不同绵羊品种褪黑激素的季节性及昼夜变化规律研究

系统研究了小尾寒羊、同羊、滩羊血液褪黑激素在春分、夏至、秋分时的昼夜变化规律，发现绵羊血液中褪黑激素存在着明显的季节性变化，在春分和秋分时平均含量相对较低，在夏至时明显升高。在夏至和秋分时，小尾寒羊和同羊血液中褪黑激素比滩羊低，在春分时，小尾寒羊褪黑激素比同羊和滩羊高。     

褪黑激素对绵羊季节性繁殖的调控机理

季节性繁殖是指动物在长期的进化过程中,为了适应生活环境而形成的只在特定季节才出现繁殖的现象.国内外学者研究表明,绵羊的性腺在日照逐渐缩短的秋冬之际开始活动,主要受外界环境中光照周期的调控[1-2].其作用机制为:光照作用于视网膜,通过复杂的神经通路传递到松果腺,黑暗时交感神经兴奋,分泌的去甲肾上腺素(NE)增多,促进松果体分泌褪黑激素(Melatonin,MLT);而光照则抑制交感神经,减少松果体分泌MLT,血液中MLT浓度的变化规律,就反映出昼夜的变化节律.     

绵羊季节性体重变化规律初探

近年来,由于种羊销路不畅,大量种羊被迫作为商品肉羊出售,故而体重成为最重要的生产指标.掌握绵羊体重的季节性变化规律在生产、管理及经营中都非常重要,它不仅是商品羊出栏的根据,同时也是制定和调整补饲计划的重要依据.     

绵羊同期发情技术的研究

绵羊同期发情技术的研究张居农（新疆石河子农学院动物科学系石河子８３２００３）王东军，杜国栋，郝国祥，马国兴，黄建军（新疆兵团农九师庙尔沟种羊场）前言绵羊同期发情是当代生物工程高新技术之一。自Ｒｏｂｉｎｓｏｎ（１９６４）首次采用孕酮进行绵羊同期发情和排...     

褪黑激素受体基因的多态性及其与繁殖季节性之间关系的研究进展

褪黑激素通过与药理学特异的高亲和性G-蛋白偶联受体相结合来发挥其生物学功能。本文介绍了褪黑激素受体基因的多态性分析及其与繁殖季节性之间的关系,并对牦牛该基因的研究做一展望。     

褪黑激素受体基因的多态性及其与繁殖季节性之间关系的研究进展

褪黑激素通过与药理学特异的高素和性g-蛋白偶联受体相结合来发挥其生物学功能.本文介绍了褪黑激素受体基因的多态性分析及其与繁殖季节性之间的关系,并对牦牛该基因的研究做一展望.     

不同繁殖节律母牦牛冷暖季血浆褪黑激素RP-HPLC测定

为研究不同季节、不同繁殖节律和繁殖活动期与静止期成年母牦牛血浆MLT分泌水平的差异,应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测成年母牦牛血浆 MLT 浓度.供试母牦牛63头,分为A、B、C 3组,每组21头.A组:1年1胎,繁殖活动期;B组:2年1胎,全奶,繁殖静止期;C组:2年1胎,半奶,繁殖活动期.在暖季的7月21-23日和冷季的11月21-23日,自然光制:12.00L:12.00D和14.65L:9.35D,日落前2 h开始采血,持续50min,颈静脉采血每头20 mL,肝素抗凝,离心取血浆.1年1胎母牦牛血浆MLT浓度((68.90±5.82) pg/mL)高于2年1胎全奶个体((44.38±2.61)pg/mL) (P< 0.01)和2年1胎半奶个体((57.51±3.82)pg/mL)(P<0.05);母牦牛血浆 MLT 浓度暖季高于冷季(P<0.05),表明其具有季节波动,并提示除光照外牦牛 MLT 分泌还与气温等环境因子有关;母牦牛血浆 MLT 浓度繁殖活动期高于繁殖静止期(P<0.05).母牦牛MLT分泌存在季节波动,母牦牛季节性繁殖和繁殖节律受到MLT水平的影响.     

褪黑激素受体1B及其基因的研究进展

褪黑激素通过与药理学特异性的高亲和性G-蛋白耦联受体相结合来发挥其生物学功能。作者介绍了褪黑激素受体1B的结构和功能,褪黑激素受体1B基因的克隆及基因结构、发育性表达与作用、定位与多态性,并讨论了该基因与繁殖季节性的关系。     

绵羊PER3基因组织表达及多态性与季节性繁殖的相关性研究

为了探究PER3基因的组织表达水平及其多态性与绵羊季节性繁殖的关系,为绵羊育种提供理论基础,该试验通过实时荧光定量PCR(qPCR)研究PER3基因在季节性发情的苏尼特羊和常年发情的小尾寒羊松果体、下丘脑、垂体、卵巢、输卵管以及子宫组织中的表达情况,同时利用SequenomMassARRAY~(○R)SNP技术对季节性发情绵羊品种(草原型藏羊、苏尼特羊、滩羊共204只)和常年发情绵羊品种(小尾寒羊、湖羊、策勒黑羊共564只)PER3基因的13个SNPs进行分型检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果表明:PER3基因在绵羊的松果体、下丘脑、垂体、卵巢、输卵管以及子宫组织中均有表达,且其在季节性繁殖的苏尼特羊的表达均高于常年发情的小尾寒羊(卵巢组织除外),在松果体和子宫组织中达到显著差异水平(P0.05);分型结果表明,在该实验室前期通过重测序得到的PER3基因13个SNPs中,g.43657503AG、g.43670012TC、g.43670807AG、g.43677259TC和g.43707227GA 5个SNPs在季节性发情和常年发情绵羊品种之间的基因型频率、等位基因频率均达到显著差异水平(P0.05);关联分析结果表明,PER3基因的13个SNPs与小尾寒羊产羔数并无显著关联(P0.05)。该研究表明,PER3基因在松果体、下丘脑和垂体等繁殖相关组织的表达,在苏尼特羊中均高于小尾寒羊,暗示着较高水平的PER3的表达可能与绵羊的季节性发情调控有关。     

褪黑素埋植对非繁殖季节绵羊发情和血浆中激素的影响

选用15只甘肃高山细毛羊，按体重分为3组：I组注射生理盐水作为对照组；Ⅱ组埋植褪黑激素（36mg）；Ⅲ组埋植褪黑激素（36mg）＋孕马血清激素（400u），研究褪黑素埋植对绵羊体重、发情和血浆中激素的影响。结果表明：0～15天、15～30天褪黑激素＋孕马血清激素组体增重分别显著低于对照组（P＜0．05）；30～45天、45～60天褪黑激素组体增重分别显著低于对照组（P＜0．05），其它时期各组无显著差异性，总增重和末重也无显著差异性（P＞0．05）。褪黑素组第一只母羊发情时间比对照组早30天，发情率比对照组提高40个百分点。在整个曲线中，I组、Ⅱ组、Ⅲ组都呈振幅性变化。I组、Ⅱ组、Ⅲ组孕酮波动周期分别为31、24、40天左右。     

褪黑素受体MT1和MT2在绵羊胃中的分布及表达

【目的】应用分子生物学技术探究绵羊不同胃室组织褪黑素(MT)特异性膜受体MT1和MT2的分布规律及表达模式,以初步探明绵羊不同胃室组织褪黑素调节胃消化的生物效应机制。【方法】采集绵羊瘤胃背囊、瘤胃腹囊、网胃、瓣胃和皱胃5个组织部位,用ELISA、实时荧光定量PCR、免疫组化和Western blotting方法检测褪黑素特异性膜受体MT1和MT2在绵羊胃组织不同部位的分布规律及表达模式。【结果】ELISA结果显示,绵羊各胃组织中均含有褪黑素,且皱胃中褪黑素含量最高,瓣胃次之,瘤胃背囊、瘤胃腹囊和网胃中均较低。实时荧光定量PCR结果显示,MT1和MT2基因mRNA在皱胃中含量均最高,其次是瘤胃腹囊,在瘤胃背囊和网胃中含量较低。免疫组化结果显示,MT1和MT2蛋白在绵羊各胃组织中均有分布,主要表达于各胃组织的黏膜层,且在皱胃腺体中的分布呈从底部到颈部逐渐增多的趋势。Western blotting结果显示,MT1和MT2蛋白在网胃中表达均最高,瓣胃次之,在瘤胃背囊、瘤胃腹囊和皱胃中表达均较低。【结论】褪黑素在绵羊各胃组织中差异化表达从而发挥多样性生理功能,可能通过与胃组织上特异性受体MT1和MT2结合,通过信号传导系统而调控前胃受食糜刺激后发生反刍生理过程。     

Blood Polymorphism in West African Breeds of Sheep

This paper reports the blood groups and blood protein distribution in West African sheep breeds. About 100 animals of the Djallonke, Fulani and Touabire breeds were sampled for blood polymorphism analysis. Their blood groups were typed by haemolytic and agglutination reactions, and their blood proteins by starch gel electrophoresis. Almost all the loci analysed showed variability in the three breeds, with the Touabire and Fulani being closer to each other than to the Djallonke.     

Reproductive Seasonality in Sheep

Unlike most domestic livestock species, sheep are widely known as animals with marked seasonality of breeding activity. The annual cycle of the daily photoperiod has been identified as the determinant factor of this phenomenon, while environmental temperature, nutritional status and social interactions may modulate it. The aim of this paper is to review the current state of knowledge of reproductive seasonality in sheep. Following general consideration of the importance of seasonal breeding as a reproductive strategy for the survival of the species, the paper describes manifestations of seasonality in both the ram and the ewe. Both determinant and modulating factors are discussed, and special emphasis is given to the neuroendocrine base of photoperiodic regulation of seasonal breeding. Other aspects such as the role of melatonin, the progestogens and ram effects with or without anestrus period are also reviewed.     

不同绵羊品种FGF5基因的多态性分析

根据人和小鼠成纤维细胞生长因子5（FGFS）基因的同源序列设计引物对绵羊基因组进行PCR扩增，将扩增片段进行克隆和测序，并与人和小鼠的成纤维细胞生长因子5基因序列进行同源性比较，确定扩增的片段为绵羊的FGF5基因片段。采用PCR-SSCP技术分析了FGF5基因外显子在小尾寒羊、湖羊、藏羊、中国美利奴等4个绵羊品种的多态性。结果表明：FGF5基因在P1和P2引物扩增片段中存在PCR-SSCP多态性。经克隆测序分析，位于外显子1的引物1扩增产物存在G→T突变，该突变位点使编码的氨基酸发生A→S的改变；引物2扩增产物发生了碱基序列C→T的突变，这一突变位点没有引起编码氨基酸的改变，属于同义突变。对不同绵羊品种的基因型和基因频率统计结果表明，引物1扩增产物小尾寒羊、湖羊、藏羊以等位基因A为主，而中国美利奴羊则以等位基因B为主，且各群体均处于Hardy-Weinberg平衡；引物2扩增产物小尾寒羊、湖羊、中国美利奴羊均以等位基因E为主，而藏羊的基因型频率与其它品种有显著差异，中国美利奴羊在引物2位点的基因频率处于Hardy-Weinberg不平衡状态。     

褪黑激素RIA方法的建立及其在探索湖羊四季发情机理上的应用

运用Mannich的反应，将褪黑激素（MLT）与牛血清白蛋白（BSA）连结，制备MLT完全抗原。MLT与BSA连结比为12：1。将此完全抗原免疫5只雄兔，制备特异性抗体；将MLT用^125I标记，薄层层析筛选标记物，制备高纯度的放射性标记物，建立竞争性MLT－RIA法。本法可测范围为15．31－1500pg，灵敏度为每管15．31pg，批内变异系数6．7％，批间变异系数14．8％。用此法测定夏至时考力代羊昼夜血样，测定结果与国外基本一致；测定夏至时湖羊昼夜血样，发现湖羊MLT分泌有其特殊性，即血液MLT水平呈明显的昼夜变化；白天为100ng/L左右，而黑暗开始时，MLT水平迅速上升，在20：00－次日8：00处于高水平，最大值为1100ng/L左右。     

绵羊附睾褪黑素受体1的表达与定位

为研究褪黑素受体1（MT1）在不同年龄绵羊附睾中的表达模式,选用幼龄绵羊（2~3月龄）、青年绵羊（6~8月龄）和成年绵羊（2~3岁）的附睾,采用实时荧光定量PCR和免疫组化技术检测不同年龄绵羊附睾各部位MT1基因mRNA的表达量和MT1的分布情况。结果表明：幼龄绵羊附睾尾MT1基因的转录水平极显著高于附睾头和附睾体（P<0.01）;青年绵羊附睾体和附睾尾MT1基因的转录水平显著高于附睾头（P<0.05）;成年绵羊附睾尾MT1基因的转录水平显著高于附睾头和附睾体（P<0.05）,附睾各部位MT1基因的转录水平随年龄增长呈明显降低趋势;定位结果显示,MT1在各年龄组绵羊附睾的各个部位均有分布,且主要分布在附睾上皮细胞中。综合上述结果,不同年龄绵羊附睾的不同部位均有MT1表达和分布,并随年龄增长各部位的表达量降低,相同年龄绵羊附睾尾MT1的表达水平较高。     

绵羊繁殖性状相关基因的研究进展

绵羊的繁殖特性已成为绵羊生产的一个重要研究方向,对绵羊繁殖力进行遗传改良是提升中国绵羊生产水平的必由之路,母羊的年产羔能力主要受单胎产羔数和季节性发情的影响。本研究对影响产羔能力的排卵数和季节性发情相关基因及miRNA的研究进行了简要的综述,并对全基因组比较在繁殖性状相关QTL检测中的应用进行了展望。     

A Programme for Oestrus Synchronization and Embryo Transfer in Sheep

Eighty-five animals were used to develop an embryo transfer programme including a study on how oestrus synchronization influenced the ovulation rate. The animals, both ewes and ewe lambs, were divided into three groups: donors, recipients and controls. Oestrus was synchronized in donors and recipients by the use of progesterone-impregnated vaginal pessaries. The donors also received one injection of 600 IU PMSG. Samples for microbiological investigation of the vaginal flora were taken in connection with synchronization. The ovulation rate was determined by laparoscopy in the control animals and by laparotomy in the donors and recipients. The embryos were surgically recovered from the donors by flushing of the uterine horns seven days after pessary removal. The embryos were classified according to developmental stage and quality. At transfer each recipient received 2–4 embryos (moruhs or blastocysts) by a surgical method. A ± 1 day asynchrony in oestrus between donors and recipients was tolerated. All synchronized animals came into oestrus within 2.5 days after pessary removal. The interval was shorter if the animals had been injected with PMSG. The largest number of ovulations occuwed in the synchronized and PMSG-treated animals (mean 4.5 ± 2.1). Synchronized animals that did not receive PMSG had almost the same ovulation rate as the control animals (2.6 ± 0.9 versus 2.5 ± 0.7). The pessary treatment influenced the bacterial flora of the vagina. The number of ewes with bacterial growth in the vagina increased. The number of isolated organisms also increased. The embryo recovery rate was 80.8% and 3.7 ± 2.7 ovas was recovered on average. Eighty-eight percent of all donors yielded transferable embryos. Morulas and blastocysts comprised 84.4% of the recovered oocytes/embryos. Only 5.2% of these were of poor quality. Of the transferred embryos, 65.1% developed into lambs and 91.3% of the recipients lambed. The ewe lambs were as suitable as donors and recipients as the older ewes.