荔蒲煎液对内毒素诱导实验性大鼠乳腺炎的防治作用

试验利用内毒素诱发实验性大鼠乳腺炎模型，探讨中药荔蒲煎液对实验性乳腺炎的防治作用。24只SD孕鼠随机分成阴性对照组（Con）、阳性对照组（P）、药物预防组（Pre）和药物治疗组（Tre）。 Pre组大鼠灌胃荔蒲煎液，对照组大鼠灌胃相应体积的生理盐水，灌胃4 d后，Pre组和P组的大鼠乳头管注入内毒素（LPS）制造乳腺炎模型，Con组乳头管注入相应体积的生理盐水，24 h后处死；Tre组大鼠于乳头管注入LPS，24 h后灌胃荔蒲煎液，连续灌胃4d后处死。对所有大鼠乳腺组织切片进行组织学观察，取胸腺、脾脏测量其胸腺指数和脾脏指数，并进行红、白细胞计数以及碱性磷酸酶（ALP）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性检测。结果表明，用药组大鼠的胸腺指数和脾脏指数明显高于P组，白细胞个数与ALP活性低于P组，GSH-Px活性高于P组。由此可知，灌胃荔蒲煎液可以减轻乳腺炎症反应，维持氧化/抗氧化平衡，对内毒素诱发的大鼠实验性乳腺炎有一定的防治效果。     

复合植物精油对脂多糖诱导的断奶仔猪免疫应激的影响

试验旨在研究复合植物精油（OCT）对脂多糖（LPS）诱导的断奶仔猪的免疫应激的影响。试验选取28日龄左右的杜×长×大三元杂交仔猪，随机分成3个处理组：对照组（基础日粮，注射生理盐水），LPS组（基础日粮，注射LPS），OCT组（基础日粮+50 mg/kg OCT，注射LPS）。每组8个重复，每个重复1头猪。于试验第21天注射LPS（100 μg/kg体重）或等体积的生理盐水，注射3 h后前腔静脉采血进行白细胞分类计数；6 h后屠宰，取胸腺、脾脏，-80℃保存，用于测量胸腺、脾脏免疫相关基因白介素-4（IL-4）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、核因子（NF-κB）以及转录相关基因转录激活因子3（STAT3）的基因相对表达量。结果表明：①与对照组相比，LPS刺激降低了仔猪血液中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及嗜酸性粒细胞数量（P<0.05）；与LPS组相比，日粮中添加OCT提高了白细胞的数量（P<0.05）；②与对照组相比，LPS刺激上调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3 mRNA水平（P<0.05），下调了脾脏IL-4、TNF-α及胸腺IL-4、TNF-α、NF-κB mRNA水平（P<0.05）；与LPS组相比，添加OCT下调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3 mRNA水平（P<0.05）；上调了胸腺IL-4、IL-10、TNF-α、NF-κB的mRNA水平（P<0.05）。综合上述结果，LPS诱导发生了仔猪免疫应激，OCT在一定程度具有缓解作用。     

复方参芪水提液对小鼠免疫调节作用的影响

为探讨自制中药参芪复方对小鼠免疫调节作用的影响,本实验采用灌喂的方法,给予实验组小鼠灌服复方水提液,连续7d,1次/d。用药结束后第10天,分别测定小鼠血细胞数、体重、胸腺、脾脏指数以及血清溶菌酶含量。结果显示,与对照组相比,中药复方组小鼠的血液红细胞数、淋巴细胞百分比、血清溶菌酶含量、胸腺指数与脾脏指数明显增高。说明复方参芪水提液能够显著增强小鼠的免疫调节功能,而且与灌服剂量有正相关性。     

牛羊专用中草药保健型饲料添加剂对大鼠免疫功能的影响

试验选择30～40日龄的Sprague-Dawley（SD）雌性大鼠,分别按1.5mL/100g体重的量灌胃奶牛、肉牛和肉羊中草药饲料添加剂浸膏（浓度为312.5mg/mL）,对照组灌胃等量蒸馏水。试验第31天宰杀,无菌采血制抗凝血作T-淋巴细胞转化率试验,同时取脾脏和胸腺计算脾脏和胸腺指数。试验表明,各组全期增重均显著高于对照组（P〈0.05）、各实验组胸腺指数均高于对照组,且奶牛和肉牛中草药添加剂组达到显著水平（P〈0.05）,脾脏指数各组间差异不显著（P〉0.05）;各试验组T-淋巴细胞转化率均显著高于对照组（P〈0.05）,说明牛羊专用中草药保健型饲料添加剂能显著提高大鼠的细胞免疫功能。     

板蓝根超微粉对大鼠免疫功能调节作用的研究

为研究板蓝根经超微粉碎后对大鼠免疫功能调节的作用影响,利用环磷酰胺构建大鼠免疫低下模型,将80只SD大鼠随机分为4.组,即模型组、普通粉组、超微粉组及空白对照组,每组20只。40 mg/kg环磷酰胺腹腔注射5.d制造免疫抑制大鼠模型,第6.天开始给药,除空白组、模型组灌服生理盐水外,其他组给药5 g/kg。第7.、14天采集血样及大鼠肝脏、脾脏、胸腺组织,测定免疫器官指数、白细胞数量、C3b受体花环形成率（C3b-R）、红细胞免疫复合物花环形成率（ICR）、吞噬百分率、吞噬指数等指标,实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素2（IL-2） mRNA转录水平,Western blotting法检测TNF-ɑ和IL-2蛋白表达水平。结果显示,模型组大鼠白细胞数量、体重、胸腺和脾脏免疫器官指数较空白对照组均显著降低（P<0.05）。第14天时,超微粉组巨噬细胞吞噬百分率达到54.75%,吞噬指数为0.58;C3b-R为9.44%,显著高于普通粉组（8.97%）（P<0.05）,超微粉组ICR为6.09%,低于普通粉组（6.33%）（P>0.05）。与普通粉组相比,第14天板蓝根超微粉组肝脏中TNF-α、IL-2 mRNA转录水平和蛋白水平的表达提高。综上所述,板蓝根超微粉和普通粉均可显著增强大鼠非特异性免疫功能,但超微粉效果优于普通粉。     

豆蔻明对免疫应激仔猪脏器指数、血清生化指标、炎性因子及抗氧化能力的影响

试验旨在通过建立脂多糖（LPS）免疫应激模型，研究豆蔻明（CDN）对免疫应激仔猪脏器指数、血清生化指标、炎性因子及抗氧化能力的影响。选取健康的断奶仔猪24头，随机分为4组，每组6个重复，每个重复1头猪。CON组仔猪饲喂基础日粮，LPS组仔猪腹腔注射100μg/kg BW LPS,LCDN组仔猪腹腔注射3 mg/kg CDN+注射100μg/kg BW LPS,HCDN组仔猪腹腔注射6 mg/kg CDN+注射100μg/kg BW LPS。试验第8 d开始，各CDN组仔猪每天注射1次CDN，其他两组注射等量生理盐水。试验第15 d，给除CON组外所有仔猪腹腔注射100μg/kg BW的LPS,CON组注射等量生理盐水，6 h后屠宰仔猪。结果显示，与CON组相比，HCDN组仔猪的肾脏指数显著提高（P<0.05）,LPS组仔猪血清谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）活性和肌酐（CREA）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)含量显著提高（P<0.05），总超氧化物歧化酶（T-SOD）及过氧化氢酶（CAT）活性显著下降（P<0.05），白细胞介素-10 ...     

冷应激环境下补充Vc对雄性小鼠免疫器官和呼吸器官组织结构的影响

选用清洁级雄性昆明小鼠30只，随机分均为冷应激组、冷应激＋Vc组和对照组，冷应激和冷应激＋Vc组每天在0℃、下给2h的冷刺激，冷应激＋Vc纽补充300μg／g的Vc，试验期1周。结果，在冷应激环境中，小鼠早晚体质量均表现明显下降趋势，胸腺、脾脏和肺脏的重量均显著降低（P〈0．05），器官指数有所下降，但差异不显著（P〉0．05）；胸腺小体数量增加，胸腺细胞数量明显减少，动脉周围淋巴鞘变薄，肺泡腔变大，肺泡壁变薄，肺泡间毛细血管减少。补充Vc后，小鼠早晚体质量下降趋势减缓，肺脏重量和器官指数显著增加（P〈0．05），胸腺和脾脏重量及器官指数也有所增加，但差异不显著（P〉0．05）。胸腺小体体积减小，淋巴细胞数量有所增加，脾小结数量以及体积都有所增加，动脉周围淋巴鞘增厚，肺泡壁明显增厚，肺泡间结缔组织增加，毛细血管增多。结果表明补充Vc可以改善冷应激对免疫器官和呼吸器官造成的不良影响。     

移植骨髓间充质干细胞对乳腺炎模型大鼠乳腺组织及血清中酶活性变化的影响

旨在研究乳腺基部移植骨髓间充质干细胞(BMSC)对试验性乳腺炎大鼠模型血清中N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、髓过氧化物酶(MPO)的影响,70只产后SD雌性大鼠,其中5只于产后72h(试验前1d)处死,作为空白对照组;另外65只大鼠乳头管灌注内毒素制作乳腺炎动物模型。造模处理1d后(试验0d),随机选取5只模型大鼠处死,作为试验对照组;其余60只随机分为生理盐水组,抗生素组和BMSC移植组,每组20只,并于试验1、3、5、7d各组分别处死5只,所有屠宰大鼠心脏采血,制备血清,检测血清中NAGase、ALP、LDH、MPO水平;同时采集乳腺组织,制作石蜡切片,进行病理组织学检测。结果表明,空白对照大鼠乳腺组织无异常,腺泡上皮细胞排列整齐;灌注内毒素的试验对照大鼠,在注射内毒素24h后乳腺腺泡结构破坏严重,腺上皮细胞脱落、坏死,腺泡腔内有大量中性粒细胞和脱落上皮细胞浸润,间隔增宽。血清中ALP、LDH、NAGase、MPO活性与灌注前相比显著升高(P0.05)。治疗后各组乳腺组织逐渐恢复;试验7d时移植BMSC组已恢复到正常水平;灌注内毒素后血清中NAGase、ALP、LDH、MPO活性与灌注前相比显著升高(P0.05),治疗后,移植BMSC组血清中ALP、NAGase活性于1、3、7d时、MPO活性于1、3、5、7d时、LDH活性于7d时与对照组差异显著(P0.05)。研究结果说明,BMSC能修复受损乳腺组织,降低血清中ALP、LDH、NAGase、MPO等乳腺炎相关酶的活性。     

中药复方制剂产复康对小鼠的抗氧化作用研究

为了评价产复康的抗氧化作用,用环磷酰胺造成免疫抑制小鼠模型,将产复康分别以10、15、20g／kg体重三个不同剂量给模型小鼠连续灌胃9d后,测定了模型小鼠脾脏和胸腺组织中、总抗氧化能力（TAOC）、超氧化物岐化酶（SOD）和丙二醛（MDA）以及血清溶血素、脾脏和胸腺指数。结果发现产复康分别以10、15、20g／kg体重三个不同剂量均能显著提高环磷酰胺所致免疫抑制小鼠脾脏和胸腺TAOC水平、SOD活性、血清溶血素、脾脏和胸腺指数,而显著降低小鼠脾脏和胸腺MDA水平,且呈剂量-效应关系;正常小鼠单独服用产复康也产生相同结果。结果说明产复康能提高健康小鼠的抗氧化能力。     

芦丁促进大鼠泌乳性能的研究

通过研究天然植物提取物芦丁对大鼠泌乳性能、内分泌激素、脏器指数的影响,考察芦丁调节大鼠泌乳的效果.试验选择18只Wistar受孕母鼠,随机分为3组,每组6只,分别为对照组、芦丁组(每日灌服芦丁60 mg/kg BW)、雌二醇组(每周肌肉注射雌二醇60 μg/kg BW),从哺乳第4天开始连续给药2周,基础饲粮相同.测定指标包括:大鼠泌乳量,仔鼠平均体增重,乳腺器官指数,胸腺指数,脾脏指数,血浆与乳腺组织中雌激素(E2)、孕激素(P)、催乳素(PRL)、生长激素(GH)的含量.试验结果显示:芦丁组大鼠泌乳量显著高于对照组(P＜0.05),与雌二醇组差异不显著(P＞0.05);仔鼠体增重芦丁组与雌二醇组差异不显著(P＞0.05),但显著大于对照组(P＜0.05);大鼠血浆与乳腺组织中E2、PRL、GH的水平,芦丁组显著高于对照组(P＜0.05),低于雌二醇组(P＜0.05),P水平各组间差异不显著(P＞0.05);大鼠乳腺、胸腺、脾脏器官指数雌二醇组显著高于芦丁组和对照组(P＜0.05).由此得出,芦丁能够显著提高大鼠泌乳量,促进大鼠胸腺、脾脏等器官的发育.     

脂多糖诱导哺乳期SD大鼠乳腺炎模型的建立

本试验旨在建立脂多糖(LPS)诱导哺乳期SD大鼠乳腺炎病理模型,为后续治疗乳腺炎的深入研究奠定基础。SD大鼠30只,于产后72h随机分为对照组(5只)和试验组(25只),试验组随机分为5组,各试验组大鼠经第4对乳头灌注LPS,剂量分别为10、20、30、40、50μg/侧,对照组灌注等量PBS。灌注后24h观察记录各大鼠临床症状、乳腺组织病理学变化。结果发现,在各试验组大鼠第4对乳腺均可观察到不同程度的炎症反应,且与LPS剂量呈正比例关系。结果表明,成功建立了LPS诱导哺乳期SD大鼠乳腺炎模型。     

β-防御素在荷斯坦奶牛正常和炎性乳腺上皮细胞中的差异表达

为探讨荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞在正常和炎性2种情况下β-防御素（BNBD5）的表达量是否存在差异,本研究通过添加内毒素（LPS）建立了实验性乳房炎的乳腺上皮细胞模型,并采用实时荧光定量RT-PCR方法检测了乳腺上皮细胞中BNBD5mRNA表达水平的变化。结果显示,添加LPS后乳腺上皮细胞中炎性因子IL-6、IL-12和TNF-α的mRNA表达量与空白对照组相比显著增加（P〈0.01）,并且α-酪蛋白mRNA表达量显著降低（P〈0.01）,说明添加LPS诱发上皮细胞产生了一定的炎性反应;并且当添加LPS终质量浓度为300μg/L并培养48h之后BNBD5的表达量最高,与空白对照组存在极显著差异（P〈0.01）;推测BNBD5基因可能参与了由LPS诱发的奶牛乳房炎的防御机制。     

LPS对小鼠乳腺组织中NF—KB、ACCa和β-CaseinmRNA表达的影晌

为探讨灌注不同质量浓度LPS对小鼠乳腺组织中NF-xB、ACCa和pCaseinmRNA表达的影响，选择30只雌性ICR小鼠为试验动物，受孕后随机分为试验组和对照组，试验组经第4对乳头灌注不同质量浓度LPS（0．1，5，10，50，100mg／L），对照组灌注生理盐水，于灌注后6h采集乳腺组织样品，组织学方法分析乳腺组织的病理变化；采用RT—PCR方法分析乳腺组织中NF_KB、ACCa和B—CaseinmRNA表达的变化。病理切片结果显示，随着LPS灌注浓度的增加，乳腺小叶间炎性细胞数量逐步增加，乳腺小叶内腺泡结构破坏程度也变大；对乳腺组织中NF-xB、ACCa和pCasein的mRNA表达水平进行分析时，发现灌注LPS小鼠乳腺组织中NF-KBmRNA的表达水平随着LPS灌注浓度的增加而逐步增加，而ACCa和pCaseinmRNA的表达水平则随着LPS灌注浓度的增加而逐步降低。结果表明，灌注LPS能够上调N-KBmRNA的表达，下调ACCa和肛CaseinmRNA的表达。     

乳头管灌注脂多糖对兔血清酶活性的影响及病理组织学观察

探讨经乳头管灌注脂多糖(LPS)对兔血清酶活性的影响及乳腺病理组织学变化.12只泌乳兔(产后第7天)经乳头管灌注LPS(150 μg/kg体重)建立急性临床型乳房炎模型,在灌注前2 h,灌注后6、12、24、48、72 h以及5 d和7 d分别测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)、髓过氧化物酶(MPO)、过氧化物酶(LP)及...     

Repertoire of Escherichia coli agonists sensed by innate immunity receptors of the bovine udder and mammary epithelial cells

ABSTRACT: Escherichia coli is a frequent cause of clinical mastitis in dairy cows. It has been shown that a prompt response of the mammary gland after E. coli entry into the lumen of the gland is required to control the infection, which means that the early detection of bacteria is of prime importance. Yet, apart from lipopolysaccharide (LPS), little is known of the bacterial components which are detected by the mammary innate immune system. We investigated the repertoire of potential bacterial agonists sensed by the udder and bovine mammary epithelial cells (bMEC) during E. coli mastitis by using purified or synthetic molecular surrogates of bacterial agonists of identified pattern-recognition receptors (PRRs). The production of CXCL8 and the influx of leucocytes in milk were the readouts of reactivity of stimulated cultured bMEC and challenged udders, respectively. Quantitative PCR revealed that bMEC in culture expressed the nucleotide oligomerization domain receptors NOD1 and NOD2, along with the Toll-like receptors TLR1, TLR2, TLR4, and TLR6, but hardly TLR5. In line with expression data, bMEC proved to react to the cognate agonists C12-iE-DAP (NOD1), Pam3CSK4 (TLR1/2), Pam2CSK4 (TLR2/6), pure LPS (TLR4), but not to flagellin (TLR5). As the udder reactivity to NOD1 and TLR5 agonists has never been reported, we tested whether the mammary gland reacted to intramammary infusion of C12-iE-DAP or flagellin. The udder reacted to C12-iE-DAP, but not to flagellin, in line with the reactivity of bMEC. These results extend our knowledge of the reactivity of the bovine mammary gland to bacterial agonists of the innate immune system, and suggest that E. coli can be recognized by several PRRs including NOD1, but unexpectedly not by TLR5. The way the mammary gland senses E. coli is likely to shape the innate immune response and finally the outcome of E. coli mastitis.     

脂多糖对小鼠乳腺组织中Toll-like Receptor4表达的影响

将40只雌性ICR小鼠,受孕后随机分为试验组和对照组。雌鼠产后10-11d,试验组经第4对乳头灌注LPS,对照组灌注生理盐水,分别于灌注后不同时间采集样本,组织学分析乳腺病理变化;分析对各组乳腺组织中TLR4和TNF-α mRNA表达变化。组织学结果显示,灌注1．5h后乳腺组织中炎性细胞增多,6、12h乳腺腺泡内有大量的炎性细胞浸润,腺泡结构崩解;6h TLR4 mRNA表达极显著高于对照组（P〈0．01）;4个试验组中TNF-αmRNA表达极显著高于对照组（P〈0．01）。试验结果表明LPS能够增强TLR4和TNF-α mRNA表达。     

家兔金黄色葡萄球菌性乳房炎模型的建立及中药组方治疗试验

选择泌乳期（7～10日）家兔,用10^4CFU、10^6CFU、10^8CFU三个不同浓度的金黄色葡萄球菌悬液人工诱导家兔乳房炎模型,观察临床表现,耳缘静脉采血进行血常规检测,确定10^6CFU为建立乳房炎模型的最佳剂量。造模后,分别采用不同剂量的中药组方制剂,通过乳池灌注和肌肉注射两种方式治疗患病家兔,观察临床治疗效果并检测血常规,确定乳池灌注和肌肉注射的最佳治疗剂量分别为35mg／乳区、100μg／kg,治愈率均为100％（8／8）。     

Protective effect of CpG-DNA against mastitis induced by Escherichia coli infection in a rat model

A mastitis model in rats, induced by Escherichia coli infection, was established and the protective effect of Cytosine-phosphate-Guanosine (CpG)-DNA was determined. An E. coli suspension containing either 2 x 10(3) colony forming units (CFU)mL(-1)(EL group), 2 x 10(5)CFU mL(-1) (EH group), or (as controls) 100 microL phosphate buffer saline (CON group), was inoculated into the mammary glands 72 h after parturition. The rats were euthanased 24 h post-infection. The histopathological changes in mammary tissue in the EL group were mild, whereas the structural changes in the EH group were severe and polymorphonuclear leukocytes (PMNs) had accumulated in the mammary alveoli. Interleukin (IL)-6 and tumour necrosis factor (TNF)-alpha and N-acetyl-beta-d-glucosaminidase (NAGase) were significantly increased in the mammary tissue from the EH group but not significantly changed in the EL group. On the basis of these findings, the potential protective effect of CpG-DNA on mammary glands was tested using a 2 x 10(5)CFU mL(-1) suspension. An intramuscular injection of either CpG-DNA (200 microg) or PBS (100 microL) was given immediately after parturition. At 72 h post-partum, 2 x 10(5)CFU mL(-1)E. coli (100 microL) were inoculated into the mammary glands of all rats. At pre-infection (0 h), and 8, 16, 24, 48 and 72 h after inoculation six rats were euthanased. CpG-DNA induced more rapid migration of PMNs from the blood to mammary tissue at the initial stage of infection, stimulated the secretion of IL-6 and TNF-alpha at different time points, reduced viable E. coli in mammary tissues and decreased the activity of NAGase. CpG-DNA also promoted the expression of its specific receptor TLR-9 mRNA in mammary tissue. The study showed that CpG-DNA protected against E. coli mastitis in this rat model.