百合花粉超低温保存方法研究

以“索邦”和“西伯利亚”百合为试材,研究了不同干燥时间和不同预处理温度及不同化冻方式对花粉超低温保存后百合花粉萌发率的影响.结果表明:不同干燥时间和不同预处理温度对超低温保存后花粉的萌发率有显著影响.与对照相比,2h干燥预处理(即花粉的含水量分别为7.67％和7.27％)后百合花粉的萌发率显著高于1、3、4h处理的;-20℃低温预冻处理后百合花粉的萌发率显著高于CK(室温)、0℃、-70℃处理的;超低温保存后40℃水浴化冻效果最佳.     

树莓茎尖玻璃化法超低温保存及植株恢复培养研究

对离体树莓茎尖的玻璃化法超低温保存进行了研究。结果表明,离体树莓茎尖超低温保存程序为在含0.8mol/L蔗糖的固体MS培养基预培养4天,低温驯化21天,再经玻璃化液PVS2处理60分钟后浸入液态氮。保存结束,茎尖在40℃水浴5分钟解冻,存活率达80%,植株再生率达75%。     

马铃薯花粉的超低温保存研究

 ：对影响马铃薯花粉超低温保存效果的因素进行了研究。结果表明：冷冻前干燥处理18 h的花粉．保存后其生活力优于干燥处理12 h和24 h的花粉;用0~C (12 h)一一10~C (12 h)一一20~C (12 h)的逐步降温预冻处理,可大幅度提高在液氮中冰冻保存花粉的活力;保存后的花粉用一20~C (12 h)一4~C(12 h)一25℃ (12 h)逐步解冻效果最好,35～4J0℃直接解冻效果优于(25±2)℃直接解冻;超低温保存对花粉萌发表现出某些促进作用。     

扁桃小滴玻璃化超低温保存研究

【目的】以扁桃休眠茎尖为试材,探讨小滴玻璃化法对扁桃离体超低温保存的影响,为扁桃种质资源的长期保存提供有效途径。【方法】采用小滴玻璃化法,通过正交设计试验和单因素试验对预培养蔗糖浓度、预培养时间、装载时间和PVS2[30%(ω,后同)甘油+15%二甲基亚砜+15%乙二醇+0.4 mol·L~(-1)蔗糖]脱水处理时间这4个因素影响扁桃休眠茎尖超低温保存后成活率的情况进行分析。【结果】预培养时间对休眠茎尖超低温保存后成活率的影响极显著(P<0.01),而预培养蔗糖浓度、装载时间和PVS2处理时间的影响不显著。建立了以‘莎车14号’为代表的扁桃茎尖小滴玻璃化法超低温保存体系,最佳处理方案是:用0.5 mol·L~(-1)预培养蔗糖液处理2 d,装载液处理20 min,PVS2脱水处理120min,放入含新鲜PVS2小滴的铝箔纸上投入液氮24 h后,浸入用40℃温水预热过的洗涤液(1.2 mol·L~(-1)蔗糖的MS)中30 s,然后再将休眠茎尖转入新鲜的洗涤液中洗涤30 min。恢复后接种在MS+0.3 mg·L~(-1)6-BA+0.5 mg·L~(-1)IAA+0.3 mg·L~(-1)GA3培养基上,扁桃成活率达80.44%。运用优化的方案对‘莎车1号’‘莎车11号’和‘莎车18号’3个扁桃品种进行超低温保存,平均成活率分别为87.41%、85.44%和83.02%。【结论】利用小滴玻璃化法可提高扁桃超低温保存成活率,建立了适合扁桃休眠芽超低温保存技术方法,为扁桃种质资源的长期保存提供理论和实践借鉴。     

不同保存方式对扁桃花粉保存效果的影响

采用干燥法和玻璃化法2种方法,对新疆莎车县扁桃品种晚丰18号花粉进行了超低温保存研究。结果表明:晚丰18号花粉最佳干燥方式为4℃硅胶干燥,适宜干燥时间为6⁸ h,干燥6h和8 h的花粉含水量分别为53.74%、52.74%,超低温保存后花粉萌发率为61.22%、63.77%,相对保存率为91.68%、97.13%;在室温(20±1)℃下以玻璃化液PVS2(30%甘油+15%乙二醇+15%二甲基亚砜+0.4 mol/L蔗糖)处理208 h,干燥6h和8 h的花粉含水量分别为53.74%、52.74%,超低温保存后花粉萌发率为61.22%、63.77%,相对保存率为91.68%、97.13%;在室温(20±1)℃下以玻璃化液PVS2(30%甘油+15%乙二醇+15%二甲基亚砜+0.4 mol/L蔗糖)处理20³0 min后,超低温保存的花粉萌发率最高,为40.88%30 min后,超低温保存的花粉萌发率最高,为40.88%⁴1.53%;不同解冻方式间花粉萌发率差异极显著,以35℃解冻70 s的萌发效果最好;干燥法保存效果较玻璃化法保存好,超低温保存时间对花粉萌发率无显著影响。     

马铃薯(Solanum tuberosum L.)茎尖超低温保存的研究

以克新8号为试验材料,通过优化超低温保存马铃薯茎尖中影响成活及再生的几个关键因素,成功建立了基于玻璃化法的马铃薯茎尖超低温保存体系。茎尖在MS+0.3M蔗糖的培养基上预培养1天后,经2M甘油+0.4M蔗糖的加载液室温加载30 min,浸入到PVS2溶液中(00C)处理60 min,将处理后的茎尖转至含有0.05 mg/L GA3的MS后培养基上培养,成活率和再生率达到94.8%和78.1%。并将建立的玻璃化法应用到其它4个品种,平均再生率为65.5%,研究结果可为中国马铃薯种质资源的超低温保存提供技术支持。     

五叶草莓超低温保存及遗传稳定性分析

【目的】为了找出野生种质资源五叶草莓(Fragaria pentapylla)的超低温保存方法和分析超低温保存后五叶草莓的遗传信息稳定性,【方法】运用玻璃化法对五叶草莓离体茎尖超低温保存技术进行了研究,并采用AFLP和MSAP技术对其遗传稳定性作了探讨。【结果】结果表明,不同的低温锻炼时间、预培养时间、预处理时间、玻璃化溶液(PVS2)处理时间和液氮保存时间对五叶草莓超低温保存后成活率的影响各不相同,经优化后,低温锻炼3周,预培养3 d,预处理30 min,PVS2处理60 min时,超低温保存的最高成活率可达79.7%,液氮处理时间对成活率影响不明显;运用AFLP技术对超低温后成活生长120 d的材料及对照材料基因组DNA进行了分析,超低温前后带型一致,未发现明显差异片段;进一步用MSAP技术分析了超低温保存后成活的材料和对照材料DNA甲基化水平差异,结果表明超低温保存后五叶草莓DNA甲基化与去甲基化分别为5.70%和12.43%。【结论】玻璃化法超低温保存技术可以有效的保存五叶草莓种质资源,超低保存前后的五叶草莓基因组DNA没有发生多态性变化,但DNA甲基化水平降低。     

仰韶和贵妃杏花粉直感研究

仰韶、贵妃杏花粉直感现象研究结果表明:花粉直感在坐果率、果实大小、果实的可食率、果实的着色度、果实含酸量、杏核大小方面表现比较明显,经差异显著分析达显著水平,而在果实可溶性固形物方面的影响较小,两个品种表现基本一致。这一结果为两个品种授粉组合和优质高产栽培的选择提供了依据。     

怀地黄玻璃化和包埋玻璃化法超低温保存

比较了玻璃化与包埋玻璃化超低温保存怀地黄（Rehmannia glutinosa(Gaertn.) Libosch）‘85-5’带芽茎段的效果。结果表明：4 ℃低温锻炼5 d,在添加二甲基亚砜（DMSO）和乙酰胺的预培养基中预培养3 d,60 % PVS₂室温装载25 min,PVS₂ 0 ℃脱水30 min时,玻璃化和包埋玻璃化两种保存方法均达到本试验条件下最佳结果;两种方法相比,玻璃化法的存活率和再生率均较包埋玻璃化法高,前者的存活率（88.92 %）和再生率（64.29 %）分别是后者的1.38倍和2.41倍。可见,采用超低温保存怀地黄种质资源是可行的,且玻璃化法优于包埋玻璃化法。     

日光温室内外金太阳杏光合特性的比较研究

为了探明杏对设施栽培的生理反应,对日光温室内外金太阳杏光合特性进行了比较研究。结果表明,日光温室栽培条件下,金太阳杏单位重量叶片的叶绿素含量增加;光(CO2)饱和点和光(CO2)补偿点降低鸦露地晴天净光合速率Pn日变化呈明显的双峰曲线,温室内也呈双峰线,但双峰出现原因不同。并且研究了影响光合作用的主要生态因子及变化规律,发现净光合速率与胞间CO2浓度、蒸腾作用、气温、叶温、光合有效辐射等因子相关。     

玻璃化法超低温保存柑桔茎尖及植株再生

 采用玻璃化法对柑桔茎尖的离体超低温保存进行了研究。约10 mm 长的柑桔茎尖于含5 %二甲基亚砜(DMSO) 的培养基上预培养3 d , 切取2～2. 5 mm 长的茎尖, 室温下60 %玻璃化溶液2 (PVS2) 装载20～30 min , 然后用PVS2 于0 ℃处理50～60 min , 换入新鲜的PVS2 , 迅速投入液氮中, 24 h 后在40 ℃水浴中迅速化冻, 再用1. 2 mol/L 蔗糖培养基洗涤2次, 接种于含BA 1. 0 mg/L 的MT培养基上, 26 ℃暗培养1 周后转于正常光下培养。枳壳茎尖超低温保存后用氯化三苯基四氮唑(TTC) 法检测, 成活率为100 % , 培养再生率达到90 % ,再生后的苗能正常生根, 与对照没有形态上的变异, 移栽可成活。     

杏新品种—鲁杏2号的选育

鲁杏2号是从20世纪90年代初与国外开展合作育种的杂种实生苗中筛选出的新品种。果实近球形,平均单果质量121.4g,最大单果质量250g;果面黄色,阳面具红晕,果肉金黄色,汁中多;离核;可溶性固形物含量11.8%,可滴定酸1.57%,果实硬度6.04kg/cm2;风味酸甜,品质中上;较耐贮运;抗裂果;果实生育期85d,6月中下旬成熟。     

玻璃化法超低温保存猕猴桃离体茎尖及其植株再生

 以中华猕猴桃矮型种质为离体培养材料, 建立试管无性系, 对其离体茎尖的玻璃化法超低温保存技术进行研究, 探讨猕猴桃种质长期保存的适宜途径。结果表明, 含1～2个叶原基(1.5～2.5 mm) 的茎尖, 在5%二甲基亚砜(DMSO) + 5%蔗糖+MS培养基上预培养4 d后, 于室温下用2 mol/L甘油+ 0.4 mol/L蔗糖预处理30 min, 再在0℃下用玻璃化液(PVS2 ) 脱水处理40 min并迅速投入液氮中, 保存24 h后接种至继代培养基上再培养, 成活率和再生率分别为56.7%和51.6%。再生植株生根后可移栽成活。     

香蕉茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生

 以香蕉(Musa spp. ) 为试材, 对其离体培养茎尖玻璃化法超低温保存影响因素进行研究。结果表明, 不定芽在MS + 3.0～5.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA的培养基上分化较好。香蕉茎尖超低温保存较佳体系是: 2.0～3.0 cm的茎尖在含0.4 mol/L蔗糖培养基上预培养2 d, 剥取带1～2个叶原基的茎尖(长1.0～1.5 mm) , 室温(25℃) 下装载液(MS + 2 mol/L甘油+ 0.4 mol/L蔗糖) 装载20～30 min, 然后用玻璃化溶液( PVS2 ) 于0℃下处理40 min, 换1次PVS2后迅速投入液氮。保存至少1 h后, 在40℃水浴中化冻90 s, 用1.2 mol/L蔗糖培养液洗涤2次, 每次10 min, 然后转入含0.3 mol /L蔗糖的MS培养基上,暗培养10～15 h后转移到含0.5 mg/L 62BA的MS培养基中, 暗培养1周后转移到正常光下, 3个香蕉品种(巴西蕉、广东香蕉2 号、广东粉蕉1 号) 的成活率分别为75.9%、40.0%和69.6% , 再生率分别为63.4%、35.0%和63.4%。再生植株生长和分化正常, 生根后可移栽成活。     

晚熟鲜食杏新品种——龙园甜杏

龙园甜杏是通过李杏远缘杂交的育种方法培育出的寒地晚熟、鲜食兼仁用的杏优良新品种。果实近圆形,底色为杏黄色,阳面带有红晕,平均单果质量59.16g,最大单果质量101.2g;果肉橙黄色、较细软,纤维少、汁液多,风味酸甜适口,品质佳,较耐贮运;可溶性固形物含量11.2%,维生素C60.8mg/kg。哈尔滨地区7月中下旬果实成熟;树体矮小,早果、丰产,适应性强。     

早熟杏新品种金辉的选育

金辉是2003年以鲜食加工兼用杏品种串枝红为母本,以丰产性极强的金太阳为父本进行杂交获得的早熟杏新品种.果实近圆形,果面底色橙黄,阳面着1/4～1/2片状红色,果面光亮洁净,果面有茸毛;果肉橙黄色,肉质细腻,纤维细少,有韧性,汁液较多,酸甜可口;平均单果质量82.6g,大果质量125 g.果肉可溶性固形物含量(w,后同...     

杏原生质体的超低温保存

将杏原生质体在５％ＤＭＳＯ＋０．５ｍｏｌ／Ｌ山梨醇的冰冻保护剂中以１℃／ｍｉｎ的降温速度降至－４０℃,停留２ｈ后投入液氮保存,４８ｈ后在４０℃水浴中化冻,结果表明,不同品种和不同供体材料的原生质体超低温保存的效果不同。‘龙王帽’杏悬浮培养物分离的原生质体超低温保存后的成活率可达４０％。保存后成活的原生质体分裂频率和植板率均有所提高。     

早熟、优质杏新品种——鲁杏1号的选育

鲁杏1号是从20世纪90年代初与国外开展合作育种的杂种实生苗中筛选出的优系。果实椭圆形,果皮橘红色,果肉黄色,肉质细嫩多汁,具香气;离核,仁苦;平均单果质量108g,最大单果质量200g,可溶性固形物12.5%,可滴定酸1.13%,可食率96.6%;果实耐贮运;该品种适应性广,可露地与设施栽培。