7个品种草莓茎尖组培脱毒苗技术研究

以青海互助地区主栽的7个不同品种草莓匍匐茎茎尖为外植体,利用MS基本培养基添加适宜浓度的6-BA、GA₃或IBA,探索草莓茎尖组织培养获得脱毒苗的方法。结果表明：以草莓茎尖组织培养技术培育出的草莓脱毒苗,幼苗移栽后生长、开花和结果正常。草莓茎尖分化培养基MS+0.5mg/L 6-BA+0.2mg/L GA₃适合“红颜”等4个品种茎尖生长;增殖培养基MS+0.5mg/L 6-BA+0.2mg/L GA₃适合草莓“红颜”、“通州公主”、“小白”、“京泉香”和“章姬”5个品种幼苗增殖,增殖系数均在7以上。生根培养基MS+0.25mg/L IBA短期内各品种生根较快,但生根超过20d时幼苗根部生长异常,还需进一步试验找到适宜培养基。     

千年古茶树组培技术研究

通过对古茶树的腋芽离体培养,探索了古茶树腋芽诱导、分化、快速繁殖及生根的最佳条件。试验结果表明:适宜腋芽诱导的培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L,增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L,生根率达到90%。     

紫叶狼尾草的繁殖培养研究

[目的]探讨紫叶狼尾草的繁殖培养技术。[方法]以紫叶狼尾草的根茎或腋芽节间为材料,进行组培快繁技术的研究。[结果]研究分析发现,较适宜的外植体诱导丛生芽培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L;最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.5 mg/L,增根系数达6.5;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L,生长率可达100%。将生根组培苗移栽后,30 d后成活率可达98%。[结论]对紫叶狼尾草的繁殖培养,需要选择合适的培养基,其成活率较高。     

甜樱桃砧木大青叶的组织培养和快速繁殖

以甜樱桃砧木大青叶植株茎段为外植体,进行了初代、继代、生根的培养基的筛选和下地移栽的技术研究。结果显示,以当年生嫩枝为外植体可以快速获得组培苗以达到高效快繁的目的,适合大青叶的培养基:初代为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.1 mg/L,继代为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,生根为1/2 MS+IBA 0.6 mg/L。     

紫椴组培快繁技术研究

为探索建立紫椴组织培养快速繁育体系,以紫椴种子为材料,探讨基本培养基、植物生长调节剂浓度及配比对紫椴组培快繁效果的影响。结果表明,增殖培养基以1/2MS培养基最适宜,添加0.05 mg/L 6-BA和0.03 mg/L IBA后,增殖系数可达13.5;MS培养基最适宜做壮苗培养基和生根培养基,最佳壮苗培养基为MS+0.1 mg/L6-BA+0.1 mg/L IBA+0.03 mg/LGA₃,平均苗高达5.15 cm;最佳生根培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+0.05 mg/L NAA,生根率达93.3%,生根数达5.7根。     

花叶锦带花组织培养的研究

以花叶锦带花的幼嫩茎段为外植体,进行组织培养与快速繁殖试验。研究结果表明:(1)初代培养的适宜培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 0.05 mg/L,附加480 mg/L氨苄青霉素钠,可有效抑制内生菌的污染,抑菌率达93.3%;(2)适宜增殖的培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+NAA 0.05 mg/L,增殖系数达6.70,苗健壮,无玻璃化现象;(3)生根最佳培养基为1/2MS+IBA 0.50 mg/L,生根率达98%,根系粗壮。     

变叶木组培快繁技术研究

以变叶木的茎段作为外植体进行组培快速繁殖,选用MS培养基为基本培养基,添加不同浓度及种类的激素,接种后进行对比试验。结果表明：变叶木最佳的初代培养基为MS＋6-BA0.5mg/L＋IBA0.5mg/L,继代培养以培养基MS＋6-BA1mg/L＋IBA0.2mg/L增殖效果最好,生根培养的最佳培养基为1/2MS＋IBA1.5mg/L。     

运用组织培养建立藤茶快速繁殖体系的研究

以带芽的藤茶(Ampelopsis grossedentata)茎段为试验材料,研究藤茶组织培养过程中各个阶段的培养基和激素配比以及炼苗的基质配比。结果表明,藤茶组培苗的快速繁殖体系中,最佳初代培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2 g/L PVP;初代茎段培养愈伤组织的最佳基质配比为MS+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L ZT+1.0 mg/L NAA;藤茶芽的最佳增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L ZT;最佳壮苗培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA;最佳生根培养基为NAA(0.1 mg/L)+IBA(0.5mg/L),生根率可达到86.7%;炼苗阶段最佳移栽基质为泥炭+珍珠岩(2∶1),并浇以改良霍格兰营养液,炼苗和移栽成活率可达73%。     

金边朱砂根组培快繁体系的建立

金边朱砂根是个叶果俱佳的品系,由于其挂果量极少,有性繁殖的后代容易出现性状分离,不利于优良性状的稳定遗传,采用种子繁殖出的种苗远不能满足市场的需求,因此亟须采用组培快繁体系进行种苗的扩繁。以金边朱砂根的茎段为外植体,采用单因素和正交试验法研究不同灭菌方式、基本培养基和植物生长调节剂对金边朱砂根茎段灭菌、初代培养、继代增殖培养、生根培养的影响。结果表明:最佳的灭菌方式为0.1%Hg Cl2消毒8 min;初代培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,启动率为73.33%;继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L噻重氮苯基脲(TDZ),增殖系数为4.27;生根培养基为1/2 MS+1.0 mg/L IBA+1.0 mg/L NAA,生根率为71.11%。     

抗盐玫瑰组培快繁体系的建立

以抗盐玫瑰当年生去叶的幼嫩单芽茎段为试验材料,建立体外无性快繁体系。结果表明,适宜玫瑰离体腋芽发芽的最佳培养基配方为MS+0.5 mg/L 6-BA和MS+1.5 mg/L 6-BA;适宜丛生芽继代增殖的最佳培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA和3/4MS+0.3 mg/L IBA;适宜组培苗生根的最佳培养基配方为1/2MS+0.3 mg/L NAA,其生根率可达95%。生根苗木移栽成活率可达87%以上。该体系可以用于抗盐玫瑰的快速大量繁殖。     

苏州近郊4种不同森林群落稳定性研究

稳定性是一个评价群落结构与功能的指标,一直是生态学研究的热点。本文依据林分地上部分指标建立稳定体系,对苏州近郊4种人工林分,应用数学生态学方法,分析冬青针阔混交林、栎树针阔叶混交林、湿地松林和木荷林的林分稳定性。结果表明,多样性并不完全能够代表稳定性;4种林分群落稳定性主要因林分密度不同而异;稳定性依次为湿地松林＞冬青湿地松林＞栎树湿地松林＞木荷林。其中湿地松林可能会发展成为针阔混交林;木荷林中在生长过程中会因竞争产生限制,可能演替形成栎树—木荷混交林;2种针阔混交林在未来演替也可能向落叶阔叶、常绿阔叶混交林发展;该地区木荷林密度过大,稳定性较弱,应采取适当的抚育措施,提高其林分稳定性。     

四川省食品动物源大肠杆菌mcr-1与ESBLs基因共转移分析

为了解四川省食品动物源大肠杆菌mcr-1耐药基因流行情况,及其与超广谱β-内酰胺酶基因(ESBLs)共存和共转移的特征,采用微量肉汤稀释法检测菌株对不同抗菌药物的敏感性;采用PCR检测菌株mcr-1,以及mcr-1阳性菌株中ESBLs基因类型;采用质粒接合转移试验分析了mcr-1与ESBLs基因共转移的耐药机制。结果显示:190株大肠杆菌的mcr-1检出率为36.84%,75.71% mcr-1阳性菌株中同时检出ESBLs基因,主要以blaTEM-1、blaCTX-M-55和blaCTX-M-14为优势基因;mcr-1阳性菌对氨曲南(ATM)、头孢噻肟(CTX)和多黏菌素E(COL)耐药率极显著高于mcr-1阴性菌(P<0.01);质粒转移率为47.14%,其中获得mcr-1和ESBLs基因共转移的接合子表现出与供体菌相同的耐药表型及耐药基因。综上,在四川省食品动物源大肠杆菌中,mcr-1与ESBLs基因共存现象广泛存在,且耐药基因易发生水平传播,对菌株多重耐药性的产生具有重要意义。     

青稞转录因子HvnANT1基因的克隆与表达分析

为探究HvnANT1基因在青稞粒色形成过程中的基因表达模式,以紫粒青稞‘涅如姆扎’和白粒青稞‘昆仑10号’为试材,利用简化基因组GBS(Genotyping-by-Sequencing)对青稞紫粒进行基因定位,克隆到HvnANT1基因,对其进行生物信息学分析。结果表明：1）在7H染色体的84.30—86.00cM获得1个MYB类转录因子,命名为HvnANT1。2）该基因长1 033bp,其完整开放阅读框为762bp,编码253个氨基酸。HvnANT1蛋白分子量为27.14kU,是亲水性的不稳定碱性蛋白且不存在跨膜结构,无信号肽。该蛋白的二级结构主要是由无规卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角组成,具有2个SANT结构域（分别位于第13—第63个;第66—第114个氨基酸）。3）同源比对与系统进化分析表明：青稞HvnANT1蛋白与大麦、乌拉尔图小麦、高梁、玉米、二型花、小米、水稻、土瓶草、车轴草和杨梅10种植物的ANT1蛋白序列相似性分别为100.00%、88.85%、54.64%、60.95%、60.82%、58.46%、57.61%、37.76%、36.05%和36.33%;这些序列都具...     

干旱胁迫下不同品种小麦4种功能基因的表达模式及相关生理指标分析

采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)对干旱胁迫下脂质转移蛋白基因(TaLTP1)、膨胀素基因(TaEXPB23)、水通道蛋白基因(TaAQP7)和果聚糖6-果糖基转移酶基因(Ta6-SFT)在4种小麦叶片中的表达情况进行分析;通过测定相对水分质量分数和果聚糖质量分数来判断小麦生长发育状况。结果显示:干旱胁迫48h内,4种基因在不同抗旱性小麦叶片中的表达模式不同,干旱敏感型小麦中4种基因的相对表达量先上升后下降,恢复到正常水平;干旱耐受型小麦中4种基因的相对表达量先上升后下降,但仍维持较高表达水平;干旱耐受型小麦具有较高的相对水分质量分数和果聚糖累积量。以上结果表明,4种基因参与小麦干旱胁迫应答,4种基因的表达模式可以作为鉴定小麦抗旱的分子指标。本研究可为准确快速地鉴定小麦品种抗旱性提供重要分子依据。     

绣线菊内生真菌的分离及对植物病原菌的抑制作用

采用组织分离法,以PDA培养基为分离培养基,从绣线菊的根、茎和叶中分离获得39株内生真菌。平板对峙结果表明, 21株活性菌株对6种植物病原菌（辣椒疫霉病原菌、番茄枯萎病原菌、苹果腐烂病原菌、苹果炭疽病原菌、葡萄灰霉病原菌、小麦赤霉病原菌）有不同程度的抑制作用,其中菌株XXT10对苹果腐烂病原菌、苹果炭疽病原菌、番茄枯萎病原菌、小麦赤霉病原菌的抑制率分别达到73.2%、72.5%、39.5%和42.7%。通过测得的ITS rDNA 序列与GenBank数据库中已知序列比对后该菌为链格孢属菌。生物学特性试验表明,该菌株在28～32℃时,选择PDA培养基,分别以乳糖和蛋白胨作为碳、氮源,酸碱度中性的条件下,菌落的生长状况最佳。     

小立碗藓PpLBD20基因敲除载体的构建及功能研究

LBD(Lateral organ boundaries domain)是植物中特有的基因家族.前期研究发现灰霉菌处理小立碗藓导致配子体中的PpLBD20上调表达,但PpLBD20的功能尚不明确.因此提取小立碗藓DNA,PCR扩增PpLBD20基因的上下游片段,依次插入PTN182载体,利用同源重组原理构建敲除表达载体,酶切和测序验证插入序列的正确性.通过工作浓度为20％的PGE 6000介导小立碗藓原生质体转化,筛选鉴定得到敲除PpLBD20后的突变体植株,观察到敲除后小立碗藓不形成茎叶体结构且配子体成丝状.结果为深入探究PpLBD20在小立碗藓的形态建成调控病原菌侵染的抗性作用奠定基础.     

摘除眼柄与注射眼柄粗提物对凡纳滨对虾性腺发育相关基因表达的影响

利用荧光定量PCR技术,检测了眼柄粗提物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)性腺发育相关基因(DMC1、VASA和VTG)表达的影响,探讨性腺抑制激素(GIH)在性腺发育过程中的调控机制,结果表明:DMC1和VASA只在凡纳滨对虾精巢和卵巢中表达;摘除眼柄后,精巢和卵巢中DMC1表达量均显著性降低(P0.05),而注射眼柄粗提物后精巢和卵巢中DMC1表达显著增高(P0.05);相反,摘除眼柄后,精巢和卵巢中VASA以及卵巢中VTG基因表达量显著增高,但注射眼柄粗提物后性腺中的VASA和卵巢中的VTG表达量显著降低。结果表明眼柄粗提物通过影响生殖相关基因的表达影响凡纳滨对虾的性腺发育。     

乌梅等20种中药对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性研究

【目的】观察乌梅Fructus mume等20种中药的体外抗胸膜肺炎放线杆菌Actinobacillus pleuropneumoniae活性.【方法】通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法对20种中药进行提取,采用二倍稀释法测定其对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性;并研究抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌活性.【结果和结论】乌梅、黄连Rhizoma coptidis、诃子Terminalia chebula、秦皮Cortex fraxini、地榆Sanguisorbae officinalis、虎杖Polygonum cuspidatum 6种中药提取物对胸膜肺炎放线杆菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)范围是6.25~50.00 mg/mL;大青叶Isatis indigotica、茵陈Artemisia capillaris、甘草Glycyrrhiza uralensis和白鲜皮Dictamnus dasycarpus 4种中药提取物的MIC范围是50.00~100.00 mg/mL;黄柏Phellodendron amurense、杜仲Eucommia ulmoides、金银花Lonicera japonica、柴胡Bupleurum chinense、蒲公英Taraxacum mongolicum、板蓝根Baphicacanthus cusia、栀子Gardenia jasminoides和黄芪Astragalus membranaceus等10种中药提取物的MIC100.00 mg/mL.联合抑菌试验结果表明,乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合抑菌指数(FICI)≤1,乌梅、虎杖分别与秦皮的FICI2.乌梅、黄连、诃子、虎杖、秦皮、地榆对胸膜肺炎放线杆菌均具有较好的体外抗菌活性;乌梅、黄连、诃子和虎杖两两联合为相加、协同作用;秦皮分别与乌梅、虎杖为拮抗作用.     

TmFAD2和BnFAD3双基因载体的构建及转化株脂肪酸分析

必需脂肪酸亚油酸(18∶2)和亚麻酸(18∶3)在植物中的合成过程一直备受研究者的关注。本研究利用旱金莲中合成亚油酸的油酸脱饱和酶基因TmFAD2及甘蓝型油菜中合成亚麻酸的亚油酸脱饱和酶基因BnFAD3,在pRD400骨架载体的基础上,构建同时表达TmFAD2和BnFAD3的串联双价载体pSFF。通过农杆菌介导的花序浸蘸法完成pSFF对拟南芥哥伦比亚野生型的转化,观察发现转基因植株的第1对真叶有不同程度的畸形。按照畸形程度将其划分为4个等级,气相色谱分析4个等级叶片及其后代种子中脂肪酸的组成及含量,发现随着畸形程度的增高,叶片和种子中亚麻酸C18∶3含量都呈现降低的趋势。     

结球甘蓝类钙调蛋白基因 CML48和 CML50在不同胁迫下的表达分析

为探究结球甘蓝类钙调蛋白（CMLs）响应不同胁迫时的功能,丰富CMLs参与钙信号网络调控,为CMLs参与植物逆境途径及其功能的研究提供依据。以结球甘蓝ZG为材料,克隆得到 CML48和 CML50基因,序列分析表明 CML48开放阅读框（ORF）为672 bp,含4个内含子,编码223 aa,分子量为25.28 ku; CML50开放阅读框ORF为1 095 bp,编码364 aa,分子量为38.06 ku,含3个内含子;均为亲水蛋白,均含有2个EF-hand结构域;系统发育树表明 CML48和 CML50均与甘蓝处于同一进化枝,与白菜、油菜的亲缘关系最近。qPCR表明 CML48和 CML50在干旱(PEG6000)、盐胁迫(NaCl)、低温(4 ℃)、高温(37 ℃)、H₂O₂、脱落酸（ABA）、水杨酸（SA）和茉莉酸甲酯（MeJA）等不同胁迫处理下,在叶和根中的表达均有上调,且 CML50的表达量均显著高于 CML48, CML48在茎尖中高度响应高温胁迫,而在根中不响应高温和H₂O₂胁迫。初步说明 CML48和 CML50在根和叶中均可响应上述8种非生物胁迫。