增效硫酸多黏菌素口服液治疗仔猪黄白痢临床试验

为验证增效多硫酸黏菌素口服液对仔猪黄白痢的临床疗效,选用自然感染仔猪黄白痢患病仔猪为试验对象,以硫酸多黏菌素口服液的疗效为对照。结果显示,增效硫酸多黏菌素口服液高、中、低剂量组对仔猪黄白痢的治愈率分别为90．0％、83．3％、53．3％,总有效率分别为93．3％、86．6％和76．6％;硫酸多黏菌素口服液对照组的治愈率为60．0％、总有效率为83．3％;试验药物高、中剂量组对仔猪黄白痢的治愈率与对照药物比较差异显著（P〈0．05）。表明增效硫酸多黏菌素口服液对仔猪黄白痢的临床疗效显著优于硫酸多黏菌素口服液,建议推荐剂量为每次0．2mL／kg,每天2次,连用2d。     

HPLC法测定硫酸黏菌素组分含量

目的:采用HPLC法测定硫酸黏菌素组分含量。方法:测定色谱条件为:色谱柱为C18,5μm,4.6mm×250mm,流动相为:称取无水硫酸钠13.38g用纯化水稀释至2700m L,用稀磷酸调节p H至2.3~2.5,加水稀释至3000m L,再加乙腈846m L,摇匀,过滤,即得。检测波长为215nm。结论:硫酸黏菌素在0.2~0.6mg/m L范围内线性关系良好,多黏菌素E1:相关系数R=0.9995、多黏菌素E2:相关系数R=0.9998、多黏菌素E3:相关系数R=0.9999、多黏菌素EI-1:相关系数R=0.9992、多黏菌素EI-7MOA:相关系数R=0.9996;硫酸黏菌素的回收率为98.6%~101.6%;多黏菌素E1重复性RSD为0.2%、多黏菌素E2重复性RSD为0.2%、多黏菌素E3重复性RSD为0.8%、多黏菌素EI-1重复性RSD为0.6%、多黏菌素EI-7MOA重复性RSD为0.5%。结论:该方法线性范围宽、分析时间短、样品前处理简便、定量结果准确、重现性好,为其质量控制提供了依据。     

淀粉对硫酸黏菌素发酵水平的影响

[目的]探究淀粉对硫酸黏菌素发酵水平的影响。[方法]在发酵培养基中添加淀粉,并对淀粉进行双酶法水解,研究水解时间对发酵水平的影响。[结果]添加淀粉的发酵水平比原配方高;水解时间不同,发酵水平也不同,水解20 min(21 178μg/m L)水解40 min(20 651μg/m L)水解60 min(20 230μg/m L)水解0 min(20 146μg/m L)原配方(19 750μg/m L)。[结论]淀粉可以提高硫酸黏菌素的发酵水平,其中水解时间20 min的发酵水平最高。     

多黏菌素E研究进展

阐述了近年来各国学者在多黏菌素E的理化性质、药理作用、体内代谢、毒性等方面研究的成果，并指出了今后的研究方向。     

左氧氟沙星与多黏菌素联合抗菌活性研究

[目的]探讨左氧氟沙星与多黏菌素的联合抗菌效果。[方法]应用纸片法和试管稀释法进行体外抑菌试验,测定左氧氟沙星与多黏菌素联合对鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌的抑菌圈大小和最小抑菌浓度。[结果]结果表明:左氧氟沙星与多黏菌素联合对鸡大肠杆菌和鸡白痢沙门氏菌均表现出明显的抗菌协同作用。[结论]左氧氟沙星与多黏菌素配合的临床应用效果有待于进一步试验证明。     

鲎素的研究及开发利用

鲎是一种栖生于海洋的低等无脊椎动物。鲎素为鲎血液中抗菌肽的总称,研究表明鲎素具有抗菌、抑病毒、检测内毒素等多种作用。鲎素对人胃癌BGC823细胞、人肝癌SMMC7721细胞、人肺腺癌SPCAi细胞、人早幼白血病HL60细胞的增殖都有明显的抑制作用。对鲎素的研究为细菌耐药性、药物残留和抗HIV等医学难题的解决提供了新途径。近年来,由于对鲎资源的过度开发利用,这一资源已濒临灭绝。现在,对鲎资源的保护工作正在展开。     

线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素致PC12细胞凋亡中的作用

探讨线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素诱导PC12细胞凋亡中作用.取对数生长期PC12细胞,用含0、62.5、125、250 μg· mL-1硫酸黏菌素DMEM培养液,作用24 h,采用Hoechst33258荧光染色法检测PC12细胞凋亡,Western blot法检测细胞色素C(Cyt-C)、Bax、Bcl-2蛋白表达含量,试剂盒检测Caspase-3活性.与对照组相比,125、250 μg· mL-1硫酸黏菌素剂量组细胞PC12细胞Cyt-C、Bax蛋白表达量、Caspase-3活性显著升高(P＜0.01);Bcl-2蛋白表达显著降低(P＜0.01),具有剂量-效应关系.说明线粒体途径介导PC12细胞凋亡是硫酸黏菌素神经毒性作用机制之一.     

线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素致PC12细胞凋亡中的作用

探讨线粒体凋亡途径在硫酸黏菌素诱导PC12细胞凋亡中作用。取对数生长期PC12细胞,用含0、62.5、125、250μg.mL-1硫酸黏菌素DMEM培养液,作用24 h,采用Hoechst33258荧光染色法检测PC12细胞凋亡,Western blot法检测细胞色素C(Cyt-C)、Bax、Bcl-2蛋白表达含量,试剂盒检测Caspase-3活性。与对照组相比,125、250μg.mL-1硫酸黏菌素剂量组细胞PC12细胞Cyt-C、Bax蛋白表达量、Caspase-3活性显著升高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),具有剂量-效应关系。说明线粒体途径介导PC12细胞凋亡是硫酸黏菌素神经毒性作用机制之一。     

黏菌素对小鼠神经传导速率及运动单元动作电位的影响

为探讨黏菌素对小鼠感觉神经传导速率(SNCV)、运动神经传导速率(MNCV)及运动单元动作电位(MUAP)的影响,对50只昆明系小鼠单次尾静脉注射硫酸黏菌素7.5 mg.kg-1,每12 h 1次,连续给药7 d。分别于第1、3、7、14天(以初次给药当天为第1天计)测定小鼠坐骨神经SNCV、MNCV及MUAP,并对腓肠肌进行病理学检查。结果表明,与对照组相比,黏菌素给药3 d后,SNCV降低至(30.67±1.15)m.s-(1P0.05)。给药7 d后,神经传导速率(NCV)显著降低,MNCV降低至(24.47±0.41)m.s-(1P0.05),SNCV降低至(29.67±2.89)m.s-(1P0.05);此外,腓肠肌MUAP降低至(0.26±0.0153)mV(P0.05),运动单元动作电位持续时间(MUAPD)降低至(0.3±0.046)s(P0.01)。表明黏菌素可影响小鼠的神经感觉及运动功能,并可导致小鼠肌肉无力。SNCV变化较为敏感,可作为黏菌素诱发神经毒性的早期诊断指标。     

水芹水浸提液对小球藻生长及抗氧化酶活性的影响

[目的]研究水芹水浸提液对小球藻生长及其抗氧化酶活性的影响。[方法]采用小球藻在不同浓度的水芹水浸提液中纯培养的方法,测定小球藻生长速率、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性、·O2-产生速率及丙二醛（MDA）含量的变化。[结果]10g/L水芹水浸提液处理下,SOD和POD活性逐步上升,至试验结束时都维持在较高的水平,·O2-产生速率和MDA含量与对照间无显著差异;20～50g/L水芹水浸提液处理,藻细胞的SOD、POD活性、·O2-产生速率及MDA含量均呈先升高后降低的趋势,并且有浓度效应。[结论]水芹水浸提液对小球藻具有化感效应。10g/L水芹水浸提液对小球藻的生长具有明显的促进效应,20～50g/L水芹水浸提液对小球藻有明显的克生作用。     

IAA对小球藻生长及叶绿素含量的影响

在室温17-26℃连续光照条件下,研究了植物生长调节物质IAA对小球藻生长及叶绿素含量的影响.结果表明,与对照组相比,0.25-4.0mg/L的I从对小球藻的生长及叶绿素含量都有不同程度的促进作用,其中2.0mg/L的IAA对小球藻的生长及叶绿素含量的促进效果最佳.     

EDTA对黏菌素体外抗菌活性的影响

采用微量肉汤稀释法研究了膜通透性促进剂EDTA对黏菌素体外抗菌活性的影响。结果表明:经PCR扩增,在受试的85株沙门菌和大肠杆菌菌株中,有23株检测到mcr-1基因,但未检出mcr-2～mcr-10阳性菌株; EDTA可增强除天然耐药的奇异变形杆菌和摩氏摩根菌以外的所有菌株(mcr-1阳性菌株、mcr-1阴性菌株和标准株)对黏菌素的敏感性,且增强黏菌素抗菌活性的作用随EDTA浓度的加大而增强;与60、30 mg/L的EDTA联用后,黏菌素对分离菌株的最小抑菌浓度(MICs)均显著降低,且沙门菌和大肠杆菌对黏菌素的耐药率均显著下降。因此,EDTA在≥30 mg/L的浓度下,可有效增强黏菌素对mcr-1阳性和mcr-1阴性菌株的抗菌活性。     

UV-B增强对南极小球藻光合活性和抗氧化酶的影响

[目的]研究极地生物适应环境的生理机制。[方法]人工模拟南极UV-B辐射环境,对南极小球藻进行UV-B适应性锻炼,并以未经UV-B适应性锻炼的南极小球藻为对照,分别测定其叶绿素荧光、光合放氧速率和抗氧化酶活性。[结果]随着UV-B辐射时间的延长,南极小球藻光合放氧速率和叶绿素荧光迅速下降,且锻炼南极小球藻的下降速率小于未锻炼南极小球藻。经UV-B胁迫后,南极小球藻的SOD、POD、CAT活性均随辐射时间的延长先上升后降低,锻炼南极小球藻的上升速率大于未锻炼南极小球藻,而下降速率显著小于未锻炼南极小球藻。[结论]经过UV-B适应性锻炼的南极小球藻可通过调整一系列生理活性指标对UV-B增强产生积极响应,以增强其自身对强辐射环境的适应性。     

复合氨基酸对小球藻的生长、叶绿素a含量及光合放氧量的影响

研究了液体和固体复合氨基酸对蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoides)生长和生理活性的影响。结果表明,两种复合氨基酸对小球藻生长、叶绿素a含量和光合放氧量均有显著促进作用,液体复合氨基酸和固体复合氨基酸对小球藻促生长的最佳浓度分别为40 mg/L和11.12 mg/L。当液体复合氨基酸浓度为40 mg/L,相对生长率(RGR)较对照组增加了81.58%,平均倍增时间(G)缩短了45.08%,叶绿素a含量和光合放氧量比对照组分别增加了(72.25±1.69)%和(38.05±2.58)%;当固体复合氨基酸浓度为11.12 mg/L,相对生长率较对照组增加了17.31%,平均倍增时间缩短了14.48%,叶绿素a含量和光合放氧量比对照组分别增加了(119.03±4.72)%和(34.49±1.98)%。     

亚硒酸钠对蛋白核小球藻生长及抗氧化酶活性的影响

为探究不同质量浓度亚硒酸钠对蛋白核小球藻Chlorella pyrenoidosa生长及抗氧化酶活性的影响,试验设计0、2、4、6、8、10、20、40、60、80、100 mg/L共11个亚硒酸钠处理组,定期监测不同处理组小球藻细胞密度、吸光度值及抗氧化酶活性的变化。结果表明:小球藻初始细胞密度为1×10⁶ cells/mL时,添加2、4 mg/L的亚硒酸钠对蛋白核小球藻细胞生长具有显著促进作用(P<0.05),而6～100 mg/L亚硒酸钠对小球藻细胞生长具有显著抑制作用(P<0.05);试验第7天时,6～10 mg/L亚硒酸钠处理组藻细胞恢复生长,至第13天时藻细胞生长速率与对照组无显著性差异(P>0.05),而20～100 mg/L亚硒酸钠处理组小球藻生长速率显著低于对照组(P<0.05),且试验前7 d为负值,第9天开始恢复为正值;蛋白核小球藻含硒量随亚硒酸钠质量浓度的增加而增加;低质量浓度(2～4 mg/L)的亚硒酸钠能诱导小球藻细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增加(P<0.05),而高质量浓度(20～100 mg/L)的亚硒酸钠则能够诱导藻细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著增加(P<0.05);用40～100 mg/L亚硒酸钠处理蛋白核小球藻时,藻细胞出现三分裂、四分裂及细胞团的现象。研究表明,低质量浓度硒能促进蛋白核小球藻的生长,而高质量浓度硒具有抑制作用,不同抗氧化酶对硒的敏感性不同,小球藻富硒培养时亚硒酸钠的适宜添加质量浓度为2～4 mg/L,且培养时间应控制在一个月内,以免藻体中毒死亡。     

复合氨基酸对小球藻的生长、叶绿素a含量及光合放氧量的影响

研究了液体和固体复合氨基酸对蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoides)生长和生理活性的影响。结果表明,两种复合氨基酸对小球藻生长、叶绿素a含量和光合放氧量均有显著促进作用,液体复合氨基酸和固体复合氨基酸对小球藻促生长的最佳浓度分别为40 mg/L和11.12 mg/L。当液体复合氨基酸浓度为40 mg/L,相对生长率(RGR)较对照组增加了81.58%,平均倍增时间(G)缩短了45.08%,叶绿素a含量和光合放氧量比对照组分别增加了(72.25±1.69)%和(38.05±2.58)%;当固体复合氨基酸浓度为11.12 mg/L,相对生长率较对照组增加了17.31%,平均倍增时间缩短了14.48%,叶绿素a含量和光合放氧量比对照组分别增加了(119.03±4.72)%和(34.49±1.98)%。     

3种有机溶剂对普通小球藻生长特性的影响

[目的]阐明藻类毒理学试验中使用有机溶剂可能对试验对象产生潜在毒性效应。[方法]以普通小球藻为研究对象,研究不同体积分数的3种有机溶剂(二甲基亚砜、乙醇、丙酮)对其生长速率、叶绿素a含量等生长特性的影响。[结果]当二甲基亚砜体积分数为0.01%～0.10%,普通小球藻藻密度与对照组相比无显著差异,当体积分数为0.50%～5.00%时,普通小球藻的生长显著抑制;当乙醇和丙酮体积分数为0.01%～2.00%时,普通小球藻的生长均表现出较明显的促进作用,当体积分数5.00%时,普通小球藻的抑制作用明显。在3种有机溶剂影响下,普通小球藻叶绿素a含量的变化趋势与藻密度、比生长速率表现出较好的一致性。[结论]该试验结果符合生态毒理学中的低促高抑规律,普通小球藻对乙醇和丙酮表现出更强的敏感性,建议在对普通小球藻相关毒理学试验中优先使用二甲基亚砜作为有机溶剂,且最大体积分数(NOEC)为0.10%。     

紫外线诱导大肠杆菌产生对鲎素抗药性菌株的研究

探讨经过紫外线诱变能否筛选出抗鲎素的大肠杆菌突变菌株以及突变菌株对抗生素敏感性的变化.以大肠杆菌JM109和ATCC25922为研究对象,通过紫外线诱变技术对出发菌株进行诱变,以相应的出发菌株作对照,并通过鲎素浓度梯度平板法对大肠杆菌进行初筛后,对初筛到的抗鲎素菌株进行亚抑菌浓度鲎素的连续传代诱导和抗生素对初筛到的抗鲎素菌株进行敏感性测定.结果表明,采用紫外诱变和鲎素浓度梯度筛选的方法,从中筛选到低抗鲎素的大肠杆菌ATCC25922 3株;通过抗生素对此3种低抗鲎素菌株进行敏感性测定,表明抗鲎素菌株对苄星青霉素有显著抗药性,而对盐酸左氧氟沙星仍然敏感.对于大肠杆菌JM109菌株,经过紫外线诱变后,未诱导出抗鲎素菌株.     

鲎素对几种常见基因工程菌的抑杀研究

采用肉汤微量稀释法和MTT法分别测定了鲎素对基因工程菌大肠杆菌BL21、枯草芽孢杆菌WB800、枯草芽孢杆菌BS168、酵母菌GS115、里氏木霉QM9414的MIC(最小抑菌浓度)及其MBC(最小杀菌浓度)值.结果表明,其MIC值分别为10、10、10、20、40 μg/mL,MBC值分别为20、20、20、40、80μg/mL.鲎素对上述5种常见基因工程菌均有不同程度的抑杀作用,考虑到鲎素基因表达量低甚至不表达,很可能是由于鲎素对宿主的抑杀作用,相比于其他基因工程菌,认为丝状真菌里氏木霉QM9414作为鲎素的表达宿主有比较大的潜能.