稀释液成分对猪精液碱性N-乙酰-β—D-氨基葡萄糖苷酶的影响

以猪精液稀释液主要成分为效应物,研究其对杜洛克猪精液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶II活力的影响。结果表明：在一定浓度下青霉素钾和硫酸链霉素对酶活力没有影响;EDTA·2Na和维生素C对酶活力有显著的激活作用;葡萄糖和蔗糖对酶活力有先扬后抑的作用;     

牛副性腺N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质的测定

以牛副性腺部分纯化的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶为材料,以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学。结果表明:牛副性腺NAGase的最适pH为5.5,在pH3.0～7.6区域内活力较稳定,而在pH7.6能很快失活;最适温度为55℃。在50℃以下处理30min,酶活力保持稳定,高于50℃酶稳定性较差。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.48mmol/L,最大反应速度Vm为19.73umol/(L·min)。酶催化pNP-NAG水解反应的活化能为69.77kJ/mol。     

番鸭 (Cairina moschata ) 睾丸N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的提取及性质研究

以番鸭睾丸为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、DEAE-32离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得比活力为19.18 U/mg、纯化倍数为6.46倍的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂。以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学。结果表明：酶的最适pH为5.6,该酶在pH3.0～7.6区域较稳定,而在pH〉7.6能很快失活;酶的最适温度为55℃。当温度为80℃时,酶完全失活。在40℃以下处理30 min,酶活力保持稳定,高于45℃,酶稳定性较差。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.215 mmol/L,最大反应速度Vm为5.54μmol/L.min。酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为69.05kJ/mol。金属离子对酶的效应试验表明：高浓度的Na＋和K＋对酶有抑制作用;Mg^2＋对酶有轻度激活作用,Cu^2＋、Pb^2＋、Zn^2＋、Ca^2＋、Ba^2＋对酶活力有不同程度的抑制作用;Al3＋对酶有抑制作用。     

稀释液中添加N-乙酰半胱氨酸对猪精液冷冻保存效果的影响

本文以手握法采集的猪精液为试验材料,以解冻后精子的活率、顶体完整率、低渗膨胀率、运动学参数(VAP、LIN、ALH、BCF)和膜脂质过氧化反应为评定标准,旨在探讨N-乙酰半胱氨酸对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明,在冷冻稀释液中添加1mmol/L的N-乙酰半胱氨酸可以显著地提高解冻后精子的活率和顶体完整率,降低精子的低渗膨胀百分率。在运动学参数方面,只有VAP显著升高,而对其它运动学参数没有影响。在冷冻稀释液中添加N-乙酰半胱氨酸对膜脂质过氧化反应没有影响。     

糖对长白猪精液NAGaseⅡ的抑制机理

以长白猪精液为材料,采用经典的纯化方法获得N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（EC 3.3.1.52,NAGase）的2种同工酶,命名为：NAGaseⅠ和NAGaseⅡ。其中NAGaseⅡ的比活力为358.21U/mg,纯化倍数为6.37倍。以海藻糖、D-甘露糖、蔗糖、葡萄糖为效应物,研究其对该酶活性的影响。结果表明：在特定浓度范围内,海藻糖对酶活力基本没有影响;D-甘露糖、蔗糖、葡萄糖对该酶均有一定的抑制作用;D-甘露糖对酶的抑制作用表现为非竞争型,抑制常数KI为11.94mmo/L;蔗糖对酶的抑制作用表现为竞争型,抑制常数KI为0.56mmol/L;葡萄糖对酶的抑制作用表现为混合型,抑制常数KI和KIS分别为0.35mol/L和64.29mmol/L。     

稀释液成分对猪精液常温保存影响的研究进展

随着猪肉在肉类消费中占比的日益升高,人工授精技术得到普遍应用,在绝大多数人工授精中使用常温保存稀释后的精液。精液在体外保存过程中,稀释液起到了提供营养、抗氧化、抗温度打击、维持pH值和渗透压,以及抑制微生物生长等作用。文章综述了稀释液成分对猪精子质量及能量代谢的影响,并比较了一些长效稀释液和短效稀释液在保存精液方面的优势,旨在为猪精液的常温保存及人工授精提供参考。     

莆田黑猪精液中NAGase酶学特性研究

试验对以莆田黑猪精液为材料分离纯化得到的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)进行了理化特性研究。经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G100分子筛层析获得PAGE电泳纯化的NAGase酶制剂。以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-GlcNAc)为底物,研究酶催化水解的相关性质。分离纯化获得的酶制剂比活力为1561.42 U/mg,分子质量为58 ku,只有1个亚基,等电点pI为9.13。酶的最适pH为5.6,最适温度为45 ℃,酶在pH 3.6～7.8之间稳定,当pH>8时迅速失活,在50 ℃以下处理30 min酶活力保存稳定,高于50 ℃时,酶活力迅速降低。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,米氏常数K_m为0.82 mmol/L,最大反应速度V_m为39.23 μmol/(L·min)。催化pNP-GlcNAc反应的活化能为27.30 kJ/mol。金属离子中Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺对酶活力无明显影响,Zn²⁺、Cu²⁺、Pb²⁺对酶有抑制作用。     

鱼源无乳链球菌N-乙酰氨基葡萄糖苷酶NalA的鉴定及生物学功能分析

为了探究N-乙酰氨基葡萄糖苷酶在无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)中的生物学功能,本试验通过生物信息学技术从鱼源无乳链球菌GD201008-001基因组中预测到一个可能的N-乙酰氨基葡萄糖苷酶编码基因A964_0097(命名为nalA),利用同源重组技术构建该基因缺失株△nalA及互补株C△...     

温度和稀释液对猪精液保存效果的影响

为了提高猪精液的保存效果,对不同温度和稀释液环境条件下猪精液活力的影响展开综述．以分析探讨保存猪精液最佳的温度和稀释液的环境条件。     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的影响

试验利用北京信邦稀释液(试验Ⅰ组)和台湾精旺稀释液(试验Ⅱ组)对猪精液进行常温保存,测定精子活率、有效存活时间、生存指数、pH值。试验结果:试验Ⅱ组稀释后第4天,精液的pH值显著高于试验Ⅰ组(P0.05),试验Ⅱ组的精液p H值始终高于试验Ⅰ组;试验Ⅱ组稀释后精子活率在第4天显著高于试验Ⅰ组(P0.05),试验Ⅱ组精子的有效存活时间与试验Ⅰ组差异不显著(P0.05)。试验结果表明,试验Ⅱ组采用的台湾精旺稀释液更有利于精液的保存,适宜大规模推广应用。     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的影响

试验以猪精液为材料通过6个配方的初步筛选,得出配方4的保存效果最好,有效存活时间为5.12d,然后在此基础上添加海藻糖、维生素B12等药物进行不同浓度的配方筛选实验。通过对精子有效存活时间、总存活时间、存活指数等项目的比较,结果表明:配方Ⅲ(3即添加海藻糖0.15g/100mL)在(17±0.1)℃恒温下保存效果最好,其数值分别为(6.25±1.13)d、13.00d、(5.17±0.33)d;其有效存活时间与配方Ⅰ、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅱ3、Ⅳ配方之间差异极显著(P<0.01),与配方Ⅲ1、Ⅲ2差异不显著。因此,添加海藻糖0.15g/100mL浓度的配方其常温保存效果明显好于对照组及添加维生素B12和混合添加2种药物组。     

不同稀释液对体外保存猪精液酶活力的影响

本试验测定了种公猪精液用四种不同的稀释液处理后，在４℃条件下体外保存７２ｈ后其ＧＯＴ，ＬＤＨ和ＬＤＨ－Ｘ酶活力的变化情况。结果表明，不同稀释液对猪精液体外保存后的ＧＯＴ，ＬＤＨ和ＬＤＨ－Ｘ活性的影响存在极显著的差异。     

不同稀释液对猪精液保存效果的研究

人工授精技术的研究历史已有200多年．并先后在牛、羊生产中应用了冷冻精液人工授精技术。但在猪生产中仅推广应用了常温精液的人工授精技术．且精液的保存时间仅为2～3d．因此，研究猪精液保存技术尤为重要。随着褪黑激素(MT)抗自由基作用的发现，它对抗衰老有着重要的意义．并可有效清除在化学反应中产生的羟自由基．抑制过氧化氢引起的过氧化脂质含     

槐猪精液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶功能基团的研究

为了研究酶活性中心功能基团的性质,从槐猪精液中提取N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,简称NAGase)的电泳单一纯酶制剂,试验采用动力学和化学修饰的方法进行研究。结果表明:在37℃条件下,酶活性中心解离常数p Ke值为5.29,解离热焓ΔHo值为30.46 k J/mol,酶活性相关的可解离基团是咪唑基;在特定条件下,通过对酶分子基团的特异性修饰可知,对酶分子链内二硫键、巯基及吲哚基的修饰会使酶的活性显著下降。说明这些氨基酸残基也是该酶的功能基团,而ε-氨基可能与维系酶分子构象有关,胍基则被修饰后对酶活性没有影响,不是此酶的功能基团。     

猪精液稀释液的配制、消毒及检测技术

在现代猪的人工授精操作过程中,造成精子死亡的主要原因除了精子本身先天性的脆弱和衰老而外,稀释液的优劣是关系到精液体外存活时间长短的一个非常重要的因素,精液的稀释不仅是增加精液的容量,还在于能使精液经过较长时间的保存和较长距离的运输后仍能继续使用。因此,养猪场如何进行猪精液稀释液的配制、消毒及检测工作,显得十分重要,实际操作务必做到严肃认真,一丝不苟。笔者结合自身工作实践,在具体操作过程中,应切实注意以下四个方面。     

2012年第11期“稀释液成分对猪精液碱性N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响”一文有关信息的补充

本刊2012年32卷第11期1730～1734页刊登的林心宇等稀释液成分对猪精液碱性N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响一文中,作者黄小红亦为通讯作者     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的研究

主要从稀释液的组分、抗生素的种类以及抗氧化剂的添加来研究猪精液常温保存的稀释液配方。结果表明：含有一定量的牛血清白蛋白有利于猪精液的保存。通过恩诺沙星、氧氟沙星、庆大霉素、菌特灵与青、链霉素对精液保存效果的比较，得出添加50μg/mol恩诺沙星的保存效果优于其它药剂。不同浓度的褪黑激素对精液保存有一定的影响，10^-5mol/L的褪黑激素可延长精子的存活时间。     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的研究

主要从稀释液的组分，抗生素的种类以及抗氧化剂的添加来研究猪精液常温保存的稀释液配方，结果表明，含有一定量的牛血清白蛋白有利于猪精液的保存，通过恩诺沙星，氧氟沙星，庆大霉素，菌特灵与青，链霉素对精液保存效果的比较，表明添加50μg/mL的恩诺沙星的保存效果优于其它抗生素，不同浓度的褪黑激素对精液保存有一定的影响，10^-5mol/L的褪黑激素可延长精子的存活时间。     

乳糖诱导大肠杆菌β-D-半乳糖苷酶试验

大肠杆菌是是重要的使人罹患疾病的食源性病原微生物之一,也是重要的食品被动物排泄物污染的指标。大肠杆菌在其生长过程中会产生β-D-半乳糖苷酶,这种酶常被用于进行大肠杆菌的快速检测。本试验是探索乳糖诱导大肠杆菌产生β-D-半乳糖苷酶的最佳条件,缩短基于酶检测技术检测大肠杆菌的时间。通过单因素试验确定培养基中加入乳糖的浓度、剂量和培养时间,用L9(34)正交表设计试验因素水平,以β-D-半乳糖苷酶活力OD值为判定指标,确定乳糖诱导大肠杆菌产生β-D-半乳糖苷酶的客观条件。结果于10 m L大肠杆菌培养液中添加0.5%乳糖1 m L,诱导时间为4 h时所诱导的β-D-半乳糖苷酶量最多。说明恰当的乳糖浓度能很好地诱导大肠杆菌短时间产生β-D-半乳糖苷酶,并因此可以明显缩短利用该酶检测大肠杆菌的时间。