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哺乳动物的精子和卵母细胞由减数分裂产生,其遗传物质减半,功能高度特化。精卵结合后,染色体数恢复,获得发育的全能性,重启有丝分裂,开始个体的生长。受精时,精子引起卵母细胞内的钙离子(Ca2+)以一定的频率波动,称为钙振荡。Ca2+周期性的变化,驱动下游蛋白的活动,完成卵母细胞的激活。作者主要介绍了受精时钙振荡启动的机制,以及其持续时间、振幅、频率对哺乳动物卵母细胞正常受精的影响;同时,讨论了Ca2+在卵母细胞内外运输的通道和钙振荡发生和维持的机制;分析了钙振荡对卵母细胞的细胞周期恢复和母源mRNA翻译的调控作用和机制。目前,关于卵母细胞激活事件信号通路的研究已经取得了很大的进展,但每个单独事件所涉及的分子机制尚未完全确定。本综述探讨了哺乳动物受精时卵母细胞内钙信号研究的现状和未来研究的方向,为保障人类生殖健康和提高畜牧繁殖效率提供参考。 相似文献
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单精注射法生产转GFP基因猪胚胎的研究 总被引:1,自引:1,他引:1
卵胞质内单精子注射(ICSI)的出现为治疗人类男性不育提供了新的途径。作为一种家畜胚胎工程新技术,ICSI可以解决猪的多精子受精问题。本研究用冷冻/解冻的猪精子与GFP基因孵育后对猪IVM卵母细胞进行ICSI,通过对猪ICSI卵母细胞发育能力和基因表达效率的分析,初步研究以精子为载体的转基因与卵细胞质内单精注射相结合的技术(SMGT-ICSI)生产转基因猪胚胎的技术路线的可行性。用GFP基因转染的精子注射后化学激活的ICSI卵母细胞基因表达率显著高于电激活处理的ICSI卵母细胞的基因表达率。用精子头部注射的猪卵母细胞和用完整精子注射的猪卵母细胞总基因表达效率无显著差异(P>0.05)。结果表明,用冷冻/解冻后的猪精子或精子头部与外源DNA孵育后通过ICSI方法生产转基因胚胎是可行的。 相似文献
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普通光学显微镜检测精液存在主观性、可变性、分析的精子数量少和与受精能力相关性差等缺点。近些年来,一些新的技术用于检测精子,可以更加细致地评价精子的特性。荧光染色技术可以用于评价精子的特殊性质和功能,包括质膜完整性、获能状态和顶体状态。联合使用荧光染料,可以同时检测精子几种功能特点。流式细胞仪可以在短时间内分析大量的经荧光标记的精子。计算机辅助精子分析系统可以提供精子活力和形态学上客观的和详细的信息。通过检测精子与透明带或者输卵管上皮附着、精子穿透卵母细胞,可以获得精子受精能力的信息。未来的研究方向仍是寻找有效的预测精子受精能力的参数。 相似文献
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这篇论文论述了牛成熟卵母细胞体外受精的研究进展,主要从精子的制备方法,获能液的组成、精子获能的判定、受精方,法以及卵母细胞受精与否的评定5个方面加以阐述,并展望了体外受精的研究方向。 相似文献
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家畜体外受精技术研究新进展 总被引:2,自引:0,他引:2
体外受精技术是由卵母细胞成熟、精子获能、受精、受精卵体外培养、胚胎移植等程序组成的完整系统。笔者较详细地综述了该技术近年来的研究现状、进展,并对其发展前景进行了探讨。 相似文献
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屠宰母牛卵巢卵母细胞体外受精与发育的研究 总被引:13,自引:1,他引:12
将从屠宰母牛卵巢采得的卵母细胞用含有LH或hCG的M199培养24~26小时,然后用经钙离子载体Ionophore A23187诱导获能的牛新鲜或冷冻精子进行授精处理。授精6~7小时后再用含有乳酸钠和EDTA的M199培养至48~60小时后观察受精及受精卵的发育情况。结果表明,卵子的受精率及受精卵的发育率与卵母细胞成熟用培养基、授精用精子(新鲜或冷冻)以及供卵牛的品种均有关系。将用含有hCG的M199培养成熟的卵子,以获能处理过的新鲜精子授精后,其受精率和受精卵子中单精子受精并发育为2~8细胞期胚的比率在蒙古牛为91.4%(265/200)和19.6%(52/265),在黑白花奶牛为69.7%(62/89)和4.8%(3/62)。 相似文献
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精子不同处理和胰岛素不同浓度对猪卵母细胞胞质内单精子显微受精的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
探讨了分别使用新鲜、冷冻和超声波断尾精子以及在胚胎培养液中分别添加不同浓度胰岛素对猪卵母细胞胞质内单精子显微受精(ICSI)胚胎早期发育的影响.结果:(1)使用冷冻解冻精子与新鲜精子相比对猪卵母细胞ICSI后的卵裂率和囊胚率均无显著影响(P>0.05);2)精子断尾与否对猪卵母细胞ICSI后的分裂率和囊胚率没有显著影响(P>0.05);3)在胚胎培养液中添加5 mg/L胰岛素与对照组相比可显著提高猪ICSI胚胎的囊胚发育率(18.22% vs 3.60%,P<0.05). 相似文献
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论述牛卵母细胞体外成熟和体外受精的最新研究进展,包括卵丘卵母细胞复合体、卵母细胞的体内、体外成熟,以及体内、体外的异常成熟和卵母细胞的体外成熟方法,无蛋白质、无血清系统的限定性培养液的研究进展,卵母细胞体外成熟状态与标志的某些理论上的突破;体外受精中精子供体的选择、精子活力和正常形态的选择、冷冻解冻精液的体外获能、精子的体外受精力,以及体外的异常受精;还论述了牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术在家畜育种和胚胎克隆等方面的应用前景 相似文献
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Recent studies in mice suggest that androgens are important for normal follicle development. However, there have been few reports concerning the action of androgens in the growth of oocytes from large animals. The purpose of this study was to determine the roles of androgens in bovine oocyte growth in vitro. Oocyte-granulosa cell complexes (OGCs) collected from 0.4−0.7 mm early antral follicles were cultured for 14 days with 17β-estradiol (E2) and a non-aromatizable androgen, dihydrotestosterone (DHT). We also examined the ability of an androgen receptor (AR) inhibitor, hydroxyflutamide, to antagonize the effect of androgens on the oocytes. During growth culture, the OGC structures collapsed in the medium with DHT alone, while in the presence of E2, the OGC structures were maintained. In the medium with both androgens and E2, the mean diameter of oocytes was increased from 95 μm to around 120 μm, larger than those grown with
E2 alone (115 μm). Also in the maturation culture, oocytes grown with androgens (A4 or DHT) and E2 showed higher percentages of metaphase II oocytes (63% or 69%, respectively) than those grown with E2 alone (32%). Moreover, these maturation rates were decreased by hydroxyflutamide in a dose-dependent manner. Immunostaining showed that ARs were expressed in oocytes and granulosa cells in early antral follicles, and the nuclei of granulosa cells showed intense AR expression. In conclusion, although E2 supports the OGC structure, additional androgens promote oocyte growth and their acquisition of meiotic competence via AR during in vitro growth culture. 相似文献
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Leah M. HOOPER Rebecca R. PAYTON Louisa A. RISPOLI Arnold M. SAXTON J. Lannett EDWARDS 《The Journal of reproduction and development》2015,61(5):459-464
Two studies were conducted with the overarching goal of determining the extent to which lipolytic changes relate to germinal vesicle breakdown (GVBD) in bovine oocytes matured under thermoneutral or hyperthermic conditions. To this end, cumulus-oocyte complexes underwent in vitro maturation for 0, 2, 4, 6 or 24 h at 38.5 (first study) or 38.5 and 41.0 C (second study; heat stress applied up through first 12 h only, then shifted to 38.5 C). Independent of maturation temperature, triglyceride and phospholipid content decreased markedly by 2 h of in vitro maturation (hIVM; P < 0.0005). Content was lowest at 24 hIVM with no detectable impact of heat stress when exposure occurred during first 12 hIVM. Germinal vesicle breakdown occurred earlier in oocytes experiencing heat stress with effects observed as soon as 4 hIVM (P < 0.0001). Germinal vesicle breakdown was associated with lipolytic changes (R2 = 0.2123 and P = 0.0030 for
triglyceride content; R2 = 0.2243 and P = 0.0026 for phospholipid content). ATP content at 24 hIVM was higher in oocytes experiencing heat stress (P = 0.0082). In summary, GVBD occurs sooner in heat-stressed oocytes. Although marked decreases in triglyceride and phospholipid content were noted as early as 2 hIVM and preceded GVBD, lipolytic changes such as these are not likely serving as an initial driver of GVBD in heat-stressed oocytes because changes occurred similarly in oocytes matured at thermoneutral conditions. 相似文献
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精子不同处理方法对牛卵泡卵母细胞体外受精的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
本研究探讨了不同精子处理方法对南阳黄牛卵泡卵母细胞体外受精效果的影响。试验一,研究三种不同的精子洗涤方法对卵母细胞体外受精的影响,结果表明:上浮法和Percoll密度梯度离心法所得的卵裂率(58.3%,60.6%)均显著高于直接离心洗涤法(47.2%,P<0.05);上浮法所得囊胚发育率(25.9%)显著高于直接离心法(13.3%,P<0.05);上浮法和Percoll法相比,卵裂率和囊胚率均无显著差异。试验二,研究三种受精液对卵母细胞体外受精的影响,结果表明:BO液组和mTyrode’s液组所得的卵裂率(60.1%,59.3%)均显著高于TCM199液组(48.5%,P<0.05);但三组囊胚率(17.8%、19.6%、14.1%)差异不显著(P>0.05)。 相似文献
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牛体外成熟卵母细胞冷冻保存的研究 总被引:10,自引:1,他引:9
本实验探讨了用6各不同方法冷冻保存的牛体外成熟卵母细胞体受精后的发育潜力及其冷冻损伤,尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞多数(86.1%)形态正常,但体外受精后的受精率(30.0%)和卵裂率(7.4%)明显低于对照组(69.0%和52.9%)。卵裂后继续发育的能力严重受损,在6种冷冻方法中,1.6M丙二醇分步平衡、程序冷冻效果最好,受精率和卵裂率分别达36.4%和13.5%,冷冻后卵母细胞发育潜力下降 相似文献
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作为胚胎生物工程技术研究的基础之一的牛卵母细胞体外成熟培养技术自上世纪30年代起至今,许多科学研究人员在牛卵母细胞体外生长、发育领域做了大量工作,对牛卵母细胞培养条件进行了广泛而深入地研究,并取得了较大的进展,目前牛卵母细胞体外成熟培养技术体系已建立,但在卵母细胞成熟机理、成熟调控方面尚存在许多尚未阐明的问题和一些亟待解决的问题。本文从卵母细胞的来源、卵母细胞体外培养条件、培养液的完善及卵母细胞成熟判定方法等方面详尽介绍了当前牛卵母细胞体外培养技术的研究进展。 相似文献
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山羊超数排卵处理后排卵时间的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
本试验以江苏地方山羊为材料,经FSH超数排卵后,在发情后不同时间屠宰母山羊,并冲洗输卵管获取卵子。试验中发现山羊的排卵时间为发情开始后18~20小时,排卵时部分卵子尚未完成第1次成熟分裂。 相似文献