海南省农业抗旱火箭增雨作业效果评估技术研究

为对海南旱季空中云水资源进行有效利用和开发,增大地面降雨量,缓解旱情,通过科学的效果检验验证和分析研究,找出针对海南典型云系的统计检验和物理检验最佳结合的非随机化效果检验方法。通过相似离度判别法用软件自动选取对比云进行效果评估,具体分析了海南省西部农业抗旱火箭增雨作业每个点对流单体的催化效果,对于无对流单体的区域采用非随机化区域对比分析方法评估。二者结果对比发现,在回波顶高方面,对流单体的催化统计效果更好,在液态水含量增大方面,区域对比的催化统计效果显著。其雷达回波各参量之差曲线图,可以通过斜率的变化来清楚的判定目标云的增长趋势,也可判定对比云的消亡时间。从整体而言,虽然二者的分析方法和分析对象不同,但其可以互相补充,互相论证,极大的提高了海南本地化增雨效果的准确性。     

安徽野生香菇遗传多样性及杂种优势的RAPD分析

王子迎等采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术，利用17个引物对26个安徽野生香菇菌株和6个香菇栽培品种进行了遗传多样性分析，并构建了遗传相关聚类图。在128个RAPD标记中，多态性标记为104个，占81．3％。聚类分析显示，当以相异距离0．25为阈值时，32个菌株被划为5个RAPD遗传组，多数菌株之间遗传相似性较低。表明供试菌株在DNA水平上存在比较显著的遗传变异，具有较丰富的遗传多样性。杂种优势的检测表明亲本间遗传距离较大的组合其杂种优势也较强。     

平欧杂种榛的继代培养条件优化研究

由于传统榛子繁育方法不能满足市场的需求,以平欧杂种榛‘辽榛7号’为材料,采用离体培养的方式对其继代培养中基本培养基及其激素配比进行研究,以期找到一条切实可行的榛子扩繁技术.结果表明:(1)与DKW培养基、NRM培养基和WPM基本培养基相比,选用改良NRM培养基作为平欧杂种榛组培苗继代培养的基本培养基;(2)选择2.5 mg/L6-BA和0.01 mg/LIBA作为继代培养的激素组合,隔代降低其浓度至6-BA 2.0 mg/L和IBA 0.005 mg/L有利于促进组培苗的增殖;(3)根据组培苗生长状况,添加TDZ的适宜浓度范围为0.001～0.01 mg/L,其中以0.005 mg/L的增殖效果最好;(4)培养基中添加多胺对组培苗茎段增殖具有良好的效果,但GA3的作用不明显,同时添加GA3和多胺,其增殖效果较单独添加GA3好,但较单独添加多胺差.     

高温胁迫下平欧杂种榛品种的耐热性研究

研究高温胁迫下平欧杂种榛品种（系）的耐热性,为选育适合于新疆高温干旱地区栽培的优良品种提供参考。以新疆伊犁大西沟的13个品种（系）为材料,分别在30℃（对照）、35℃、40℃、45℃、50℃等 5个温度梯度下处理,测定叶片的相对电导率,计算细胞伤害率,结合Logistic方程拐点确定半致死温度,利用聚类分析法综合分析品种间的耐热性。结果显示：（1）随着胁迫温度的升高,各品种（系）的细胞伤害率均有不同程度的上升,其细胞伤害程度为：12^#＜7^#＜26^#＜8^#＜3^#＜24^#＜6^#＜2^#＜1^#＜27^#＜30^#＜29^#＜28^#。（2）各品种（系）的高温半致死温度在39.29℃~47.02℃,12^#的半致死温度最高,28^#的半致死温度最低。（3）聚类分析将13个品种（系）划分为3个类群,第Ⅰ类群包括1^#、27^#、28^#、29^#、30^#;第Ⅱ类群包括2^#、3^#、6^#、8^#、7^#、24^#、26^#;第Ⅲ类群仅有12^#。研究表明,13个品种（系）的耐热阈值为39.29℃~47.02℃,12^#耐热性最强,1^#、27^#、28^#、29^#、30^#耐热性较差,其余品种（系）耐热性居中。     

梨RAPD分析技术体系的建立及遗传多样性研究

以梨叶为试材,从DNA提取入手,通过优化扩增程序和反应条件,建立起梨的RAPD分析技术体系,并对15个梨材料进行了遗传多样性分析。结果表明：用改良SDS法提取DNA能有效抑制酚的氧化,所提DNA模板呈无色透明状,A260／A280为1.70以上,DNA（鲜重）平均产率为365.7μg/g,所提模板DNA能成功用于RAPD分析。经过梨遗传多样性分析表明,梨的DNA多态性高,多态带百分率达到81．7％,证明梨的遗传基因广泛、种质资源丰富。根据相似系数用UPGMA法聚类,将起源不同的东方梨和西洋梨明显分成两大类,证明RAPD技术能在DNA分子水平上较好地揭示梨的遗传背景及其亲缘关系。     

甘蓝型油菜遗传多样性及其与杂种表现的关系

以3个双低甘蓝型油菜自交不亲和系、 22个不同来源的父本品种及其按NCⅡ法配制的66个杂种为材料, 应用AFLP及RAPD标记技术研究亲本的遗传多样性及遗传距离与杂种产量、含油量的关系. 结果表明, 根据遗传距离可将3个自交不亲和系分为2组, SI-1300和SI-1310为一组, SI-1320单独为一组; 父本品种分为5组, 中国品种为1组, 国外品     

辣椒遗传多样性的SSR分析

采用109对SSR特异引物对89份辣椒材料进行分析,其中87对引物扩增出条带,52对引物具有多样性,扩增带分子量在150～2 000 bp之间,231条谱带中175条谱带具有多态性,多态率占75.76%,平均每个引物可扩增出2.66条带,说明辣椒材料的遗传多样性相对较小.89份材料经过NTSYS2.1.0软件分析后,计算出材料间遗传距离,并做出SSR分子标记聚类图.结果显示,89份材料在遗传相似系数0.60处分为两类,可以将栽培种和野生种区分开来,在遗传相似系数0.80处可以分为四类,总体上看,将果实类型相似的种质基本都聚在一起,说明用SSR标记进行辣椒遗传多样性的分析是可行的.     

利用RAPD分析云南野生荞麦资源的多样性和亲缘关系

利用筛选出的19个随机引物对云南养麦资源的9个种、1个变种、2个亚种的26份材料进行RAPD扩增反应，共获得162条DNA扩增带，其中多态性带153条，多态性带的比率平均为94．8％。Nei氏相似性系数的分析结果，养麦种间平均相似系数为0．411，种内平均相似系数为0．786，表明云南养麦资源种间比种内具有更丰富的多样性；聚类分析的结果，26份供试资源聚为3大类群：第1大类群是小粒种类群，第Ⅱ大类群是甜养类群，第Ⅲ大类群是苦荞类群。结合3大类群的特点，     

利用RAPD标记分析番茄杂种遗传纯度

本研究用350条10碱基的随机引物对番茄优良一代杂交品种毛粉808、毛粉818和强选1号进行了RAPD分析,筛选出6个可用于鉴定这3个杂种遗传纯度的RAPD标记:S16950、S1019400、S1072683、S14221270、S1388800和S1503750。另外,筛选出8个母本特异的RAPD标记:S66740、S66780、S169570、S178570、S5051700、S13161057、S1388952和S1458650;其中标记S66740和S13161057可以将西北地区种植的5个主要番茄品种分为两组,毛粉808、毛粉818和毛粉802为一组,西粉3号和强选1号为另一组,这些标记可用于部分番茄品种的鉴定。并克隆了S1072683、S1388952和S13161057这3个RAPD标记。     

桃品种遗传多样性SSR分析

以95份桃育成品种为试材,利用筛选出的18对SSR分子标记引物,对桃育成品种进行微卫星标记,之后根据桃的生物学性状,利用Popgene软件进行数据分析.结果表明,桃品种8个连锁群观测到的等位基因数在4～9之间,有效等位基因数2.2～5.5.基于桃果形性状将桃品种分为扁球形和球形两个类群.扁球形类群的Nei's基因多样度...     

杨树RAPD标记技术体系的建立与优化

本研究主要对杨树RAPD体系进行优化,以银白杨为试材,利用L₁₆(4⁵)正交试验设计和2个单因素试验,研究各主要参数的适宜浓度。结果表明,杨树RAPD优化后的反应体系：20μL反应体系中,含Mg²⁺ 1.5 mmol/L、Taq酶2.0 U、引物0.2μmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、模板DNA 50 ng。扩增程序为：94℃预变性3 min、94℃变性40 s、38℃退火60 s、72℃延伸90 s,共38个循环;最后在72℃延伸7 min后4℃保温。通过1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测其扩增产物,证明该体系稳定可靠,可以用于杨树的遗传学分析。     

烟草RAPD反应体系的建立与优化研究

以烤烟品种为材料,研究了烟草RAPD分析过程中的影响因素,包括模板浓度、Mg2+、dNTP、引物、Taq 酶、循环次数、退火温度等,建立了适于烟草RAPD分析的PCR反应体系：即在25μl反应体系中,模板用量为40ng;引物浓度为0.4μM;Mg2+浓度为2.5mM;dNTP浓度为0.2mM;Taq DNA聚合酶用量为1U。扩增程序为94℃预变性5min;然后94℃变性1min,38℃复性1min,72℃延伸1.5min,39个循环;最后72℃延伸5min。     

杨树RAMP体系的建立与优化

以杨树基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物4种因素3个水平对杨树RAMP反应体系进行优化,建立了适合于杨树的RAMP-PCR优化反应体系,该体系为25μL:Mg2+浓度为1.5 mmol/L,dNTPs为0.2 mmol/L,Taq酶1.0 U,引物各为0.4μmol/L。PCR反应程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,45℃复性1 min,72℃延伸2 min,45个循环,72℃延伸10 min。     

芹菜RAPD反应体系的优化研究

本试验以一般RAPD反应程序为基础,采用单因素递进筛选方法,针对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、随机引物和DNA模板5个主要影响因素,分别设置5个不同浓度梯度,对芹菜进行RAPD-PCR扩增,建立了芹菜RAPD技术最优体系。结果表明：25 μL反应体系中含Taq DNA聚合酶1.0 U、Mg2+ 3.0 mM、dNTPs 0.2 mM、引物28 ng、模板DNA 70 ng,10×PCR Buffer 2.5 μL;扩增程序为：94℃预变性5 min,94℃变性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min,进行42个循环,最后72℃延伸10 min。     

山杏RAPD反应体系条件的优化

以山杏新鲜叶片为材料,研究了山杏RAPD分析过程中的影响因素,包括Taq酶、Mg2+、dNTP、引物、模板DNA浓度、变性时间、循环次数等,建立了适合山杏RAPD反应的PCR体系,即20μL反应体系中含有Taq酶1.0U、Mg2+ 2.0mM,四种dNTP各0.1mM,引物0.5μM,模板DNA50ng。扩增程序为：94℃预变性4mins;94℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸1.5mins,10个循环;94℃变性30s,36℃退火40s,72℃延伸60s,30个循环;最后72℃延伸5min     

滩地13个杨树无性系遗传多样性的RAPD分析

利用RAPD分子标记手段,研究杨树无性系的遗传多样性。在探讨杨树叶片基因组DNA提纯方法和优化PCR扩增反应体系的基础上,采用18个引物对13个杨树无性系的基因组DNA进行扩增;每个引物扩增的DNA片段数为1~14个,共产生126条带,其中多态带53条,占42%,平均每个引物扩增出3条多态带。结果表明：通过对126条谱带的聚类,分析了供试杨树无性系的系统发育,并通过比较各品种间的特异带或特征带的差异进行无性系鉴别和测定,运用特殊谱带,建立了杨树无性系的分子检索表。     

油葵SRAP-PCR反应体系的建立与优化

为建立油葵SRAP-PCR的反应体系,采用单因素试验法,对Mg2+、dNTPs、引物浓度、Taq DNA聚合酶、模板DNA分别设置5~7个水平梯度,筛选出适宜的用量范围,以此为基础,再通过L16(45)正交试验设计,对影响SRAP-PCR的5个因素进行优化,建立了油葵SRAP-PCR的最佳反应体系：20 μL体系中含10×Buffer 2 μL,Mg2+ 2.75 mmol/L,dNTPs 0.18 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.25 U,正反引物各0.3 μmol/L,模板DNA 60 ng,最佳退火温度为52.2℃。用22份油葵材料对该体系进行验证,结果显示扩增条带清晰、多态性高,说明该体系稳定可靠,可有效的用于油葵种质资源的鉴定、遗传图谱构建等研究。     

萝卜SRAP-PCR反应体系的建立与优化

以萝卜基因组DNA为模板,对其SRAP-PCR反应体系的各个主要影响因子进行了系统的优化,建立了重复性好、多态性丰富的萝卜SRAP-PCR反应体系:20 μL反应体系中,DNA 50 ng、Mg2+2.25 mmol/L、dNTP0.2 mmol/L、Taq1 U、Primer 0.7μmol/L.扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min、35℃复性1 min、72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min、50℃复性1 min、72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min,4℃保温.该反应体系在不同萝卜种质资源遗传多样性分析、遗传图谱构建、分子标记辅助选择育种等方面都有重要作用.     

马铃薯SSR-PCR反应体系的建立和优化

应用L16(45)正交设计对影响马铃薯SSR-PCR的主要参数进行优化,建立适于马铃薯SSR-PCR反应的最佳体系。结果表明:各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响。马铃薯SSR-PCR优化反应体系为:10×PCR Buffer 1.0μl、模板DNA约30 ng、dNTP 200 mol/L、SSR引物66 ng、Taq DNA聚合酶0.25 U、Mg2+2.25 mmol/L,加ddH2O至终体积10.0μl。PCR扩增程序如下:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,53℃复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸10 min,然后4℃保存。     

花椰菜的ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以花椰菜基因组为材料,通过单因素试验,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子如dNTPs浓度,DNA模板含量,Taq DNA聚合酶量,引物用量以及最适退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合花椰菜的ISSR-PCR反应体系:25μL反应体积:内含10×PCR反应缓冲液(含Mg~(2+))2.5μL、0.5U TaqDNA聚合酶、0.2mmol/L dNTPs、0.5μmol/L引物、60ng模板DNA。确定了适宜的退火温度为48.6℃。扩增程序为94℃预变性5 min;然后94℃变性30s,46.9℃退火45 s,65℃延伸1.5min,35个循环;最后65℃延伸7min,4℃保存。用120条引物对花椰菜基因组进行标记,筛选出引物TI-13可以将这6份花椰菜材料区分开。花椰菜ISSR反应体系的建立为利用ISSR标记技术进行花椰菜品种鉴别、分类、种质资源遗传多样性分析奠定了良好基础。