84K杨繁育技术

84K杨是韩国用银白杨与腺毛杨杂交选育的一个白杨杂种无性系。它原是韩国低山造林的主栽品种，1984年引入中国，K是韩国英文名称（Korea）的第1个字母，故起名84K杨。中国林科院引入84K杨后，由陕西省林科院刘玉媛等研究员主持了十几年的引种试验，于2000年8月通过了林木良种审定委员会审定。184K杨扦插育苗1.1苗圃地的选择与整地育苗地尽可能选择地势平坦、肥沃、深厚的中性壤质或沙壤质土壤，光照充足，排水良好，灌溉方便的地方。整地前，每公顷施入腐熟农家肥8万kg，磷酸二铵450kg，尿素450kg，并对育苗地进行全面深翻，深翻后，每公…     

提高84K杨扦插成活率的几点关键措施

84K杨是韩国选育的一个白杨派杂种无性系，该品种树形优美，树干光滑，抗性强，适应性广，不飞絮。既是优良的造林树种，又是优美的城市绿化树种。由于84K杨生根较慢较难，先发芽后生根，在苗木生产上扦插成活率不高。要提高苗木成活率必须掌握以下几点技术措施。     

84K杨特性及其嫩枝扦插繁殖技术

作为新一代白杨派杂种无性系,84K杨具有生长快、抗性强、树形美、分布广等突出特性。针对其硬枝扦插生根困难等问题,开展了嫩枝扦插扩繁试验,收到了满意效果。文章就84K杨特性及其嫩枝扦插繁殖技术作以总结,旨在为发展好、推广好、利用好84K杨提供帮助。     

84K杨特性及嫩枝扦插育苗技术

作为新一代白杨派杂种无性系,84K杨具有生长快、抗性强、树形美、分布广等突出特性。针对其硬枝扦插生根困难等问题,开展了嫩枝扦插扩繁试验,收到了满意效果。对84K杨特性及其嫩枝扦插繁殖技术作一总结,旨在为发展好、推广好、利用好84K杨提供帮助。     

84K杨硬枝插条育苗技术的研究

84K毛白杨是较难生根的树种，为了满足当前造林绿化的需要，为林业生产探索出一种简便易行的硬枝插条技术，加快84K毛白杨的繁育速度，进行了硬枝插条育苗试验。试验获得了成功。硬枝插穗采用水浸加ABT生根粉处理的扦插成活率达96％。该育苗技术可以在生产中推广应用。     

84K杨扦插成活率低的原因及对策

20 0 1年春季 ,84 K杨销售达到了历史上的高峰 ,价格从开始的每株 0 .8元上涨到了1 8元 ,许多育苗户争相采购 ,买苗后 ,由于种种原因 (时间紧或为节省材料 ) ,经过简单处理后 ,便扦插到地里 ,最后形成大面积死苗、缺苗 ,造成了巨大的经济损失。现对 84 K杨扦插成活率低的原因 ,总结如下 :1　由 84 K杨本身的遗传性决定84 K杨为白杨派的银腺杨 (银白杨×腺毛杨 ) ,白杨派的生理特性决定了用普通方法处理其插穗 ,肯定收不到象黑杨派及青杨派的理想成活效果。2　 84 K杨插穗长度普遍不够许多育苗户将插穗剪成 1 5cm左右 ,而且认为其生根与否 …     

银腺杨转Cry I Ac和API双价抗虫基因的研究

在建立以银腺杨（84K）叶片为外植体的再生系统基础上，通过农杆菌介导法把CryⅠ4c和API双价抗虫基因导人银腺杨（84K）基因组中。转化杨树叶片，在含有卡那霉素的培养基上诱导不定芽和诱导生根，获得了400株卡那霉素抗性转化再生植株。抗性植株经PCR检测，有70株呈阳性。通过Southern杂交和ELISA检测进一步证明CryⅠ4c和API双价抗虫基因已整合到银腺杨（84K）基因组中，拷贝数1～2个，并得到了表达。转化植株用杨扇舟蛾幼虫进行饲虫试验，结果表明昆虫幼虫的死亡率高达60．0％～80．0％。同时，存活幼虫的生长发育也受到了明显抑制。本研究结果为杨树抗虫育种提供了新的种质资源。     

不同氮素供给水平对84K杨幼苗碳氮代谢的影响

[目的]解析不同氮素供给水平下杨树幼苗的生长与碳氮代谢特征,对提高木材产量和品质以及科学制定人工林养分管理策略具有重要意义。[方法]分别以高氮、正常氮和低氮供给处理84K杨(Populus alba×P.glandulosa),分析其生长特征与碳氮代谢变化特征。[结果]高氮处理增加了净光合速率、根中的蔗糖含量以及叶中的淀粉含量和生物量,促进84K杨的碳代谢;高氮处理促进了84K杨根中NH_4~+和NO_3~-吸收和积累,提高了谷氨酸合成酶的活性,增加了大多数氨基酸含量以及总氮含量,促进了84K杨的氮代谢。低氮处理降低了净光合速率、叶中的大多数可溶性糖含量和淀粉含量,抑制84K杨的碳代谢;低氮处理会降低植物体内NH_4~+、NO_3~-含量,降低根中的硝酸还原酶(NR)的活性,降低氨基酸含量以及总氮含量,抑制84K杨的氮代谢。[结论]这些结果表明84K杨中的碳代谢与氮代谢响应环境中的氮素的盈亏变化表现出很高的一致性,即外界环境中氮素充足时,碳代谢随着氮代谢的增加而增加;而外界环境中氮素亏缺时,碳代谢随着氮代谢的降低而降低。     

84K杨扦插育苗技术

84K杨是一个白杨派杂交品种，树干端直，树形美观，寿命长，材质好，雄性，不飞絮，生长迅速，无性繁殖相对容易，是营造防护林、用材林和城乡绿化的一个优良树种。     

毛白杨PtoWOX11/12a对杨树扦插苗生长发育的影响

【目的】WOX转录因子家族是一类植物特有的转录因子家族,在植物胚胎建成、干细胞分裂和分化的维持以及器官的形成过程中发挥重要调控作用。本研究分析毛白杨Pto WOX11/12a基因对转基因84K杨叶形、茎等生长发育的影响,分析毛白杨不定根诱导过程中及过表达和抑制表达Pto WOX11/12a转基因84K杨中Pto WOX11/12a基因、生长素合成基因YUCCA1和YUCCA8的表达模式,为深入研究WOX基因对植物生长发育的调控机制提供参考。【方法】对在温室生长1~3个月的过表达和抑制表达Pto WOX11/12a转基因以及非转基因84K杨(对照)的叶形、株高和地径进行比较;通过组织切片对转基因和非转基因84K杨的第5、9和13节间的解剖学特征进行分析,并对各节间的形成层和木质部宽度进行比较;利用实时荧光定量PCR(q PCR)技术,分析Pto WOX11/12a、生长素合成基因YUCCA1和YUCCA8在毛白杨不定根产生过程中及在过表达和抑制表达Pto WOX11/12a转基因84K杨中的表达模式。【结果】在叶形上,过表达Pto WOX11/12a转基因84K杨叶片长度与非转基因84K杨(对照)没有显著差异,但是宽度显著大于对照;抑制表达Pto WOX11/12a转基因84K杨的叶长和叶宽都明显小于对照,且叶边缘呈现锯齿状缺刻。在植株的株高和地径方面,过表达和抑制表达Pto WOX11/12a转基因84K杨的株高和地径都明显低于对照,且存在显著差异;茎解剖分析发现,过表达Pto WOX11/12a转基因84K杨木质部宽度小于对照,形成层细胞层数多,而抑制表达Pto WOX11/12a转基因84K杨木质部宽度同样小于对照,但与过表达植株相比,木质部宽度相对变大,形成层细胞层数变少。q PCR结果显示Pto WOX11/12a基因在毛白杨不定根产生过程中被诱导并持续表达,而生长素合成基因YUCCA1和YUCCA8在诱导培养3天后表达量才迅速增加,但在过表达Pto WOX11/12a转基因植株中表达量升高,在抑制表达植株中表达量降低。【结论】Pto WOX11/12a基因的过表达或者抑制表达都影响了转基因84K杨叶的发育、茎的高生长和径向生长(次生木质部发育);Pto WOX11/12a基因在杨树不定根形成和生长过程中发挥作用涉及到生长素合成基因YUCCA1和YUCCA8的参与。在生根过程中,Pto WOX11/12a基因和生长素合成基因YUCCA1及YUCCA8在表达时间上存在时间间隔。高水平的Pto WOX11/12a抑制了生长素合成相关基因的表达,导致过表达Pto WOX11/12a转基因84K杨由于更容易形成分生组织,促进了根原基的形成,产生比较多的不定根。在不定根生长过程中,YUCCA1及YUCCA8基因上调表达,可促进生长素合成和根部分生组织细胞的分裂;在茎中,二者上调表达促使过表达Pto WOX11/12a转基因84K杨形成层活动的增强,继而影响木质部的分化,木质部变窄。     

84K杨嫩枝插条育苗快繁技术

84K毛白杨较难生根，硬枝插条育苗1年只能繁育1批苗木，而且需要的种条多。为了提高苗木的繁育速度和产量，适应当前造林绿化的需要，在弥雾条件下进行嫩枝插条育苗获得了成功，并生产了大量苗木。插条生根平均成活率达91．3％，移植平均成活率达87．5％，平均保存率达86．6％。每15～20天即可繁育l批苗木，1年可以繁育6～7批苗木。并总结出快速繁育84K毛白杨的嫩枝插条育苗技术。     

杨树微管功能研究植物表达载体构建及验证

[目的]分别构建84K杨的微管蛋白TUA5和TUB16与红色荧光蛋白mCherry融合的植物过表达载体,瞬时表达验证载体在植物体内表达后的荧光信号,为研究杨树微管功能奠定基础。[方法]以毛果杨微管蛋白TUA5和TUB16的基因序列为模板,设计84K杨的皿5和7TZB76基因的引物,提取野生型84K杨的RNA并反转录成cDNA,同源克隆得到84KTUA5和84KTUB16基因,分别连接在pCAMBIA 1300载体mCh-ep荧光标签的N,端和C端,转化到大肠杆菌TOP10感受态细胞中,通过菌落PCR和测序鉴定获得阳性单克隆,并通过电击法将重组质粒转化到农杆菌GV3101中,瞬时转化烟草后进行荧光观察。[结果]克隆得到了84KTUA5和84KTUB16基因,成功与pCAMBIA 1300-mCherry载体连接,烟草瞬时表达荧光观察结果显示:仅目的基因与mCherry标签C,端相连的融合蛋白能够成功表达,且荧光明显。[结论]成功构建了84K杨皿5和TUB16基因与pCAMBIA 1300-mCherry的融合表达载体,为进一步研究杨树微管功能提供了背景材料。     

4个杨树无性系木质部导管结构与栓塞脆弱性的关系

以杨属84K、I-101及其杂交子代02-8-21、02-9-22为研究对象,采用Cochard cavitron离心机法测定木质部栓塞脆弱性(P50),利用染色法、硅胶注射法等测定每个无性系木质部导管的直径、长度、导管壁上纹孔膜面积,探究木质部导管结构与栓塞脆弱性的关系,以期建立杨树无性系的木质部结构指标体系.结果表明:4个无性系枝条的栓塞脆弱性为02-8-21＞Ⅰ-101＞ 02-9-22＞ 84K,子代02-9-22比02-8-21抗栓塞.4个无性系的导管直径为02-8-21 ＞02-9-22＞ 84K＞ Ⅰ-101,导管长度为02-9-22＞ 02-8-21＞Ⅰ-101＞ 84K,纹孔膜面积为02-8-21＞02-9-22＞Ⅰ-101＞ 84K.回归分析表明随着杨树无性系枝条导管直径和每个导管上纹孔面积的增大,其栓塞脆弱性也随之增大,显示出较强的正相关(R2 ＞0.7),导管长度与栓塞脆弱性显示出较弱的相关性(R2 =0.019).导管直径大小对栓塞脆弱性起决定性作用.     

84K杨扦插育苗技术要点

84K杨是中国林科院 1 984年从南朝鲜引进的一个优良无性系白杨派品种 ,因其生长快、材质好、扦插成活率高、抗寒、耐旱、能在 1 5°以下的坡地上正常生长而深受人们的喜爱。 84K杨是白杨派的一个品种 ,因此 ,扦插繁殖比黑杨派、青杨派类杨树成活率低 ,如果繁殖技术没有掌握好 ,可能造成极大的损失。 1 999年宁夏、甘肃等地从我院引种了84K杨树 ,因为繁殖方法不当致使成活率只有 2 0 %～ 30 %。为了推广这个树种 ,加快西部林业建设的步伐 ,现将繁殖技术要点简要介绍如下。1　苗圃地的选择苗圃地要选择肥沃、深厚且前茬为农作物的中性沙壤土…     

84K杨嫩枝扦插技术

84K杨产生于韩国，它是银白杨与腺毛杨的杂交种。自 1984年由中国林科院引进后，由陕西省农林科学院负责作区域性试验。 16年来在“三北”地区，特别是我国大西北的试种，均表现良好。它与其他杨树有着不可比拟的优良特性：生长快（年生长 4米左右，直径 1． 5－ 2． 0厘米），树皮青灰色，干形通直，材性好不易风折，优于三倍体毛白杨，雄性无性系不扬絮，抗逆性强，耐旱，是城市绿化的好树种。 该树种由于是白杨派的杂交种，种条硬枝扦插，其生根成活率较低，加上冬贮和长途运输的失水，更增加了成活难度。山东省邹城市平阳寺镇横河大队…     

84K杨育苗技术要点

种条处理84K杨同毛白杨均属于白杨派，它较毛白杨易生根，不抗病，特别是在种条处理不当、浇水不及时、育苗期间遇到连续高温、干旱的情况下，很容易感染腐烂病，即使是幼苗达到25~30厘米高，照样会感染腐烂病而死亡。因此，种条必须经过以下4种方法处理为宜。①.种条沙藏。秋冬季在上冻前将种条剪下后，选择地势较高的背风向阳处，挖深1米，宽1米的长方形沟，将种条平放在沟里，一层种条一层湿沙，最上层覆30厘米沙土，并将覆土用水浇透，但不宜浇水过多，防止种条腐烂，对种条及时进行沙藏。②种条剪裁。在育苗前将种条剪成15厘米左右的…     

解放CA3165K2E型汽车在运材中的应用

将解放CA3165K2E型长头柴油自卸汽车底盘用于林业运材汽车底盘，对其车架、板簧和后桥等总成采用的金属材料和制造工艺进行了分析，并对一年的生产运输成本进行统计，结果表明，解放CA3165K2E型汽车技术先进、质量可靠、坚固耐用，性价比高、经济性好，能够给林业木材运输企业带来良好的经济效益。     

银腺杨转Cry I Ac和API双价抗虫基因的研究

在建立以银腺杨(84K)叶片为外植体的再生系统基础上,通过农杆菌介导法把Cry I Ac和API双价抗虫基因导入银腺杨(84K)基因组中.转化杨树叶片,在含有卡那霉素的培养基上诱导不定芽和诱导生根,获得了400株卡那霉素抗性转化再生植株.抗性植株经PCR检测,有70株呈阳性.通过Southern杂交和ELISA检测进一步证明Cry I Ac和API双价抗虫基因已整合到银腺杨(84K)基因组中,拷贝数1～2个,并得到了表达.转化植株用杨扇舟蛾幼虫进行饲虫试验,结果表明昆虫幼虫的死亡率高达60.0%～80.0%.同时,存活幼虫的生长发育也受到了明显抑制.本研究结果为杨树抗虫育种提供了新的种质资源.     

杨树油菜素内酯合成基因DET2的克隆与功能分析

[目的]DET2基因编码一个5α-还原酶,是油菜素内酯(BRs)合成过程中的关键限速基因。研究DET2基因在杨树生长发育中的作用,对于进一步研究油菜素内酯在木本植物中的调控机制有重要意义。[方法]从银腺杨84K(Populus alba×P. glandulosa,‘84K’)克隆得到拟南芥AtDET2同源基因PagDET2,利用生物信息学对其进行序列比对、生化特征分析、构建系统发育进化树。通过RT-PCR分析其在杨树中的表达模式。构建由CaMV 35S强启动子驱动的过表达载体,通过农杆菌介导的叶盘转化法转化84K杨,得到PagDET2-OE转基因植株。分析过表达DET2基因对于转基因植株内源BRs含量、植株生长和抗逆的影响。[结果]克隆了包含全长编码区PagDET2基因全长,可编码一个长度为257个氨基酸的蛋白质。其蛋白序列与毛果杨、拟南芥、水稻、棉花、大豆、番茄DET2蛋白同源性较高,说明该基因在进化过程中相对保守。PagDET2在84K杨不同组织中均检测到表达,其在茎中的表达较高。通过ELISA检测植物BRs含量发现,过量表达DET2可以显著提高杨树内源BRs含量。过量表达DET2基因,可以导致转基因植株的高生长,但对盐胁迫更加敏感。[结论]DET2基因作为BRs合成的关键基因,在杨树中过量表达可以显著提高内源BRs含量,促进植株增高。DET2转基因植株的获得为进一步分析BR参与木本植物生长发育的调控机制奠定了基础。     

AtMET1基因在84K杨中的遗传转化及诱导表达分析

[目的]研究拟南芥甲基化转移酶基因AtMET 1在银腺杨84K(Populus alba×P. glandulosa ‘84K’)中的诱导表达特性,为建立杨树甲基化诱导变异体系、进而实现杨树品种改良等奠定基础。[方法]以白杨派优良品种84K杨的无菌苗叶片为受体材料,采用农杆菌介导法将化学诱导启动子与AtMET1基因导入84K杨基因组中;经潮霉素筛选获得抗性植株,通过常规PCR检测、DNA测序等方法对抗性植株进行鉴定。通过化学诱导剂17-β-雌二醇对随机挑选的1个转基因株系离体叶片进行诱导处理,处理时间为0、3、6、12、24、48、96、144 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外源基因AtMET1表达量变化。[结果]本研究共获得了潮霉素抗性芽648个,经生根筛选获得18株抗性植株,经分子检测证实全部为转基因植株,分别标号为AM-1～18#。qRT-PCR结果显示:化学诱导剂17-β-雌二醇处理3 h时,目的基因AtMET1的表达量即达到最大值,随后在处理6 h时表达量下降,处理12 h时有所回升,处理24 h后表达量降低至不足12 h时的一半。[结论]化学诱导剂17-β-雌二醇能迅速有效地调控转基因杨树中AtMET1基因的表达,为进一步研究MET1基因在杨树基因组甲基化调控方面的作用机制奠定基础,也为今后杨树化学诱导表达研究及品种改良提供新思路、新方法。