丰花月季愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养

分别以丰花月季叶片、叶柄和茎段为外植体诱导出愈伤组织,并建立细胞悬浮系。结果表明,丰花月季叶片和茎段是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的理想外植体;诱导松散型愈伤组织的最佳激素浓度配比是NAA 4 mg·L-1+2,4-D 1 mg.L-1+BA 1 mg.L-1;细胞悬浮培养细胞最佳起始密度为1.5×104～3.0×104个.mL-1时;继代培养4～5代时,可得到稳定的悬浮细胞系。     

土人参愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

[目的]建立土人参愈伤组织的诱导、增殖继代培养及其细胞悬浮培养的技术体系。[方法]研究不同植物激素组合对叶片、茎段愈伤组织诱导的影响;采用液体振荡培养法测定叶片愈伤组织细胞悬浮生长曲线。[结果]叶片最易诱导产生愈伤组织,最佳诱导、增殖培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L＋6-BA0.5 mg/L（pH5.8）。由叶片愈伤组织建立的细胞系生长呈＂S＂型曲线,最适继代周期为15 d。[结论]以叶片为外植体经愈伤诱导、增殖培养可建立良好的细胞悬浮系。     

栝楼细胞悬浮系的建立

[目的]为了解决栝楼悬浮细胞系在继代培养中容易退化,生长速度减慢的问题。[方法]以栝楼的茎为外植体诱导出愈伤组织,筛选出质地疏松、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系,将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡悬浮培养,建立起分散程度好的栝楼悬浮细胞系。同时对影响愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养的条件进行研究,确定适合愈伤组织生长的条件及影响细胞悬浮培养的主要因素。[结果]看护培养可以使栝楼悬浮培养细胞长势良好,并在低密度下获得由单细胞形成的细胞系。[结论]该悬浮系的建立为栝楼细胞大规模培养,进而实现有效药物成分的工业化生产奠定了理论基础。     

香蕉胚性愈伤组织的诱导及胚性细胞悬浮系的建立

分别以3个香蕉品种的多芽体茎尖和5个香蕉品种的未成熟雄花为外植体,诱导产生胚性愈伤组织．结果分别从2个基因组类型为AAA的品种的多芽体茎尖和未成熟雄花获得了胚性愈伤组织,而未能从基因组类型为AAB或ABB的香蕉品种中获得胚性愈伤组织．胚性愈伤组织的诱导率受基因组类型、品种和培养条件等因素的影响．以上述4个品种的胚性愈伤组织为起始材料成功建立了胚性细胞悬浮系,不同香蕉品种,从其胚性愈伤组织建立胚性细胞悬浮系的难易程度有所不同．     

盐生植物盐穗木悬浮细胞系的建立

[目的]组织和细胞培养能够为研究盐穗木的耐盐机制提供实验材料,建立盐穗木悬浮细胞系,从细胞水平上揭示盐生植物盐穗木的耐盐机制.[方法]以成熟胚为外植体,探讨不同培养基和激素配比对愈伤组织诱导以及悬浮细胞系培养条件的优化,并以酚藏花红染色和固体培养基培养法检测悬浮细胞的细胞活性.[结果]以葡萄糖替换蔗糖作为培养基碳源,在0.5 mg/L6-BA、1.0 mg/L KT下盐穗木诱导愈伤组织最适宜悬浮细胞的培养;而在液体基础培养基中添加1.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L KT,则最有利于盐穗木悬浮细胞系的稳定.所获得的盐穗木悬浮细胞具有一定的细胞活性.[结论]采用成熟胚为外植体诱导愈伤组织能够获得盐穗木悬浮细胞系,为在细胞层面上深入开展盐穗木耐盐机制奠定基础.     

疣粒野生稻原生质体再生小植株

 以我国特有的疣粒野生稻成熟胚和幼穗作外植体诱导愈伤组织 ,挑选致密颗粒状愈伤组织建立胚性细胞悬浮系并分离原生质体 ,将原生质体固体包埋后添加液体培养基进行培养。在培养过程中调节培养体系渗透压诱导产生胚状体 ,成功得到疣粒野生稻的原生质体再生植株 ,对提高原生质体再生频率的途径进行了探讨。     

高粱液体再生系统初步研究

选用幼穗为外植体并进行匀浆,将匀浆物进行振荡培养,获得颗粒状培养物。再把这些颗粒状培养物接入到液体分化培养基中,振荡培养后有些颗粒会萌发出新芽,然后把这些已长出芽的培养物接入到固体分化培养基中可获得完整的苗。研究还将幼穗固体培养模式获取的愈伤组织接入到液体分化培养基中进行振荡培养,结果获取了相互分离能生根发芽的胚状体。该研究丰富了高粱再生培养技术手段。     

水稻幼穗液体振荡培养获得愈伤组织及原生质体

在液体培养基中振荡培养水稻幼穗获得花药愈伤组织。花药愈伤组织开始在颖花内形成,增殖而撑开稃片,脱颖而出,浮游于培养基中成为悬浮细胞。根据大小区分愈伤组织和悬浮细胞,将小的愈伤组织转移到再分化培养基上培养,分化出许多绿点及二株绿苗。通常     

普通小麦与偃麦草属间杂种体细胞无性系的建立

本试验以小麦与堰麦草属间杂种的幼嫩叶片、茎节、叶鞘和幼穗为外植体进行了离体培养。结果表明，不同基因型和不同外植体之间的愈伤组织诱导率及分化率都存在明显差异，愈伤组织的诱导率及分化率均以幼穗外植体为最高，余者较低。最终，建立了各种供试基因型的体细胞无性系。     

小麦（Triticum aestivum．L）单细胞培养与植株再生的研究

小麦单细胞培养研究于１９８５～１９９５年进行，以六倍体普通小麦８４—５３的幼穗为外植体．在诱导胚性愈伤组织基础上．经振荡悬浮培养获得单细胞再生植株，建立体细胞无性系，并系统研究再生植株后代体细胞无性系的变异规律和遗传稳定性、体细胞无性系有利变异的选择及其在小麦品种改良中应用的可能性．本文报道有关单细胞培养和再生植株的研究结果．     

一品红愈伤组织诱导·增殖及悬浮系建立的研究

[目的]为一品红原生质体融合及遗传转化等相关研究奠定基础。[方法]以一品红品种"喜庆红"的顶芽和带芽茎段为外植体,进行愈伤组织诱导、增殖及悬浮系建立的研究。[结果]以浓度0.1%升汞处理顶芽和带芽茎段的时间分别以6 min和10 min为宜。在MS固体培养基里分别添加活性炭、PVP和Vc后,愈伤组织在培养过程中褐化程度有所减轻,但与对照相比差异并不显著。[结论]一品红愈伤组织悬浮系的适合继代周期为7~8 d。     

东北矮紫杉细胞悬浮培养的研究

对东北矮紫杉进行了愈伤组织的诱导,并建立了细胞悬浮培养系.研究表明,茎、叶均可诱导出愈伤组织,愈伤组织诱导培养基以MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋NAA 1.0 mg/L＋KT 0.1 mg/L为佳,愈伤组织继代培养基以B5＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.1 mg/L为佳.以嫩枝为外植体,愈伤组织的诱导率较高、状态较好,且较适于悬浮培养.悬浮培养的接种量2.0 g/瓶为最佳密度,细胞生长周期为20 d,对数生长期为10~16 d,细胞收获期为16 d.试验中还发现,聚乙烯吡咯烷酮是东北矮紫杉组培中解除培养物褐化的较好抗氧化剂,使用浓度为1mg/L.     

臭柏愈伤组织的诱导

在离体培养条件下,取当年生臭柏（Ｓａｂｉｎａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）茎尖、茎段、叶及根尖为外植体,在ＳＨ、ＭＳ培养基上获得愈伤组织。结果表明：在试验的４种外植体中,以茎尖脱分化能力最强,并筛选出愈伤组织最佳培养基为：ＳＨ＋ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ。植物本身的生态生物学特性与臭柏的愈伤组织的诱导成功与否有很大关系。     

串叶松香草组培快繁技术研究

以串叶松香草的嫩芽、新叶和叶柄的切块为外植体,分析在不同培养阶段不同激素浓度配合使用对其组培能力的影响。结果表明,不同外植体诱导形成愈伤组织的能力大小依次为嫩芽>叶柄>新叶;串叶松香草的最适诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D3.0mg/L,增殖培养基为MS+6-BA2.5mg/L+IBA0.5mg/L,生根培养基为1/2MS+6-BA0.2mg/L+IBA2.0mg/L;当根系长约5cm时,开瓶炼苗2～3d,移栽至装有基质(V(泥炭):V(珍珠岩):V(蛭石)=1:1:1)的花盆内炼苗1个月后即可移入大田,移栽成活率达90%以上。     

红栀子愈伤组织诱导研究

[目的]为了研究红栀子组织培养的最佳条件,为栀子黄色素的工业化生产提供理论依据。[方法]以红栀子茎尖、茎段和幼嫩叶片为外植体,在MS、1/2MS和1/4MS3种培养基上进行培养试验,研究不同外植体、培养基、激素浓度和消毒时间对诱导愈伤组织的影响。[结果]红栀子茎尖和幼嫩叶片的诱导效果明显优于茎段。在3种培养基中,MS培养基更有利于愈伤组织的产生和生长。在MS培养基中添加2,4-D时,2.0mg/L为诱导红栀子茎尖愈伤组织的最适浓度。用升汞消毒,茎尖、茎段和幼嫩叶片的最佳消毒时间分别为9、12和7min。[结论]MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L为红栀子幼嫩叶片愈伤组织的最佳培养基,且10d后形成愈伤组织。     

中香梨的离体培养研究

[目的]对中香梨的离体培养进行研究。[方法]以中香梨茎尖和嫩叶为外植体,筛选适合中香梨茎尖培养及叶片愈伤组织诱导的最佳培养基。[结果]中香梨茎尖培养的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂;叶片的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+40 g/L蔗糖+6 g/L琼脂。[结论]通过茎尖培养可很快获得中香梨植株,但从愈伤组织诱导植株较为困难。     

建立甜高粱(Sorghum bicolor)高频、高效再生体系的研究

【目的】建立能源植物甜高粱(Sorghum bicolor L.Moench)的高频、高效离体培养再生体系,为遗传转化奠定基础。【方法】以甜高粱品种凯勒的芽顶端分生组织为外植体,探讨在甜高粱直接诱导丛生芽的培养过程中,无菌实生苗的适合苗龄,适宜的激素组合与比例;并将获得的最佳培养方法应用于其它两个甜高粱品种:M-81E和意达利,以研究此途径的基因型依赖性。【结果】利用3d苗龄的芽顶端分生组织作为外植体容易获得较高的分生组织膨大率。甜高粱丛生芽诱导的适宜激素组合为4.0mg·L-16-苄基腺嘌呤+0.5mg·L-12,4-二氯苯氧乙酸+0.5mg·L-1噻重氮苯基脲,可获得91%的丛生芽诱导频率。适合甜高粱快速生根的激素配方为0.5mg·L-1萘乙酸。通过芽顶端分生组织直接诱导丛生芽途径,每个外植体可诱导出上百个芽,最终产生30—40株再生苗。M-81E和意达利具有与凯勒相似的丛生芽诱导频率及效率。【结论】本研究成功地建立了甜高粱的高频、高效离体培养再生体系,且具有外植体来源不受限制,基因型依赖性弱,遗传稳定性好的优点。     

百里香愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以普通百里香无菌苗的茎段和叶片为材料,对百里香愈伤组织诱导和继代增殖的最佳培养条件进行研究,并对悬浮细胞的生长特性进行监测,初步建立细胞悬浮培养体系.结果表明,茎段是诱导愈伤组织和进行悬浮培养的理想外植体,愈伤组织最佳诱导培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D0.5 mg/L,最...     

谷子茎尖愈伤诱导优化及转化影响因素浅析

目前谷子组织培养和转化研究相对较少,不同外植体愈伤诱导以及转化效率相对较低。采用不同谷子品种茎尖作为外植体进行愈伤诱导,分析影响愈伤形成的因素并对诱导条件进行优化,结果表明优化后胚性愈伤诱导率最高可达75.4%,愈伤分化率达15%左右。此外对根癌农杆菌介导转化愈伤进行GUS染色分析,结果表明转化愈伤GUS的瞬时表达效率最高在22.3%。由于用茎尖做外植体不受季节和地域的限制,初步研究结果表明优化后愈伤诱导率大大提高,初步GUS检测表明转化效率也有所提高。该结果为今后谷子组织培养和遗传转化研究提供参考数据。