贵州地方山羊Leptin基因表达的组织分布规律及品种差异

[目的]揭示贵州地方山羊瘦素基因(Leptin)表达水平的组织分布规律及品种差异,为研究Leptin基因与山羊肉质的关系提供参考依据.[方法]以黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊4个贵州地方山羊为研究对象,南江黄羊为对照,采用TaqMan实时荧光定量PCR对其肝脏、肾脏、心脏、肺脏、背最长肌、半膜肌和皮下脂肪中的Leptin基因表达水平进行测定.[结果]Lptin基因在不同山羊品种的肝脏、肾脏、心脏、肺脏、背最长肌、半膜肌和皮下脂肪中呈高表达,均以皮下脂肪的Leptin基因表达水平最高,且在黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊4个贵州地方山羊品种中,皮下脂肪中的表达水平显著高于心脏、肺脏、背最长肌和半膜肌(P＜0.05).除肝脏内Leptin基因表达水平在各品种间无显著差异(P＞0.05)外,在肾脏、心脏、肺脏、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪中的表达水平均存在品种差异,且以贵州白山羊最高.[结论]贵州地方山羊品种Leptin基因表达的组织分布规律相似,均以皮下脂肪最高,在品种方面则以贵州白山羊的整体表达水平较高.     

贵州地方山羊品种肌肉生长抑制素基因的表达差异

为了解贵州地方山羊肌肉生长抑制素基因(Myostatin)的表达部位及组织分布模式,比较各组织中Myostatin基因表达的品种间差异,以β-actin作为内参基因,应用Taq Man实时荧光定量方法检测了黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊等贵州地方山羊品种以及南江黄羊的肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪组织中Myostatin基因mRNA的表达水平。结果显示:肝和皮下脂肪中Myostatin基因的表达水平较高,肾和肺次之,半膜肌、背最长肌和心等肌肉组织中的表达水平相对较低;而半膜肌和背最长肌中Myostatin基因的表达水平高于心肌。肝和皮下脂肪Myostatin基因的表达在各品种间差异不显著;心、肺、肾、背最长肌和半膜肌中Myostatin基因的表达,贵州白山羊显著高于黔东南小香羊和黔北麻羊;肺、背最长肌和半膜肌中,Myostatin基因的表达贵州白山羊显著高于贵州黑山羊和南江黄羊。可见,贵州地方山羊心、肝、肺、肾、背最长肌、半膜肌和皮下脂肪中均有Myostatin基因表达,其组织表达水平总体为肝和皮下脂肪肾和肺半膜肌、背最长肌和心(肌),且多数组织中Myostatin基因的表达存在品种差异。     

雷公山山区放牧山羊ACC1 mRNA的组织分布

为了揭示雷公山山区放牧山羊乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)mRNA表达的组织分布规律,使用Taq Man实时荧光定量技术对黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊和南江黄羊的肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌以及皮下脂肪组织中ACC1基因的mRNA表达水平进行测定。结果表明,黔东南小香羊、黔北麻羊、南江黄羊ACC1 mRNA均主要在皮下脂肪中表达,其水平分别为3 919.545 6、900.556 8、1 550.559 2;贵州黑山羊ACC1 mRNA主要在肝脏内表达,其水平为2 367.425 8;贵州白山羊ACC1 mRNA主要在肌肉组织和肝脏中表达,其水平分别为背最长肌420.110 9,心351.436 1,半膜肌268.031 1,肝200.414 1。在皮下脂肪和肝脏,贵州白山羊ACC1 mRNA的表达水平都明显低于其他品种。由此可见,雷公山山区放牧山羊ACC1 mRNA主要在皮下脂肪和肝脏中表达。     

放牧山羊CPT1B基因mRNA的组织分布研究

为摸清放牧山羊CPT1B基因mRNA的组织分布特点,以贵州省雷公山山区放牧饲养的黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊和南江黄羊为研究对象,采用TaqMan法对心、肝、肺、肾、背最长肌、半膜肌和皮下脂肪CPT1B基因的mRNA进行定量分析。结果表明:黔东南小香羊的心肌和半膜肌、贵州白山羊的心肌背最长肌和半膜肌、贵州黑山羊的心肌背最长肌和半膜肌、贵州麻羊的心肌背最长肌和半膜肌、南江黄羊的心肌中CPT1B mRNA水平均显著高于各自品种的肝、肺、肾和皮下脂肪对应值。结果表明:放牧山羊CPT1B基因mRNA主要分布在心肌、背最长肌和半膜肌。本研究为探索放牧山羊的肉质性状与CPT1B基因表达水平的关系奠定了基础。     

富硒地区山羊组织中的硒沉积量及其对PHGPx表达的影响

【目的】检测富硒地区山羊部分组织中的硒沉积量,分析组织硒沉积量对磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase,PHGPx)基因表达的影响。【方法】将年龄相仿、体质量相近,分别来自富硒地区陕西紫阳县双安镇(试验Ⅰ组)、高滩镇(试验Ⅱ组)的山羊作为研究对象,以硒水平正常的宝鸡市陈仓区的山羊作为对照,采集各组山羊血液,分离血清,然后采用切断颈动脉放血法屠宰,随后立即采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、股二头肌以及羊毛组织样,利用氢化物发生-原子荧光光谱法测定样品中的硒含量;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、股二头肌组织中PHGPx基因mRNA的表达量,分析硒沉积量对PHGPx基因mRNA表达的影响。【结果】Ⅰ组山羊,除肾脏中的硒含量显著高于对照组(P0.05)外,其他组织均极显著高于对照组(P0.01);Ⅱ组山羊,心脏、肝脏、脾脏、羊毛和血清中硒含量极显著高于对照组(P0.01),背最长肌和股二头肌中的硒含量显著高于对照组(P0.05),肺脏、肾脏与对照组差异不显著(P0.05)。PHGPx基因mRNA在Ⅰ组山羊各组织中的表达量由高到低依次为肺脏股二头肌脾脏肾脏心脏背最长肌肝脏;在Ⅱ组为肺脏股二头肌脾脏肝脏肾脏心脏背最长肌。与对照组相比,Ⅰ组山羊心脏中PHGPx基因mRNA的表达量显著升高(P0.05),肺脏极显著升高(P0.01);试验Ⅱ组山羊肝脏中PHGPx基因mRNA的表达量显著高于试验Ⅰ组和对照组(P0.05)。试验Ⅰ组、Ⅱ组、对照组山羊脾脏、肾脏、背最长肌和股二头肌中PHGPx基因mRNA的表达量差异不明显。【结论】富硒地区山羊各组织中硒沉积量和PHGPx基因mRNA表达水平总体上高于宝鸡市陈仓地区山羊,而且山羊心脏、肝脏、肺脏中PHGPx基因mRNA的表达量受到其硒元素沉积量的影响,这表明硒在转录水平上可调控PHGPx基因的表达,但是具有组织差异性。     

ADD1基因在贵州地方山羊组织器官中和品种间的表达差异比较

以黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊、南江黄羊为研究对象,采用实时荧光定量技术对肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪中ADD1基因的表达水平进行测定。结果表明,黔东南小香羊ADD1基因的表达水平无组织器官差异(P0.05),贵州白山羊表达水平以背最长肌、心和半膜肌较高(P0.05),贵州黑山羊肝内较高,黔北麻羊肾内较高,南江黄羊心内较高。心和半膜肌中ADD1基因的表达无品种差异(P0.05),肝、肾、肺、背最长肌和皮下脂肪中ADD1基因的表达存在品种差异(P0.05)。结果提示,贵州地方山羊ADD1基因的组织器官表达模式不一致,且其组织器官表达水平可能存在品种差异。     

山羊心脏型脂肪酸结合蛋白基因mRNA的组织表达谱分析

以黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊、南江黄羊为研究对象,采用实时荧光定量技术对肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪中H-FABP基因的表达水平进行测定。结果表明,心内H-FABP基因的表达水平最高,半膜肌、背最长肌次之,再次为肾,肺、皮下脂肪、肝较低,可见心、半膜肌、背最长肌是山羊H-FABP基因mRNA分布的主要组织。     

放牧条件下山羊激素敏感性甘油三酯脂肪酶基因的表达

为探明放牧条件下山羊组织中激素敏感性甘油三酯脂肪酶(HSL)mRNA的分布规律,筛选出HSL mRNA表达的最主要组织,为进一步研究山羊肉质与HSL基因的关系奠定基础,使用实时荧光定量RT-PCR法检测在雷公山山区放牧的黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊和南江黄羊各4只山羊的肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪组织中HSL mRNA的表达水平。结果表明:5种放牧山羊HSL基因的组织表达谱各有特点,皮下脂肪和心脏中HSL mRNA水平较高,肺、肾、背最长肌和半膜肌次之,肝内最低。在放牧条件下5种山羊皮下脂肪和心脏中HSL mRNA表达丰度较大,是检测mRNA变化的最适靶组织。     

贵州地方山羊CPT-1A基因在不同品种和组织中的表达差异

为揭示贵州地方山羊及南江黄羊CPT-1A mRNA水平的品种和组织差异,以黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊以及南江黄羊为研究对象,采用实时荧光定量方法对肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪中CPT-1A基因的mRNA表达水平进行检测。结果表明,从器官组织分布模式来看,黔北麻羊和南江黄羊CPT-1A mRNA水平都以肾中最高(0.0019和0.0019),贵州黑山羊以肝中最高(0.0074),贵州白山羊以背最长肌中最高(0.0011),黔东南小香羊各组织中无差异;从品种差异来看,心和肾中CPT-1A mRNA水平以南江黄羊最高(0.0018和0.0019),肝和肺中以贵州黑山羊最高(0.0074和0.0027),皮下脂肪中以黔东南小香羊(0.0007)最高,背最长肌和半膜肌中各品种无差异。结果提示,贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊以及南江黄羊CPT-1A基因的器官组织分布模式存在差异,肝、肾、心、肺和皮下脂肪中CPT-1A mRNA的表达存在品种间差异,此结果为研究该基因与贵州地方山羊脂肪沉积及肉质性状的关系提供了理论基础。     

不同品种羊血液和肺脏中TLRs基因转录水平差异分析

【目的】分析不同品种羊Toll样受体（TLRs）基因转录水平的差异性,为揭示TLRs基因转录水平与羊疫病间的关联性提供参考依据。【方法】选取贵州省主要饲养的贵州黑山羊、贵州白山羊、黔北麻羊、波尔山羊和湖羊为研究对象,根据GenBank已公布的TLRs基因序列设计荧光定量PCR特异性扩增引物及TaqMan探针引物,利用TaqMan探针荧光定量PCR检测不同品种羊血液和肺脏中TLR1~TLR10基因转录水平差异。【结果】 TLR1~TLR10基因在不同品种羊血液和肺脏中均有转录表达。不同品种羊血液和肺脏中的TLRs基因转录水平均存在差异性,在波尔山羊血液中TLR2、TLR4和TLR5基因转录水平均极显著低于其他4种羊（P<0.01,下同）,TLR7和TLR8基因转录水平则极显著低于除黑山羊外的其他3种羊;在白山羊血液中TLR4、TLR7、TLR8和TLR9基因转录水平极显著高于其他4种羊;在湖羊肺脏中TLR2、TLR3、TLR4、TLR5和TLR8基因转录水平极显著低于其他4种羊,而在黔北麻羊肺脏中TLR5和TLR8基因转录水平极显著高于其他4种羊。此外,在5种羊血液中TLR2、TLR4、TLR7和TLR8基因转录水平均极显著高于其他TLRs基因转录水平;羊肺脏中TLR2、TLR3、TLR4、TLR5和TLR8基因转录水平相对较高,在贵州白山羊、贵州黑山羊和波尔山羊均表现为极显著高于其他TLRs基因转录水平。【结论】不同品种羊血液和肺脏中TLRs基因转录水平具有差异性,以TLR2、TLR3、TLR4、TLR5和TLR8基因转录水平相对较高,提示TLRs在不同品种羊机体中发挥着清除病原体及维持机体稳态的作用,而TLRs基因转录水平差异可能是造成不同品种羊对疫病易感差异的原因之一。     

芦荟组培生根试验

以美国“翠叶”芦荟 (A barbadensisMill)无菌分化芽为试材 ,研究芦荟的生根条件 ,结果表明 :高浓度的IBA不利于生根 ,而高浓度的NAA、低浓度的H3BO3有利于提高平均生根条数 ;芦荟生根以 1/ 2MS大量元素 +MS微量无素 +NAA1- 2mg/l+IBA0 5 - 1mg/l+H3BO310 - 5 0mg/l为佳 ,既有利于提高生根率 ,也有利于提高平均生根条数     

沙棘耐盐基因HrNHX1的克隆及3'UTR序列分析

以沙棘(Hippophae rhamnoides L.)叶片为材料,用改良SDS法提取总RNA,反转录合成第一链cDNA作为模板,根据已公布NHX1家族同源序列保守区设计简并引物,扩增出沙棘中HrNHX1基因的中间序列,然后用快速扩增cDNA末端(rapid amplification on of cDNA end,RACE)方法,从沙棘中克隆到HrNHX13'cDNA序列.该序列(GenBank登录号:EU718492)长度为1 373 bp,与已知NHXI序列同源性最大为80;,其编码区1 094 bp,编码364个氨基酸,3'非翻译区(3'-untranslated resion,3'trm)长度为239 bp.3'UTR序列分析显示沙棘的3'UTR与陆地棉、葡萄柚和小盐芥的同源性分别为43.97;、45.63;和40.64;,明显低于编码区的同源性.结果表明,NHX1基因编码区具有较高的保守性,3'UTR序列的同源性较低,显示了非编码区在环境适应中的重要性,并为进一步研究沙棘对生境的适应分子机制奠定了基础.     

IGFBP-3、caspase-3在小鼠白念珠菌阴道炎模型黏膜组织中的表达

目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP-3）、半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）在ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型中阴道黏膜局部的表达及其临床意义。方法构建ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型,运用荧光实时定量PCR及免疫组化检测感染组与正常组中IGFBP-3、caspase-3表达的差异。结果构建ICR小鼠白念珠菌阴道炎模型成功,感染组阴道组织中见大量念珠菌丝及炎症细胞浸润;IGFBP-3c、aspase-3在感染组中较正常组高表达（P〈0.01）且两者表达呈正相关（rs=0.683,P〈0.01）。结论IGFBP-3、caspase-3在感染组中高表达可能与念珠菌下调阴道黏膜免疫并致病有关。     

小麦矮秆基因Rht3和赤霉酸不敏感基因Gai3与α-淀粉酶的表达

以小麦赤霉酸反应不敏感的Rht3矮秆基因两个近等基因系及其分离群体为材料,分析了Rht3、Gai3与α-淀粉酶表达的相互关系.结果表明,Rht3、Gai3能强烈地抑制萌发籽粒α-淀粉酶的表达,降低α-淀粉酶活性水平.高矮亲本间α-淀粉酶活性差异明显,矮扬3、矮苏3和扬麦3号、苏麦3号的α-淀粉酶OD值分别为0.071,0.080和0.635,0.720.经χ2测验,两群体中α-淀粉酶活性高、中、低的分离比率符合1:2:1的理论比.株高与α-淀粉酶活性间的相关系数分别为0.791 5和0.688 8达极显著水平.赤霉酸反应与α-淀粉酶活性的相关系数更高,分别为0.854 0和0.735 3.对几株Rht3与Gai3重组类型植株的α-淀粉酶活性分析表明,Rht3对α-淀粉酶活性的影响更大.     

马齿苋活性成分中抑脂成分的筛选

［目的］筛选马齿苋中具有抑脂作用的活性成分。［方法］MTT法测定马齿苋各活性成分对前脂肪细胞3T3-L1增殖的影响。［结果］马齿苋多糖、生物碱、黄酮具有较好抑制前脂肪细胞3T3-L1增殖的作用,马齿苋生物碱、黄酮随浓度增大抑制作用增强。而马齿苋不饱和脂肪酸则无显著抑制作用。［结论］马齿苋多糖、生物碱、黄酮具有抑脂作用。     

3G技术及其在电信领域的应用

3G技术是未来无线通信的发展方向,通过3G和G3的概念对两者做出了区分,重点介绍了3G中TD-SCDMA技术的新特点,并描述了未来3G业务在电信领域的应用前景。     

Quest3D技术在园林景观设计中的应用与实现

虚拟现实技术在园林中应用的领域日趋广阔,对园林设计的影响也越来越大。Quest3D是虚拟现实技术得以实现的重要软件之一。文章以一个古典庭院的园林设计为例,结合Quest3D技术制作开发了一个园林漫游展示系统,并从Quest3D技术的选择、软硬件选择及建立的基本流程等方面阐述了园林景观设计中应用Quest3D技术的优缺点。     

香蕉14-3-3蛋白基因Ma-14-3-3d的克隆及序列分析

[目的]克隆分析香蕉中14-3-3蛋白编码基因。[方法]采用PCR与RACE技术相结合的方法克隆香蕉14-3-3基因,并进行CDNA测序及同源性分析。[结果]所克隆cDNA全长866 bp,编码197个氨基酸残基,具有植物14-3-3蛋白基因的特征结构域,并与其他植物来源的14-3-3蛋白具有很高的序列相似性,将其命名为Ma-14-3-3d(Musa acuminate14-3-3gene)。[结论]Ma-14-3-3d蛋白与来源于单子叶植物的14-3-3蛋白位于同一进化枝上。     

不同处理方法对樟叶越桔种子萌发的影响

为了提高樟叶越桔种子的萌发率,以在六盘水采集的樟叶越桔种子为材料,对其进行种子萌发试验,研究了不同水浴温度浸种(常温、40℃和60℃)、不同浓度赤霉素(GA_3)溶液浸种(200、1000、1500 mg/L)、不同浓度硼酸溶液浸种(0.2%和0.5%)和不同培养温度(15、20、25、30、35℃)等处理对樟叶越桔种子萌发的影响。结果表明:常温水浴浸种与40℃水浴浸种条件下种子萌发率差异不显著,60℃水浴温度过高,浸种后的种子丧失生命活力;GA_3浸种处理能显著促进种子萌发,缩短发芽时间,且萌发率随浓度增加而增加,最大萌发率达68.67%,而硼酸浸种无明显作用;不同培养温度条件下的萌发率差异显著,在15~30℃条件下,种子都能发芽,但萌发适宜温度为15~25℃,最适温度为20℃,最大萌发率达65.33%。     

施用H_3BO_3对茄子黄萎病抗性的影响

以茄子黄萎病为研究对象,采用田间施用H3BO3的方法,探讨硼元素对接种茄子黄萎菌后茄子幼苗的发病率、植株生长状况的影响。研究结果表明,施用不同浓度H3BO3处理降低了茄子黄萎病的发病率和病情指数,提高了茄子幼苗的抗病性。随着元素浓度的升高对发病率的抑制作用呈现先增后降的趋势,硼元素对黄萎病的防治效果35%~76%,诱导茄子黄萎病抗性的最佳浓度为50mg/L。