昆仑雪菊对结肠癌细胞株体外抗肿瘤作用研究

[目的]探讨昆仑雪菊中总黄酮粗提取物、纯化物及总多糖对人结肠癌细胞株(HCT116细胞、CACO-2细胞)增殖的抑制作用.[方法]体外培养结肠癌细胞,采用不同浓度昆仑雪菊中总黄酮粗提取物、纯化物及总多糖对其进行干预,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪测细胞凋亡率.[结果] MTT法检测昆仑雪菊中总黄酮粗提取物、纯化物及总多糖对结肠癌细胞株的抑制作用具有浓度和时间依赖性;流式细胞仪检测昆仑雪菊总黄酮纯化物能增强结肠癌细胞株的凋亡率,且剂量与凋亡率呈正相关.[结论]昆仑雪菊总黄酮纯化物抗肿瘤活性优于总黄酮粗提物及总多糖,且对结肠癌细胞株的增殖有明显抑制作用,其作用机制可能与增强细胞凋亡有关.     

牛支原体生长曲线的测定和培养基筛选

为筛选最适于牛支原体(Mycoplasma bovis)生长的培养基,利用活菌计数方法测定了牛支原体OF2株在改良Thiaucourt’s培养基、牛心汤培养基和改良KM2培养基中的生长曲线。结果发现,牛支原体在改良Thiaucourt’s培养基中生长30 h即可达到平台期,平均最高生长滴度7.0×109ccu/mL;在牛心汤培养基中生长40 h即可达到平台期,平均最高生长滴度4.0×109ccu/mL;在改良KM2培养基中生长50 h达到平台期,其平均最高生长滴度为7.0×108ccu/mL。结果表明,牛支原体在改良Thiaucourt’s培养基中生长快、滴度高,为下一步牛支原体灭活疫苗的研究提供了参考依据。     

茶氨酸硝香酰胺对人宫颈癌细胞生长的抑制作用

前期研究发现本试验合成的茶氨酸衍生物茶氨酸硝香酰胺(TNC)具有显著抑制人肺癌细胞体内外生长的作用,为进一步探索研究TNC的抗癌活性和作用的分子机制,以其母体化合物茶氨酸为对照,评估现TNC对人宫颈癌细胞生长的抑制作用。采用MTT方法检测不同浓度的TNC对人宫颈癌细胞生长的影响,应用蛋白质印迹法检测解析这些癌细胞中与凋亡和生长密切相关蛋白的表达和药物可能作用的分子靶点。此外,通过建立动物肿瘤模型,评价TNC对荷瘤裸鼠体内人宫颈癌He La肿瘤生长的抑制效果。实验结果显示,TNC抑制人宫颈癌细胞体内外生长的活性超过其母体化合物茶氨酸多倍,对小鼠生长无明显毒性;TNC抑制人宫颈癌细胞生长的分子机制可能与抑制VEGFR2-NF-κB信号传导通路相关。本研究结果提示,TNC具有应用于临床治疗和(或)辅助治疗高转移人宫颈癌的潜力。     

猪粪除臭微生物筛选及其生长曲线测定

为研制猪粪微生物除臭剂,本试验以发酵猪粪为样本筛选除臭微生物并对其生长曲线进行测定,结果从发酵猪粪中分离得到4株具有除臭功能的菌株,经染色镜检和生化反应判定为枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和班图酒香酵母菌,且这4株菌株的生长曲线各具特点.     

桔黄裸伞提取物对人乳腺癌细胞(MCF-7)抑制作用的研究

采用台盼蓝法研究了桔黄裸伞的乙醚提取物、乙醇提取物和液体培养的菌丝及培养液的混合物对人乳腺癌细胞（MCF－7）的存活率和对其DNA合成的影响。结果表明：乙醇提取物对MCF－7细胞存活的抑制率达到100％。乙醇提取物和液体培养的菌丝及培养液的混合物对MCF－7细胞的DNA合成有较强的抑制作用，抑制率均达到96％以上。     

乳酸菌体外粘附人结肠腺癌细胞系HT-29细胞的研究

用实验室保存的24株乳酸菌菌种做了对人结肠腺癌细胞系HT-29细胞的体外粘附性试验。发现双歧杆菌的粘附能力较高,平均在 10.5个/细胞;乳杆菌的粘附能力较低,平均在 3.2个/细胞;球菌的粘附能力很低,平均在 2.3个/细胞。其中双歧杆菌中 Bifidobacterium bifidum 02菌株粘附能力最好,达到(18.4±2.7)个/细胞。乳杆菌中 Lactobacillus acidophilus 99101粘附能力最好,达到(10.2±1.8)个/细胞。同时,同种不同株的乳酸菌粘附能力有差异,而同属中,来自人粪便与来自猪粪便的乳酸菌的粘附能力没有明显差异。     

复合螺旋藻多糖对人乳腺癌231细胞抑制作用的研究

[目的]研究复合螺旋藻多糖对人乳腺癌231细胞的抑制作用。[方法]将螺旋藻多糖（PSP）与银杏叶有效成分（GBE）按一定比例复合,观察复合制剂对人乳腺癌231细胞的抑制作用。[结果]与空白对照组相比,PsP与GBE按1：1、1：2和2：1比例的复合制剂组对人乳腺癌231细胞的抑瘤率,高剂量时分别提高93．32％、57．83％和44．95％,中剂量时分别提高67．52％、59．93％和41．72％,低剂量时分别提高54．22％、48．56％和40．26％。单一成分的螺旋藻多糖组对人乳腺癌231细胞有较好的抑制作用,但随着剂量地降低其药效也随之降低。[结论]复合螺旋藻多糖对人乳腺癌231细胞有较高地抑制作用,其中,以高剂量组1：1复合制剂抑制效果最好（93．32％）,表明复合螺旋藻多糖在该剂量配比时协同增效作用达到最大。     

茶氨酸衍生物TClC脂质体对雌激素受体阳性的 乳腺癌细胞生长和迁移的抑制作用

为研发抗癌新药,使用茶氨酸衍生物茶氯香酰胺TClC制备纳米脂质体(TClC-L),研究TClC-L对雌激素受体阳性的人乳腺癌MCF-7细胞生长和迁移的抑制作用,并深入探究可能的作用机制。分别采用MTT和Transwell chamber实验方法探究各浓度TClC-L对MCF-7细胞的生长和迁移的抑制作用;使用流式细胞术(FCM)检测TClC-L对MCF-7细胞凋亡的影响;应用Western blotting检测MCF-7细胞生长和迁移有关蛋白和酶的表达。实验结果显示,TClC-L对MCF-7细胞生长和迁移有显著的抑制、对癌细胞的凋亡表现促进作用;TClC-L明显下调受体蛋白p-VEGFR~2、Met和ER-α、抗凋亡蛋白Bcl-2、Cyclin D1、Akt和NF-?B的表达,上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3、p53和p21的表达。TClC-L作用的分子机制可能与抑制VEGFR/Met/ER-α-Akt/NF-?B信号传导通路有关。本研究显示了TClC-L有潜在的治疗雌激素受体阳性乳腺癌的作用。     

灵杆菌素对人结肠癌细胞LS-174t增殖抑制作用

采用热酚水法提取灵杆菌素并对提取物粗品进行纯化,用MTT法检测其对LS-174t细胞生长增殖的抑制作用,透射电镜观察细胞凋亡的形态学变化;RT-PCR法检测Bcl-2和Bax mRNA的表达及琼脂糖凝胶电泳法检测DNA纯度;流式细胞仪分析检测细胞周期的改变.实验结果发现,灵杆菌素可能通过诱导凋亡抑制LS-174t细胞生长,其机制可能与抑制抗凋亡因子Bcl-2、增强凋亡因子Bax的表达量有关.     

茶氨酸溴香酰胺对人宫颈癌细胞体内外生长的抑制作用

将茶氨酸为母体合成的茶氨酸衍生物茶氨酸溴香酰胺(TBrC)与茶氨酸作比较,评估茶氨酸溴香酰胺对人宫颈癌细胞体内外生长的抑制作用与其分子机制。应用MTT等方法检测不同浓度的TBrC对人宫颈癌细胞体外生长的影响,运用蛋白质印迹法检测解析这些人宫颈癌细胞中与凋亡和生长密切相关蛋白的表达和药物可能的作用靶点。此外,通过建立动物肿瘤模型,评价TBrC对荷瘤裸鼠人宫颈癌生长的抑制效果。实验结果显示,TBrC抑制人宫颈癌细胞体内外生长的活性超过其母体化合物茶氨酸多倍,对小鼠生长无明显毒性;TBrC作用的分子机制之一可能与抑制VEGFR1-Bcl-2/Bax信号传导通路相关。研究结果提示,TBrC具有广泛应用于临床治疗和(或)辅助治疗人宫颈癌和其他癌症的潜力。     

推广的生长曲线模型未知参数估计的相对效率

讨论了推广的生长曲线模型未知参数估计的4种相对效率，给出了相应的上下界，并对其进行了比较。     

龙眼果实生长曲线和各组织的相关分析

龙眼以全果干鲜重、体积、纵横径表示的Ｌｏｇｉｓｔｉｃ生长曲线，其回归方程经Ｆ检验，达极显著水平，简单相关、偏相关、通径分析统计表明，直接影响龙眼果实生长主要是假种皮和果皮，而假种皮与种子的偏相关达显著水平．龙眼果实及各组织的生长型，不论以鲜重或干重表示，均为单Ｓ型．龙眼果实及各组织的水分进入均早于溶质的进入，假种皮的生长落后于果皮和种子的生长，溶质进入果皮和种子先于假种皮，花后７０ｄ开始，溶质主要进入假种皮．     

塞北肉用型乌骨鸡早期生长发育规律及生长曲线拟合研究

肉用型乌鸡是通过丝羽乌鸡、山地乌鸡、本地柴鸡杂交选育而成.生产性能显著提高,60日龄体重、90日龄体重和40周龄体重以及90日龄屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸腿肌率比丝羽乌鸡及本地柴鸡高,差异显著(p<0.05)或差异极显著(p<0.01),但和山地乌鸡比,差异不显著(p>0.05).试验用logis-tic非线性动物生长模型拟合了塞北肉用型乌骨鸡1~14周龄的平均体重,进行生长曲线分析,结果表明:lo-gistic方程能很好地拟合塞北肉用型乌骨鸡的生长过程,拟合度均在0.99以上,其生长的拐点时间为8.80周龄,拐点体重为744.75 g,极限体重参数1 489.50 g.     

甘肃高山细毛羊羔羊生长曲线模型选择及生长曲线分析

为了探索甘肃高山细毛羊羔羊的生长状况、生长规律及饲养模式,以86只甘肃高山细毛羊羔羊为研究对象,运用Logistic、Gompertz、Von Bertalanffy 3种典型的非线性数学模型对其初生体质量、1~6月龄的体质量和平均日增质量进行生长曲线模型的建立及拟合,并进行模型选择及生长曲线分析。结果显示,3种模型的曲线拟合度R2均在0.99以上,其中Gompertz模型拟合出的成熟体质量为39.11 kg,较Logistic模型高16.43%,较Von Bertalanffy模型低10.85%;拐点体质量为14.58 kg,分别较Logistic模型、Von Bertalanffy模型低13.15%、9.60%;拐点日龄为91 d,最大日增质量达495 g,明显高于Logistic模型、Von Bertalanffy模型。通过对3种模型拟合参数进一步对比分析,并结合肃南甘肃高山细毛羊羔羊的实际生长情况,可知Gompertz模型的拟合效果较好,其羔羊在3月龄时出现生长拐点,日增质量达到最大。     

siRNA介导的Plk1表达沉默对食管癌细胞生长的影响

在包括食管癌在内的多种肿瘤中,Plk1呈现过表达且具重要预后价值,表明该分子是一个潜在的肿瘤治疗靶点.为了探讨Plk1作为分子靶点用于食管癌治疗的潜在价值,采用siRNA技术抑制Plk1的表达,并观察了其对3株代表性食管癌细胞生长的影响.结果表明:合成的特异性短链Plk1 siRNA在mRNA和蛋白质水平上均能高效、特异性地抑制3株代表性食管癌细胞系中Plk1的表达.同时,siRNA介导的Plk1表达沉默显著抑制了食管癌细胞的生长,细胞活力同时显著下降.另外,Plk1表达被抑制后,大量细胞有丝分裂受到阻滞,并进而发生大规模细胞死亡.这些结果表明,siRNA介导的Plk1表达沉默能显著抑制食管癌细胞的生长,Plk1是一个潜在的用于食管癌治疗的新靶点.     

苦参碱逆转人结肠癌细胞株(HT-29)奥沙利铂耐药性的作用及机制研究

目的 研究苦参碱对结肠癌耐药细胞HT-29/奥沙利铂（Oxaliplatin,OXA）耐药性的逆转作用并探讨其可能的作用机制。方法 采用逐步增加药物浓度的方法建立奥沙利铂耐药结肠癌细胞株HT-29/OXA;CCK-8法测定苦参碱对HT-29/OXA细胞的耐药性逆转作用,流式细胞术检测细胞凋亡、周期变化;实时定量PCR检测各组细胞肺耐药蛋白（lung resistance protein LRP）和P-glycoprotein（P-gp）mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞LRP和P-gp蛋白的表达水平。结果 苦参碱使HT-29/OXA细胞对奥沙利铂的敏感性增加,耐药性得到部分逆转。奥沙利铂（0.5 μg/mL）和苦参碱（3.0 μg/mL）单独用药对结肠癌耐药细胞株HT-29/OXA细胞周期以及细胞凋亡没有影响;联合用药对HT-29/OXA生长增殖具有明显抑制作用并且能够通过改变细胞周期引起凋亡（P<0.05）。奥沙利铂（0.5 μg/mL）和苦参碱（3.0 μg/mL）单独用药对HT-29/OXALRP和P-gp mRNA以及蛋白的表达没有影响;联合用药作用后LRP mRNA和P-gp mRNA表达水平降低（P<0.01）,同时下调了LRP和P-gp蛋白表达（P<0.01）。结论 苦参碱部分逆转HT-29/OXA细胞对奥沙利铂的耐药性,其机制可能与细胞内LRP和P-gp表达降低有关。     

修水黄羽乌鸡生长发育规律及生长曲线拟合研究

对修水黄羽乌鸡这一新兴的地方特禽资源平毛、翻毛系生长发育规律加以探讨。运用Logistic、Von Berta-lanffy、Gompertz 3种非线性动物生长模型对0～22周龄修水黄羽乌鸡进行生长发育曲线拟合分析,并通过拟合度（ R2）和残差平方和（ E）进行效果比较。结果显示3种模型模拟效果均较好,但Von Bertalanffy方程拟合效果最佳,平、翻毛两系母鸡拟合度分别为0．990、0．991,平毛系拐点时间为11．02周略早于翻毛系的11．08周,平毛系拐点体质量（503．21 g）也比翻毛系（474．02 g）大。运用3种模型对修水黄羽乌鸡进行生长曲线拟合分析是可行的,为及时了解修水黄羽乌鸡生长发育及改善饲养管理提供参考。     

原花青素促进三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的作用机制研究

目的 研究原花青素（Procyanidins,PC）对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖及细胞凋亡的作用及其机制。方法 常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、对照组和PC10、20、40、80、160、320 μg/mL组。MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测FoxA1蛋白及抗凋亡蛋白bcl2、UCP2表达。结果 PC各剂量组均可显著抑制抑制MDA-MB-231细胞增殖（P<0.05）;PC（10-160 μg/mL）组剂量依赖性抑制MDA-MB-231细胞增殖（P<0.05）,PC（40-320 μg/mL）可以时间依赖性抑制细胞增殖（P<0.05）;PC320 μg/mL组各时间点细胞抑制率与PC160 μg/mL组差异无显著性（P>0.05）;160 μg/mL PC可以时间依赖性促进MDA-MB-231细胞凋亡（P<0.05）;160 μg/mL PC作用24 h后,FoxA1蛋白表达显著上升（P<0.05）,同时bcl2及UCP2表达降低（P<0.05）。结论 PC抑制MDA-MB-231细胞,促进MDA-MB-231细胞凋亡,升高其FoxA1表达,同时降低bcl2及UCP2表达,表明PC可能通过促进FoxA1表达发挥促进MDA-MB-231细胞凋亡的作用。     

核桃外果皮不同萃取部位对人宫颈癌HeLa细胞抑制作用研究

[目的]研究核桃外果皮不同萃取部位对人宫颈癌细胞的抑制作用,筛选核桃外果皮抗肿瘤活性部位.[方法]采用MTT法,选用人宫颈癌HeLa细胞,对核桃外果皮不同萃取部位进行抗肿瘤活性筛选.[结果]石油醚萃取部位、氯仿萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位对HeLa细胞的IC50分别为158.81、40.43、130.49和137.67 mg/L,水相部位对HeLa细胞无抑制作用.[结论]核桃外果皮石油醚萃取部位、氯仿萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位对HeLa细胞均有抑制作用,其中氯仿萃取部位对HeLa细胞具有较强的抑制作用,初步认定氯仿萃取部位为核桃外果皮的抗肿瘤活性有效部位.