利用间歇浸没式生物反应器进行慈姑组培快繁研究

以慈姑(Sagittaria sagittifolia)茎尖诱导的组培苗为材料,利用间歇浸没式生物反应器(TIBs)开展慈姑组培快繁激素组合的筛选、慈姑不同代数继代材料的培养效果、不同接种密度对慈姑组培增殖影响及不同间歇频率对慈姑组培快繁的影响等组培快繁技术体系研究。结果表明:TIBs系统可以使慈姑组培苗一代增殖19.5倍以上,比传统方法提高3倍以上;培养基含6-BA 3.0mg/L+NAA 0.01 mg/L的TIBs适合组培苗继代增殖培育;TIBs系统中,以第5代继代材料为宜,接种密度10株/L,间歇浸没频率在10 min/3 h时,最有利于慈姑组培苗的增殖和生长。     

利用间歇浸没式生物反应器进行甘蔗组培快繁的研究

以甘蔗(新台糖22号)茎尖脱毒组培苗为材料,利用间歇浸没式生物反应器(TIBs)进行组培快繁的技术体系研究.结果表明:TIBs系统可使甘蔗组织培养一代增殖40倍以上,远远高于传统方法;TIBs系统以第3代继代的材料为宜;10～15株/瓶的接种密度最有利于组培苗的增殖;激素选择与传统方法相似,0.5～1.0 mg/L 6...     

基于间歇浸没式生物反应器的荔浦芋组培快繁体系优化

[目的]优化基于间歇浸没式生物反应器系统(TIBs)的荔浦芋组培快繁体系,为荔浦芋脱毒组培苗的工厂化、自动化生产提供技术支持.[方法]以荔浦芋新品种桂芋2号茎尖分生组织脱毒诱导获得的不定芽为外植体,利用TIBs培养系统筛选出适合组培苗增殖及生根的最佳激素组合,并分析不同继代材料、接种密度及浸没间歇频率对组培苗增殖和生根效果的影响.[结果]利用TIBs培养系统可有效提高荔浦芋组培苗的增殖效果,增殖倍数达28.96倍,约是传统固体培养方法(2.87倍)的10倍,且组培苗的株高和生根数均极显著高于传统固体培养植株(P<0.01).在TIBs培养系统中,含4.00 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.05 mg/L萘乙酸(NAA)的培养基最适合荔浦芋组培苗增殖和生长,其组培苗增殖倍数为32.04倍.当接种材料为第4代荔浦芋继代材料、接种密度为10株/L、浸没间歇频率为5 min/6 h时,最有利于组培苗增殖和生长,增殖倍数均在30.00倍以上,可缩短萌芽时间,组培苗长势良好,且培养基污染率为0.[结论]利用TIBs培养系统对荔浦芋继代材料进行高效快繁具有可行性,可为实现及推动荔浦芋健康种苗繁育的工厂化生产提供技术支持.     

间歇浸没式生物反应器快繁草莓脱毒苗的参数

以茎尖脱毒处理诱导的草莓‘红颜’第3代继代苗为试验材料,利用间歇浸没式生物反应器进行组培苗增殖技术体系的研究。经过40d的增殖培养后,结果表明:(1)利用TIBs系统进行草莓组培苗培养增殖率约是传统培养方式的3倍;(2)TIBs系统中接种密度在2株/0.25L培养基/瓶,有利于草莓组培苗的生长;(3)TDZ和NAA质量浓度均为0.5mg/L时有利于TIBs系统中草莓组培苗的增殖;(4)TIBs系统中蔗糖质量浓度为30g/L较适宜;(5)荧光灯与红蓝LED灯对TIBs系统中草莓增殖无差异。     

退化非洲菊的根段组织培养与植株再生

【目的】开展退化非洲菊根段的组织培养和植株再生研究,旨在为恢复其退化性状,实现优良品种的可持续利用提供技术保障。【方法】以退化非洲菊瓶苗的不同长度根段作为外植体,以MS为基础培养基,研究不同激素及其配比对不定芽分化、增殖和组培苗生根的影响。【结果】最适宜根段长度为0.5 cm;适合不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L,分化率为48.3%;不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L,增殖倍数为5.07,且在此条件下,不定芽以较高倍数增殖的同时保持旺盛的生长势;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖15~20g/L,第20天时生根率达到97.8%,根系粗壮较整齐且生长较快。【结论】建立了以根段为外植体的非洲菊最佳组织培养体系,在该体系下不定芽分化率、增殖倍数高,组培苗生根情况好。     

豌豆再生体系的建立

【目的】建立用于豌豆组织培养与转基因的再生体系.【方法】利用植物组织培养的外植体的消毒、接种、脱分化、再分化和生根等方法进行豌豆再生体系的建立.【结果】以‘陇豌1号’为试验材料,其胚轴为豌豆愈伤组织诱导最佳外植体;适宜诱导培养基为MS+1.0mg/L 2,4-D+0.2mg/L 6-BA;最佳增殖培养基为:MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA;胚轴在MS+0.2mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA培养基中分化率最高,达26.21%,MS+B5+0.5mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA条件下最适宜子叶的分化(14.80%);不定芽在1/2 MS+0.5mg/L NAA下生根率最高,达66%.【结论】‘陇豌1号’的这一再生体系可用于其转基因受体系统的建立和种苗的组培快繁.     

药用酸枣组织快繁技术初探

以药用酸枣为试材,研究了其组织培养快繁体系。组培苗继代周期不同增殖倍数也不同,接种于MS+1.5mg/L6-BA+0.2mg/L NAA培养基上继代培养,第5个周期组培苗增殖倍数最高,达到4.5。接种于1/2MS+0.3mg/L NAA和1/2MS+0.5mg/L IBA培养基上,生根率达到80%和83%,但生根数不理想,平均根数为2.3,仍需深入研究。     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。     

木薯品种西选03快繁体系的建立（英文）

【目的】探讨木薯品种西选03快繁技术,为其种苗规模化生产提供技术支持。【方法】以水培幼茎腋芽为外植体,调查MS基本培养基中添加不同用量6-BA和PP333对外植体芽诱导、增殖培养和生根的影响。【结果】外植体采用0.1%KMNO4预处理10 min后经75%酒精20 s+0.1%Hg Cl2(加吐温-80)5 min的灭菌效果较好,污染率为14.0%,成活率达79.3%。采用MS+6-BA 0.05 mg/L培养基进行初代诱导效果较好,外植体培养15 d腋芽萌发率达90.0%,且萌发芽生长旺盛,茎秆粗壮。无菌腋芽茎段在MS+6-BA 0.1 mg/L培养基中继代增殖效果最佳,芽增殖倍数为4.6。MS+PP3330.3 mg/L培养基诱导生根效果较好,生根率100.0%,培养30 d平均根数为6.9,叶色墨绿,植株健壮。【结论】以幼茎腋芽为外植体的快繁体系可用于西选03种苗规模化生产。     

蓝莓品种布里吉塔的组培无菌体系建立

【目的】探明蓝莓外植体采集时间、不同外植体、玉米素核苷浓度对蓝莓初代培养的影响及细胞分裂素种类对组培苗继代生长的影响，为蓝莓组培无菌体系建立提供参考。【方法】以北高丛蓝莓品种布里吉塔为试验材料，依托组织培养技术建立无菌体系。【结果】蓝莓4—5月均可进行外植体采集，其中5月最佳；最佳外植体茎为中下段和茎下段；初代培养最佳培养基为1/2 MS+1/2 WPM＋ZT 1.0 mg/L；与1.5 mg/L ZT相比，培养基中添加1.5 mg/L反式玉米素核苷（tZR）初代诱导新梢的继代生长更好。【结论】通过组培快繁技术，建立了蓝莓布里吉塔的高效组培无菌体系，初代培养最佳培养基为1/2 MS+1/2 WPM＋ZT 1.0 mg/L，继代培养基为1/2 MS + 1/2 WPM＋1.5 mg/L tZR。     

尾巨桉3个无性系继代增殖培养研究

[目的]研究尾巨桉3个无性系继代增殖培养技术,为尾巨桉苗木快速繁殖提供理论依据。[方法]以尾巨桉3个无性系DH32-26、DH32-29、DH32-28为试验材料,筛选最佳的植物生长调节剂组合、凝固剂、暗培养天数和培养瓶,达到较高的继代增殖系数。[结果]3个无性系继代增殖培养时最适的植物生长调节剂组合为:DH32-26(6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L);DH32-28(6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2 mg/L);DH32-29(6-BA 0.3 mg/L+NAA0.2 mg/L);DH32-26的继代增殖系数在凝固剂为卡拉胶和琼脂的培养基中差异不大,DH32-28、DH32-29的继代增殖系数在以卡拉胶作为凝固剂的培养基中比在以琼脂作为凝固剂的培养基中有所提高,在生根培养过程中,以卡拉胶作为凝固剂的培养基远比用琼脂作为凝固剂的培养基诱导出根好;继代增殖初期DH32-26、DH32-28需用黑布进行全暗遮光5~10 d,而DH32-29不需全暗培养;用广口瓶继代增殖培养DH32-29可降低苗木生产成本,但DH32-26、DH32-28不适合用广口瓶进行继代增殖培养。[结论]要提高无性系继代增殖系数,需要选取最优的植物生长调节剂组合、凝固剂、暗培养天数和培养瓶。     

宽叶刺槐的组织培养和快繁技术研究

选用宽叶刺槐带腋芽的茎段进行组织培养 ,结果表明 :适宜的诱导培养基是MS +6-BA 0 .3mg/L(单位下同 ) +NAA 0 .1;分化、增殖培养基MS +6-BA 0 .6+NAA 0 .2 ;生根培养基 1/2MS +IBA 0 .5 +NAA 0 .5 +AC 5 0 0。试管苗在自然光下封口炼苗 14d ,开瓶炼苗 2～ 3d ,移栽成活率达 90 %以上。     

吉塞拉的组织培养技术研究

以大樱桃矮化砧吉塞拉(Gisela)为试材,进行了外植体消毒试验、不同培养时期培养基筛选试验和炼苗移栽试验,并利用植物组织培养技术建立了快繁再生系统。结果表明:吉塞拉组织培养不同培养阶段的适宜培养基分别为:分化培养基:MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.05 mg/L;继代培养基:MS+6-BA0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L;生根培养基:1/2 MS+IBA0.3 mg/L。试管苗移栽前先在自然光环境下封闭锻炼然后开瓶炼苗3 d,产生的侧根数量多,移栽成活率高,其中自然光封闭锻炼12 d+开瓶锻炼3 d效果最好。     

高山蓍嫩茎无性系的建立

[目的]建立高山蓍嫩茎再生繁殖体系,满足高山蓍人工栽培对种苗的需求,保护其野生种质资源.[方法]以嫩茎为外植体,分别探讨不同培养基和激素组合对愈伤组织的诱导、分化、不定芽生根、试管苗继代增殖培养的影响.[结果]在添加不同激素组合的MS、1/2MS、8114和B5培养基中,高山蓍嫩茎愈伤组织诱导培养的理想培养基为1/2MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L和1/2MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;愈伤组织分化培养的理想培养基为1/3MS和1/3MS+IAA 0.2 mg/L;在添加NAA 0.6 mg/L或IAA 0.6 mg/L的1/2MS、1/4MS、N6、B5和LS培养基中,1/4MS+IAA 0.3 mg/L是不定芽生根培养和试管苗继代增殖的理想培养基,生根率为92%,平均每代繁殖系数为2.7;试管苗易移栽定植,成活率可达98.6%.[结论]建立了高山蓍嫩茎繁殖无性系,定植的试管苗生长旺盛,翌年开花结果,并保持了高山蓍的所有植物学性状.     

绿玉树茎段组织培养再生体系的建立（摘要）

[目的]研究绿玉树茎段组织培养再生苗的条件,确定各培养阶段的最佳培养条件,为绿玉树组培苗工厂化生产和相关研究提供参考。[方法]以绿玉树茎段作为外植体试验材料,研究了不同培养基对萌芽率、增殖倍数、生根率的影响。[结果]萌芽培养最佳的诱导培养基为1/2MS＋NAA0.02mg/L＋6-BA1.0mg/L,分化率为89.7%;继代培养最佳培养基为1/2MS＋NAA0.02mg/L＋6-BA0.60mg/L＋AD3.0mg/L,增殖倍数为5.70;生根培养最佳培养基为1/2MS＋NAA0.40mg/L＋IBA0.4mg/L,生根率达100%,移栽成活率达80%。[结论]试验初步确定了绿玉树茎段组织培养的生长条件。     

长寿花高繁殖组培体系及瓶外生根技术

[目的]建立长寿花高繁殖的组培体系和瓶外生根技术,促进长寿花工厂化生产。[方法]选用长寿花叶片和茎段作为外植体,在加有6-BA1.00mg/L和NAA0.20mg/L培养基上培养诱导出芽丛,再将芽丛转接到继代增殖培养基,调节不同外源激素配比获得长寿花高繁殖组培体系的最佳培养基组合。[结果]在MS＋6-BA0.50mg/L＋NAA0.10mg/L＋GA30.10mg/L的培养基组合中,诱导丛芽增殖率达到95.35%,增殖倍数达到20倍以上,试管苗生长势好。利用海绵作为载体进行瓶外生根,生根率达到95.00%以上,移栽苗成活率达到100%。[结论]利用海绵作为载体进行试管苗瓶外生根是完全可行的。     

菊叶薯蓣茎段组织培养研究

为解决菊叶薯蓣种苗的繁育问题,用不同种类、浓度的植物生长调节剂对菊叶薯蓣幼嫩茎段进行离体培养试验,结果表明,启动培养用M S 6-BA 0.2m g/L KT 1.0m g/L NAA 0.01m g/L诱导不定芽萌芽率为100%,效果最理想;继代培养用M S 6-BA 0.8m g/L NAA 0.2m g/L诱导芽的增殖系数超过3,长势较理想;生根培养用1/2M S IBA 1.5m g/L NAA 0.3m g/L诱导生根长苗率达90%以上,对生根培养的效果最佳;采用河沙 塘泥假植菊叶薯蓣组培生根苗成活率高,生产成本降低;表明应用组培快繁技术能为菊叶薯蓣的规模化种植提供充足的优质种苗。     

多倍体萱草的组织培养与快速繁殖技术

以多倍体萱草的芽和花蕾为外植体,以MS为基本培养基,进行组织培养与快速繁殖的研究。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为最佳诱导培养基,MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L为较好的增殖培养基。1/2 MS+NAA0.02 mg/L为较好的生根培养基,用腐叶土和珍珠岩4∶1比例做基质移栽苗成活率可达80%以上。     

驼峰藤组织培养及快速繁殖

以驼峰藤(Merrillanthus hainanensis)带芽茎段为外植体,研究不同消毒方法及植物生长调节剂对其离体培养及植株再生的影响,建立了驼峰藤离体快繁技术体系。结果表明,带芽茎段的最佳消毒灭菌方法为75%乙醇浸泡20 s,0.1%HgCl_2浸泡10 min;腋芽诱导的最适宜培养基为MS+2.00 mg/L 6-BA+0.10mg/L NAA+0.10 mg/L GA_3,诱导率可达81.11%;适宜腋芽增殖的培养基为MS+3.50 mg/L 6-BA+0.15mg/L NAA,增殖系数可达6.24;最佳生根培养基为1/2MS+0.30 mg/L NAA,生根率为84.44%,该结果为驼峰藤的快繁提供了一条新途径。