板栗主要栽培品种的遗传学分析

应用RAPD分子标记手段，研究了品种间的遗传多样性。对46个板栗品种样品的DNA，用1个引物进行扩增反应，产生69个多态位点。结果表明，各个位点上遗传多样性程度存在较大差别，有效等位基因数目（Ne）最大值为1．9990，最小值为1．0444；基因多样度（H）的最大值为0．4998，最小值为0．042；Shannon信息指数的最大值为0．6929，最小值为0．1047。所检测位点的平均有效等位基因数目为1．5260，平均基因多样度为0．3618，平均信息指数为0．4832。有效等位基因数目、平均基因多样度和平均Shannon信息指数的标准误都较小，分别为0．3096，0．1418，0．1748，估计精度较高。这3个遗传多样性度量表明板栗品种间具有较高的遗传多样度。品种间遗传距离最大值为0．8001，相应的遗传共享度为0．4493；品种间遗传距离最小值为0．0910，对应的遗传共享度为0．9130。遗传距离是评价品种间近缘关系的重要指标。对板栗品种间的遗传分析，是板栗良种选育和品种间亲缘关系的理论基础。     

切花月季绿枝扦插技术

现代月季（Rose hybrida Hort）是蔷薇科蔷薇属的木本花卉。有“花中皇后”的美誉，深受人们喜爱。为我国十大名花之一，在我国有30多个城市将其选为市花。切花月季为现代月季中的一个重要组成部分，在品种分类上属于杂种茶香月季（HT）和丰花月季（FL）品种系列，在世界花卉园艺中，切花月季已占全部切花总量的第三位，而在我国，近几年来切花消费量已占首位。今天的切花月季不但花色、花型丰富，     

6个复叶槭品种间亲缘关系的RAPD分析

采用RAPD法对复叶槭5个品种及1个芽变品种进行基因组DNA多态性分析,从300个引物中筛选出具有丰富多态性的20个10bp的随机引物,这20个引物共扩增出170个DNA片段,片段大小在200bp～2800bp之间,其中多态性谱带为112条,多态率为65.88%,表现出较为丰富的RAPD多态性;利用UPGMA进行遗传距离计算的结果表明,6个复叶槭品种间的亲缘关系和遗传距离均有较大差异.     

美国山核桃群体遗传多样性的RAPD分析

运用随机扩增多态性DNA（RAPD）标记技术，采用Operon公司的10种随机引物，以采自美国东南部、北部、西部和我国江苏、浙江、湖北、湖南、云南等地的9个美国山核桃栽培群体45个单株的种子为材料，检测出多态位点42个。以这些多态位点为依据，计算了估测了多态性位点百分比、Shannon表型多样度指数、Virk群体内遗传距离和Nei氏群体间遗传距离，并用它们作为参数进行群体遗传多样性的RAPD分析。结果表明，参试的美国山核桃品种群体遗传变异明显，且群体间差异大于群体内差异，我国引种的群体遗传差异大于原产地美国的群体遗传差异。     

常山胡柚优良无性系的RAPD分析

采用改良的CTAB法成功提取到常山胡柚叶片DNA，并对常山胡柚的12个优良无性系及7个优株之间进行了RAPD分析。从初选的0peron公司的60个随机引物中又筛选出12个扩增效果较好的引物，共产生随机扩增位点103个，平均每个引物产生8．6个识别位点，但都没有发现多态性位点。由此表明，目前所选的常山胡柚优良无性系及优株之间在分子水平上并无什么差异，其经济性状方面的差异可能主要受生长发育阶段、生态环境条件及经营管理水平等因素的影响。     

不同修剪方式对1年生切花月季生长及产花的影响

通过对“萨蔓莎”、“金徽章”、“坦尼克”３个切花月季品种１年生苗徒长枝采用嫩枝摘心、半成熟枝摘心、半成熟枝折枝、成熟枝剪枝４种不同修剪方式,统计侧枝数、脚芽数、花枝长、花枝数等表明,同一修剪方式对３个切花月季品种生长的影响有一定共性,但不同品种之间又表现差异,而不同修剪方式中以半成熟枝摘心最为合适。     

油茶优良无性系的RAPD分子鉴别

油茶优良无性系是当前生产上的主要良种.通过采用RAPD分子标记方法,从180多个引物中筛选出22个具有多态性的随机引物进行扩增,得到141个位点,其中有91个是多态位点,以此为基础建立油茶优良无性系的RAPD分子鉴别体系.同时还探索出油茶叶片总DNA的分离技术和建立了RAPD反应体系,为油茶分子技术育种积累了相关的知识并奠定了DNA技术基础.     

三种修剪强度对月季切花产量的影响

本试验以二年生月季切花品种，砂蒙砂，金奖章和肯尼迪为材料，比较越夏后采用三种修剪强度对月季在切花适期切花总产量的影响，试验结果表明，三种修剪强度间的切花总产量差异极显著，轻修剪总产量最高，中修剪次之，重修剪为最低产；月均温与轻修剪的参试各品种月切花产量呈显著或极显著的正相关关系，与中修剪和重修剪的月切花产量无相关关系。     

基于SSR标记月季品种鉴定及遗传关系分析

以36个月季品种为材料,应用荧光SSR标记进行月季品种分子鉴定和品种间遗传关系研究。结果显示8个SSR位点检测出85个等位基因变异,等位基因变异范围为6～15个,平均每个位点产生10.6个等位基因变异。结合8个SSR位点,每个品种均具有独特的等位基因表现型,其中位点Ra043a品种鉴定的分辨率最高,产生32个等位基因表现型,区分所有品种最少需要2个SSR位点。品种间成对遗传相似度变幅介于0.105～0.791之间,聚类结果显示36个品种聚为6类;中国月季聚为一类,与其他月季品种存在遗传差异,起源相近月季品种分别聚为一类。研究认为SSR标记在月季品种鉴定中具备可行性,还可用于品种的遗传关系分析。现代月季遗传背景的深入研究可为未来月季新品种培育、种质资源保存等提供参考依据。     

云南特有濒危植物馨香木兰的遗传多样性研究

为研究云南特有濒危植物馨香木兰的遗传多样性水平,采用随机扩增多态DNA技术（ RAPD）,对云南省馨香木兰4个居群,即文山州广南县、西畴县新街、西畴县亚坪等3个天然居群及昆明树木园1个人工居群,进行遗传多样性分析。随机筛选出重复性好的8条随机引物,对70个样品的基因组DNA进行扩增,建立RAPD分析图谱。扩增结果为,共检测出84个多态位点。遗传多态位点百分率为61.90％（文山广南）、76.19％（西畴新街）、71.43％（昆明树木园）和66.67％（西畴亚坪）。遗传多样性Shannon指数为0.5686,其中30.55％来自种群间,69.45％来自种群内; Nei’s指数为0.3903,种群间的遗传分化系数（GST）为0.2216。文山广南和西畴亚坪之间的遗传距离最大,昆明树木园与西畴亚坪之间的遗传距离最小。结果显示,与木兰科等其他濒危植物相比较,馨香木兰遗传多样性相对较高。根据各种群遗传背景研究结果,提出了该物种迁地保护种群遗传资源管理建议。     

利用ISSR DNA标记鉴定主要银杏栽培品种

银杏 (Ginkgobiloba)是我国特有树种 ,我国劳动人民自古就有栽植银杏的习惯。在长期栽培过程中 ,已逐渐形成了一些农家品种。由于品种间形态差异 (非果期 )较小 ,用常规方法无法鉴别各个品种 ,特别是早期(苗期 )鉴定。 2 0世纪 90年代以来 ,DNA分子标记技术的不断发展和完善 ,为品种鉴定提供了新的技术手段 ,如RAPD、AFLP、ISSR、SSR等。这些标记也逐步被用于植物种或品种的鉴定研究 ,如RAPD标记鉴定桂花 (Osmanthusfragrans)品种 (赵小兰等 ,1999)、AFLP标记鉴定苹果 (Maluspumila)品种 (祝军等 ,2 0 0 0 )和美洲黑杨 (Populus…     

树木溃疡病病原真菌类群分子遗传多样性研究Ⅱ--Botryosphaeria属28S rDNA-PCR-RFLP和RAPD解析

BotryosphaeriaCes.etdeNot .(无性阶段是DothiorellaSacc .)属病原真菌能引起多种林木溃疡病的发生 ,在我国分布区域十分广泛。病原菌因较大的寄主范围和地理分布区域表现出明显的分子遗传分化 ,通过对来自 5个区 1 4个寄主种 (品种 )的 30个菌株进行 2 8SrDNA PCR RFLP和RAPD解析 ,结果表明 ,所有供试菌株都能扩增出稳定一致的 2 8SrDNA条带 ,6种内切酶不能区分该属内部的 2 8SrDNA差异。RAPD结果表现出该属丰富的多样性 (92 81 % ) ,在 0 845相似系数的水平上所有菌株被识别为 1 3类 ,其中有地理分化、寄主分化的表现 ,也有不表现地理、寄主分化的。从DNA水平上证实引起雪松溃疡病的病原为B .dothidea ,表明B .dothidea不仅能够寄生被子植物 ,还能寄生裸子植物 ,有非常宽阔的寄主范围。随机扩增引物K1 6和R1 4可以作为陕西菌株和湖南菌株与其它地区菌株区别的鉴别性引物。传统上认为苹果轮纹病菌 (B .berengerianadeNot.f.sp .piricola (Nose)KoganezawaetSakuma)为苹果干腐病菌 (B .berengerianabeNot.)的专化型 ,它们与杨树溃疡病原分属两个种。本试验分析表明这种分类较为合理。     

香果树RAPD扩增条件的优化及遗传多样性初步分析

对浙江省天台山自然香果树种群的DNA进行了提取和RAPD扩增条件的优化,分别测试了镁离子、dNTP、模板DNA含量、引物浓度、DNA聚合酶量和牛血清白蛋白浓度对反应结果的影响,通过各因子的组合研究,可知香果树RAPD分析较适宜的扩增条件为:15μLPCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液,1 8mmol·L-1MgCl2,2UTaq酶;10ng模板DNA;20pmol引物;dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0 1mmol·L-1。以此适宜条件对12个引物进行扩增,共扩增出51个DNA片段,多态位点百分率为45 1%,种群内遗传多样性较低,进一步研究不同种群香果树的遗传多样性具有一定的意义。     

板栗优良品种（无性系）苗木分子标记鉴别研究）

利用ＲＡＰＤ标记对浙江省林木良种审定委员会审定（认定）和通过省级鉴定的８个板栗品种及无性系进行指纹分析，鉴别出各板栗品种（无性系），实验过程中对６８４个随机核苷酸引物进行了重复筛选，经筛选共获得９个稳定的ＲＡＰＤ标记，构建了板栗的ＮＤＡ指纹图谱，经过大量的实验，确定了鉴别板栗优良品种（无性系）的较为理想的程序，获得了ＲＡＰＤ良好的重复性，建立了较完整的板栗ＲＡＰＤ分析的技术体系，用大田苗进行步验证，结果可靠。     

美国山核桃主要栽培品种的RAPD鉴定

以叶片为材料,采用改良CTAB法和16种Operon引物对从原产地美国引进的30个美国山核桃主要栽培品种进行RAPD分子分析。结果表明：参试品种问存在明显的基因带型差异,多态型比率高达78．1％;根据RAPD特异分离谱带确定了各品种的标记基因型．以此可实现对美国山核桃无性系品种DNA水平上的鉴别;以标记基因型对30个美国山核桃品种进行系统聚类,结果与传统形态学及Marquard等人的同工酶分类基本吻合。     

板栗主要栽培品种的分子鉴别

应用ＲＡＰＤ分子标记手段，研究板栗品种的遗传多样性，建立了板栗品种ＲＡＰＤ标记的标准程度，以及板栗品种种的ＤＮＡ指纹数据库，并为板栗品种鉴别提供了准确、可靠的标准方法，４６个板栗品种的样品的ＤＮＡ，用１６个引物进行扩增反应的位点总数为１１９个，产生６９个多态位点，建立了４６个板栗品种的ＤＮＡ指纹数据库，并分析出这些板栗品种分子鉴别的最优化引物组合。对特定的引物组合，计算品种间的遗传距离矩阵，从而确定引物组合对这些品种鉴别的特异性。     

同功酶技术在鹅掌楸属树种分类中的应用研究

笔者运用同工酶电泳技术和形态学对鹅掌楸属树种的分类进行了探讨,结果表明：各种间不仅在形态上存在很大差异,而且同工酶酶谱也存在很大差异,鹅掌楸在Pgm的基因位点有1条特有的谱带（等位基因d）,杂种鹅掌楸2条谱带（等位基因a、d）都不存在;鹅掌楸在Shdh的基因位点有1条特有的谱带（等位基因a）,北美鹅掌楸和杂种鹅掌楸都不存在这条谱带。根据这个试验结果可以鉴定鹅掌楸、杂种鹅掌楸、北美鹅掌楸。     

Adaptive genetic diversity and population structure of the “algarrobo” [<Emphasis Type="Italic">Prosopis chilensis</Emphasis> (Molina) Stuntz] analysed by RAPD and isozyme markers

The “algarrobo” [Prosopis chilensis (Molina) Stuntz] is a tree species that represents an important natural resource in arid and semi-arid regions of Argentina. In this paper, we analysed and compared the variability of 46 RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) loci with previous estimates obtained from 12 isozyme markers in nine Argentinean populations of P. chilensis representative of the whole range of this species in Argentina. We evaluated the population structure and the existence of genetic variants associated with environmental variables. Expected heterozygosity (H _e) estimated from RAPD varied significantly among populations and regions. Hierarchical analysis of genetic variability (AMOVA) showed that most (88.1%) of the total diversity occurs within populations, the component among populations within regions (9.3%) was intermediate, while the between-region component was the lowest (2.6%). All three variance components were highly significant. The MDS plot from pair-wise Φ _ST matrix was consistent with the highly significant among-region differentiation indicated by the AMOVA. All 12 variable isozyme loci and 26 out of 46 RAPD loci showed significant or highly significant association with at least one geographic/climatic variable according to the stepwise multiple regression analysis. These results imply that the genetic differentiation among populations is better explained by environmental or biogeographical grounds than by geographical distances, suggesting gametic disequilibrium with loci responsible for the adaptation to particular environmental conditions. The information from RAPD markers would provide a relevant criterion to preserve genetic diversity in programmes for conservation and rationale use of this species.     

Direct genotyping of the poplar leaf rust fungus,Melampsora medusae f. sp. deltoidae,using codominant PCR‐SSCP markers

Two anonymous DNA markers that are revealed by single‐strand conformational polymorphism (SSCP) analysis were developed for detection of polymorphisms in Melampsora medusae f. sp. deltoidae (Mmd). Mono‐uredinial isolates of Mmd were first obtained, DNA was extracted from urediniospores and random amplified polymorphic DNA (RAPD) products of eight mono‐uredinial isolates were separated on a SSCP gel to identify differences among them. Bands representing putative polymorphic loci among the eight isolates tested were excised from the SSCP gel and re‐amplified by polymerase chain reaction (PCR), and then cloned and sequenced. A primer pair was designed to amplify a DNA fragment of a size suitable for SSCP analysis (<600 bp) for two out of three DNA fragments sequenced. Each set of primers amplified a PCR product for all eight isolates that were initially used to generate them and the resulting PCR products were analysed by SSCP. Polymorphisms among isolates were identified for both putative loci. The two primer pairs amplified a PCR product of the expected size on an additional 32 mono‐uredinial isolates of Mmd tested. From the overall 40 mono‐uredinial isolates tested, 5 and 11 alleles were detected, and 12 and 34 isolates showed to be heterozygous, as indicated by the presence of more than two bands on the SSCP gel, at loci A and B, respectively. The primer pairs were tested for specificity against 106 fungal isolates belonging to various taxa, including other rusts, and against DNA extracted from greenhouse‐grown healthy poplar leaves. DNA amplification products of the expected size were obtained only when Mmd DNA was present. Optimization of PCR conditions with these two primer pairs allowed genotyping directly from single uredinia extracted from infected leaves, thus alleviating the need to culture the fungus to characterize individuals, hence making it possible to process large numbers of samples for population studies.     

不同地域的代表性基因型龙眼RAPD分析

利用RAPD标记技术对不同地域之间有代表性的16个基因型龙眼进行遗传分析。结果表明,6条随机引物共扩增出84个多态性位点,平均每条引物扩增出14条多态性条带;地域不同的基因型龙眼具有丰富的遗传多样性,云南、贵州和广东的龙眼遗传多样性较高,其次是福建、台湾、广西、泰国、四川,而印度尼西亚最低;同一龙眼产区中,福建不同基因型龙眼之间多态性最高,达34.52%,其次是贵州、广东、广西、泰国,四川龙眼之间多态性最低,仅为15.48%。聚类分析结果表明,在相似系数0.59的水平上16个基因型龙眼可以分为3个遗传群体;龙荔作为龙眼近缘种与龙眼栽培种的DNA指纹具有明显差异;泰国和印度尼西亚的基因型龙眼可以归类到中国的部分基因型龙眼群体中,印证了泰国、印度尼西亚基因型来源于中国。此外还讨论了利用RAPD构建不同基因型龙眼指纹图谱的可行性。