多种激素对喜树悬浮细胞中喜树碱合成关键酶基因的影响

喜树中抗肿瘤活性成分喜树碱的生物合成调控具有重要的理论意义与应用价值。基于喜树碱生物合成途径的复杂性及其积累的时间、空间特异性,本研究选择生理状态的均一的喜树悬浮细胞作为研究材料,分析植物激素茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, Me JA)、脱落酸(abscisic acid, ABA)、赤霉素(gibberellin, GA)以及水杨酸(salicylic acid, SA)对喜树碱合成途径中关键酶基因转录水平的调控。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测结果显示,MeJA、ABA、GA以及SA均可促进喜树碱合成色胺途径中关键酶基因CaTDC1以及下游CaSTR的表达,且在处理2 h左右达到峰值;MeJA、GA、SA主要调控环烯醚萜途径中关键酶基因Ca7DLGT、CaG8O、CaCYC1的表达,而ABA则显著调控色胺途径关键酶基因CaTDC1以及下游CaSTR的转录水平;4种激素中SA调控效果与其他激素相比极其显著。本实验排除了喜树碱合成时间、空间特异性影响以及植物向重性、激素浓度梯度等干扰因素,准确地分析了4种激素对喜树碱合成途径关键酶基因的调控,为后续研究植物激素...     

含喜树碱植物水培根系化感化合物的分离分析

本研究旨在探明喜树碱植物水培体系中化感物质的种类及其长期积累对植物生产的作用。建立了喜树幼苗和野生型蛇根草水培体系根系分泌物的新分离富集方法:首先以硅胶填充固相萃取柱萃取水培液根系分泌物,然后取出填充硅胶加到硅胶层析柱上层进行柱层析分离,再经洗脱后,用GC-MS技术分析不同组分的洗脱液。从喜树水培根系分泌物中检测到1,1,2,2-四氯乙烷、N,N-二甲基苯胺、二苯铬等11种化感物质;在广州蛇根草水培根系分泌物中检测到邻苯二甲酸二丁酯、苯硒酚、二苯铬等14种化感物质。2种含喜树碱植物水培根系分泌物中化感物质的大量分离富集和分析,为清除水培体系的生长抑制物、优化水培体系、实现喜树碱的高效生物合成奠定基础。     

真菌诱导子和抗褐变剂对喜树悬浮细胞生长及喜树碱生物合成的影响

摘要：在试验的7种真菌中,最终浓度为30 mg/L的米根霉（Rhizopus oryzae）提取物作为真菌诱导子,在第18d加入可以使喜树（Camptotheca acuminata Decaisne）悬浮培养细胞喜树碱的总产量达到最大。在试验的4种抗褐变剂中,最终浓度为2 g/L的植酸作为抗褐变剂,在第15d加入可以使喜树悬浮培养细胞的生长和喜树碱的总产量达到最大。2 g/L的植酸在第15d加入后,再在18d加入30 mg/L的米根霉诱导子处理后,细胞干重在第24d达到最大值26.9 g/L,是未作任何处理细胞干重最大值的1.2倍（对照的在第20d达到最大值22.4 g/L）。综合处理的细胞喜树碱总产量在第26d达到最高值34.2 mg/L,是未作任何处理的喜树碱总产量的9.0倍（对照的在第20d达到最大值3.8 mg/L）。     

水培大蒜技术在水产养殖中应用可能性初步研究

旨在研究水培大蒜在水产养殖中应用的基础性问题。通过在红斑马鱼(Brachydanio rerio)养殖缸中浮床种养大蒜(Allium sativum L.)试验,研究水培大蒜对红斑马鱼自然死亡率的影响试验;通过在异育银鲫(Carassius auratus gibelio)养殖缸中浮床种植大蒜试验,研究水培大蒜对养殖水体水质的影响。结果表明:当大蒜种植量达到4.75 g/L时斑马鱼的自然死亡率显著增加,这可能与溶解氧的降低有关;大蒜种植使得水体总磷、总氮、氨氮、高锰酸盐指数和亚硝态氮水平均发生显著下降,其中对氨氮的影响最显著。水培大蒜可以改善养殖水体水质,但要注意控制种养密度,水培大蒜在水产养殖中的应用具有一定的前景。     

杧果中DXS基因的鉴定及与其他植物的比较分析

1-脱氧-D-核酮糖5-磷酸合成酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase, DXS)是2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(2-C-Methyl-D-erythritol-4-phosphate, MEP)途径的第一个关键酶。本研究鉴定了杧果DXS基因,以拟南芥DXS基因为参考,通过BLASTP方法获得了番木瓜、金钱橘、甜橙、苹果、桃子、白梨、葡萄、中华猕猴桃、无油樟、小果野蕉的DXS基因的蛋白序列,共32条序列,对其进行了保守结构域、保守基序、系统发育、理化性质、蛋白二级结构分析等研究。保守结构域及保守基序分析结果表明,杧果DXS蛋白包含一个PLN02582结构域,保守结构域内包含6个motif,其宽度、排列顺序与大多数植物相同,说明DXS基因家族具有高度保守性。系统发育分析结果显示,单子叶植物纲与双子叶植物纲的DXS基因没有分别形成分支,推测在进化过程中DXS基因的分化在双子叶植物纲和单子叶植物纲形成之后。理化性质分析及蛋白二级结构分析结果显示,稳定性蛋白占65.63%,碱性蛋白占25%,所有蛋白均为亲水性蛋白。杧果DXS蛋白为酸性、不稳定蛋白,具有亲水性。杧果DXS蛋白的二级结构主要结构元件是无规则卷曲、α-螺旋。本研究为进一步阐明杧果DXS基因在萜类合成途径中的功能提供了理论依据。     

樟树果实红色素组分分离及稳定性初步研究

采用大孔树脂柱层析纯化樟树果实红色素,薄层层析法对色素组分进行分离并研究了色素的稳定性。结果表明：D-406树脂对樟树果实色素吸附效果较好;正丁醇-浓盐酸-水（65:10:45）是硅胶薄层层析法分离樟树果实色素的较好展层剂,羧甲基纤维素钠(CMC-Na)以添加量为0.8 %,层析温度以25 ℃较为适宜,能分出6个组分（4种红色素,2种黄色素）;Rf值为0.711的红色组分对大多数食品添加剂及金属离子较稳定,但Fe3+、Fe2+ 、Cu2+对色素有破坏作用。纯化后的樟树果实红色素具有较强的稳定性,可望用于酒类及酸性食品的着色。     

新疆尖果沙枣中生物挥发油组分的鉴定及脂肪酸含量的测定

以新疆尖果沙枣为试验对象,对其有效化学成分进行分析研究。结果表明,新疆尖果沙枣中共有34种不同分子量的生物挥发油和9种脂肪酸,其中挥发油中含有黄酮类、萜烯类等具有生物活性的物质,而脂肪酸中多以不饱和脂肪酸为主。     

种子质量投诉及鉴定过程中相关问题的初步分析

《种子法》的实施规范了种子的生产经营行为,种子使用者的法律意识逐步增强,通过投诉依法解决种子质量纠纷的事件逐年增多。本文从工作实际出发,通过对种子质量投诉及鉴定过程的初步分析,提出存在问题,以期有针对性地加强种子管理工作。1种子质量投诉1.1投诉的起因种子质量投诉是种子使用者购买商品种子后,在播种到收获的全生育期内,农作物的田间表现与其预期目标不一致,认为由于种子质量问题造成产量和收益减少,并与种子经营者不能协商解诀时向有关部门提请处理的行为。通常是种植面积大,产量和收益损失大,有的甚至绝收,与经营者就赔偿难以…     

喜树中ABA转运蛋白基因CaABAT的克隆及生物信息学分析

以喜树叶片提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增喜树中的ABA转运蛋白基因CaABAT全长序列,并克隆到pGMT载体中,序列分析表明,CaABAT基因4 377 bp,编码1 458个氨基酸,等电点为7.82,分子量约为164.8 KD,且该基因与拟南芥中ABA转运蛋白基因At ABCG40氨基酸序列同源性高达73%,并将该序列提交至GenBank(No.KY882555)。该蛋白的二级结构中α-螺旋为49.45%,β-折叠为11.04%,无规则卷曲39.51%,定位细胞的质膜上。且该蛋白基因功能分类体系(Gene ontology)分析显示其具有ATPase依赖的跨膜转运活性,可能参与细胞内如含氮化合物代谢过程。然后分别分段导入至酵母表达载体pDRGAL与植物表达载体pBIGD中,构建重组质粒pDRGAL-CaABAT和pBIGD-CaABAT。最终为探究CaABAT转运ABA功能以及研究其对植物次生代谢调控奠定基础。     

水培条件下病毒诱导棉花基因沉默体系的建立及优化

以国欣棉3号为材料,以棉花GhCLA1为指示基因,探讨了生长温度、重悬液浓度、注射时间、品种等对水培棉花pTRV介导的VIGS沉默效率的影响。结果表明在24℃条件下,出苗后3~5 d内注射能得到较高沉默效率,重悬液浓度对沉默效率没有影响;同时以注射pTRV-GFP作为空白对照可以消除插入片段对植株生长的影响,减小对照误差;水培与土培方式相比能更快更早出现沉默表型,缩短试验周期,并能诱导不同品种棉花材料GhCLA1基因沉默;利用水培棉花TRV-VIGS体系,成功抑制了棉花GhCTR1基因的表达,与对照株相比,抑制后的棉花植株出现矮化表型,说明水培棉花TRV-VIGS体系建立在棉花研究中的广谱利用性。     

麦棉套作Bt棉花根系分泌物对土壤速效养分及微生物的影响

在砂培条件下,设置改良3∶1式麦棉套作试验,采用1/2 Hoagland-Aron营养液培养棉苗,溶液法收集根系分泌物.以中性去离子水为对照,将收集到的棉花根系分泌物与不同粒径的土壤混合培养15 d后,测定棉花根系分泌物对不同粒径土壤速效养分(速效氮、速效钾、速效磷)含量和土壤酶活性的影响.同时在大田条件下,研究改良3∶1式麦棉套作系统中套种行土壤养分、微生物数量和土壤酶活性的变化.结果表明:棉花根系分泌物促进了土壤中磷、钾向有效态的转化,土壤速效氮(硝态氮、铵态氮)含量下降,速效磷、钾的含量分别比对照提高了19.2%和34.0%,土壤酶活性比对照提高了12.2%.细菌和真菌的数量比对照高49.8%和52.9%,土壤蔗糖酶活性升高.     

棉花多胺HPLC的测定方法优化及其在体细胞胚胎发生过程中的变化规律

利用HPLC法测定棉花组织培养物中的多胺含量,以棉花品种新陆早33号愈伤组织为材料进行多胺含量的测定,结果表明:冰浴浸提时间及衍生反应时间优化后,可将内源腐胺(Putrescine,Put)、亚精胺(Spermidine,Spd)、精胺(Spermine,Spm)在15 min完全分离并定量测定,线性关系良好(r0.99),回收率高(96.8%~103.1%);建立了棉花多胺HPLC测定方法。利用该方法对棉花体细胞胚胎发生各时期培养物进行多胺含量测定,结果显示胚性愈伤组织形成后多胺含量显著上升,且腐胺与亚精胺和精胺的比例随着体细胞胚胎发生持续下降,表明非胚性细胞向胚性细胞转化过程中,二胺(腐胺)不断向三胺(亚精胺)和四胺(精胺)转化,特别是在胚状体形成期,亚精胺和精胺的积累显著增加,初步揭示了棉花体细胞胚胎发生过程中多胺的变化规律。     

中性氧化铝柱净化—高效液相色谱法测定菠菜中的代森锰锌丙森锌和福美双

建立了菠菜中代森锰锌、丙森锌和福美双残留量的高效液相色谱分析方法。原理是使用碘甲烷甲基化后过中性氧化铝柱净化,使用高效液相色谱二极管阵列检测器进行测定。3种农药的定量下限均为0.05 mg/kg,线性范围0～2.0 mg/kg。添加水平25μg/kg时回收率为82%～107%,RSD小于5%。该方法选择性好、操作简单、重现性和准确度高。     

褪黑素测定方法及玉米、水稻种子中褪黑素含量的分析研究

褪黑素（melatonin,缩写MT）是一种吲哚类色胺（N-乙酰-5-甲氧基色胺）,MT被证实广泛存在于生物有机体中。本试验利用玉米、水稻种子作为材料,探索种子中MT含量的测定方法、并初步了解玉米和水稻种子中MT含量情况。结果表明：(1)用高效液相色谱法（HPLC）来检测种子中MT含量是可行的, 褪黑素在0.01～1.20mg/kg浓度范围内,其标准曲线的回归方程为Y＝643436X－2446.1,R2＝0.9998,平均回收率达94.11%;（2）玉米、水稻两种粮食作物种子中含有褪黑素成份,且不同种间、品种间MT含量差异很大。玉米品种MT平均含量为96.5PPb,变幅为0～2034PPb;水稻平均为16.0PPb,变幅为0～264PPb。     

大豆籽粒生育酚及其组分含量鉴定与优异种质筛选

生育酚（维生素E）具有防止人体动脉硬化、降低胆固醇、增强血液循环和防治心血管疾病等多种功效。大豆较其他植物含有更为丰富的生育酚,但目前大规模筛选优异种质的工作开展较少且研究不够深入。鉴于此,利用299份大豆品种资源,通过高效液相色谱法测定其籽粒生育酚及其组分含量,明确其遗传变异及相关性,并筛选生育酚含量高的特异种质。结果表明,供试大豆品种生育酚及其组分含量存在丰富的遗传变异,其δ-、γ-、α-生育酚及总生育酚平均含量分别为44.15、143.05、66.81及254.01μg/g,变异系数在15.37%~38.04%之间,α-生育酚变异系数最高;3种成分占总含量比值分别为17.47%、56.57%和25.96%,变异系数为11.78%~32.21%,α-生育酚比值变异系数最高;同时发现,总含量与3种组分含量间的相关系数均达到极显著水平,δ-生育酚与γ-及α-生育酚的相关系数也达极显著水平;基于各供试品种生育酚及其组分含量,将其分为3类,并筛选出13份高生育酚含量特异种质,其中包括黑河44、合丰50、合农75和绥农28等,为今后通过常规及分子育种方法实现生育酚及其组分含量遗传改良奠定了材料基础。     

Identification of qRL7, a major quantitative trait locus associated with rice root length in hydroponic conditions

Root system development is an important target for improving yield in rice. Active roots that can take up nutrients more efficiently are essential for improving grain yield. In this study, we performed quantitative trait locus (QTL) analyses using 215 recombinant inbred lines derived from a cross between Xieqingzao B (XB), a maintainer line with short roots and R9308, a restorer line with long roots. Only a QTLs associated with root length were mapped on chromosomes 7. The QTL, named qRL7, was located between markers RM3859 and RM214 on chromosome 7 and explained 18.14–18.36% of the total phenotypic variance evaluated across two years. Fine mapping of qRL7 using eight BC₃F₃ recombinant lines mapped the QTL to between markers InDel11 and InDel17, which delimit a 657.35 kb interval in the reference cultivar Nipponbare. To determine the genotype classes for the target QTL in these BC₃F₃ recombinants, the root lengths of their BC₃F₄ progeny were investigated, and the result showed that qRL7 plays a crucial role in root length. The results of this study will increase our understanding of the genetic factors controlling root architecture, which will help rice breeders to breed varieties with deep, strong and vigorous root systems.     

贵州四种名优茶叶的电子鼻鉴别与香气成分分析

为实现贵州4种名优茶叶（湄潭翠芽茶、石阡苔茶、凤冈锌硒茶、都匀毛尖）的鉴别,本文通过线性判别分析（LDA）和载荷分析（Loadings）,研究电子鼻技术对贵州4种名优茶叶的鉴别能力,并采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术对香气成分进行分析。结果表明：电子鼻中LDA方法能够将4种名优茶叶有效鉴别,而Loadings分析表明2号（氮氧化合物）和7号（萜烯类、硫化物）传感器在整体气味鉴别中起到主要作用。对4种名优茶叶的具体香气成分分析表明,4种茶叶中共检出香气成分77种,共有成分14种。其中,醇类和烷烃类在4种茶叶香气成分中的相对含量均较高,4种茶叶均未检测出独立的醛类化合物。芳樟醇、2-丁基-1-辛醇、5-庚基苯-1,3-二醇、癸烷分别是湄潭翠芽、石阡苔茶、凤冈锌硒茶和都匀毛尖茶中检测出独有的且相对含量最高的香气成分,说明不同种类的茶叶均有独自的香气成分。因此,不同种类的茶叶由于挥发性成分种类及相对含量有差异导致其香气不同,并且电子鼻技术可以对贵州这4种茶叶进行有效鉴别。     

Analysis of the Medium Pressure Range in Urban Gas Transmission and Distribution System

According to the analysis of technology and economy about the gas supply with the medium pressure in gas pipeline network of urban gas transmission and distribution system,a more economical and feasible pressure value is obtained.     

北疆高产棉花根系构型与动态建成的研究

在大田条件下,研究棉花根系构型分布和动态建成结果表明,北疆高产棉花根系生物量的积累呈S型曲线,其中线性增长期从6月下旬(盛蕾期)至7月下旬(盛花期),较地上部相应时期早约10d。随种植密度的增大,根系生长率下降、快速生长期提前。根系在土壤中的下伸过程呈S型曲线,构型分布符合Y＝Ae-Bx指数方程,有52．4％、65．8％和73．3％以上的根量分别集中在地表20cm、30cm和40cm深的土层内,80．6％以上的根量集中在植株行间两侧0～15cm土体内。与内地棉区相比,北疆棉花根量小,但生产力更高。