利用shRNA真核表达载体干涉雌性鸡胚性腺中芳香化酶基因(CYP19A1)的表达

本研究通过把构建的短发夹结构RNA(shRNA)真核表达载体导入鸡胚,检测鸡胚性腺分化期质粒载体在鸡胚体内代谢情况及雌性鸡胚性腺中芳香化酶基因(CYP19A1)mRNA表达效率,进而探讨利用该方法在鸡胚体内进行特定基因干涉的可行性.实验针对CYP19A1基因构建了4条特异性表达载体,一条非特异性表达载体.每个实验组选取45个新鲜种蛋作为实验材料进行胚盘下腔注射,并设立空白对照组.鸡胚发育12d时,检测各处理组鸡胚肝脏组织中质粒存在情况,并取其左侧性腺组织进行目标基因的荧光定量分析.研究结果表明,导入组在12日胚龄时所有鸡胚基因组中均可检测到绿色荧光蛋白基因(EGFP);荧光定量结果显示,导入特异性表达载体cyp-580、cyp-1083和cyp-1295后,对应雌性鸡胚性腺CYP19A1 mRNA表达效率显著低于空白对照组,干涉效率分别为:73％、52％和85％;特异性表达载体cyp-1403组CYP19A1mRNA表达效率与空白对照组相比有所降低但无显著性差异.本实验为诱导鸡胚性反转提供了新方法并建立了鸡胚发育期特定基因体内干涉新平台.     

用PCR法检测性反转母鸡W精子的产生

在自然界公鸡和母鸡的性别分别由性染色体ＺＺ和ＺＷ所决定。因此公产生的精子其性染色体均是Ｚ,而母鸡产生的卵子有Ｚ和Ｗ两种。本实验在受精卵孵化的第三天注入芳香化酶抑制剂以抑制雌激素的合成,用Ｗ染色体特异的基因鉴别性别后将雌鸡饲养性成熟。这些性反转母鸡有与公鸡相似的表型和雄性交配行为,但无精子排出,为了观察性腺内是否有精子产生,取出睾丸在显微镜下捕获单个精子,用Ｗ染色体基因特异的寡核苷酸引物进行了ＰＣＲ     

树胡椒的组织培养

树胡椒种子作为外殖体进行微繁殖,不同培养阶段适宜的培养基分别为：（１）愈伤组织诱导：ＭＳ＋ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋活性碳０．０３％;（２）分化和继代：Ｂ５＋ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＬＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ和Ｂ５＋ＫＴ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡｍｇ／Ｌ;（３）生根：Ｂ５＋ＩＡＡ０．５～２ｍｇ／Ｌ。     

禽类性腺发育和性别调控的分子机理

禽类的性腺由无形态差异的性腺分化成睾丸或卵巢。在同型配子ZZ胚胎中，Dmrt-1、抗缪勒氏管激素、Sox9和P450 17α羟化酶的表达对性腺分化并发育为睾丸起到关键的作用。在异型配子ZW胚胎中，雌激素受体、类固醇生成因子-1和P450芳香化酶基因的表达可刺激卵巢的形成。利用性激素或其合成酶可调控禽类的性别。     

鸡胚性分化早期性别差异表达miRNAs的表达谱分析

为研究microRNA(miRNA)在鸡胚早期性分化过程中的表达,探讨miRNA在性腺早期发育中的作用,本研究从前期以3.5～6.5 d的雌、雄鸡(Gallus gallus)胚胎性腺为材料的miRNA芯片表达谱中筛选出6个性别差异表达的miRNAs(其中miR-551b和miR-612为鸡新miRNAs),采用RNA加尾以及引物延伸的半定量RT-PCR方法研究这些差异表达miRNAs在3.5～6.5 d雌、雄鸡胚性腺中的表达,并验证其中新miRNAs的茎环前体结构.RNA folding软件折叠结果表明,预测的鸡miR-612和miR-551b均具有茎环状的前体结构.半定量结果表明,这6个miRNAs均存在不同程度的性别差异表达.除4.5 d外,gga-miR-612和gga-miR-1456在其它检测时期的表达为雌性高于雄性;在4.5～6.5 d鸡胚性腺中,gga-miR-551b在雄性中表达显著高于雌性(P<0.05);gga-miR-126在3.5和6.5 d雌性性腺中的表达低于雄性,而4.5和5.5 d则相反;gga-miR-1599在所检测时期中均为雄性中高表达且在4.5 d达极显著水平(P<0.01),gga-miR-10b的表达与之相反.根据表达谱结果推测gga-miR-551b以及gga-miR-1599可能涉及早期鸡胚性腺发育过程.     

高维生素C水果Acerola的组织培养(简报)

１植物名称葡文为Ａｃｅｒｏｌａ（ＭａｌｐｉｇｈｉａｇｌａｂｒａＬｉｎｎ）。２材料类别成熟种胚。３培养条件（１）诱导种胚生长用１／２ＭＳ培养基,未添加任何激素;（２）诱导种胚愈伤组织培养基为ＭＳ＋２,４Ｄ２～３ｍｇ／Ｌ;（３）愈伤组织分化培养基为ＭＳ＋...     

新城疫北京强毒株融合糖蛋白（F）基因的克隆及序列分析

ＮＤＶ北京强毒株Ｆ４８Ｅ９经ＳＰＦ鸡胚增殖,超速离心纯化,异硫氰酸胍法提取病毒ＮＡ后,用ＲＴ－ＰＣＲ扩增,得到其融合糖白基因。将扩增产物与ｐＧＥＭ＾Ｒ－Ｔ载体相连接转化,经过ＡｍｐＩＰＴＧ－Ｘｇａｌ（ＡＩＸ）平板筛选,ＨｉｎｄⅢ酶切及ＰＣＲ鉴定,初步获得了含Ｆ基因的阳性克隆。用渐近法对克隆片段进行全序列分析,证明得到了作长１７４４个核苷酸的ＮＤＶ Ｆ蛋白基因。     

促减数分裂甾醇(MAS)在附助生殖生物学中的作用及应用前景

促减数分裂甾醇（Ｍｅｉｏｓｉｓ－ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｓｔｅｒｏｌｓ,ＭＡＳ）是近年来新发现的能够促进哺乳动物生殖细胞减数分裂恢复的物质。其中,来自人卵泡液的ＦＦ－ＭＡＳ和来自牛睾丸组织Ｔ－ＭＡＳ能诱导体外培养的小鼠卵母细胞减数分裂的恢复,可能在促性腺激素调控配子的成熟过程中扮演重要的生理性角色。本文结合我们的研究结果,就ＭＡＳ在性腺的合成及分布、与卵母细胞减数分裂恢复及精子形成的关系以及ＭＡＳ在     

小麦细胞质雄性不育与花药组织内源激素的关系

利用间接酶免疫（ＥＬＩＳＡ）检测技术，测定了Ｋ，Ｔ型小麦细胞质雄性不育系及其相应保持系分发育过程中花药组织生长素，细胞分裂素，脱落酸，赤霉素四大类内源激素的动态变化，结果表明，不讼是Ｋ型还是Ｔ型细胞质雄性不育系，在花粉败育过程中与其相应保持系相比在比花组织中均表现为ＩＡＡ，ＩＰＡ，ＧＡ３ＧＡ４含量的下降ＺＲ，ＤＨＺＲ，ＡＢＡ含量的上升，据此认为内源激素含量的变化与小麦雄性不育的发生密切相关。     

应用植物生长调节剂克服甘薯种间杂种回交甘薯时的生殖障碍

将甘薯同其近缘野生种Ｉ．ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓ（２ｎ＝４ｘ）杂交获得五倍体杂种。研究５Ｘ染种回交甘薯时生殖障碍的表现特征,进而探讨植物生长调节剂克服其低结实性的可能性,结果表明,５Ｘ杂种回交甘薯的生殖障碍表现在从花粉萌发到胚发育的各个阶段,参试５Ｘ杂种系同甘薯的交配障碍具有Ｃ不孕群特征,其交配后障碍则不具有不孕群别特征,而普遍表现为子房脱落,胚的败育和低结实性,植物生长调节剂（ＮＡＡ＋６ＢＡ）对促进     

青海省耕地资源开发利用分析及对策研究

分析论述了青海省耕地资源开发利用的现状、特点和问题。在此基础上,提出了对青海省耕地资源进行研究的框架体系和思路,同时基于GIS/RS技术设计了相关的技术路线。最后依据所做设计对青海省耕地资源开发利用做了初步分析,并进行了相关的对策研究分析。     

Physical Properties of the Soils of Sibay City of the Republic of Bashkortostan

Eurasian Soil Science - The results of the study of the properties of urban soils of the city of Sibay located in the mining region of the Republic of Bashkortostan are presented. A specific...     

荔枝种子结构的扫描电镜观察

荔枝种子从果实中剥离出来后, 即使在室内条件下, 也极易失水干缩, 潮湿环境中又易发霉而腐烂。扫描电镜观察表明: 种皮上布满纹孔, 水分散失面积很大; 种脐部为疏松的海绵组织, 且营养丰富。据此, 生产上应对种子彻底清洗, 并保存于适当湿度的环境中, 以提高其发芽率。     

物联网安全及解决措施

物联网是一个集信息通信、数据交换、传感器技术与软件工程于一体的综合性产业,探讨和分析了物联网的结构体系与发展中遇到的安全问题。     

三门峡水库库岸坍塌成因分析与防治措施研究

三门峡水库自1960年9月蓄水运行以来,库岸坍塌现象频繁发生,平均每年塌岸0.5～0.7亿m3.指出了造成库岸坍塌的原因主要是地质环境的影响以及水力条件的变化;不同的地形、地貌、地质结构和岩性特征,表现了不同的塌岸强度,其中黄土塬区为极强塌岸段,黄河Ⅱ级阶地为强烈塌岸段,黄河Ⅰ级阶地为中等强烈塌岸段;分析了引起库岸坍塌的主要水力条件有大气降水、地表水和地下水,并且不同水力条件及其变化特征,对库岸坍塌影响的方式和程度也不同;最后给出了防治库岸坍塌应采用标本兼治的原则,治标是指对塌岸进行必要的加固、支挡、衬砌等;治本就是根据引起塌岸的原因以及不同地质环境条件下的塌岸特征和水力条件,因地制宜,因害设防,从根本上进行综合治理.     

食用仙人掌萎蔫气象条件分析

塑料大棚内种植的食用仙人掌在土壤墒情较好时也有萎蔫现象发生，通过试验观测和对仙人掌生理习性的分析，发现阴雨过后天气突然放晴温度急剧上升易使仙人掌发生萎蔫现象，并提出了田间管理的应对措施。     

Heterogeneity of Organic Matter of Aggregates of Protocalcic Chernozems

Eurasian Soil Science - Layers were step-by-step removed from macroaggregates (2–1 mm in diameter) of Protocalcic Chernozems via successive abrasion in a revolving rotator during 5, 10, 15,...     

氟对小鼠生精细胞凋亡的影响及锌的保护作用

为观察氟对成年雄性小鼠生精细胞凋亡的影响及锌的保护作用,通过腹腔注射氟化钠建立氟中毒动物模型及锌保护实验。采用石蜡切片、苏木精-伊红染色(HE染色)、末端原位标记(TUNEL)及琼脂糖凝胶电泳的方法检测小鼠生精细胞的凋亡情况。结果显示:(1)氟感染组无论是低剂量组(NaF10 mg/kg)或是高剂量组(NaF 20 mg/kg)生精细胞都发生了明显的凋亡。生精细胞凋亡主要发生在精母细胞和精原细胞,凋亡指数与对照组差异极显著(P<0.05)。(2)无论是高剂量锌(ZnSO430 mg/kg)和低剂量锌(ZnSO415 mg/kg)都可以使凋亡指数明显降低,高剂量锌组的凋亡指数与对照组差异不显著(P>0.05)。     

Characterization of physical and chemical properties of Varzea soils of Goias State of Brazil

Abstract

Brazil has approximately 30 million hectares of lowland areas, known locally as “Varzea,”; distributed throughout the country. Soils in these areas have the potential to support agricultural production, but very little is known about their fertility. The current experiment was undertaken to characterize the chemical and physical properties of representative “Varzea”; soils collected at 0–20, 20–40, 40–60, and 60–80 cm depth intervals from 23 sites in Goias State of Brazil. Organic matter contents averaged 42 g/kg in the surface 20 cm of soil and should make a significant contribution to overall nutrient availability. Soil pH increased slightly with depth from a mean value of 5.2 in the surface 20 cm of soil to a mean value of 5.4 in the 60–80 cm depth interval. Several soils had exchangeable Al values ≥ 1.0 cmol Al/kg, but soil Al saturation was generally less than the 60% level frequently associated with Al toxicity. However, cereal and legume production could benefit from lime addition in many of these soils. Although base saturation was fairly low in some soils, exchangeable Ca and Mg levels were, in general, adequate throughout the profile. Extractable P levels were adequate in most surface soil samples. Extractable K levels in these soils were generally low, and the application of K fertilizers should be beneficial, especially in conjunction with lime addition. The high clay content “Varzea”; soils of the Brazilian lowlands have some drainage problems but generally exhibit favorable chemical properties for crop production when compared to soils of the well‐drained Cerrados.