2)种胚愈伤组织的诱导宜采用MS 2，4—D 5mg/L的培养基；(3)种子愈伤组织的诱导与种子发芽率无关。     

长白落叶松胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生

【目的】以长白落叶松的未成熟合子胚为外植体,进行胚性愈伤组织的诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的相关研究,揭示影响长白落叶松胚性愈伤组织诱导的关键因素,并探讨继代培养过程中添加不同种类、浓度的生长调节剂对胚性愈伤组织增殖及体胚发生的影响。【方法】采集长白落叶松3个家系优良单株的种子,诱导胚性愈伤组织,比较外植体采集时间、家系、2,4-D浓度及基本培养基对胚性愈伤组织诱导的影响。诱导出的胚性愈伤组织继代于含不同种类、浓度生长调节剂的增殖培养基,通过体胚发生途径获得体细胞胚。选取发育正常的体胚进行萌发,待体胚生根后移栽。【结果】不同时间采集的未成熟合子胚,其胚性愈伤组织诱导率存在较大差别,授粉后63天的合子胚诱导率为5.61%,授粉后70天诱导率为22.35%,而授粉后80天未诱导出胚性愈伤组织;‘长77-22’、‘长77-37’和‘长73-50’3个家系胚性愈伤组织的平均诱导率分别为6.69%,11.17%和3.11%;2,4-D浓度对长白落叶松胚性愈伤组织诱导具有一定影响,在一定范围内胚性愈伤组织的诱导率会随2,4-D浓度升高而升高,当其浓度为1.5 mg·L~(-1)时胚性愈伤组织的诱导率最高,达到11.11%,而当2,4-D浓度超过1.5 mg·L~(-1)时,胚性愈伤组织的诱导率则开始下降;BM,MS,S培养基均能诱导出胚性愈伤组织,其中,BM培养基的诱导率最高,S培养基的诱导率次之,MS培养基的诱导率最低。胚性愈伤组织在含2,4-D 0.3 mg·L~(-1)、6-BA0.1 mg·L~(-1)及KT 0.1 mg·L~(-1)的BM培养基上增殖15天可获得相对较多的胚性愈伤组织,增殖率为345.93%;在含2,4-D 1.5 mg·L~(-1)、6-BA 0.5 mg·L~(-1)及KT 0.5 mg·L~(-1)的BM培养基上培养14天,再经诱导可获得较多的体细胞胚胎,每克愈伤组织平均诱导179.87个体胚,并且这些体胚的萌发率及植株再生率相对较高,分别为75.00%,66.67%;再生植株移栽成活率为27.08%。【结论】不同长白落叶松家系的胚性愈伤组织诱导率不同,散粉后70天的合子胚适合诱导胚性愈伤组织,基本培养基为BM,添加2,4-D 1.5 mg·L~(-1)。胚性愈伤组织长期继代在含高浓度生长调节剂的培养基上易丧失胚性,且增殖速度慢,但体胚的发生量及萌发率相对较高;适当降低生长调节剂浓度利于愈伤组织保持胚性及增殖,但体胚的发生量及体胚的萌发率有所下降;当培养基中生长调节剂浓度较低时,不利于愈伤组织的增殖,但仍能使其胚性长期保持;采用浓度为0.5 mg·L~(-1)的NAA代替0.15 mg·L~(-1)的2,4-D有助于胚性愈伤组织的增殖,并能在一定程度上提高体胚的萌发率。因此,可根据不同阶段的培养目的,选择添加不同种类和浓度生长调节剂的增殖培养基进行继代。     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的研究

以红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)成熟合子胚为基准试验材料,对红松愈伤组织诱导的影响因素进行了初步研究。结果表明,不同的培养基对有效愈伤组织的诱导效果不同,初始诱导应选用LM培养基使外植体完全脱分化,反复继代后可以产生有效愈伤组织,供试的其他培养基继代后则极少产生有效愈伤组织;不同的激素组合和浓度配比对有效愈伤组织的诱导率影响不同,2,4-D是愈伤组织启动的不可或缺的植物生长调节剂,其作用远远大于NAA。在LM+2mg.L-1 2,4-D+0.5mg.L-16-BA的诱导培养基中加入0.5mg.L-1 KT或0.5mg.L-1 TDZ,可明显提高有效愈伤组织的诱导率(可达75.7%)。     

山苍子嫩枝扦插生根过程的形态解剖学研究

研究山苍子[Litsea cubeba(Lour.)Pers]扦插不定根的发生过程,为山苍子扦插繁殖提供理论依据。以山苍子一年生嫩枝为试材进行扦插,观察生根过程中外部形态变化;同时,利用常规石蜡切片法制片对山苍子扦插过程中不定根的形成过程进行解剖观察。结果表明,在山苍子插穗中无原始根原基存在,根原基由维管形成层的部分薄壁细胞诱导分化而来,进而发育为不定根,属于诱导生根型;愈伤组织是由皮层薄壁细胞、维管形成层的部分薄壁细胞诱导产生,且愈伤组织中未观察到根原基,不定根的发生与愈伤组织的出现不存在直接关联。山苍子属于非愈伤组织生根型树种。