纳米银对甘蓝黑腐病菌抑制作用的研究

测定纳米银对甘蓝黑腐病菌的抑制作用.结果表明:纳米银对甘蓝黑腐病菌的毒力(EC50)为0.020 9 μg/mL;当处理质量浓度为0.02 μg/mL时,甘蓝黑腐病菌的呼吸强度和群体的生长数量均受到明显的抑制;剂量为0.1 μg/mL的纳米银可使甘蓝黑腐病菌细胞膜受损,电导率明显提高.盆栽试验结果表明:质量浓度为30 μg/mL的纳米银对小白菜黑腐病的防治效果可达67.67%.     

克隆包含以拟南芥为寄主的甘蓝黑腐病菌Xcc1067无毒基因的D…

本研究探索了以拟南芥为寄主的甘蓝黑腐病菌的致病条件，观察了其病症的发展。建立了菌株Ｘｃｃ１０６７的ｐＩＪ３２００为载体的基因文库，从基因文库中筛选出拟南芥Ｃｏｌｕｍｂｉａ为寄主的Ｘｃｃ１０６７菌株的无毒基因克隆，该克隆的进一步分析正在进行。     

甘蓝黑腐病菌XC_3374基因功能的初步探究

【目的】初步探究XC_3374基因在甘蓝黑腐病菌Xcc8004中的功能,为深入研究甘蓝黑腐病菌Xcc8004中L-天冬酰胺酶的功能奠定基础。【方法】从KEGG数据库内获取XC_3374基因的旁侧序列,通过常规PCR对其进行克隆,同时利用自杀质粒pK18mobSacB通过同源双交换的方法构建了其缺失突变体DM3374并检测其表型。【结果】以引物D3374L-F/D3374R-R扩增,野生型菌株能够扩增出1789 bp的DNA片段,而候选突变体菌株能扩增出1367 bp的片段;以内部引物3374F/3374R扩增,野生型菌株能扩增出332 bp的片段,而候选突变体菌株不能扩增出任何片段,表明目标基因已缺失,缺失突变体DM3374构建成功。平板检测法结果表明,XC_3374基因突变后不影响胞外多糖及胞外酶的合成与分泌。在MMX基本培养基上,突变体菌株能够正常生长,形成的菌落大小与野生型菌株基本相同,表明缺失突变体不是营养缺陷性。游动平板检测结果表明, XC_3374缺失突变体的运动能力比野生型稍强,但差别不明显。采用剪叶法检测缺失突变体的致病性,结果表明,野生型Xcc8004和缺失突变体DM3374 病斑平均长度分别为13.000和11.983 mm,两者致病性无显著差异。【结论】XC_3374基因突变体在胞外多糖、几种胞外酶的合成与分泌、致病性等各种表型与野生型基本一致。     

甘蓝黑腐病菌XC_3374基因功能的初步探究

【目的】初步探究XC_3374基因在甘蓝黑腐病菌Xcc8004中的功能,为深入研究甘蓝黑腐病菌Xcc8004中L-天冬酰胺酶的功能奠定基础。【方法】从KEGG数据库内获取XC_3374基因的旁侧序列,通过常规PCR对其进行克隆,同时利用自杀质粒pK18mobSacB通过同源双交换的方法构建了其缺失突变体DM3374并检测其表型。【结果】以引物D3374L-F/D3374R-R扩增,野生型菌株能够扩增出1789 bp的DNA片段,而候选突变体菌株能扩增出1367 bp的片段;以内部引物3374F/3374R扩增,野生型菌株能扩增出332 bp的片段,而候选突变体菌株不能扩增出任何片段,表明目标基因已缺失,缺失突变体DM3374构建成功。平板检测法结果表明,XC_3374基因突变后不影响胞外多糖及胞外酶的合成与分泌。在MMX基本培养基上,突变体菌株能够正常生长,形成的菌落大小与野生型菌株基本相同,表明缺失突变体不是营养缺陷性。游动平板检测结果表明, XC_3374缺失突变体的运动能力比野生型稍强,但差别不明显。采用剪叶法检测缺失突变体的致病性,结果表明,野生型Xcc8004和缺失突变体DM3374 病斑平均长度分别为13.000和11.983 mm,两者致病性无显著差异。【结论】XC_3374基因突变体在胞外多糖、几种胞外酶的合成与分泌、致病性等各种表型与野生型基本一致。     

甘蓝品种黑腐病抗性试验

甘蓝黑腐病是甘蓝的主要病害之一,近年来该病害在山西省旱塬甘蓝生产地区发生比较严重,给当地菜农造成了严重的经济损失。研究选用15个甘蓝品种,在其不同生长期进行黑腐病抗性田间鉴定试验。结果显示,寿阳甘蓝黑腐病的发生集中开始于结球期,不同品种抗病性差别明显,其中,夏盛65、改良优美、春天宝抗性较强,结果可为生产上预防甘蓝黑腐病发生及品种选择提供依据。     

甘蓝黑腐病菌rpf基因簇对胞外蛋白酶I基因表达的调控

甘蓝黑腐病黄单胞菌产生的胞外蛋白酶Ｉ在致病的早期阶段起重要作用，该酶以及其它胞外酶和胞外多糖的合成受一致病因子调控基因簇（ｒｐｆ基因簇）的正向调控。本研究利用带有β－半乳糖苷酶报道基因（ｌａｃＺ）的转座子Ｔｎ５－Ｂ２０诱变蛋白酶Ｉ基因克隆，获得了ｌａｃＺ在蛋白酶Ｉ基因启动子控制下表达的Ｔｎ５－Ｂ２０插入突变质位。通过将这种突变质粒导入野生型和各ｒｐｆ基因突变体菌株后，测定ｌａｃＺ基因在细胞生长周期     

甘蓝黑腐病的无公害防治技术

黑腐病是甘蓝的主要病害之一,病菌寄主广泛,还可危害白菜、花菜、油菜、芥菜、萝卜等多种十字花科蔬菜。该病在降水较多的年份发病严重,对甘蓝的产量和品质造成很大危害。一、病原致病菌为黄单胞杆菌。细菌菌体短杆状,单生或链生,仅一端有单条鞭毛,无芽孢,有荚膜,革兰氏染色为阴性。菌落近圆形,颜色先淡黄,后转为蜡黄色,边缘整齐,略凸起,薄或平滑,有光泽,老龄菌落边缘呈放线状。二、病害诊断幼苗期受害,子叶开始产生水浸状,逐渐变褐枯萎或蔓延至真叶,使叶脉呈长短不齐的小条斑。成熟期发病多,主要危害甘蓝叶片。叶片染病后多从叶缘向内扩散,…     

应用单克隆抗体鉴别水稻白叶枯病菌血清型的研究

从已建立的15株稳定分泌抗水稻白叶枯病原细菌的单抗杂交瘤细胞株中筛选出4株,用其抗体采用琼脂双扩散和酶联免疫吸附试验检测了作者从采集的病叶分离和从各地收集的水稻白叶枯病菌菌株63株,将其分为4个血清型,其结果与常规多抗血清划分的血清型一致.并运用免疫电泳和琼脂双扩散试验比较了各血清型之间的差异,其结果表明,单抗较多抗特异性强,在鉴别血清型方面较优越.     

生物素——亲和素酶联免疫吸附测定法检测水稻白叶枯病病菌

在以单克隆杭体为第2抗体的酶联免疫吸附测定法(ELISA)的基础上,应用生物素——亲和素系统,建立了亲和素——生物素化辣根过氧化物酶复合物——酶联免疫吸附测定法(ABC-ELISA)检测水稻白叶枯病病菌。比较了ABC-ELISA法和常规ELISA法的差异,表明ABC-ELISA法的灵敏度比常规ELISA法高10～100倍。常规ELISA双夹心法的检出量一般为10~6菌体/ml,ABC-ELISA双夹心法达10~菌体/ml;全菌包被ELISA间接法为10~5菌体/ml;而ABC-ELISA间接法为10~3个菌体/ml。ABC-ELISA法并不影响单克隆抗体的高度特异性。用ABC-ELISA法检测58份水稻白叶枯病病叶,16份病种,病叶全部表现阳性反应,病种稻壳如取样在1g以上,检出率较高。     

福建柑桔溃疡病菌分化的初步研究

以日本(XC25和 XC29)和南京(XC31)菌株作对照,对从福建柑桔主要栽培品种上分离的28个柑桔溃疡病菌株进行培养性状,形态、生理生化、血清学,噬菌体敏感性和致病性的比较研究。试验初步表明,福建的柑桔溃疡病菌属于毒力较强的 A 致病型,且具有一定的分化。试验还表明,柑桔品种的抗病性变化较大。有感病、中抗和抗病等各种类型。在研究溃疡病菌菌系分化时,应选择中抗品种作为鉴别品种,采用无伤痍接种法较好。     

水稻白叶枯病菌分离用培养基的研究

以改良的 Watanabe(1963b)培养基为基础,对稻白叶枯菌在平板培养条件下的营养需求进一步试验,提出了新的稻白叶枯菌培养基。其成分为蔗糖10g、谷氨酸钠5g、蛋氨酸0.1g、磷酸二氢钾1g、氯化铵1g、氯化镁1g、EDTA 螯合的亚铁离子1ppm、琼脂17g 及水1L,pH6.4～6.7。培养基中加入0.5%胰蛋白胨,可以大大促进此菌的生长,而对许多稻种杂菌(包括 Erwinia herbicola)的促进相对不大。再加入0.2%蛋白胨后与其他各类培养基比较,本研究提出的培养基具有回收率高、菌落出现早等优点,适于稻白叶枯菌的分离。     

反复通过寄主对水稻白叶枯病菌致病力和生化性状的影响

把致病力强弱不同的四株水稻白叶枯病菌反复接种在两个抗性不同的水稻品种上,测定比较了反复接种12代后的菌种和原始冻干菌株的致病力与若干生化性状。致病力弱的菌株经反复接种后致病能力增强,致病力强的菌株经反复接种后,致病力逐渐减弱;病菌的胞外粘多糖量和蛋白酶活性的变化趋势与致病力的变异相一致,但菌的生长速度和胞外纤维素酶活性的变异无明显规律。本文还讨论了寄主抗性的遗传背景对病菌变异的影响。     

水稻白叶枯病菌单克隆抗体酶联试剂盒的研制及其应用

利用全菌包被酶联免疫吸附试验间接法,建立了能准确快速灵敏测定不同类型的水稻白叶枯病菌的单抗酶联试剂盒。应用该试剂盒检测水稻白叶枯病病叶样品101份、病种样品10份及水稻白叶枯病病菌65个菌株,结果均为阳性,且重复性好,该试剂盒使用简便、灵敏度高、特异性强,有实用价值。     

稻白叶枯病菌的变异和菌系划分的研究

1979～1983年从省内46个县、市各主要病区分离了将近200个稻白叶枯病菌株,根据它们在我国现行一套鉴别品种上的反应,可将其分为致病力强弱不同的四个菌系群。另外,我们利用国外已知功能抗性基因的鉴别品种,与我国鉴别品种一起进行比较试验,根据77个代表菌株在这些鉴别品种上的反应,将这些鉴别品种归为七个品种群,并将这些菌株相应地分为四个菌群。这一试验结果表示,我省稻白叶枯病菌的致病力可能与日本和菲律宾菌系的不同。基于上述试验,我们认为金刚30、窄叶青8号、农垦57、植科1号、南15、IR26和76C 凡7等品种,可作为我省稻白叶枯病菌系鉴定的一套试用鉴别品种。根据这套鉴别品种,可将我省稻白叶枯病菌区分为五个菌系群(0,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)和九个亚群,基中Ⅲ群和Ⅳ群菌株对水稻品种表现分化性侵染。     

白菜型油菜和羽衣甘蓝种间杂交的初步研究Ⅰ.取材时间对子房离体培养结籽率的影响

黄籽白菜型油菜和黄籽甘蓝人工合成甘蓝型油菜是解决现有甘蓝型油菜黄籽不稳定的有效途径之一。研究以黄籽白菜型油菜和黄籽羽衣甘蓝进行种同杂交，通过子房离体培养克服种间杂交的不亲和型，并对授粉后取材时间和子房培养效率进行分析，研究结果表明：不同基因型的羽衣甘蓝和白菜杂交结籽率有一定差异；授粉后10-17d取材进行子房培养都是有效的，其中15d左右效果较好。     

湖北省水稻白叶枯病菌致病型研究

从湖北８个地区４６个县市广泛采样分离纯化获得２０８个稻白叶枯病菌株，按国内统一标准进行致病力的鉴定，结果表明：湖北省当前稻白叶枯病菌致病性的分化，主要表现为以强弱数量变化为主的０、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ致病型，其中第Ⅳ致病型是流行优势致病型。按行政区域以及按水稻的种植区划，比较稻白叶枯病菌致病型分化情况，表明不同区域各致病型的流行强度不一致。强毒力的第Ⅳ致病型菌的多少，与水稻的复种指数关系不大，而同稻区土