枇杷根际土壤真菌对生防木霉菌株P3.9的影响

采用对峙培养法,测定105株枇杷根际土壤真菌对生防木霉菌株P3.9的抑菌作用。结果表明,抑制率30.0%~39.9%的菌株共5个,占供试菌株的4.8%;抑制率20.0%~29.9%的菌株共13个,占供试菌株的12.4%;抑制率10.0%~19.9%的菌株共45个,占供试菌株的42.9%;抑制率0%~9.9%的菌株共42个,占供试菌株的40.0%。结果表明,所有供试枇杷根际土壤真菌菌株对P3.9生防木霉菌株的抑制率均在40%以下,82.9%的供试菌株抑制率在0%~19.9%之间。枇杷根际土壤真菌菌株不影响P3.9生防木霉菌株在枇杷根际土壤中的定殖能力。     

引入内生木霉菌株P3.9对枇杷根际土著真菌数量的影响

为了探究内生木霉菌株P3.9对枇杷根际土著真菌是否有不良影响,采用稀释分离法与平板计数法,跟踪测试了此菌株1个季度内对枇杷根际土著真菌数量的影响。结果表明:接种内生木霉菌株P3.9后枇杷根际土壤土著真菌数量总体呈减少趋势;接种后5～60 d,除35～40 d间土著真菌数量变化不明显外,其余时间以10 d为周期呈循环增减变化,接种后60～90 d以30 d为周期呈增减变化;而对照组在5～50 d时土著真菌数量以15 d为周期呈循环减增变化,50～70 d时以20 d为周期呈增减变化,70～75 d数量变化不大,75～85 d以10 d为周期呈增减变化,85～90 d数量呈增加态势;对照组土著真菌数量波动幅度比处理组大,真菌数量不稳定;处理组真菌数量极显著低于对照组,表明内生木霉菌株P3.9对土著真菌有一定抑制作用。     

引入内生木霉菌株P3.9对枇杷根际土著真菌数量的影响（英文）

为了探究内生木霉菌株P3.9对枇杷根际土著真菌是否有不良影响,采用稀释分离法与平板计数法,跟踪测试了此菌株1个季度内对枇杷根际土著真菌数量的影响。结果表明:接种内生木霉菌株P3.9后枇杷根际土壤土著真菌数量总体呈减少趋势;接种后5～60 d,除35～40 d处理组土著真菌数量变化不明显外,其余时间以10 d为周期呈循环增减变化,接种后60～90 d以30 d为周期呈增减变化;而对照组在5～50 d时土著真菌数量以15 d为周期呈循环减增变化,50～70 d时以20 d为周期呈增减变化,70～75 d数量变化不大,75～85 d以10 d为周期呈增减变化,85～90 d数量呈增加态势;对照组土著真菌数量波动幅度比处理组大,真菌数量不稳定;处理组真菌数量极显著低于对照组,表明内生木霉菌株P3.9对土著真菌有一定抑菌作用。     

内生木霉P3.9菌株的多功能性及其枇杷根腐病的盆栽防效

为明确内生木霉P3.9菌株多功能性及其生防潜力,采用菌丝生长速率法、透明圈法、农艺性状观测法、组织分离法、土壤梯度稀释法和盆栽法,分别测定其对不同植物病原菌的抑制率、不同化学农药的耐药性、纤维素及磷的降解能力、促生作用、在枇杷植株及其根际土壤中的定殖能力和枇杷根腐病的防治效果。结果表明,内生木霉P3.9菌株对7种植物病原菌有不同程度的抑菌作用,其中,对枇杷根腐病菌的抑制作用最强,抑菌率达93%;对5种化学农药有不同程度的耐药性,其中,对硫磺三唑酮的耐药性最高;对纤维素及磷有极强的降解能力;对枇杷植株有促生作用,能定殖于枇杷植株及其根际土壤中,盆栽防治枇杷根腐病效果可达80%。     

抗枇杷根腐病病菌的枇杷内生木霉P3.9菌株生物学特性

以抗枇杷根腐病病菌的枇杷内生木霉P3.9菌株为试验材料,用菌丝生长速率法测定其生物学特性。结果表明,适合内生木霉P3.9菌株菌丝生长的培养条件为PDA培养基,碳源为D-果糖、葡萄糖、麦芽糖、α-乳糖或D-甘露醇,氮源为磷酸二氢铵,温度为15~30℃,p H值为3~10。最适合内生木霉P3.9菌株产孢的培养条件是以D-果糖为碳源,以磷酸二氢铵为氮源,温度为28℃,p H值为10,光暗交替。蛋白胨极显著促进孢子萌发,孢子致死温度为52℃。研究结果为内生木霉P3.9菌株的开发应用提供了一定理论依据。     

抗枇杷根腐病病菌的内生木霉菌株筛选

以分离自黄瓜及枇杷中的12株内生木霉属(Trichoderma spp.)菌株(J1、J2、J3、J4、J5、JD3、GD3、GD5、GM6、Y2、PZ1、P3.9)为供试菌株,用菌丝生长速率法测定其对枇杷根腐病病菌(Pestalotiopsis microspora)的抑制率。结果表明,12株木霉对枇杷根腐病病菌均有抑制作用,菌株P3.9和JD3的拮抗等级达Ⅱ,菌株Y2的拮抗等级为Ⅳ,其余菌株的拮抗等级均为Ⅲ。菌株P3.9和JD3的抑菌率分别为80.1%、78.1%。P3.9菌株发酵滤液在50℃水浴2 h,浓度达75%时,对枇杷根腐病病菌的抑菌率为78.9%。此结论可以为枇杷根腐病绿色防控提供菌种资源及理论依据。     

枇杷内生木霉P3.9菌株液体发酵条件优化筛选

为弄清枇杷内生木霉P3.9菌株最佳发酵条件,以分离自枇杷主干韧皮部的内生木霉P3.9菌株为供试菌株,以菌丝生长量为指标,通过单因素和正交试验,筛选最佳组合液体发酵培养液,碳源、氮源、pH及其接种量。结果表明,最佳培养液为马铃薯浸汁,碳源为D-果糖,氮源为磷酸二氢铵,pH 7.0,接种量为1.5%;正交试验表明其菌丝生长的最佳组合培养条件为马铃薯浸汁,在其中添加2%D-果糖、0.05%磷酸二氢铵、pH 6.0、接种量为1.5%。按优化后的培养条件培养,最高菌丝干重可达5.1 mg/m L。     

一株生防木霉菌的农药降解特性

从实验室保存的9株生防木霉菌中筛选出一株具有农药降解作用的木霉菌株Q3,该菌能够以100 mg/L高效氯氰菊酯、毒死蜱和吡虫啉为唯一碳源生长,7天的降解率分别达到90.43%、86.71%和78.81%;采用蔬菜大棚田间试验方法并利用气相色谱仪检测了高效氯氰菊酯和毒死蜱在油菜中的残留动态。结果表明,木霉菌Q3能够显著降低油菜中的农药残留,17天后高效氯氰菊酯和毒死蜱的降解率分别达到45.54%和72.58%。     

番木瓜炭疽病生防木霉菌株的初步筛选

为利用生物防治的方法抑制番木瓜炭疽病,通过测定并综合分析比较各木霉菌株的抗生作用、产孢量、不同培养基下的抑菌率、生长速度以及耐药性,从90株木霉菌株中初步筛选出拮抗番木瓜炭疽菌的优良木霉菌(Trichodermaspp.)T05-049、T8-R、T05-035和T05-044等4株菌株,其产孢量分别为1.42×109、5.45×108、4.16×108、1.38×109;在1.01 mg/L特可多的条件下,均生长良好;该4个菌株在25、20、15和10℃下生长正常,耐温性较好,对炭疽菌(Colletotrichumspp.)的抗生作用分别为3、1、1、5;分别在PDA和番木瓜培养基上于25、20和15℃下培养,木霉对胶孢炭疽菌(C.gleosporioides)的抑制率在57.05%以上,对辣椒炭疽菌(C.capcisi)的抵制率在47.87%以上.     

一株生姜生防内生真菌的生态学特性

【目的】探究菌株BJM-11的生态学特性,为其菌种的发酵生产及在生姜生产大田应用提供科学依据。【方法】采用菌落生长法和血球计数板孢子计量法,观测分析菌株BJM-11在不同温度、pH、碳源和氮源条件下的菌丝生长和产孢特性。【结果】菌株BJM-11在10～35℃、pH 4.0～12.0及24 h连续光照、24 h连续黑暗和12 h光暗交替条件下均能生长和产孢,其中在25～30℃下菌落直径显著大于其他温度处理(P0.05,下同),在25℃下产孢量最大,且显著大于其他温度处理;在pH为5.0～6.0时的菌落直径显著大于其他pH处理,在pH为5.0、6.0和7.0时产孢量较大,且均显著大于其他pH处理;在24 h连续黑暗时菌落直径显著大于其他光照处理,在24 h连续光照时产孢量最大,且显著大于其他光照处理。菌株BJM-11能在8种碳源和11种氮源培养基上生长和产孢,其中碳源为葡萄糖和可溶性淀粉时菌落直径较大,碳源为甘露醇时产孢量最大且显著大于其他碳源处理;氮源为酵母浸粉和蛋白胨时,菌落直径显著大于其他氮源处理,而氮源为蛋白胨时产孢量最大,且显著大于其他氮源处理。菌株BJM-11在PDA等5种培养基上均能生长和产孢,其中在PDA和PSA培养基中菌落直径显著大于其他培养基,在PDA培养基中的产孢量最大,且显著大于其他培养基。【结论】菌株BJM-11在温度25～30℃、pH 5.0～6.0、连续黑暗及以葡萄糖或可溶性淀粉为碳源、以蛋白胨或酵母浸粉为氮源、培养基为PDA或PSA条件下菌落直径较大,菌丝生长状况较佳;在温度25～30℃、pH 5.0～7.0、连续光照及以甘露醇为碳源、以蛋白胨为氮源、培养基为PDA条件下产孢量较大,可供开发利用BJM-11参考。     

枇杷植株对木霉P3.9菌株及枇杷根腐病病菌的激素响应

为弄清枇杷植株对有益菌及致病菌的激素响应差异,明确内生木霉P3.9菌株诱导枇杷植株抗根腐病病菌的信号转导途径,以枇杷内生木霉P3.9菌株及枇杷根腐病病菌P3.1、P3.5、P3.6菌株为研究对象,将其活体接种于1年苗龄枇杷根茎部,木霉接20 g菌剂,根腐病病菌各接3个直径为5 mm的菌丝块,设木霉P3.9菌株分别与3株致病菌同时接种枇杷根系为阳性对照组,不接种任何菌体为阴性对照组,单独接种木霉P3.9菌剂为处理组。用高效液相色谱法,检测各处理及对照枇杷根、茎和叶中茉莉酸(JA)和水杨酸(SA)含量的变化情况。结果表明,木霉P3.9菌株与枇杷互作,促使枇杷根部JA、SA含量均增加。茎部SA和JA含量均增加。叶部JA含量不受影响,游离SA含量降低,结合SA含量增加。说明枇杷根、茎和叶对有益菌木霉P3.9菌株的JA和SA响应存在组织特异性。游离SA对枇杷叶防御系统起负向调控作用,枇杷根、茎部防御系统由JA和SA途径共同转导。木霉P3.9菌株分别与致病菌P3.1、P3.5和P3.6互作,在枇杷根部SA含量均增加,JA含量变化不一致,前两者JA含量降低,后者JA含量不受影响。在茎部SA和JA含量...     

内生木霉P3.9菌株在枇杷根际土壤中的定殖能力测定

采用土壤稀释分离法与平板计数法测定内生木霉P3.9菌株在枇杷根际土壤中的种群密度,跟踪测试90 d内其在枇杷根际土壤中的定殖动态,结果表明,P3.9菌株在枇杷根际土壤中的定殖过程大致可划分为3个阶段,前25 d内,菌株相对含量以10 d为1个周期呈增减增减变化趋势,且于10 d时达到最大值,为9.52×10~5 CFU/g,该时期木霉P3.9菌株在根际土壤中快速适应并定殖存活;25～65 d期间,P3.9菌株相对含量的变化周期延长至20 d,也呈增减增减变化趋势,且波动幅度较5～25 d期间小,该时期木霉能够相对稳定地定殖存活于根际土壤中;65～90 d期间,P3.9菌株相对含量在65～75 d期间出现小幅度增加后呈近直线状下降态势;5～75 d期间,P3.9菌株相对含量维持在10~5 CFU/g水平上,且75 d时较接种量只下降1个数量级,说明木霉P3.9菌株在枇杷根际土壤中的持效期可达75 d。     

生防长枝木霉菌株T05生物学特性

研究了长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)菌株T05的生物学特性,包括不同培养条件对菌丝生长和分生孢子萌发的影响。结果表明:T05在PDA、MEA、查彼和基本培养基上都能生长,以在PDA上菌丝生长最快。在PDA上,菌丝生长的温度范围是15~35℃,最适温度为25℃;pH值为4~10,最适pH=6。在基本培养基上,菌丝生长的最佳碳源是葡萄糖、最佳氮源是蛋白胨、最佳维生素是VB_1。分生孢子萌发需要一定的营养,当其分别在PDB、2%蔗糖水和自来水中时,以在PDB中的孢子萌发率最高。在PDB中,分生孢子萌发的温度范围是15~35℃,最适温度为25℃;接种后8 h就有15%的萌发率,在16~24 h内萌发率为25.33%~46.12%。     

木霉P3.9菌株对枇杷根际土著细菌数量的影响

以枇杷内生木霉P3.9菌株为供试菌株,用稀释涂布平板法与种群密度法,检测木霉P3.9菌株对枇杷根际土著细菌数量的影响。结果表明,在5～25 d期间,以5 d为周期处理组细菌数量前10 d呈减增变化,后10 d细菌数量持续减少。对照组细菌数量前5 d减少,10～15 d期间保持稳定,后5 d增加。木霉P3.9菌株施入枇杷根际土壤20～80 d期间,处理组细菌数量变化趋势与对照组完全一致,其中在20～50 d期间,处理组细菌数量波动幅度大于对照组。80～90 d期间,处理组细菌数量变化趋势与对照组相反。将木霉P3.9菌株施入枇杷根际土壤3个月内,处理组细菌数量明显高于对照,木霉P3.9菌株可促使枇杷根际土壤细菌数量增加。     

棉花黑斑病病原鉴定及生防木霉菌株的筛选

从河南省部分地区感染黑斑病的棉花叶片上分离病原菌,并对其致病力、病原及其生防木霉菌株进行了研究。共分离到5株棉花黑斑病菌株。致病力分析表明,CHB-3的致病力比较强,病情指数达到89.3。对Y21c菌株的核糖体RNA基因内转录间隔区进行PCR扩增和序列测定,并在GenBank中进行Blast搜索和比对分析,根据rDNA-ITS序列分析结果并结合病菌的形态学特征,初步认为河南省棉花黑斑病的病原菌为细极链格孢菌(Alternaria tenuissima)。利用平板对峙培养测定了7个木霉菌株对棉花黑斑病菌株CHB-3的拮抗作用,筛选到抑菌作用较好的木霉菌株TH,抑菌率为88.6%。     

1株生防木霉菌可湿性粉剂中助剂的筛选

继初步研究酷绿木霉TR1与多种常用载体和润湿分散剂的生物相容性后,通过菌丝生长速率测定法和孢子萌发率法进一步对与TR1有良好生物相容性的稳定剂、紫外保护剂和保水剂进行筛选。结果表明：4种稳定剂中,CMC-Na对TR1菌丝的生长无明显影响,在低浓度下对孢子萌发的影响与对照没有显著差异;5种紫外保护剂中,糊精和黄原胶对TR1菌丝生长和孢子萌发没有影响,与TR1具有良好的生物相容性;保水剂在碳源不充足的情况下可给菌丝的生长提供碳源,在含保水剂的培养基上,空气湿度对孢子萌发的影响较小。     

高效木霉菌株筛选及对针叶苗木立枯病的生防作用

应用8株木霉分别与苗木立枯病病原菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和腐皮镰刀菌(Fusarium oxysporum)进行平板对峙培养,测定木霉非挥发性和挥发性次生代谢产物对病原菌菌丝生长的影响;应用高效菌株T-C14和T-43及其组合对针叶苗木(落叶松、红松和云杉)立枯病进行室外防治试验,并测定了木霉的促生作用.试验结果表明:在对峙培养及发酵液抑菌试验中,各菌株及其次生代谢产物对2种病原菌均有不同程度的抑制作用,对峙培养中,T-28和T-19对立枯丝核菌和腐皮镰刀菌的抑制率最高,分别达到61.57％和57.31％;T-43发酵液对病原菌的抑制率最高分别达79.41％和77.64％,可以强烈抑制病原菌的生长并具有热稳定性.用木霉菌剂对针叶苗木进行灌根处理,对3种针叶苗木立枯病具有较好的防治效果,其中孢子菌剂好于液体菌剂,对落叶松、红松和云杉立枯病防治效果最高分别为88.60％、83.87％和88.63％;促生方面,液体菌剂好于孢子菌剂.     

生防木霉菌生物安全性评价

 【目的】检测木霉菌（Trichoderma sp.）的生物安全性，评价木霉菌应用后对部分生态因子的影响。【方法】采用常规试验方法，将木霉菌孢子进行种子接菌、土壤接菌、水中接菌，研究木霉菌对瓜类作物生长性状的影响，在水中的存活及对根际土壤微生物的影响，对大白鼠、大白兔的毒性。【结果】大多数木霉菌对甜瓜种子安全，并且能够显著提高种子的出苗率、增加须根数和促进瓜苗生长；绿色木霉菌T23菌株对甜瓜及西瓜根际土壤真菌、细菌和放线菌群体数量无显著影响；木霉菌孢子在河水、井水、雨水及自来水中均不能萌发，分生孢子在水中存活约12～20 d，厚垣孢子约20～30 d，菌体自行消解；对鱼苗生长没有不良影响；对大鼠的急性经口和经皮毒性均属低毒类，对兔皮肤和兔眼粘膜无刺激性。【结论】与其它微生物农药一样木霉菌无毒、无污染，用于作物土传病害的生物防治无明显性风险。     

一株生防木霉菌株的鉴定及其对番茄保护酶的诱导作用

采用形态鉴定和5.8S rDNA-ITS序列分析对土壤中分离得到菌株进行鉴定.结果表明,其形态特征与哈茨木霉非常接近,5.8S rDNA-ITS序列分析表明.其与哈茨木霉的同源性达到99%,因此,鉴定其为哈茨木霉新菌株.用其孢子悬浮液对番茄灰霉病进行防治,测定植物苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物...