应用高效毛细管电泳测定生物蛋白质样品

应用高效毛细管电泳仪（ＣＥ）测定了生物样品中的胃蛋白酶，卵清蛋白及枯草杆菌细菌蛋白等，经过对波长１８５ｍｍ与２１４ｍｍ条件下的测定结果进行比较试验，得出１８５ｍｍ波长下检测灵敏度大大高于２１４ｍｍ波长的检测灵敏度。     

分光光度法测定小球藻数量的方法研究

[目的]确定用分光光度法测定小球藻藻液浓度的适宜波长。[方法]在不同波长下对不同浓度普通小球藻藻液的吸光度进行测定,对有关数据进行生物统计分析。[结果]在8．7×10^6～8．7×10^8个／ml的浓度范围内,小球藻藻液的最大吸收波长在680nm左右,较高浓度小球藻藻液的吸光度超出了测定范围。显著性测验表明,9种波长下小球藻藻液浓度与藻液吸光度呈极显著直线相关。680nm波长下的测定灵敏度最高,其最高藻液浓度最低,为3．79×10^8个／ml;700nm波长下的测定灵敏度最低,其最高藻液浓度最高,为7．7×10^8个／ml;560nm波长下的测定灵敏度仅高于700nm波长下的,其最高藻液浓度为6．9×10^8个／ml;540nm波长下的测定灵敏度高于560nm波长下的,其最高藻液浓度为6．5×10^8个／ml。[结论]在680nm波长下测定小球藻藻液浓度,其灵敏度高、数据更精确。     

HPLC测定独头蒜和大蒜中的蒜氨酸和大蒜素

为准确、快速、方便地测定大蒜中的蒜氨酸和大蒜素,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),Waters symmetry C18(4.6mmi.d.150mm,5μm)色谱柱,蒜氨酸检测波长214nm、大蒜素检测波长254nm,流动相甲醇水(3070),流速0.8ml/min,结果蒜氨酸在0.01～0.35mg/ml,呈良好的线性关系,相关系数=99.6,平均回收率(99.85±1.53)%。     

小鼠脑提取液中铝的毛细管电泳分析

用毛细管区带电泳法(CZE)测定了小鼠脑中的铝,在10mmol/L苄胺和40％甲醇溶液中,Al3+在7min内与其他组分分离,用间接紫外吸收法在 214nm处检测,并以外标法定量,对样品进行5次测定,RDS为2.9％,回收率为96.8％,方法简便、快速、灵敏度高,重现性好,成本低。     

基于三维荧光光谱法的水样中苯酚和对苯二酚含量测定

[目的]研究用荧光分光光度法测定水中苯酚和对苯二酚的含量,为环境样品中痕量物质的分析提供测定方法。[方法]取水样,加入β-环糊精溶液、EDTA溶液及缓冲溶液后测定。[结果]在波长对为λEx/λEm=240 nm/309 nm时测定苯酚含量,线性范围为0～1×10-4mol/L,检出限为6.6×10-8mol/L;在波长对为λEx/λEm=310 nm/340 nm时测定对苯二酚含量,线性范围为0～1.5×10-5mol/L,检出限为5.2×10-9mol/L。[结论]通过三维荧光扫描来选择干扰少而测定灵敏度较高的检测波长,实现了荧光分光光度法直接测定水样中的苯酚和对苯二酚含量。     

应用高效液相色谱-二极管阵列检测器优化棉花体内多胺的测定方法

应用高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-DAD)对棉花体内多胺测定时的流动相比例及流速、多胺全光谱信息等进行分析,重点比较2种常用检测波长230、254 nm下的测定参数。最终确定检测波长为230 nm、流动相体积比V_(甲醇)∶V_水=80∶20、流速为0.6 m L/min为最佳色谱条件。该方法有较好的准确度、灵敏度,腐胺、亚精胺、精胺的回收率分别为98.58%、96.98%、99.62%,且非常稳定。以此色谱条件为基础测定棉花幼苗不同组织中多胺水平发现,叶片中3种多胺的含量明显高于根、茎组织;此外,不同组织内亚精胺含量最高。     

新温185号核桃叶片光谱特征及其对施肥的响应

【目的】通过肥料效应田间试验,了解不同氮(N)、磷(P)、钾(K)施肥水平下新温185号核桃叶片光谱反射率的变化特征,并检验其光谱指数是否存在差异性,以期为探索采用光谱技术监测其树体营养的可能性提供科学依据。【方法】基于"3414"肥料效应田问试验,使用单通道高光谱非成像光谱辐射仪(UniSpeeSC)测定新温185号核桃叶片在不同N、P、K施肥水平下的光谱反射率。【结果】新温185号核桃叶片光谱反射率依赖于波长,在510和680 nm附近出现吸收谷,在550 nm附近出现反射峰,在710⁷80 nm波段出现了一个陡峭的爬升脊,在810780 nm波段出现了一个陡峭的爬升脊,在810¹000 am波段出现了一个较高的反射平台。不同N、P、K施肥水平下,新温185号核桃叶片的光谱反射率依波长变化发生了一定程度的改变,并且叶片光谱指数ND_(705)存在显著差异(P<0.05)。【结论】存在利用叶片光谱反射率监测新温185号核桃树体营养的可能性,可尝试采用光谱技术监测其树体N、P、K营养的进一步研究。     

紫外分光光度法测定原料药喜树碱含量分析

由于喜树碱内酯环开环后在254 nm波长下紫外吸收增强,而开环的喜树碱毒副作用大。鉴于目前喜树碱含量测定均采用254 nm,且喜树碱在大多数溶剂中溶解性较差,为更准确便捷地检测喜树碱原料药的含量,有必要探索在新的波长下测定喜树碱含量的方法。将喜树碱在200~400 nm扫描,发现在367nm处有较大吸收,且溶剂二甲基亚砜无干扰。因此采用367 nm波长下测定喜树碱含量,并进行含量测定方法学考察。喜树碱的标准曲线方程为y=0.042 3x+0.013 2,r=0.999 6,浓度在4~20μg/mL与其吸光度呈现良好的线性关系。平均加样回收率为101.76%,RSD为0.75%,结果重现性良好,符合方法学要求。在367 nm波长下测定喜树碱含量,所受干扰较小,测定结果可信度高。     

火腿肠中亚硝酸盐含量的测定

[目的]分析测定火腿肠中亚硝酸盐的含量。[方法]采用分光光度法确定亚硝酸钠的最佳吸收波长,检测市售2种不同种类的火腿肠中亚硝酸钠的含量。[结果]试验表明,亚硝酸钠的最佳吸收波长为538nm,2种市售火腿肠中的亚硝酸钠含量根据国标都在安全食用范围之内。[结论]分光光度法检测食品中亚硝酸盐含量操作快捷、灵敏度高、设备简单、结果直观,效果较好。     

分子荧光法对水中氨氮含量的测定

采用分子荧光法对水中氨氮含量进行了测定,在硼酸缓冲液作用下,邻苯二甲醛(OPA)与氨氮反应,生成具有荧光性的物质,在一定的pH、反应温度和静置时间条件下,以362 nm为激发波长,在425 nm发射波长处测定荧光物质的荧光强度,探究了四硼酸钠、亚硫酸钠和OPA混合溶液配比、反应温度、静置时间对衍生物荧光值的影响。结果表明,在一定浓度范围内,衍生物的量与荧光强度有良好的线性关系,该方法灵敏度高,适用于氨氮浓度较低水样的测定,对于高浓度水样也可进行简单稀释后测定。     

大百合中铜和锰的原子吸收光谱直接测定方法

[目的]建立简便、快速、精确的大百合中高含量铜、锰的测定方法。[方法]采用次灵敏线（铜327．4nm、锰280．1nm）确定大百合中高含量铜、锰的分析条件,建立大百合中高含量铜、锰的次灵敏线原子吸收光谱测定方法,并考察酸及酸含量、共存离子等对测定结果的影响。[结果]含量低于10％的盐酸、硝酸、王水、高氯酸、硫酸对5mg／L铜和锰的测定结果无影响;2000mg／L K＋、Na＋,1000mg／LFe3＋、Zn2＋、mg2＋、Ca2＋100mg／LAl3＋、Si4＋及50mg／LPb2＋、Cd2＋、Cr6＋、Ni2＋均不干扰铜、锰的测定;铜、锰的线性jia范围分别为0-25、0—12mg／L,相对标准偏差分别为0．42％和0．66％,加标回收率分别为96％～103％和97％-102％。[结论]该研究建立的大百合中铜、锰含量的测定方法简便、快速、实用性强。     

苜蓿内生菌中高效AHL降解菌的筛选和鉴定

从中国新疆、内蒙古和墨西哥等地分离苜蓿内生菌133株,平板筛选到8株细菌具有N-酰基高丝氨酸内酯(N-Acyl-L-homoserinelactone,AHL)降解活性,其中活性较强的菌株有r-12、r-9和R1.5.对8株AHL降解菌做AHL唯一碳源试验,结果发现菌株S35和N46在液体AHL唯一碳源培养基中生长情况较好,D600 nm分别为0.415和0.386,菌株r-9的生长情况最差,D600 nm为0.015.菌株R1.5还具有耐高温、耐盐碱、能分解无机磷、在无氮培养基上生长等优点.经细菌形态学观察、生理生化试验以及16S rDNA序列分析,初步确定菌株R1.5为1株地衣芽孢杆菌.     

检测禽多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增(LAMP)方法的建立

以禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)C48-1为研究对象,利用LAMP方法对Pm进行快速检测.结果表明:LAMP方法在恒温65℃下,1 h内就可以检测到Pm;LAMP方法最低可检测100 pg.μL-1Pm基因组DNA.该方法不需要精密的温度循环装置,有恒温加热设备就可以满足检测条件,适合基层临床应用.     

白菜苗期对不同硫处理的光谱反应

本文以盆栽试验的方法,通过对不同土壤硫处理情况下的白菜苗期光谱曲线及其生长状况、叶绿素含量和体内营养元素含量的对应分析,结果表明:不同硫处理情况下,白菜苗期的反射光谱曲线在形状上基本相同,绿峰出现在560nm处、红端位于720nm处、近红外平台出现在780~924nm。不同土壤硫处理情况下没有“红移”和“蓝移”现象;反射光谱曲线对白菜苗期的植株生长状况的敏感有四处,可见光区为500nm和690nm,近红处区在1900nm处,2400nm波长以后,对植株含水量的敏感性增强;不同的叶绿素含量表示方法在光谱相关曲线上的反映完全不同,其中光波反射值对单位叶面积上的总叶绿素含量、叶绿素A含量和叶绿素B含量敏感点在“绿峰”和“红端”两处,而光波反射值对干基表示的总叶绿素含量、叶绿素A含量和叶绿素B含量敏感区域地2400nm以后;植株反射光谱对白菜苗期植株体内不同营养元素种类和含量均有不同的反映,根据不同营养元素的光谱相关曲线,可将白菜苗期植株体内营养元素分为三类,一类是Ca、K、Cu、Fe和N,另一类是P、Mg和Mn,Zn元素的光谱相关曲线最为特别;白菜苗期植株性状值相关性高的性状,在光谱相关曲线中最接近。     

Spectral sensitivity of the compound eyes of Anomala corpulenta motschulsky (Coleoptera: Scarabaeoidea)

The scarab beetle, Anomala corpulenta Motschulsky (Coleoptera: Scarabaeoidea), is a widespread and destructive pest in China. Vision is one of the most important means of acquiring information about the external environment. In order to contribute to the understanding of the perception of visual stimuli in this species, the light sensitivity and spectral responses of the scarab beetle, A. corpulenta, were measured by using an electroretinogram (ERG) technique. In total, 14 monochromatic light intensities, between 340 and 605 nm, were applied to the compound eyes of A. corpulenta under varying levels of adaptation to dark and light conditions. The results showed that all light stimuli induced an ERG response, with varied amplitudes. The spectral sensitivity curve of dark-adapted eyes showed one major peak (~400 nm; near-ultraviolet), a secondary peak (from 498 to 562 nm; yellow-green) and the third peakat 460 nm. By contrast, in light-adapted eyes, only a near-UV peak was observed. From these results, we conclude that the compound eye of A. corpulenta is likely to have at least three spectral types of photoreceptor. Significance of differences were also recorded in the responses of male and female compound eyes, as well as diurnally and nocturnally. The amplitude of ERG in response to white-light stimuli varied with the light intensity: The stronger the luminance, the higher the ERG value. This suggests that the compound eye of A. corpulenta adapts quickly to changing light conditions, enabling A. corpulenta to maintain nocturnal activities.     

茶叶儿茶素总量的硫酸-香荚兰素检测方法研究

[目的]探讨硫酸-香荚兰素分光光度法检测茶叶中儿茶素总量的最佳条件。[方法]通过对反应温度、显色剂浓度和反应时间等条件的研究,确定硫酸-香荚兰素显色反应体系为：吸取10μl茶汤,加入2.5 ml质量分数为1%的香荚兰素/乙醇溶液和2.5 ml质量分数为30%硫酸/乙醇溶液,在20℃下反应5 min后,反应液在500 nm处测定吸光度值。[结果]该方法的相对标准差为0.055,变异系数为0.32%,平均回收率为98.29%。[结论]与盐酸-香荚兰素法相比,硫酸-香荚兰素法节省了操作时间,提高了试验效率,降低了试验成本,同时具有较高的灵敏度、准确性和稳定性,值得推广应用。     

分光光度法快速测定酸奶中的钙

[目的]确定分光光度法测定酸奶中钙含量的最佳操作条件。[方法]利用钙指示剂与钙的显色反应,研究影响其稳定性的因素,确定分光光度法测定酸奶中钙含量的最佳操作条件。[结果]最佳操作条件为:在536 nm的测定波长下,加入pH值为5.33的乙酸-乙酸钠缓冲溶液5 ml,0.05%钙指示剂的用量为2 ml,显色时间10 min,在此条件下,钙含量在0~1.6μg/ml的浓度范围内遵守比尔定律,体系表观摩尔吸光系数5ε36 nm为3.751 02 L/(mol.cm),且17种常见共存离子均不产生干扰。分光光度法测定酸奶中钙含量的相对标准偏差小于2.50%,加标回收率为96%~100%。[结论]分光光度法测定酸奶中的钙含量显示出较高的灵敏度,具有稳定性好、准确度高、试剂和仪器廉价、操作简便快速等优点。     

维药阿育魏实总多糖的提取工艺研究

[目的]通过正交试验探讨提取维药阿育魏实总多糖的最佳提取工艺,为资源的合理开发利用提供科学依据.[方法]以水为溶剂回流提取,采用苯酚-浓硫酸法显色,采用紫外分光光度法（UV）测定阿育魏实中总多糖的含量,并进行方法学验证.[结果]维药阿育魏实总多糖的最佳提取工艺为提取温度90℃、提取时间3h、料液比1∶50、提取次数1次;标准品溶液和供试品溶液均在488 nm处有最大吸收,总多糖溶液浓度在0.002 5 ～0.012 5 mg/ml线性关系良好（r=0.999 3）;精密度试验、稳定性试验、重复性试验和加样回收率试验的RSD值分别为0.6％、0.5％、0.069％和0.9％,同时得到阿育魏实多糖平均提取率可达3.41 mg/g.[结论]该方法具有操作简单、重复性好、灵敏度高,适用于阿育魏实中总多糖含量测定.     

抗rmNDPK-B抗体的制备、纯化、鉴定及应用

为制备抗rmNDPK-B多克隆抗体,以纯化后的rmNDPK-B为抗原,改良法免疫新西兰兔,琼脂双向扩散法分析抗体滴度,SDS-PAGE和Western-blot鉴定纯化后的抗体,结果发现,已获得高效价、高纯度的抗rmNDPK-B多克隆抗体;再分别以此抗体和抗rhNDPK-B抗体为一抗,Western-blot和免疫组织化学法检测小鼠子宫内膜组织中的NDPK-B的表达和分布.结果提示,在检测妊娠小鼠子宫内膜组织NDPK-B的表达时,抗rmNDPK-B抗体的特异性明显高于抗rhNDPK-B抗体.妊娠小鼠子宫内膜组织NDPK-B的表达显著高于非妊娠鼠.这表明用改良法制备的抗rmNDPK-B多克隆抗体具有高特异性、高效价和较高的灵敏性.nm23-M2/NDPK-B可能参与了胚泡着床过程.