B超监测供体羊超数排卵的效果

用AMI-900型兽用B超,对经过超排处理的供体羊进行实时监测,主要包括卵巢的发育,卵泡或黄体的数量、大小等,并据此判断超排效果、估测排卵数和胚胎回收数。结果表明,卵巢上卵泡发育的最佳监测时间为超排处理后的第3-4天,黄体发育监测可在手术冲胚前2-3 d进行。13例供体羊的B超监测卵泡数与回收胚胎数基本相符(142/133),说明根据监测卵泡数而预测回收胚胎数是可行的。     

无角道塞特绵羊超数排卵技术研究

采用国内不同厂家生产的促卵泡刺激素(FSH)和加拿大进口的FSH,进行了无角道塞特母羊超排 处理,对不同给药方式、首次超排与重复超排、经产羊与青年羊、春季超排与秋季超排、自然发情与诱导发情及未知 发情周期的超排效果进行了对比研究,同时研究了母羊卵巢黄体退化、有无卵泡及推迟发情对超排效果的影响。结 果表明,加拿大进口FSH的超排效果最好,国产FSH以宁波+中科院激素组合的超排效果较好;重复超排对超排 效果无显著影响;经产羊的超排效果优于青年羊;自然发情母羊的超排效果优于诱导发情母羊和未知发情周期母 羊;黄体退化母羊回收可用胚的数量明显较低;卵巢上有无卵泡对超排效果无影响;推迟发情母羊的超排效果明显 低于正常发情母羊。     

影响山羊重复超排主要因素的研究

研究了间隔情期数、超排次数和前次超排的黄体数及卵泡数对关中奶山羊重复超排效果的影响。结果证明,间隔一个情期进行1～3次重复超排获得的头均可用胚数显著少于对照组(P<0.05);而间隔两个情期进行1～2次重复超排的效果均接近对照组(P>0.05);前次超排有较多黄体和卵泡对间隔一个情期的重复超排均有不利影响。故关中奶山羊的重复超排宜在间隔两个情期后进行。     

影响黑白花母牛超排效果的主要因素分析

4年间超排307头次黑白花母牛的结果表明:①用高纯度的FSH超排供休母牛,所得的可用胚胎的比率高于普通FSH(P<0.05);②用FSH和PMSG+aPMSG超排的成功率和可用胚胎数分别是90.77%、89.29%和5.42、5.57枚(P>0.05);③供体母牛开始超排时黄体对侧卵巢有活性,比静止和有卵泡的黄体数和可用胚胎数高;④A级黄体母牛的超排结果好于B级(P<0.05)和C级黄体(P<0.01);⑤第2、3胎供体母牛比其它胎次的可用胚胎数稍高;⑥在发情周期的第8～14天开始超排,其中第10～12天的卵巢反应最好;⑦重复超排4次,第4次的可用胚胎数比前3次低;⑧不同的年度、季节、产奶量和产后60天以后开始超排的时间对超排结果没有显著影响.     

Experiment on super-ovulation in Xinjiang fine-wool sheep

[目的]提高并稳定新疆细毛羊超数排卵效率,为以生产2～8-细胞期胚胎的转基因研究提供素材.[方法]分别从激素生产厂家、供体年龄、激素处理方案等3个方面探讨新疆细毛羊的超数排卵效果,确定新疆细毛羊超数排卵供体羊的最佳年龄及其有效处理方案.[结果]不同生产厂家的激素对新疆细毛羊黄体数和可用胚胎数均存在极显著影响(P＜0.01):1.5周岁以内的新疆细毛羊超排后,其黄体数(6.17个/只)和可用胚胎数(1.50枚/只)均极显著低于2.0周岁以上的新疆细毛羊(黄体数12.24个/只,可用胚胎数8.30枚/只)(P＜0.01);FSH剂量在150～200 U/只范围内不影响超排效果和胚胎质量( P＞0.05):FSH+PMSG超排处理的新疆细毛羊黄体数(6.05个/只)和可用胚胎数(1.76枚/只)则显著低于FSH+PG超排处理(黄体数17.11个/只,可用胚胎数10.38枚/只)(P＜0.01).[结论]新疆细毛羊超数排卵时宜选用2.0周岁以上的供体羊,FSH剂量控制在150～200 U/只,若能与PG联合使用其超排效果更好,但不宜与PMSG联合使用.     

新疆细毛羊超数排卵效果研究

[目的]提高并稳定新疆细毛羊超数排卵效率,为以生产2~8-细胞期胚胎的转基因研究提供素材.[方法]分别从激素生产厂家、供体年龄、激素处理方案等3个方面探讨新疆细毛羊的超数排卵效果,确定新疆细毛羊超数排卵供体羊的最佳年龄及其有效处理方案.[结果]不同生产厂家的激素对新疆细毛羊黄体数和可用胚胎数均存在极显著影响(P<0.01):1.5周岁以内的新疆细毛羊超排后,其黄体数(6.17个/只)和可用胚胎数(1.50枚/只)均极显著低于2.0周岁以上的新疆细毛羊(黄体数12.24个/只,可用胚胎数8.30枚/只)(P<0.01);FSH剂量在150~200 U/只范围内不影响超排效果和胚胎质量( P>0.05):FSH+PMSG超排处理的新疆细毛羊黄体数(6.05个/只)和可用胚胎数(1.76枚/只)则显著低于FSH+PG超排处理(黄体数17.11个/只,可用胚胎数10.38枚/只)(P<0.01).[结论]新疆细毛羊超数排卵时宜选用2.0周岁以上的供体羊,FSH剂量控制在150~200 U/只,若能与PG联合使用其超排效果更好,但不宜与PMSG联合使用.     

运用B超观察白牦牛超数排卵期卵巢的变化

首次运用兽用B超仪,对12头天祝白牦牛超排处理期的卵巢变化进行了观察.结果表明:在超排处理后出现了不排卵和排卵两种情况,不排卵组卵泡以Ⅱ类卵泡居多,该类卵泡达到一定大小时并未排卵而是闭锁减小;排卵组有1~2个Ⅳ类卵泡排卵.同时发现在超声断层扫描面上无明显黄体的卵巢上闭锁卵泡较多.因此,B超在检查白牦牛超数排卵方面有一定的可行性.     

春季卡拉库尔羊和多浪羊的超数排卵研究

在3月下旬至5月中旬,采用CIDR+FSH+LH+PG方法对12只绵羊(多浪羊和卡拉库尔羊)进行超数排卵.结果表明,卡拉库尔羊的春季同期发情率为100%,平均超排的黄体数为13.67枚,平均可用胚数11.00枚,超数排卵率为88%;多浪羊的春季同期发情率为100%,平均超排的黄体数为14.33枚,平均可用胚数12.67枚,超数排卵率为88.42%.     

牦牛妊娠期卵巢、卵泡及黄体的形态学观测

对87头妊娠母牦牛卵巢及其表面的卵泡、黄体的形态学观测发现,牦牛妊娠后孕侧卵巢大小、质量显著增加(P<0.05),而对侧卵巢则无明显变化(P>0.05).妊娠4个月以后,卵巢逐渐变扁长,以孕侧更为明显.牦牛在妊娠期,卵巢上仍然有规律地出现非排卵卵泡波,但卵泡数比未孕状态下少.在卵巢表面,主要以Ⅰ类卵泡(直径≤5 mm)为主,为3~6个.在孕侧随妊娠的进行Ⅰ类卵泡数呈递增趋势,妊娠1个月为(2.3±1.8)个,妊娠6个月达到(6.6±5.2)个,而空侧数量变化不明显(P>0.05),整个妊娠期其卵泡数保持在5~7个之间.Ⅱ类(5 mm<直径≤10 mm)和Ⅲ类(直径>10 mm)卵泡数很少,妊娠2个月平均数分别为(0.7±0.5)个和(0.3±0.1)个.牦牛妊娠黄体一半以上不突出于卵巢表面,且黄体直径在整个妊娠期基本不变.     

促卵泡素(FSH)对山羊卵巢卵泡群生长发育的影响

试验研究了促卵泡素对山羊卵巢卵泡群生长发育的影响。６只母羊在发情周期的１３～１６ｄ用激素处理,处理前摘取左卵巢,处理后３ｄ摘取右卵巢,组织切片,检测卵泡数。结果显示：当卵母细胞由２层卵泡细胞包围时,开始形成透明带;当达５层以上时,开始形成腔隙。超排和未超排（对照）卵巢上小卵泡数差异不显著（Ｐ＞０．０５）,分别为３７２１±１１２个和３６８５±１５６个;而带有５层以上卵泡细胞的卵泡数差异显著（Ｐ＜０．０５）,分别为１４０±２０．３个和１１０．０±９．１个;卵泡腔形成后的卵泡数差异非常显著（Ｐ＜０．０１）,分别为７５．０±２０．２个和３２．０±１０．１个。带有１～２层卵泡细胞时期的卵泡直径大约３１．６±１．７μｍ,带有３～４层卵泡细胞的卵泡直径大约为５２．３±５．０μｍ,带有５层以上卵泡细胞的卵泡直径为１５１．２±７２．１μｍ,卵泡腔形成后的卵泡直径为０．４～３ｍｍ。     

安哥拉山羊胚胎的手术回收和移植

对３５只安哥拉山羊超排处理，配种后第３天放置阴道海绵栓，第６日由子宫手术回收胚胎。３１只发情配种的供体，共回收胚胎２０４枚，平均每只供体获可用胚４．３±３．９６枚。其中卵巢有功能黄体无大卵泡的６只供体，回收胚胎５１枚，回收率为８７．１５％±１５．９８％，平均每只获可用胚８．１±２．９６枚。卵巢上有大卵泡、或子宫及输卵管有病变者可使回收率和可用胚胎数严重降低。由于配种后放置了阴道栓，８只有黄体退化倾向的供体，平均每只仍获得可用胚４．６枚。移植桑椹胚和囊胚的５１只受体，３６只妊娠，妊娠率为７０．６％．移植４～１６细胞胚胎的对照组，妊娠率为５１．６％．本研究还证明，移植单胚较移植双胚的胚胎成羔率提高２８％以上     

山羊卵巢颗粒细胞差异表达基因消减文库的建立

为了从单卵泡水平建立非闭锁大小卵泡颗粒细胞基因表达的消减文库,选择繁殖性能正常、空怀高繁殖力黄淮山羊2只,以氯前列烯醇处理40h后取卵巢,计数卵泡并测量卵泡直径,钝性分离采集卵泡颗粒细胞,置于液氮内保存,取样后的卵泡部分组织采用原位缺口末端标记法(TUNEL)进行闭锁鉴定。选择直径6和4mm非闭锁卵泡,提取颗粒细胞mRNA,扩增cDNA,监测抑制消减杂交及其文库构建的试验环节。结果表明:消减文库的阳性克隆测序成功率100%,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,发现12个全新表达序列标签;应用RT-PCR对已知序列的抑制素βA亚基基因(INHBA)和谷胱甘肽S-转移酶A1基因(GSTA1)进行表达水平测定,证实了颗粒细胞2个基因mRNA的表达模式与差异显示的结果相同。表明消减文库构建成功。     

发情间期注射PMSG对猪卵泡发育及颗粒细胞凋亡影响的研究

为探讨孕马血清促性腺激素 (PMSG)对猪卵泡发育和闭锁及颗粒细胞凋亡的影响 ,实验采用性成熟肥育母猪为实验材料 ,对在情期第 11d(发情当日为 0 d)注射 PMSG后 2 4 ,4 8,72和 96 h的猪卵巢表面各类卵泡数量、颗粒细胞凋亡比例以及外周血浆中类固醇激素浓度等进行了研究。结果表明 ,注射 PMSG后 2 4 h卵巢表面卵泡总数、小卵泡 (直径 <3mm)数和中等卵泡 (直径 3～ 5 m m)数分别为 :5 9,32和 2 5 .5个 /卵巢 ,明显多于同期对照组 (情期第 12 d)猪的数量 ;注射 PMSG72和 96 h卵巢表面大卵泡 (直径≥ 5 m m)数量分别为 7和 6个 /卵巢 ,明显多于对照组 (情期第 14和第 15 d) ,而此时卵汇总数却明显低于对照组。大卵泡颗粒细胞的凋亡比例在注射 PMSG后与对照组相比无显著差异 ,而小卵泡和中等卵泡的颗粒细胞的凋亡比例在注射 PMSG后 2 4 h(6 .4 %和 7.8% )显著 (P<0 .0 5 )降低 ;中等卵泡颗粒细胞凋亡比例到 PMSG后 72 h回升至与对照组无显著差异 ,小卵泡颗粒细胞凋亡比例于 PMSG后 96 h回升至与对照组无显著差异。血清中雌二醇浓度在 PMSG注射后明显升高 ,在 PMSG注射后72 h时达最高值 (72 .3pg· m L- 1 ) ,显著高于对照组 (10 .8pg· m L- 1 )。孕酮的浓度在 PMSG注射后无明显变化。以上结果表明 ,在体内条     

黔北麻羊超数排卵效果分析

[目的]探索适宜的地方山羊品种超数排卵方案。[方法]以黔北麻羊为试验动物,比较不同品牌促卵泡素(FSH)、相同品牌不同剂量FSH的超数排卵效果。[结果]41只黔北麻羊的平均黄体数14.59个,平均有效胚数8.39枚。日本产FSH 20.0 AU/只剂量组平均黄体数13.90个,平均有效胚数10.21枚;加拿大产FSH 160 mg/只剂量组平均黄体数14.00个,平均有效胚数7.33枚。[结论]日本产FSH的适宜剂量为20.0 AU/只,加拿大产FSH的适宜剂量为160 mg/只,日本产FSH的超数排卵效果优于加拿大产FSH,但差异不显著。     

雏鸵鸟卵巢的形态学研究

为了解雏鸵鸟卵巢组织结构的形态学特点,采用解剖学及组织化学和透射电镜技术对90d非洲雏鸵鸟卵巢组织结构进行研究.结果表明:非洲雏鸵鸟卵巢内主要由原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡组成,未出现成熟卵泡,各级卵泡卵母细胞的胞核大多为圆形,内有异染色质颗粒,核孔较明显,卵母细胞的胞质内有卵黄颗粒,胞质内含粗面内质网、线粒体、中心粒等细胞器;次级卵泡有一些特殊的超微结构,皮质颗粒出现在次级卵泡的卵母细胞内,并且主要位于靠近核周的胞质内,次级卵泡的卵黄膜较明显,并且形成放射带.另外,雏鸵鸟卵巢内网、连接网和外网上皮细胞的嗜碱性依次增强.结果提示,雏鸵鸟卵巢内次级卵泡的颗粒细胞的胞质内细胞器比初级卵泡的更丰富,尤其是具管状嵴的线粒体数量较多.雏鸵鸟卵巢内有卵巢网存在.     

促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛血清生殖激素的影响

【目的】研究促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛雌二醇（E2）、促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）和孕酮（P4）4种生殖激素的影响,探讨促孕散治疗奶牛持久黄体和卵巢静止的作用机理。【方法】用促孕散治疗奶牛持久黄体和卵巢静止,统计发情率,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测奶牛血清中的E2、FSH、LH和P4 4种生殖激素,并与正常奶牛对比。【结果】促孕散治疗持久黄体牛发情有效率为91.67%,治疗卵巢静止牛发情有效率为88.89%。促孕散处理前,持久黄体P4水平极显著高于正常组（P＜0.01）,卵巢静止P4极显著低于正常组（P＜0.01）,而两种病型在处理前E2、FSH、LH水平与正常组差异不显著（P＞0.05）。持久黄体患牛在促孕散处理后血清中E2和FSH水平不断升高,与正常组比较差异不显著（P＞0.05）,LH水平在促孕散处理后也逐渐上升,与正常组同时达到峰值,其变化规律与正常组相似,P4水平逐渐降低,与正常组水平差异不显著（P＞0.05）。卵巢静止组在促孕散处理后血清中E2、FSH和LH水平均升高,其变化规律与正常组相似,P4水平出现先升高后降低的变化,变化规律与正常组相似,差异不显著（P＞0.05）。【结论】促孕散对持久黄体和卵巢静止奶牛血清生殖激素具有显著调节和诱导发情的作用。     

高温诱导蛋鸡氧化损伤及对卵泡发育的影响

【目的】研究高温诱导蛋鸡氧化损伤及对卵泡发育的影响,探讨环境高温抑制蛋鸡卵泡发育、降低产蛋量的机制。【方法】试验分两部分进行：试验一,将180只27周龄的海兰褐蛋鸡随机分为3个处理组,分别饲养于人工环境控制舱内,3个处理组分别为常温组（23℃,饲喂基础日粮）、日循环高温组（28—35—28℃,饲喂基础日粮）和高温补充VE组（28—35—28℃,饲喂基础日粮+250 IU•kg-1 VE）,试验期14 d;试验二,分离蛋鸡F1和F2卵泡颗粒层并制备颗粒细胞悬浮液,将颗粒细胞分别在39或44℃下培养。【结果】试验一结果显示,日循环高温显著抑制蛋鸡卵泡发育,表现为产蛋数量下降（P＜0.05）、卵巢重量降低（P＜0.05）、大卵泡数量减少（P＜0.05）,同时颗粒细胞层细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶（P450scc）mRNA的表达量以及孕酮（P4）分泌量均显著（P＜0.05）减少;日循环高温还诱导蛋鸡氧化损伤,表现为蛋鸡血浆、肝脏和卵黄中丙二醛（MDA）水平上升（P＜0.05）;高温环境下补充250 IU•kg-1 VE,显著降低蛋鸡血浆、肝脏和卵黄中MDA水平（P＜0.05）,同时显著缓解高温对卵泡发育的抑制（P＜0.05）。试验二结果显示,提高培养温度可显著增加颗粒细胞中活性氧（ROS）的产生量（P＜0.05）,同时抑制颗粒细胞的增殖活性（P＜0.05）;培养液中添加VE预处理24 h可显著缓解高温的影响,表现为细胞ROS降低（P＜0.05）,细胞增殖活性增加（P＜0.05）。【结论】高温增加蛋鸡颗粒细胞ROS的产生量,诱导蛋鸡机体（肝脏,血浆和卵黄）氧化损伤,同时影响颗粒细胞增殖及分泌孕酮的能力,抑制蛋鸡卵泡发育;补充VE可以缓解高温诱导的蛋鸡氧化损伤,并缓解高温对卵泡发育的抑制。表明高温抑制蛋鸡卵泡发育与诱导蛋鸡氧化损伤有关。     

云岭黑山羊FSH基因表达量与其产羔数相关性研究*

 本文对云岭黑山羊产羔性状的分子基础进行了研究,分析了云岭黑山羊FSH基因表达量与其产羔数性状的相关性。采用绝对荧光定量PCR方法对两个品种山羊卵巢组织中FSH基因的表达量、用放射免疫技术对血液中FSH的水平进行了测定。结果表明,云岭黑山羊FSH表达水平显著地低于波尔山羊(P<0.05),云岭黑山羊血清FSH浓度显著低于波尔山羊（P<0.05）,且云岭黑山羊FSH表达水平与产羔数之间的相关系数为0.9540,存在显著正相关（P<0.05）。由此可见,和波尔山羊比较,云岭黑山羊FSH基因低表达量、血浆中FSH 低浓度是导致低产羔数的一个可能原因。     

安哥拉山羊改良陕北黑山羊后代皮肤毛囊研究

于１９９４年４月份，采集安哥拉山羊、陕北黑山羊及其级进杂交后代的皮样，制作皮肤切片，进行皮肤及毛囊结构特征的观察研究。结果表明：随着级进代数的增加，杂交后代的毛囊密度、形态及结构与安哥拉山羊逐渐接近，到Ｆ３与安哥拉山羊基本一致，且具有较强的生长马海毛纤维的机能。培育新品种可以从Ｆ３开始横交固定。