猪细小病毒病微量血凝抑制试验方法的探讨

使用U型微量滴定板、0.025ml定量滴管和稀释棒、PBS稀释液、白陶土处理被检血清、8单位或4单位抗原及0.4％鸡红细胞做HI试验诊断猪细小病毒病是比较适宜的条件。用此法对七种猪传染病抗血清进行检查,均不产生非特异性血清学反应。对同一份被检血清重复测定,HI价基本一致。用滤纸吸附被检猪血液(简称血纸)与分离血清做HI比较试验,两者的HI价无大差异。     

猪细小病毒病血凝抑制试验的研究

高岭土处理被检血清，４单位抗原及０．６％豚鼠红细胞做血凝抑制（ＨＩ）试验诊断猪细小病毒病是比较适宜的条件。用此法对七种猪传染病抗血清进行检查，均不产生非和划１性血清学反应。用滤纸吸附被检猪血液（简称血纸）与分离血清做ＨＩ比较试验，两者的ＨＩ价无大差异。与日本ＰＰＶ毒株９０ＨＳ抗原进行比较，两者的ＨＩ价一致。     

血凝性脑脊髓炎病毒血凝抑制试验方法的研究

为检测某猪场的猪感染血凝性脑脊髓炎病毒的情况,用250 mL/L 的鸡红细胞和200 g/L的高岭土去除非特异性物质,使用4单位抗原及5 mL/L鸡红细胞做HI 试验,发现这些条件较适宜。用此法对其他5 种猪传染病抗血清进行检查,发现均不产生非特异性血清学反应。另外,本试验用滤纸吸附血清与分离血清做HI比较试验,其HI价差异不显著,从而为以后进行血清学调查提供了一种便利的方法。用分离的HEV与日本HEV 67N毒株抗原进行比较,两者的HI价一致。     

鸡新城疫琼脂扩散试验方法的研究

用新城疫病毒(NDV)La Sota株接种的鸡胚含毒尿囊液,经灭活、透析和浓缩后,研制出琼脂扩散(AGP)抗原。应用AGP和HI试验同步检测不同免疫状态的鸡血清样品977份。试验表明,HI抗体效价≥16的被检血清,AGP阳性率为98.5％(268/272);HI抗体效价=8的,AGP阳性率为79.3％(142/179);HI抗体效价≤4的526份血清,AGP试验均为阴性。抗原经2次冻融,或在4℃和-3℃保存10个月以上,其效价未见降低。AGP抗原可用于ND的免疫监测和流行病学调查。     

琼脂扩散试验检测鸡新城疫抗体的研究

本文报告了用NDV—Lasota株经鸡胚增殖病毒,收集含毒的鸡胚尿囊液,用乙醚脱脂、透析浓缩制成琼扩(AGP)抗原,应用本抗原和HI试验同步检测435份待检血清,结果AGP与HI试验的阳性符合率为91.6％(241/202),阴性复合率为100％(114/114),     

猪细小病毒血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清的制备与鉴定

猪细小病毒（Porcine Parvovirus,PPV）血凝抑制试验抗原、阳性血清和阴性血清在猪细小病毒制品的效力检验中不可或缺,对猪细小病毒相关生物制品的质量控制至关重要。试验采用PPV 7909株病毒同步接种PK-15细胞制备血凝抑制试验抗原,用制备的抗原乳化后免疫豚鼠制备阳性血清,同时用未免疫的阴性豚鼠制备阴性血清。对抗原、阳性血清和阴性血清进行鉴定,结果表明,制备的PPV血凝抑制试验抗原HA效价达1:512;阳性血清HI效价达1:1024;阴性血清HI效价＜1:8,且特异性均良好。利用制备的血凝抑制试验抗原、阳性血清与不同PPV疫苗株的灭活抗原、阳性血清进行交叉反应试验,结果表明,制备的抗原与阳性血清具备良好的血清学交叉反应性,可用于PPV制品的统一评价。     

鸡新城疫稳定抗原制作过程中一个数学公式的推导及应用

HI试验监测鸡新城疫的抗体水平早已被多数鸡场所接受,用于HI试验中的新城疫稳定抗原,在国内部分大学和科研单位进行了批量生产。在生产过程中,时常遇到用高HA价的抗原去调整低价抗原,使     

不同家禽的红细胞悬液对禽流感病毒血凝抑制试验的影响

目前,血凝抑制试验(HI)被广泛用于检测各种家禽的禽流感抗体及禽流感病毒的鉴定,而多数实验室都是用鸡红细胞悬液来进行该试验。为了探讨不同家禽红细胞悬液对不同家禽血清抗体HI试验中非特异性凝集作用的影响,我们进行了本试验,现总结如下:一、材料与方法1.试验材料(1)待检血清:采取进行过禽流感H5亚型灭活油乳剂疫苗免疫的鸡、鸭鹅、鸽血各10份,分离血清备用。(2)抗原:禽流感H5诊断抗原,哈尔滨兽医研究所生产〔哈研生药中试字(2000)8818号,批号:20021225〕。(3)红细胞悬液:采取不具有特异性禽流感H5抗体的鸡、鸭、鹅、鸽的血按农业部标…     

猪瘟免疫抗体检测：琼脂扩散和间接血凝试验

应用琼脂扩散试验和间接血凝试验检测猪瘟免疫抗体,1990年在我州黄平、锦屏两县进行,现将试验结果报告如下: 材料和方法一、材料: (一)抗原:IHA反应抗原由成都药械厂提供;AGP反应抗原由河北省兽医防检站提供。 (二)血清:被检血清经免疫注射猪瘟疫苗的猪群中采取(均由黄平和锦屏两县提供)。     

鸡传染性支气管炎微量血凝抑制试验方法的研究

用胰酶处理鸡传染性支气管炎病毒(IBV)制成血凝(HA)抗原,HA＝1:16384,用此抗原建立了微量血凝抑制试验(HI)方法检测IBV阳性血清。IBV阳性血清鸡胚病毒中和试验(NT)结果与HI效价呈正相关,相关系数r＝0.29,HI效价达1:8以上可保护鸡胚抵抗200个MLD的IBV攻击,表明HI抗体是保护性抗体,该方法具有较大的实用价值。     

断喙时间对新城疫免疫效果的影响

关于断喙对新城疫免疫应答的影响大小及方式的研究尚未见有关报道。试验通过对不同断喙时间雏鸡的新城疫抗体的检测,研究断喙对新城疫免疫应答的影响,并提出合适的解决方案。1材料与方法1.1材料1日龄健康河南青脚麻鸡150只,购于安徽省六安市马巷孵坊。鸡新城疫低毒力Lasota株活疫苗,齐鲁动物保健品厂提供,批准文号为鲁生药字(2001)42207;鸡新城疫血凝抑制试验抗原,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供,批号为20030517;红细胞凝集价为7 lb,HI试验时配成4个血凝单位。被检血清:将被检鸡群编号登记,用消毒过的干燥注射器采血,注入洁净干燥试…     

益母草酊剂对鸡新城疫免疫后抗体效价(HI效价)影响

鸡群在接受新城疫苗免疫的同时 ,使用益母草酊剂 ,可以使免疫鸡群血清抗体效价 ( HI效价 )提高 ,在国外已有报道。本试验采用鸡群免疫的同时 ,以益母草酊剂饮水试验 ,于免疫后 1 0天测其血清HI效价 ,结果表明试验组 HI效价值均高于对照组(高出值为 0 .96～ 1 .2 6)。目的在于探索部分中草药对鸡群体内免疫功能的影响关系 ,现报告如下。1　试验材料1 .1　新城疫 系弱毒苗山东齐鲁制药厂提供。1.2　试剂 HI试验用抗原尿囊液稳定抗原 ,HI血凝价为 1 2 80 X;生理盐水 ;微量法血凝抑制试验器材一套。1 .3　益母草山东临沂地区药材采购供应…     

rNP-ELISA检测抗猪流感病毒抗体工作条件的优化

猪流感是生猪养殖的国家普遍都会遇到的猪的呼吸道病[1]。虽然HI检测已经被作为可信赖的抗流感病毒抗体的检测方法[2]。但是,应用ELISA方法检测抗体具有明显的优势,对于待检血清不需要进行任何处理,而且也不必要对应用的抗原进行更换与选择[3]。试验采用的包被抗原为重组NP蛋白     

用微量血凝和血凝抑制试验诊断水貂病毒性肠炎

用8HA单位水貂肠炎病毒(MEV)细胞培养活毒标准抗原、8 HI单位兔抗MEV血清标准抗体、0.5％戊二醛化猪RBC进行微量血凝(HA)-血凝抑制(HI)试验诊断水貂病毒性肠炎(MVE),具有敏感、准确、简便、省时等特点,适于MVE的确诊、检疫、流行病学调查和免疫水平监察,可在接到病料后4小时内报告结果。因本试验只能用活毒标准抗原,所以需把好消毒关。防止散毒。     

猪附红细胞体Dot-ELISA检测方法的建立

本试验建立了一种检测猪附红细胞体抗体的Dot—ELISA方法，并确定了试验程序中最适抗原包被浓度、被检血清最适稀释度等工作条件。特异性和重复性试验结果表明，所建立的Dot—ELISA不与猪瘟等常见猪病阳性血清发生交叉反应，且稳定性高；用所建立的Dot—ELISA与IHA对70头份被检血清进行平行检测，阳性率分别为90％和60％；对20份阳性血清进行检测，Dot—ELISA和IHA平均抗体滴度分别为1：1012和1：160。表明所建立的Dot-ELISA是一种比较敏感、特异和稳定的血清学检测方法，能用于猪附红细胞体的抗体检测和疾病诊断。     

影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究

选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株(M41、Gray、T株)和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株[X、Fu、W和H株(有自然血凝性)]，在非免疫鸡胚上增殖后，用蔗糖透析法浓缩10倍，再分别采用三种方法处理，制备IBV-HA抗原：1)用浓缩4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液(R．W．F．C4)处理IBV；2)用2．5U／mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV；3)用1％胰酶处理IBV。结果显示，除T株仍不具有血凝性外，其余毒株都有了较高的血凝价。IBVM41株、X株HA效价株高达2^8，Fu、Gray、W、H株的HA效价也达2^7—2^9。但是，用方法3)来制备HA抗原没有任何实用价值。因为1％胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用，非特异性HA价高达8log2。而采用R．W.F．C4和2．5U／ml PLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV—HA抗原，除T株外，均能凝集鸡红细胞，且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制，而不能被ND、EDS—76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制，说明该抗原具有较强的特异性。本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究。比较了用R．W．F．C4和用2．5U／ml PLC1处理IBV制备HA抗原血凝价，结果显示二者的血凝价是一致的，所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液。本试验还采用IBV—M41株和陕西省地方肾型株X株制备IBV—HA双价抗原，结果表明，用上述IBV—HA二价抗原所测出的各毒株抗血清的HA效价和用各毒株所制得的IBV—HA单价抗原所测出的相应毒株抗血清的HI效价差异不显著，说明IBV二价HA抗原的抗原交叉性广泛，可用于IB的免疫监测和诊断。本试验还将在同一条件下获得的免疫鸡血清分别采用HI和CEKC—SN二种方法所测得的抗体效价进行了比较，结果经统计学分析表明：HI效价与CEKC—SN效价呈正相关，相关系数为0．6585，且HI法比ECKC—SN法省时、省力。     

马动脉炎病毒血凝抑制试验研究及其应用

用马动脉炎病毒（EAV）免疫SPF豚鼠，4周后采血做血凝抑制试验（HI），其抗血清可以抑制血凝抗原对小鼠红细胞的凝集反应，抗原和抗血清在4℃感作24h后可以检测到最高的HI抗体效价，同时结果显示HI抗体与中和抗体产物呈正相关。对561份来自新西兰、吉尔吉斯、沙特阿拉伯及内蒙古、新疆的马血清用HI试验和微量血清中和试验（NT）进行EAV抗体检测，HI和NT阳性符合率为94．7％，血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关。     

用LAT、AGID、SN法检测血清抗体的比较试验

为探索出适合猪伪狂犬病防治需要的准确、实用的血清学诊断方法,我们选择乳胶凝集试验(LAT)、琼脂免疫扩散试验(AGID)、血清中和试验(SN)3种猪伪狂犬病血清学诊断方法,以进口试剂盒酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断方法作为标准,对45份猪伪狂犬病被检血清样品进行了比较试验.……     

猪乙型脑炎间接ELISA与血凝抑制试验方法的比较

用血凝抑制试验和间接ELISA两种方法检测乙脑阳性血清均呈阳性反应,检测乙脑阴性血清均呈阴性反应。用间接ELISA对来自9个猪场74份送检血清进行了猪乙脑病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）抗体检测,并与血凝抑制试验（HI）进行对比,两种方法检测总符合率为85.1%(63/74),经统计分析,检测结果差异不显著(P＞0.05)。对来自无猪乙脑病猪场24头健康猪的血清进行检测,两种方法结果均为阴性,符合率为100%。对10份阳性血清进行检测,ELISA检测效价较HI效价高,表明ELISA比HI敏感。结果表明,ELISA与HI检测结果相符,前者更适用于猪血清中乙脑IgG抗体的大规模检测。     

用ELISA检测猪细小病毒(PPV)血清抗体

采用差速离心、透析、聚乙二醇(PEG)浓缩方法纯化猪细小病毒(PPVDK7113)制备抗原。用纯化的PPV抗原包被聚苯乙烯微量反应板，建立了检测PPV血清抗体的间接ELISA。抗原最佳包被浓度为6．3μg/ml，被检血清最佳稀释度为1：200。用建立的ELISA检测山东、东北、广东等地的426份血清，结果阳性率为36．2％。与华中农大病毒室提供的猪细小病毒乳胶凝集试验试剂盒相比，其结果符合率为98．6％。通过阻断试验、交叉试验，说明本方法在特异性上达到了较为满意的结果，且易于操作，适用于血清学定性诊断、检疫和大规模的血清流行病学调查。