巴西橡胶花药培养的研究

本文综合报道了近三年来巴西橡胶花药培养研究的主要试验结果.已有10个材料的花药培养获得植株.品种之间诱导频率差异很显著.MB基本培养基诱导的效果优于MS培养基.对多数材料诱导愈伤组织的较适宜培养基为MB K、2,4—D、NAA各1毫克/升 CM5% 蔗糖7%.分化胚状体较佳培养基为MB(微量元素扩大一倍) K0.5毫克/升 NAA0.2毫克/升 GA0.3毫克/升 蔗糖7%.把MB或MS培养基中的大量元素减少20%,微量元素扩大1—2倍,同时补加2毫克/升的GA和0.2—0.5毫克/升的IAA,蔗糖5%,或再加 5—Br0.5毫克/升,是出苗诱导率较高的配方.所得到植株根尖细胞染色体的数目是不稳定的,其中有单倍、二倍及少数多倍的整信性细胞,也有大量的非整倍性细胞.植株移栽成活,生长正常.     

甜菜未授粉胚珠培养技术研究

甜菜未授粉胚珠接种在附加不同生长素(IAA、2,4—D)、细胞分裂素(KT、6BA)或激素组合(6BA NAA和IAA KT)的MS、PGOB、1/2MS等培养基上,可成功诱导出胚状体,分化诱导形成单倍体植株,对其用0.1％～03％秋水仙碱溶液处理使染色体加倍,获得了高度纯合的二倍体株系。试验选配了110种诱导培养基、两种分化和3种生根培养基,选择了143种不同基因型材料.不同基因型材料在不同培养基上的诱导率各不相同.     

红麻花粉植株诱导成功

为探索红麻育种新途径,加快红麻育种的步伐,我们于1979年开始进行红麻花药培养的研究。供试品种为红麻71—33。79年接种于每升附加2,4—D 2毫克,萘乙酸1毫克及激动素1毫克的 MS 培养基上诱导而成的愈伤组织,经多代分化培养,80年夏,从中挑选部分新鲜愈伤组织进行再诱导,嗣后转入加有玉米素、6—苄基氨基嘌呤的 MS 培养基上进行再分化培养,于1981年10月获得20多株绿苗及大量的绿芽。     

用离体花药诱导巴西橡胶植株的研究

自1973年培养巴西橡胶花药以来,已产生了诱导频率很高的愈伤组织和近4万个胚状体。在1977年底至1978年春先后从高产无性系“海垦2”和“热研88—13”获得113棵完整植株。并首次盆栽成活,成活率30％。到目前为止,已从“海垦2”、“海垦1”、“热研88—13”等品种中诱导出完整植株137棵,1979年移栽成活率提高到69％。经过几年的试验,得到了培养效果较好的下列培养基:用以诱导愈伤组织和幼小胚状体的第一培养基为MS基本培养基添加5％椰乳、0.5～1.0毫克/升2,4—D和0.5～1.0毫克/升K,蔗糖提高到7～10％,用以继续诱导肉眼可见胚状体的第二培养基为MS基本培养基添加0.1～0.2毫克/升NAA,0.2～1.0毫克/升K和0～10毫克/升水解DNA,蔗糖提高到7％,微量元素可提高1～2倍;用以诱导植株的第三培养基为改良的MS培养基,其大量元素减为60～80％,微量元素加倍,蔗糖提高到5％,再添加2毫克/升GA。对非完整植株,再加0.5毫克/升K和0.5毫克/升BAP,有促进顶芽长出真叶,成为完整植株的作用。接种后45～50天是转移愈伤组织的最适时间。胚状体和植株的诱导频率因材料和花期的不同而有很大差异。经组织学和细胞学研究,证明花药植株起源于花药的体细胞。     

苎麻茎尖组织低温保存技术研究

苎麻不同类型的7个品种的茎尖组织接种在附加6BA1.0mg/L、NAA0.2mg/L、蔗糖2％的MS培养基上,在5～10℃冰箱中保存。6个月后将低温保存茎尖转入附加6BA1.0～3.0mg/L,GA_30.2～0.5mg/L、NAA或IAA 0.2～0.5mg/L的培养基上进行生长培养,长根培养在附加NAA0.5mg/L的1/2MS培养基上进行,培养温度为26～30℃,光照为每天11小时,1000Lx,获得完整试管植株。     

外源激素对亚麻花药、花瓣、未受粉子房去分化培养的作用

亚麻外植体去分化培养的程度,直接地影响愈伤组织的再分化。为此,我们使用不同种类(IAA、NAA、2,4—D、K、玉米素)和不同浓度(0.1毫克/升,0.5毫克/升、1毫克/升、1.5毫克/升、2毫克/升、4毫克/升)的外源激素,研究它们对亚麻外植体的作用及其变化规律,为提高亚麻外植体     

甜叶菊试管苗的研究

以甜叶菊种子萌发的幼苗为试材,用茎尖为外植体,在MS 0.5mg/LNAA 0.5mg/L BA 3g/L蔗糖培养基中诱导一次性丛生芽,在1/2 MS 1.0mg/L NAA 0.5mg/L IBA 3g/L蔗糖培养基中诱导大量须根,产生15～20倍健壮的丛生芽,为甜叶菊试管苗工厂化系列生产打下了基础.     

双低油菜品种组织培养的反应

在有激素培养基中萌发的油菜种苗的子叶大而厚、根少而短、下胚轴粗短,并有少数愈伤组织出现。2,4—D1～3mg/1均能诱导愈伤组织形成,添加0.1～1mg/16BA有利于愈伤组织的分化培养。子叶愈伤组织诱导率高于下胚轴,三个品种中,双低油菜DSV—SR—50的诱导率最高。来自激素萌发培养基的下胚轴的愈伤组织发生早、发展快、诱导频率高,并有直接分化出芽的。愈伤组织在含有IAA1mg/l和6BA1～7mg/l的B5培养基中都能分化出芽,但以添加6BA3～5mg/l对频率最高。小塔的愈伤组织分化频率最高为45.65％,以下为DSV—SR—5034.32％,Liglando 22.79％。并讨论了前期培养基和材料基因型与愈伤组织诱导分化的问题。     

柑桔细胞悬浮培养及再生植株的研究

取锦橙(Citrus sinensis Osbeck)试管实生苗下胚轴切段诱导愈伤组织,继代培养,再以该愈伤组织制备悬浮细胞系。在附加KT(0.75mg/L)和2,4—D(0.5mg/L)的MS液体培养基中悬浮单细胞能正常分裂和生长,形成多细胞团和愈伤组织,在MT添加BA(1.5mg/L)和IAA(0.5mg/L)的固体培养基上能进一步诱导小芽并形成完整小植株。文中还探讨了建立悬浮培养细胞系的最适蔗糖浓度以及单细胞悬浮培养过程的细胞密度和培养液的pH值变化情况。     

尖蜜拉的快繁技术

以尖蜜拉老茎干上的不定芽作外植体,采用从不定芽→丛生芽→完整植株的繁殖途径进行繁殖。结果表明∶尖蜜拉不定芽外植体在温度（262）℃,光照强度1500～2000k、光照时间12hA条件下,茎萌发最适培养基为MS+6BA 2.0mgL+NAA0.1mgL+Vc0.5gL;茎增殖最适培养基为MS附加6-BA3.0mg人+NAA 0.5mgL;茎生根最适培养基为1/2MS+ BA 0.5mgl+NAA 3.0mgL+AC0.5gL;生根时温度可适当上升为28+2）℃,光照强度20001x,光照时间12h/。     

密花石斛无菌播种与茎尖培养研究

密花石斛是原产海南、兼具观赏和药用价值的野生石斛。为促进其规模化生产,探讨了密花石斛的无菌播种和茎尖培养中培养基种类和激素等配比。结果表明：在花宝1号附加土豆的培养基上萌芽效果最好,原球茎发生率较高;分化阶段以花宝1号附加香蕉的培养基分化效果最理想,幼嫩茎尖在MS基本培养基上附加BA 3.0 mg/L与NAA 0.2 mg/L上可诱导出新芽。     

青天葵组织培养繁殖技术的研究

以青天葵球茎为外植体,在附加 BA 1—2毫克/升,NAA0.2毫克/升的 BM 培养基上进行培养,就能诱导出芽和根茎。根茎埋在砂土中,3个月左右就能形成大小不等的子球茎,4个月后出球率为40%。这些子球茎植后,能长成完整的青天葵植株。     

影响芝麻花粉愈伤组织形成的某些因素

试验结果表明芝麻花药培养最适宜的培养基是B_6培养基,其次是Nitsch(1969)、MS培养基,蔗糖浓度是3—6％。只有2,4—D或2,4—D与低浓度BA组合能使花药脱分化。秋播的花药比夏播的易于诱导,夏播栽培品种中芝8号花药愈伤率是2.2-9.6％,秋播的则是46,3％。培养基的pH值在5.8以上时抑制花粉发育,L—酪氨酸对花药有毒害作用.     

提高水稻成熟种胚体细胞培养力

实验结果认为,水稻成熟胚是一种“竞争性”外植体。高浓度的脱落酸（ABA）能有效地抑制胚芽和胚根的生长,而对水稻盾片愈伤组织的生长影响较小,从而促进盾片愈伤组织的同步健壮生长。这些愈伤组织致密,呈乳白色且分化频率高。调节分化培养基的浓度可减少愈伤组织变褐老化,有效地提高愈伤组织绿苗分化率。在诱导培养期间,较高的2,4－D浓度（大于1 mg/L）和6－BA会抑制种胚体细胞愈伤组织的诱导,其中籼稻比粳稻敏感。在诱导培养基中附加2,4－D 0.5 mg/L,BA 0.5 mg/L,ABA 5 mg/L,B_1 (5－10 mg/L)对成熟籼稻种胚培养是较合适的。     

籼稻绿芽悬浮细胞原生质体再生成株

采用籼稻Hu-18绿芽为外植体,在N6附加2 mg/L 2,4-D的培养基上诱导愈伤组织。加20 d后转人AA 培养基进行悬浮培养。继代培养45 d左右形成了分裂旺盛的胚性细胞悬浮系。即从绿芽诱导至胚性细胞悬浮系的建立仅用了65 d左右。继代后前6 d,细胞干重几乎每2 d增加1倍,而培养液的渗透压及pH 值迅速下降。取继代后4 d的悬浮细胞游离原生质体,产率为8.74X10⁶/g鲜重。纯化后的原生质体在KPR培养基中进行琼脂糖包埋培养,原生质体植扳率为12.0％ 。将20 d后的小愈伤组织(0.1 mm)转入 N6附加0.5 mg/L 2,4- D、1 mg/ L BA、1 mg/L KT、0.3 mg/L ZT的培养基上增殖,待长成直径2～3 mm 左右时,用N₆附加1 mg/L BA,1 mg/L KT,0.3 mg/L ZT的培养基进行分化培养, 5 d后同时出现芽根生长,最终再生成绿色植株,绿苗分化率为3.5株/10000个原生质体。     

樱桃砧木吉塞拉6号快繁体系建立

[目的]建立樱桃砧木吉塞拉6号快速繁殖体系。[方法]以甜樱桃吉塞拉6号带腋芽茎段为外植体,探讨其在不同激素组合的培养基上的诱导效果及生根培养效果。[结果]适宜的芽诱导与增殖培养基为MS+6BA 1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,分化率及增殖倍数可达92%和3.4,适合吉塞拉6号组培苗壮苗的培养基为MS+6BA 1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L+NAA 0.05 mg/L,适宜的生根培养基为1/2 MS+IAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.5 g/L。[结论]在促进吉塞拉6号的分化方面,6BA、IBA和NAA的共同作用优于6BA和IBA组合。     

石牌广藿香的细胞悬浮培养

以石牌广藿香无菌苗幼嫩叶片为外植体,通过愈伤组织诱导和培养、筛选及细胞的液体培养,在含0.05 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L KT的MS液体培养基中获得了分散性良好的悬浮细胞,建立了广藿香细胞悬浮培养体系.研究培养基中植物生长调节剂、继代培养时间等因素对细胞生长、分化的影响.结果表明:0.05 mg/L2,4-D和0.5 mg/L KT能促进细胞的快速生长,而0.5～1.0 mg/L BA促进细胞的分化;以继代培养时间为15～18 d细胞进行接种,接种量8 g/100 mL时,悬浮细胞到达最大生长量,细胞鲜重最高达到511.2 g/L.     

悬浮培养诱导克劳茨基棉(G·kletzchianum Anderss)体细胞胚胎发生

在含有谷氨酰胺(最适量1—15毫克分子量)的液体培养基中悬浮培养克劳茨基棉愈伤组织3—4周后,分化出体细胞胚状体。胚胎形成发生在经过含10毫克/升细胞分裂素2iP的培养基培养过的愈伤组织。胚状体有形成表皮的分生区,并形成根和发育不完全的叶片。天冬酰胺对促进胚状体分化的效果比谷氨酰胺差得多。     

郑薯5号和费乌瑞它试管苗培育、快繁及试管薯诱导培养基的筛选

用不同配方的培养基对马铃薯试管苗培育、繁殖和试管诱导进行了研究,结果表明,马铃薯茎尖分化培养基为MS+6 BA0.5+NAA0.1,分化成苗率达46％;切段快繁培养基为1／2 MS,根多苗壮;试管薯诱导培养基为MS+6 BA0.5+NAA0.2,诱导结薯株率达80％以上。     

频繁开花高产小桐子组织培养的初步研究

为了奠定频繁开花型高产小桐子的快繁及转基因基础,通过对小桐子茎段腋芽培养、叶片和叶柄愈伤诱导及不定芽分化的不同激素组合培养进行研究。结果表明：适合该高产品种的茎段培养的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋IBA 0.1 mg/L,叶片愈伤诱导及不定芽分化培养基为MS＋6-BA 2.5 mg/L＋IBA 0.5 mg/L,叶柄愈伤诱导及不定芽分化培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋IBA 0.2 mg/L,生根培养以1/2MS＋IBA 0.5 mg/L＋AC 0.1%较为适宜。引起小桐子组培苗玻璃化现象的主要原因之一是BA浓度过高;在不定芽的分化培养中,愈伤过多会严重影响不定芽的数量及质量。