2株鲤鱼源乳酸菌体外抗逆性研究

对2株鲤鱼源乳酸菌作为益生菌候选菌株进行体外抗逆性试验。通过耐受胆盐、耐受pH 值、耐受蛋白酶和耐高温等试验, 对这2株乳酸菌进行研究。其中在胆盐耐受性试验中, YL- 1和YL- 7在胆盐浓度0. 4%、培养4 h时仍有30%以上的存活率; 在pH 值耐受性试验时, 2株乳酸菌均可在一定的酸性和碱性条件下存活; 胰蛋白酶对2株菌的存活率没有影响; 在70e 的高温中, 2株乳酸菌均有一定的耐受性。     

团头鲂肠黏膜益生乳酸菌的分离及体外抗逆性研究

从团头鲂肠黏膜上分离筛选出2株对嗜水气单胞菌有较强的抑制作用的乳酸菌菌株JK-1和JK-2,通过耐受胆盐、耐受pH值、耐受蛋白酶和耐高温等试验对这2株乳酸菌进行体外抗逆性试验研究.其中在胆盐耐受性试验中,JK-1和JK-2在胆盐浓度0.4%、培养4 h时仍有35%以上的存活率;在pH值耐受性试验时,2株乳酸菌均可在一定的酸性和碱性条件下存活;胰蛋白酶对2株菌的存活率没有影响;在70 ℃的高温中,2株乳酸菌均有一定的耐受性.     

斜带石斑鱼消化道乳酸菌在模拟胃肠道环境中的存活

从斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)幼鱼消化道分离到3株乳酸菌,通过抑菌试验筛选出抑菌效果较好的2株菌(MM1和MM4),经生理生化鉴定结合16SrRNA基因测序分析,MM1菌株鉴定为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),MM4菌株鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium)。进一步研究了MM1和MM4的体外生长特性,及其对不同pH值的人工胃液、含有不同浓度胆盐的人工肠液及高温的耐受能力。结果表明,MM1和MM4均在培养6h左右进入对数生长期。对人工胃液的耐受能力相似,pH4.0和3.0的人工胃液对2株菌存活的影响较小,而pH2.0的人工胃液对2株菌的影响较大,经2h处理后两者的存活数即下降到105CFU/mL,经4h处理后的存活数低于5.0×103CFU/mL。MM1和MM4对含不同浓度胆盐的人工肠液均具有较好的耐受能力,含中低浓度胆盐(0.1%～0.3%)的人工肠液对2株菌的存活影响很小,处理3h后2株菌的存活数均维持在107CFU/mL以上;高浓度胆盐(0.5%～0.7%)处理3h后2株菌的存活数明显下降,但活菌数仍维持在105CFU/mL以上。MM1和MM4具有一定的耐高温能力,60℃处理30min二者存活数在107CFU/mL以上;80℃处理30min二者存活数在106CFU/mL以上。结论认为,2株乳酸菌具有生长速度快、抑菌能力强、对胃肠道环境和高温耐受能力较强的特点,具有作为益生菌的应用潜力。     

2株鱼源芽孢杆菌的生物学特性研究

体外研究了2株分离自斜带石斑鱼肠道的芽孢杆菌(DE5和SE5)的生长曲线、对模拟胃肠道环境的耐受能力及对潜在致病菌的抑制效果.结果显示,SE5生长速度明显快于DE5,SE5培养4 h进入对数生长期,而DE5培养8 h进入对数生长期.人工胃液耐受试验表明,DE5对人工胃液(不同pH值、胃蛋白酶)的耐受能力较强,pH 2.0的人工胃液处理4 h,其活菌数超过104cfu/ml,pH 3.0和4.0的人工胃液对DE5的生长几乎没有影响;SE5对人工胃液的耐受能力相对较差,pH 2.0的人工胃液处理2 h后未检测到活菌,但pH 3.0和4.0的人工胃液处理4 h后SE5的活菌数超过105cfu/ml.SE5和DE5对人工肠液(不同质量分数胆盐、胰蛋白酶)均有很强的耐受能力,经含0.1%～0.7%胆盐的人工肠液处理3 h后,2株菌的存活数均超过107cfu/ml,且SE5的耐受能力略强于DE5.抑菌试验显示,2株芽孢杆菌对多株潜在致病菌具有一定抑制作用.因此,2株芽孢杆菌均具有生长速度较快,对胃肠道环境耐受能力强特点,且对潜在致病菌具有一定抑制效果,具有作为益生菌应用的潜力.     

仔猪肠源枯草芽孢杆菌体外耐受性研究

研究了分离的仔猪肠源枯草芽孢杆菌体外耐受性。以枯草芽孢杆菌的存活率为考察指标,通过耐酸性、耐胆盐、耐高温试验来研究菌株的体外培养特性。结果:耐酸性试验中枯草芽孢杆菌在p H为2.0的培养基中培养3 h的存活率仍能达到64.7%;耐胆盐试验中其在0.1%和0.3%胆盐培养基中培养8 h存活率均在60%以上;耐高温试验中,70℃、90℃和100℃对其处理20 min存活率分别为70.4%、29.3%和0.2%。结果表明:仔猪肠源枯草芽孢杆菌对酸及胆盐有较强耐受性,对高温有一定耐受性,试验为进一步研制仔猪肠源枯草芽孢杆菌制剂研究提供参考。     

林蛙肠道中乳酸菌的分离及鉴定

用2种方法从健康林蛙肠道菌群中分离乳酸菌,并进一步纯化及鉴定.试验结果表明,用乳酸菌半选择性培养基液体培养液先富集后分离得到了11株单一的乳酸杆菌,经过一系列生化鉴定,11株菌为同一种菌即嗜酸乳杆菌.该菌对嗜水气单胞菌具有抑制作用,抑菌圈直径为12 mm.在胆盐含量为0.3%,pH值为3时仍然生长,表明该菌株完全能适应动物胃肠道环境,作为微生态制剂用菌种具有较好的潜力.     

海水对固定化乳酸菌生长的影响

为探究固定化乳酸菌对海水中不同因素的耐受性,采用涂布分离计数法测定海水中不同pH值、NaCl浓度、Pb~(2+)浓度、葡萄糖浓度对固定化乳酸菌生长的影响。结果表明:海水pH值为6.0,德氏乳杆菌、嗜热链球菌、屎肠球菌三种乳酸菌在海水中的活菌率分别为98.0%、117.6%、111.4%;在海水中添加NaCl和醋酸铅溶液均抑制乳酸菌的生长,但屎肠球菌的耐盐性与耐重金属铅的能力均比德式乳杆菌和嗜热链球菌强;乳酸菌生长的最适葡萄糖浓度为20%,过量葡萄糖会抑制其生长。综合比较三种乳酸菌在海水中的生长耐受性,得出屎肠球菌对海水中的pH值、NaCl浓度、Pb~(2+)浓度及葡萄糖变量的耐受性较强。     

2株乳酸菌抑菌作用研究及安全性评价

该研究利用无菌操作技术对2株乳酸菌[乳酸菌S60 (干酪乳杆菌Lactobacillus casei)和S72 (植物乳杆菌Lactobacillus plantarum)]开展了常规生化检测、药敏实验、体外抑菌实验和动物实验,验证了其作为渔用益生菌的可行性和安全性。结果显示,2株乳酸菌均能在pH为4.5和0.1%的胆盐环境中存活,对水产动物常见病原菌嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)等均有一定的抑制作用,且抑菌物质分析结果显示,其有效抑菌物质与其代谢过程中产生的有机酸类相关。安全性评价实验结果显示2株乳酸菌无分解明胶和溶血的能力。死亡统计和血液生化指标结果显示,高达1.0×10~9 CFU·mL~(-1)的活菌腹腔注射攻毒并未引起实验鱼类[异育银鲫(Carassius auratus)]的严重死亡和机体损伤。可见2株乳酸菌作为口服益生菌具有较高的安全性。此外,耐药特性研究表明,2株乳酸菌对所用药物中的氨基糖苷类和磺胺甲唑耐受能力强,对氨苄青霉素、恩诺沙星、氟苯尼考和多西环素敏感。因此,2株乳酸菌的应用需要注意管理过程中药物的选择。     

急性pH和碳酸盐碱度对缢蛏存活率、Na+/K+-ATPase活性及血淋巴吞噬能力的影响

采用静态毒理学实验方法,分析了2种规格缢蛏(小规格SSc和大规格LSc)在pH和碳酸盐碱度(C_A)急性胁迫条件下的存活率,Na~+/K~+-ATPase(NKA)活性以及血淋巴的吞噬能力。结果显示,当C_A浓度为2.5 mmol/L、pH值为7.5～9.5时,2种规格缢蛏的存活率均接近100%;当pH值大于9.5时,2种规格缢蛏的存活率均显著下降。当C_A浓度为0～44.58mmol/L、pH值为9.0～10.0时,随着C_A浓度的上升,缢蛏的存活率明显下降;在pH值为9.5条件下,LSc的鳃组织NKA活性,随着C_A浓度的上升而升高,LSc血淋巴的吞噬能力随着C_A浓度的上升而下降。由此可见,缢蛏在高pH或高C_A下表现出较强的耐受性,但高pH和高C_A协同胁迫下对缢蛏的存活率具有较大的影响,研究结果为进一步探索缢蛏在盐碱地的养殖提供了一定的理论参考。     

817肉鸡肠道乳酸菌及生理特性研究

为筛选817肉鸡同源性乳酸菌菌株,从健康30日龄肉鸡盲肠内容物中分离出LB1、LB2、LB3和LB4四种疑似乳酸菌,经革兰氏染色镜检,生化分析及糖发酵试验进行鉴定,并通过耐酸性、耐胆盐性及抑菌性生理特性研究。结果表明:4种菌株均初步判定为乳酸菌属,LB3和LB4在0.3%胆盐浓度的菌落存活数显著高于其他菌株(p<0.05);LB4和LB1在pH4.0酸度的存活菌数显著高于其他菌株(p<0.05);LB4抑菌圈直径最大,抑菌效果最佳。经综合评定,LB4菌株生理特性最佳,可作为乳酸菌制剂菌种备选。