一株生防菌的筛选及其抗菌活性研究

从烟草根际土壤中分离培养出19株细菌活体纯培养物,以黑曲霉为指示菌株筛选出GHZ05、GHZ09和GHZ12等3株具有抑菌作用的菌株,抑菌圈直径分别为13 mm、11 mm和28 mm,其中GHZ12的抑菌率最强,达到60.39%;GHZ12的多相鉴定结果为假单胞菌属Pseudomonas菌株,暂定名Pseudomonas sp. GHZ12;盆栽试验证实,GHZ12菌悬液的灌根+叶面喷雾混合处理在烟草白粉病不同发病阶段均表现出比叶面喷雾和灌根单一处理要好的防治效果,15 d时的防治效果达到了56.50%。综上所述,GHZ12菌株是开发烟草白粉病生防制剂的良好材料。     

菌株SYT-SF的筛选鉴定及生防效果验证

为筛选拮抗烟草黑胫病病原烟草疫霉（Phytophthora parasitica var. nicotianae）的生防菌资源,本研究对连作烟田烟草黑胫病发病地块的健康烟株根际土壤中的细菌进行了分离培养、筛选,并对抑菌效果较好的菌株进行了鉴定及生防效果试验。结果表明：从根际土壤中共分离到35株菌,其中菌株SYT-SF对烟草疫霉的拮抗作用最强,抑菌率达到77.15%;菌株SYT-SF具有较好的抑菌广谱性;依据菌株SYT-SF的形态特征、生理生化特征、16S rDNA序列及gryA基因序列分析,将SYT-SF归属于假单胞菌属（Pseudomonas）,暂定名为Pseudomonas sp. SYT-SF。盆栽试验表明,菌株SYT-SF预防组和治疗组对烟草黑胫病的生防效果分别达到71.97%和65.05%。菌株SYT-SF在烟草黑胫病生防菌剂及植烟土壤保育菌剂开发方面具有良好的应用潜力。     

烟叶面细菌分离筛选及其对烟草赤星病的拮抗作用

为了从烟叶面获得防治烟草赤星病的拮抗菌,利用稀释分离方法,从湖南、云南烟区烟株下部叶片分离得到烟草叶面细菌676株,通过对峙培养试验、孢子萌发试验,结果16株菌株对烟草赤星病有较强拮抗作用;室内盆栽生防测定试验表明,16株菌株不同程度地减轻了烟草赤星病的发生,其中18,19,29,49,71号防治效果好,其防效分别为77．4％,77．4％,92．5％,92．5％和90．3％．     

产几丁质酶木霉生防菌株的生化测定

以烟草赤星病的CA原真菌链格孢（Alternaria alternata）为实验菌株，通过对峙平板拮抗实验和胶体几丁质平板透明圈实验测定木霉菌株（Trichoderma harziaum）THS-1对病原真菌的拮抗作用，结合DNS法进行定量检测木霉菌株发酵产生几丁质酶的活性。上述方法的结合可以筛选出产几丁质酶高效木霉生防菌株。     

不同诱抗剂对烟草赤星病的诱导抗病作用

[目的]筛选出一种能够有效诱导烟草提高对赤星病抗性的诱抗剂,为生产中烟草赤星病的防控提供参考.[方法]采用田间小区试验,比较了水杨酸、茉莉酸甲酯、苯并噻二唑、二氯异烟酸、甲壳素、草酸6种诱抗剂对烟草赤星病的诱导抗病作用.[结果]同一诱抗剂的不同浓度对烟草赤星病的诱导抗病效果不同,其中水杨酸以浓度为2.50 mmol/L时防治效果最好,在烟草赤星病发生高峰期的相对防效达56.6％,茉莉酸甲酯以浓度为1.00 mmol/L时防治效果最好,赤星病发生高峰期的相对防效达57.6％,苯并噻二唑以浓度为0.50 mmol/L时防治效果最好,高峰期的相对防效为62.2％,二氯异烟酸以处理的最高浓度为2.00 mmol/L时防治效果最好,赤星病发生高峰期的相对防效为47.8％,甲壳素同样以处理的最高浓度为2.00 mmol/L时相对防效最好,高峰期的相对防效为50.3％,草酸以浓度为15.00 mmol/L处理的防治效果最好,高峰期的相对防效为46.4％.不同诱抗剂在各自的最佳处理浓度下对烟草赤星病的防治效果不同,其中以苯并噻二唑的防治效果最好,烟草赤星病发生高峰期和后期的相对防效分别达62.2％和57.6％,茉莉酸甲酯次之,高峰期和后期的相对防效分别为57.6％和50.1％,二氯异烟酸、甲壳素和草酸在赤星病发生高峰期和后期的相对防效均较低.显著性分析表明,苯并噻二唑处理的相对防效显著高于其他5种诱抗剂.[结论]苯并噻二唑对烟草赤星病具有良好的诱导抗病效果.     

烟草赤星病高效生防内生细菌的分离筛选及发酵培养条件优化

为提高烟叶安全，探索曲靖烟区烟草赤星病生物防控技术，研究烟草内生菌株对烟草赤星病的防控作用。以曲靖烟区分离得到的烟草赤星病病原菌为靶标，采用平板对峙培养法从健康烟株体内分离筛选出生防内生细菌，并应用Design-Expert软件，采用响应面法对其进行发酵培养基的优化。结果表明，从曲靖烟区健康烟株体内分离筛选出15株对烟草赤星病病原真菌链格孢菌具有拮抗作用的菌株，其中编号为YWF-19-0004、YWF-19-0065、YWF-19-0068、YWF-19-0070、YWF-19-0071的5株内生细菌抑菌带宽≥10 mm、抑菌率≥50%;采用响应面法获得YWF-19-0068菌株的优化培养基配方：大豆粉浓度14 g/L,蛋白胨浓度2 g/L,鱼粉浓度2 g/L,蔗糖浓度11 g/L,玉米粉浓度为7 g/L,碳酸钙浓度5 g/L,氯化钠浓度0.3 g/L,磷酸二氢钾浓度0.3 g/L,磷酸氢二钾浓度0.3 g/L,硫酸锰浓度0.2 g/L,硫酸镁浓度0.3 g/L,硫酸铵浓度0.5 g/L,利用优化培养基进行发酵，YWF-19-0068菌株的菌量是基础培养基发酵所得菌量的4.47倍，说明...     

新型生防菌组合防治烟草青枯病田间药效评价

对基于烟草根际核心微生物组筛选获得3种生防菌组合进行了青枯病田间药效评价。结果表明，黄色假单孢菌(Pseudomonas lurida)FGD5-2、韩国假单孢菌(Pseudomonas koreensis)HCH2-3和霍氏假单孢菌(Pseudomonas rhodesiae)MTD4-1对烟草青枯病均有一定的防治效果，能够延迟病害发生时间，减轻病害发生程度。3个菌株组合处理防病效果最佳，能够延迟发病时间8～10 d,对轻度发病烟田防病效果达50%以上，同时还表现出一定的促生效果。经2地田间试验效果，3种生防菌组合具有较好的青枯病防治应用潜力。     

抗烟草黑胫病菌生防细菌筛选、鉴定及体外拮抗机理初探

【目的】从云南烟草黑胫病高发区烟草根际土壤分离对烟草黑胫病菌具有高效拮抗作用的菌株,明确拮抗菌株的分类地位,并进行体外拮抗机理初探,为烟草黑胫病的防治提供生防资源和参考依据。【方法】采用平板对峙法从烟草根际土壤中分离对烟草黑胫病菌具有拮抗作用的菌株,通过生理生化特性及16S rDNA序列分析对具有较强拮抗活性的菌株进行鉴定,并测定生防细菌在体外对烟草疫霉的生物防治活性及作用方式。【结果】从采集的烟草根际土壤样品中共分离出6株对烟草疫霉具有拮抗活性的细菌菌株,其中菌株CD-1表现出最强的拮抗活性,其抑菌带宽度达10.12 mm;根据生理生化特性和16S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）。菌株CD-1具有广谱抗真菌特性,其胞内和胞外均存在抗真菌物质,其中使用二氯甲烷作为细菌发酵液萃取剂所提取的抗真菌物质的抑制效果最好;在p H 6～8、温度40～80℃时表现出相对稳定的抑制活性;菌株CD-1在NB培养基中培养的上清液提取物和细胞提取物对烟草疫霉均表现出较强的抑制活性,其抑制率分别达76.91%和67.23%;菌株CD-1分泌的抗真...     

不同竹醋液复配剂对烟草赤星病的田间防效

为明确不同竹醋液复配剂对田间烟草赤星病的防治效果,以烤烟品种云烟87为材料,通过大田试验,研究了不同竹醋液复配剂对烟草赤星病发病率及防治效果的影响。结果表明:与清水对照相比,竹醋液复配菌核净与竹醋液复配波尔多液均能有效防治烟草赤星病,且以竹醋液复配菌核净防治效果最好。综合来看,在黔东南烟区喷施竹醋液与菌核净复配剂可有效防治烟草赤星病,提升烟叶产量和品质。     

赣州烟区烟草赤星病防治药剂筛选

[目的]筛选出适宜赣州烟区推广应用防治烟草赤星病的生物药剂及其最佳施药时间,用以替代或部分替代化学药剂。[方法]通过研究不同药剂和不同施药时期互作对烟草赤星病的影响,调查烟草赤星病发病情况,分析其防治效果。[结果]不同药剂及不同施药时期对烟草赤星病具有不同的防治效果。从不同处理烟草赤星病发病率分析,10%多抗霉素WP在旺长末期连续2次施药(每隔7 d)最有利于控制烟草赤星病发生,发病率仅为53.33%;其次是80%波尔多液WP在旺长末期连续2次施药(每隔7 d),发病率为83.33%;最后是40%菌核净WP在旺长末期连续2次施药(每隔7 d)。[结论]使用10%多抗霉素WP在旺长末期连续2次施药(每隔7 d),能有效预防烟草赤星病的发生,适宜在赣州烟区推广应用。     

烟草黑胫病拮抗细菌的分离、鉴定及发酵条件优化

【目的】从美洲大蠊肠道筛选获得对烟草黑胫病病原菌具有拮抗作用的拮抗菌株,明确拮抗菌株的分类地位、优化其发酵条件及测定其对烟草黑胫病的室内防治效果,为烟草黑胫病的生物防治提供菌种资源。【方法】以美洲大蠊肠道为材料,利用稀释涂布平板法及平板对峙法筛选对烟草黑胫病具有拮抗作用的菌株,根据形态特征、生理生化、16S rDNA和...     

草酸青霉和棘孢木霉对青枯劳尔氏菌的生防效果

  目的  探究自主筛选获得的2株生防菌棘孢木霉Trichoderma asperellum QZ2与草酸青霉Penicillium oxalicum QZ8对青枯劳尔氏菌Ralstonia solanacearum(简称青枯菌)的生防效果。  方法  以青枯菌作为靶标菌,通过平板培养法、生长曲线法测定2株生防菌及其发酵液对青枯菌生长的抑制作用;通过土培试验、基于稀释涂布法测定生防菌在土壤中对青枯菌的抑制效果。  结果  平板对峙培养试验发现:棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌有显著的抑制作用(P＜0.05),抑制率分别达80.9%和45.9%;棘孢木霉QZ2与草酸青霉QZ8生防菌高温灭菌发酵液对平板培养青枯菌,同样呈显著的抑制作用(P＜0.05),抑制率分别达33.3%和34.8%。无菌滤膜处理的未高温灭菌2株生防菌发酵液的青枯菌液培养结果表明:其D(600)显著小于未添加生防菌发酵液的对照D(600)(P＜0.05),且棘孢青霉QZ8抑制效果好于草酸木霉QZ2。土壤培养结果显示:2株生防菌处理的土壤中青枯菌的活菌数量显著低于未添加生防菌的对照(P＜0.05)。  结论  棘孢木霉QZ2和草酸青霉QZ8对青枯菌均有显著的抑制效果,可作为番茄Lycopersicon esculentum青枯病的潜在生防菌。图5表2参32     

真菌病害拮抗菌的筛选及其对多种植物病原真菌的拮抗活性测定

针对广西境内常见多发的12种植物真菌病害,对柑橘、香蕉、甘蔗、辣椒、药用植物等作物根际土壤进行拮抗菌筛选试验。结果从不同作物根际土壤中共分离得到386株菌株,其中有拮抗作用的34株,平皿拮抗效果较好的16株;再经复筛,得到一株对柑橘炭疽菌有较好抑制效果的拮抗菌Bs55;对峙培养试验表明,Bs55菌株对12种常见病原真菌具有较强的抗菌活性,抑菌率最高达87.7%。拮抗菌Bs55具有拮抗作用强、能大量繁殖、抑菌谱广等特点,是具有较好利用前景的生物防治材料。     

一株陈化烟叶附生细菌的筛选鉴定及其烟叶发酵效果

以K326(B2F))陈化烟叶为材料,采用平板分离技术分离培养出46株活体纯培养物,依次编号为CHJ1~CHJ46,纯化菌株通过蛋白酶和淀粉酶鉴别培养基筛选培养,鉴别筛出CHJ3和CHJ9两株菌具有淀粉酶水解活性,CHJ5、CHJ28和CHJ36三株菌具有蛋白酶水解活性。CHJ3、CHJ5、CHJ9、CHJ28和CHJ36五株菌菌悬液烟叶发酵试验表明,CHJ5菌株促进烟叶的发酵效果最好,发酵后的烟叶化学成分更加合理,评吸得分达到91分,与其他处理差异达显著水平。对菌株CHJ5的多相鉴定结果表明,CHJ5隶属于微杆菌属(Microbacterium)菌株,暂命名为Microbacterium sp. CHJ5。菌株CHJ5作为烟叶发酵微生物制剂开发的备用菌株,应用前景广阔。     

烟草黑胫病菌的拮抗根际细菌的筛选

 从重病田健株采集根际土样13份,分离根际细菌753株,室内平皿对峙筛选到拮抗烟草黑胫病菌的菌株98株,占分离菌株的12.7%。温室测定发现有20个菌株防治效果达40.0%以上,超过药剂对照的有4个菌株,防治效果分别为75.7%,78.6%,78.6%,79.3%。其中,大部分菌株对烟草有不同程度的促生作用。     

棉花苗期根腐类病害生防细菌的筛选与鉴定

【目的】从新疆棉田中筛选对棉花苗期根腐类病害具有较强拮抗作用的生防细菌,为棉花苗期根腐类病害生物防治奠定基础。【方法】采用平板对峙法,测定实验室保存的多株生防细菌的抑菌能力,通过田间试验,验证其防治棉花苗期根腐类病害的效果。对生防细菌的16S rDNA基因序列与gyrA基因序列分别测序,通过BLAST在线比对,利用MEGA 7.0构建系统发育树,确定该生防菌株的分类地位。【结果】生防细菌TWt34、HWt34对棉花苗期根腐类病害(立枯病和红腐病)防治效果分别为76.74%和78.43%;在平板对峙对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani) 和拟轮枝镰孢霉(Fusarium verticilliodes)的抑菌宽度分别为8.29和6.60 mm,具有较强拮抗作用,对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)的抑菌宽度分别为7.70 和13.15 mm,也具有明显抑制作用。16S rDNA与gyrA基因序列鉴定表明生防菌菌株TWt34、HWt34同属于莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)。【结论】筛选出的2株莫海威芽孢杆菌TWt34、HWt34对棉花4种主要病害的病原菌具有较强的抑制作用,能够有效防治2种棉花苗期根腐类病害(立枯病和红腐病)。     

1株烟草青枯病拮抗内生细菌的分离及鉴定

为了筛选具有生防价值的拮抗烟草青枯雷尔氏菌的内生细菌,从湖南长沙、永州、郴州烟草青枯病发病区的健康烟株采集茎秆,采用稀释平板分离法获得150个内生菌株.抑菌结果表明,21个内生菌株对烟草青枯雷尔氏菌2316菌株有拮抗效果,占总菌株数的14.0％.拮抗菌株中,F1菌株24 h对烟草青枯雷尔氏菌株2316抑菌圈直径达6.5...     

草莓病害生物防治初探

用平板稀释法从２０份根围土样中分离出６７株芽孢杆菌,用异步培养法筛选出对草莓灰霉菌和立枯丝菌核有强拮抗作用的菌株２２个,其中对２种病原菌有一强一弱拮抗作用的菌株９个,对２种病原菌均有强拮抗作用的菌株５个。朱１０,１２,３４和６３还对梨轮纹病菌和玉米大斑病有拮抗作用,表现为广谱抗菌丝,其中菌株１０和１２对４种病原真菌均有强拮抗作用。     

禾谷丝核菌拮抗真菌的鉴定及抗菌活性研究

利用从小麦茎叶组织中分离的内生真菌,进行平板对峙试验,从中筛选出2株对禾谷丝核菌有明显抑制效果的菌株(RF5和RF6)。采用改良的真菌基因组DNA提取方法,提取内生真菌RF5和RF6的基因组DNA,运用ITS序列通用引物(ITS4、ITS5)进行扩增,分别得到约600 bp的特异条带。对PCR产物进行测序,根据序列比对分析结果,将拮抗真菌RF5和RF6分别鉴定为:肉座菌(Hypoc-reales sp.)和杂色曲霉(Aspergillus versicolor)。进一步研究这2株拮抗真菌的抗菌活性大小,结果显示,2株真菌对病原菌都能产生明显的抑菌圈,抑菌圈直径分别为23 mm和19 mm;其液体发酵产物对病原菌的生长也有显著抑制作用,抑制率分别为63.3%和60.8%。