企鹅珍珠贝不同组织同工酶表达的差异

采用垂直板聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳对企鹅珍珠贝[Pteria penguin (Roeding)]的消化盲囊、鳃、外套膜、足部肌肉和闭壳肌肌肉5种组织中的过氧化物歧化酶(SOD)、酯酶(ESF)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、乳酸脱氢酶(LDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)同工酶的表达变化进行比较研究。结果表明，企鹅珍珠贝组织内的这6种同工酶存在不同程度的组织特异性，其位点的表达与否和酶活性的强弱方面都表现出明显的组织差异。企鹅珍珠贝的SOD、ESF同工酶在消化盲囊中有较高活性，而MDH、ME在闭壳肌中活性较高。研究中讨论了这些差异与组织生理功能的相关性。     

广东雷州流沙湾养殖企鹅珍珠贝多毛类寄生虫病的调查

对流沙湾养殖的企鹅珍珠贝(Pteria penguin)多毛类寄生虫病进行了调查。结果显示,锥形笼养殖2~4年的企鹅珍珠贝母贝多毛类寄生虫病感染率为39.13%~44.98%,开放式养殖2~4年为26.6%~35.63%,同一养殖方式各龄母贝多毛类寄生虫病感染率之间差异不显著(P>0.05);养殖时间两年时,多毛类寄生虫病的感染率与养殖方式之间存在极显著差异(P<0.01);养殖时间3年和4年时,多毛类寄生虫病的感染率与养殖方式之间存在显著差异(P<0.05)。锥形笼养殖的企鹅珍珠贝左壳较易感染多毛类寄生虫病。企鹅珍珠贝感染多毛类寄生虫病后,其生长与健康贝相比,无显著差异(P>0.05)。     

企鹅珍珠贝GLUT1 基因全长cDNA 克隆及其对葡萄糖的表达响应

葡萄糖转运蛋白(GLUTs)是能量代谢的关键因子,为了探索GLUT1(glucose transporter type1)在企鹅珍珠贝(Pteria penguin)中的功能,开展了企鹅珍珠贝GLUT1基因的克隆与功能研究。利用RACE技术克隆出企鹅珍珠贝GLUT1基因,并命名为PpGLUT1。该基因cDNA全长为2 068 bp,编码522 个氨基酸,有2个跨膜螺旋区,N端和C端都在胞质侧,分子量为57.226 4 kD,理论等电点为5.17。不同组织荧光定量结果表明,在肠和外套膜中表达量最高,闭壳肌中的表达量显著低于其他组织。0.5 gmL- 1的高质量浓度葡萄糖注射实验表明,在注射后30 min内,肠PpGLUT1表达量升高,在30 min之后表达量逐渐降低,注射后第2小时表达量最低。不同浓度葡萄糖注射实验表明,当葡萄糖质量浓度为0.1～0.4 gmL-1时,PpGLUT1表达量逐渐上升;质量浓度为0.4 gmL-1 时,PpGLUT1表达量最高;大于0.4 gmL-1之后,表达量逐渐降低。上述结果表明,企鹅珍珠贝PpGLUT1主要在肠和外套膜表达, 并对葡萄糖注射有表达响应,可能在上述组织的葡萄糖转运过程中发挥作用。     

解剖采集的企鹅珍珠贝精子的激活条件

解剖采集成熟的企鹅珍珠贝精子，在不同pH值，盐度和温度条件下进行激活实验。结果表明，解剖得到的企鹅珍珠贝精子激活的适宜pH值为9．0－9．5，适宜盐度为25－35，最适盐度为30，适宜温度为25－30℃。     

企鹅珍珠贝珍珠培育技术的研究现状

本文介绍了企鹅珍珠贝的生物学特性,对国内外企鹅珍珠贝人工育苗、养殖、育珠、遗传和病害防治技术研究现状进行了综述,提出了研究建议。     

企鹅珍珠贝游离珍珠颜色与珍珠规格的相关性

在海南省陵水黎族自治县黎安港选择1.5龄企鹅珍珠贝插核培育游离海水珍珠,20个月后收获优质游离珍珠43颗。全部43颗珍珠的聚类分析结果显示,它们共聚为3个类群,类群彼此间珍珠的直径、珠层厚度、重量以及与金珠的色差均存在显著差异;第1类和第2类群珍珠的明度L值、黄蓝特征b值以及与白珠的色差相似,而且均与第3类珍珠之间存在显著差异;第1类和第3类珍珠的红绿特征a值相似,而且均与第2类珍珠之间存在显著差异。相关分析结果显示,珍珠颜色的L值与珍珠的直径、珍珠质层厚度以及珍珠的重量之间均存在极显著的负相关关系,相关系数分别为-0.567、-0.617和-0.523;a值和b值均与珍珠的直径、珍珠质层厚度以及珍珠的重量之间没有显著的相关性。珍珠的直径、珍珠质层厚度、珍珠的重量与白珠色差以及金珠色差之间都有极显著的正相关关系。     

企鹅珍珠贝镉金属硫蛋白的分离纯化及其多克隆抗体的制备

镉—金属硫蛋白(Cd-MT)是水生环境中重金属镉污染的重要生物标志物,对该蛋白的研究不仅有利于Cd-MT免疫学检测方法的建立,也为水生环境重金属污染监测技术的开发提供理论依据。采用不同浓度CdCl₂(0～0.8 mg/L)胁迫诱导企鹅珍珠贝合成Cd-MT,通过组织捣碎、冷冻离心、热处理、Sephadex G-50凝胶柱层析等方法从企鹅珍珠贝全脏器中纯化得到Cd-MT。紫外吸收显示,在CdCl₂浓度为0.8 mg/L时,MT粗提液中的Cd-MT特征吸收最大,表明贝体内的Cd-MT含量随着CdCl₂胁迫浓度的增大而增加。SDS-PAGE显示纯化后的Cd-MT及其二聚体分子量约为9 ku和18 ku。采用戊二醛法将获得的Cd-MT与牛血清白蛋白(BSA)偶联后免疫家兔,制备了兔抗企鹅珍珠贝Cd-MT多克隆抗血清。通过间接ELISA法检测其抗血清效价为1∶12 800。经饱和硫酸铵法和DEAE-Sephadex A50亲和层析纯化得到分子量约为35 ku的高纯度免疫球蛋白G(IgG)。ELISA免疫鉴定显示,该IgG不仅能识别企鹅珍珠贝的Cd-MT,还与马氏珠母贝的Cd-MT有明显的免疫交叉反应。     

企鹅珍珠贝人工育苗技术

企鹅珍珠贝是一种热带海水珍珠贝类,在我国广西、广东、台湾和海南都有分布,主产地为海南。企鹅珍珠贝,生长快,个体大,适应性强,具有培育直径较大珍珠的潜力。近年来,企鹅珍珠贝附壳珠与游离珠培养已在广东徐闻、海南陵水的极个别企业进行了小规模尝试。笔者自2008年起,在海南陵     

企鹅珍珠贝附壳珠规模化培育技术研究

为探索企鹅珍珠贝附壳珠的规模化培育技术,采用"钻孔系线植核法"对企鹅珍珠贝母贝进行植核.植核贝数量为1437834个,育珠期8-12个月,共收获育珠贝1095683个,植核手术育珠期成活率为70.1%-88.3%,平均成活率为84.1%,留核率为100%.共收获附壳珍珠2191366颗,其中商品珠1821025颗,商品...     

企鹅珍珠贝早期养殖生长性状的增长规律及生长曲线拟合研究

该研究对海南新村港养殖17个月的企鹅珍珠贝(Pteria penguin)苗种生长性状进行测量,利用von Bertalanffy、Gompertz 和Logistic 3种生长模型对其生长性状的增长规律进行拟合, 通过Levenberg-Marquardt 迭代法求出各模型中3个生长参数,综合各参数的最优值,得出不同生长性状拟合效果最佳的生长模型。结果表明,Gompertz模型为企鹅珍珠贝各生长性状的最优生长模型。根据生长参数得出壳长、壳高、壳宽和体质量的生长极限值分别为93.519 mm、90.641 mm、39.075 mm和157.755 g, 生长拐点分别为2.86个月、4.04个月、5.63个月和9.61个月;各生长性状间的绝对生长速度在不同生长期内差异较大,但随着月龄的增大均呈现先增加后降低的趋势;性状间相对生长速度存在差异并随月龄的增长逐渐趋于0。研究结果可为企鹅珍珠贝的养殖生态研究、遗传育种及插核育珠提供理论依据和参考资料。     

企鹅珍珠贝微卫星分子标记的筛选

运用生物素与链霉亲和素的强亲和性原理,用生物素-磁珠吸附微卫星富集法,筛选企鹅珍珠贝（Pteria penguin）的微卫星分子标记序列,进而对南海区企鹅珍珠贝的遗传多样性进行分析。对136个菌落中的85个阳性克隆进行微卫星测序,获得64个序列,达到85.93%。所得到的55个重复6次以上的微卫星序列中,除生物素探针中...     

企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪酸组成

对企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪进行了提取和测定。结果表明,企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪含量分别为8.3%和9.6%。企鹅珍珠贝脂肪酸中DHA EPA的总含量为39.71%,比马氏珠母贝脂肪酸中DHA EPA的总含量(30.86%)高。2种珍珠贝软体部脂肪酸均具有重要的开发利用价值。     

企鹅珍珠贝组织蛋白酶D的cDNA克隆、序列特征分析和应激表达研究

笔者初步研究了企鹅珍珠贝（Pteria penguin）组织蛋白酶D（cathepsin D,CTSD）的基因克隆和功能,通过同源克隆方法和cDNA末端快速扩增技术（RACE）获得了企鹅珍珠贝组织蛋白酶D基因（命名为pgCTSD）。该基因cDNA全长1 767 bp,其中5＇UTR为38 bp,3＇UTR为553 bp,ORF为1 176 bp,编码392个氨基酸,包括信号肽（Met1-Ala18）、前体域（Leu19-Lys47）和成熟域（Tyr48-Ser392）三部分,分子量为42.3 kDa,等电点为8.04。pgCTSD氨基酸序列与大珠母贝（Pinctada maxima）pmCTSD的相似性最高（79%）,与其他物种的相似性为59%～75%。荧光定量分析表明,空白对照组中pgCTSD mRNA在闭壳肌、性腺、肝胰脏、外套膜和鳃组织中都有表达,且在闭壳肌中表达量最少,肝胰脏中最高。与试验对照组相比,脂多糖（LPS）刺激6 h后性腺和肝胰脏显著下降,闭壳肌的表达量虽不大但增加显著,外套膜和鳃组织变化不显著;哈维弧菌（Vibrio harveyi）刺激6 h后肝胰腺和外套膜显著下降,闭壳肌和鳃显著上升,性腺无显著变化。肝胰腺中pgCTSD对LPS和弧菌刺激的应答反应表明pgCTSD可能参与了免疫反应。     

运输方式对企鹅珍珠贝存活、生长、消化及抗氧化性能的影响探究

为探究运输方式对企鹅珍珠贝(Pteria penguin)稚贝存活、生长、消化及抗氧化性能的影响。本研究以企鹅珍珠贝稚贝为研究对象,分别以有水运输和无水运输2种方式进行8 h实地运输。运输后暂养14 d进行观察。结果显示,在恢复期第14天,有水运输和无水运输存活率(SR)分别为(97.00±1.00)%和(82.00±0.71)%;有水运输组的壳长、壳高和体重均显著高于无水运输(P<0.05);无水运输的皮质醇(COR)含量显著下降;2种运输中淀粉酶活性均呈上升趋势,超氧化物歧化酶(SOD)活性下降。在恢复期第14天,有水运输组酶活性高于无水运输(P<0.05);有水运输后,酸性磷酸酶(ACP)、谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOP)活性上升;无水运输后,ACP活性上升,GPT和GOT活性下降;在恢复阶段,有水运输组ACP活性逐渐下降,无水运输组ACP活性呈先下降后上升的趋势,GOP和GPT活性不断上升。研究表明,运输方式会对企鹅珍珠贝稚贝产生不同影响,有水运输相对无水运输可使企鹅珍珠贝稚贝在后期恢复阶段具有更好的存活效果和生长状态,稚贝运输后需一定时间进行生理恢复从而能更好地适应野外养殖环境。