2012-2014徐州地区禽源大肠杆菌耐药性监测

为了掌握徐州地区大肠杆菌耐药菌株的情况和耐药程度,指导临床合理用药,笔者2012-2014年对徐州地区禽源大肠杆菌进行耐药监测,从临床分离鉴定出86株禽源大肠杆菌,采用纸片扩散法测定86株分离菌株对15种抗菌药物的敏感性。结果表明,禽源大肠杆菌分离株多重耐药现象严重,其中11耐和12耐的菌株所占比例最大,分别为25.58%和23.25%;分离的菌株对头孢类抗生素,特别是阿莫西林耐药率最高,达到100%,对氨基糖苷类药物则耐药率相对较低,粘杆菌素耐药率最低,仅为2.3%。     

徐州地区猪源致病性大肠杆菌耐药性调查

为了掌握徐州地区猪场大肠杆菌耐药菌株的产生情况和耐药程度,在2016-2018两年间对徐州地区猪源大肠杆菌进行耐药监测。从猪场分离鉴定致病性大肠杆菌,采用纸片扩散法测定46株分离菌株对15种抗菌药物的敏感性。结果表明,猪源大肠杆菌分离株多重耐药现象严重,至少耐药10种以上,其中10耐和11耐的菌株所占比例最大,分别为28.3%和23.9%;分离菌株对阿莫西林、氟苯尼考、强力霉素耐药率最高,达到80%以上,对头孢噻呋耐药率最低,为17.4%。两年间痢菌净耐药率下降幅度最大,丁胺卡那霉素耐药率增长幅度最大。     

仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析

由湛江市3个养猪场采集到40份仔猪黄痢、白痢腹泻粪便样品,共分离到40株大肠杆菌,其中7株是致病性大肠杆菌,三个猪场致病性大肠杆菌的分离率分别为15.4%、10%和43%。对7株致病性大肠杆菌进行药物敏感性试验,结果表明:它们均对恩诺沙星、菌必治和丁胺卡那霉素敏感,而对复方新诺明、阿莫西林、氨苄青霉素、四环素和庆大霉素的耐药率为100%,对氯霉素、头孢氨苄和痢特灵的耐药率为85.7%,对卡那霉素和链霉素的耐药率为57.1,%对氟哌酸和环丙沙星的耐药率为14.3%。猪场选用较敏感药物来防治仔猪大肠杆菌病,使疫病得到了有效控制。     

仔猪腹泻大肠杆菌流行株鉴定及毒力与耐药性分析

为明确河南地区一规模化猪场暴发新生仔猪腹泻疫情的病原特性及其耐药谱,本研究对肠道致病大肠杆菌进行了分离鉴定。对腹泻仔猪粪便中分离的大肠杆菌进行13种毒力基因检测和21种抗生素的药敏试验。结果显示,34.8%分离株检出EAST1基因;所获分离株均为多重耐药菌株,且至少对5类抗生素耐药,耐9类以上抗生素的菌株达到75.3%,对氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星耐药率达到100.0%。细菌种系进化分群结果显示,21.7%分离株属于有致病性的B2群和D群。本研究获得了腹泻仔猪大肠杆菌分离株的毒力基因、耐药谱的基本数据和种系进化分群的遗传背景,为制定有针对性的治疗和防控技术方案提供依据。     

第六师五家渠市仔猪源大肠杆菌耐药性检测及分析

为调查第六师五家渠市仔猪黄白痢病料中分离的大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药情况,采用药敏纸片法测定66株大肠杆菌分离株对13种抗菌药物的耐药性。结果显示,66株大肠杆菌分离株对四环素、诺氟沙星、林可霉素、多黏菌素、强力霉素、庆大霉素、磺胺异唑、卡那霉素、环丙沙星、头孢呋辛、新霉素、链霉素、阿莫西林的耐药率分别为85%、38%、98%、15%、20%、33%、89%、52%、38%、39%、29%、71%、82%;多重耐药从2耐到13耐;101团、103团等7个地区常用抗菌药耐药率为25%~80%不等。说明不同地区仔猪源大肠杆菌有不同的耐药性,且均呈多重耐药;不同类的抗菌药耐药性不同,即使是同一类抗菌药,不同的抗菌药之间的耐药情况变化也比较大。     

四川地区猪源致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性检测

为了解四川地区猪源大肠杆菌的耐药情况,本试验对2015～2017年四川地区40个猪场的125个病猪样本进行了大肠杆菌的分离鉴定和耐药性检测。结果共分离到37株致病性大肠杆菌,采用K-B纸片法进行药敏试验,发现37株致病性大肠杆菌对恩诺沙星、四环素、阿莫西林、复方新诺明、氨苄西林、庆大霉素、强力霉素的耐药性强,耐药率高于80%,对四环素的耐药率甚至达到了100%;对阿米卡星有较高的敏感性,耐药率为13.5%;所有菌株的多重耐药率高达100%,表明四川地区猪源大肠杆菌的耐药性强、耐药谱广。     

云南多重耐药猪源大肠杆菌的分离鉴定及其耐药机制初步研究

从云南省3个规模化猪场仔猪黄白痢病猪病例分离到7株革兰氏阴性小杆菌,用生理生化鉴定、药敏试验和致病性试验对分离菌株进行鉴定,并提取细菌的质粒,分析质粒与细菌耐药性之间的相关性。结果表明:7株分离株经生理生化试验鉴定为仔猪黄白痢大肠杆菌,对小白鼠有强致病性,分离株对15种抗生素表现为多重耐药,其中14耐1株、13耐2株、11耐2株、8和8耐以下2株,头孢类抗生素是治疗仔猪黄白痢的首选药物,表明云南猪大肠杆菌已经呈现出十分严重的耐药性。质粒图谱分析表明,4株分离株均携带分子量约为5000bp的一个质粒,而另外3株不携带任何质粒。质粒转化实验表明,分离株所携带的质粒为非耐药性质粒,与细菌耐药性无直接相关性。     

银川地区鸡源与牛源大肠杆菌耐药性比较

为了了解银川地区规模化养殖场大肠杆菌的耐药情况,试验采用药敏纸片法测定了160株大肠杆菌对11种抗菌药物的耐药情况。结果表明:鸡源和牛源大肠杆菌对美罗培南的敏感率均为100%;有69株鸡源大肠杆菌对庆大霉素、阿莫西林/克拉维酸、氯霉素及环丙沙星的敏感性比较高,而对头孢唑啉、多西环素和复方新诺明的耐药率较高,耐药率最高的是氨苄西林和萘啶酸,达到了70.00%以上。91株牛源大肠杆菌对11种抗菌药的敏感性都比较高,除氨苄西林外,其他药物的敏感率均在70.00%以上。所有分离菌株最多对10种药物耐药,鸡源大肠杆菌中4耐菌株最多,占21.71%,而牛源大肠杆菌中有54株菌对所有抗菌药物都敏感。     

鸡源大肠杆菌耐药性分析及中药对大肠杆菌耐药性消除作用的研究

研究鸡源大肠杆菌耐药性及中药对大肠杆菌耐药性消除作用。选择22种抗生素采用Kirby-Bauer法对山西省部分地区分离的20株致病性鸡源大肠杆菌进行耐药性检测,对分离菌株进行质粒分析和耐药质粒转化试验,并分析多种中药对大肠杆菌耐药性的消除作用。结果显示,20株试验菌对测试抗生素均存在不同程度的耐药性,其中5耐及5耐以上的菌株占分离菌株的90%,试验菌对青霉素耐药率最高(90%),其次为恩诺沙星(85%),而对黏杆菌素和呋喃妥因的耐药性最低;分离出12种质粒谱型,同一地区、同一鸡场菌株的质粒图谱相同或相似,不同地区菌株的质粒图谱不同,仅有部分相同或相近的流行质粒共存;对其中5株菌株进行耐药质粒的转化试验,发现同一质粒可编码1个至数个耐药性基因,不同质粒可以携带相同的耐药性基因;中药单剂或合剂对大肠杆菌的耐药性有一定的消除作用,其中黄芩的消除效果最好,中药处理后部分菌株质粒图谱无变化,只有黄连和双黄连造成2条质粒带丢失;对中药提取物作用后的消除子进行药敏试验,结果发现大肠杆菌对环丙沙星等多种抗生素恢复了敏感性。研究结果提示联合使用中药治疗鸡源大肠杆菌病有显著效果。     

不同动物源大肠杆菌的耐药性调查

为了解畜禽源大肠杆菌的耐药状况,2011—2012年从患病和健康食品动物中分离鉴定大肠杆菌935株,包括健康猪源606株、患病猪源114株、患病鸡源51株、患病水禽源(鸭和鹅)164株。试验采用琼脂稀释法测定了不同动物来源的大肠杆菌对15种抗菌药物的敏感性。结果发现,大肠杆菌耐药严重,对大部分药物的耐药率超过70.0%,其中氨苄西林、复方新诺明和四环素的耐药率均达到了80.0%以上;仅对头孢西丁、黏菌素和阿米卡星较敏感,但患病水禽源大肠杆菌对阿米卡星的耐药率达到了52.4%,明显高于其他动物。健康畜禽源大肠杆菌对多数抗菌药的耐药率低于患病畜禽源大肠杆菌,表明抗菌药物的使用增加了病原菌对第3代头孢类药物和氟喹诺酮类药物的耐药率,势必增加临床治疗难度。     

淄博地区鸡源耐氟喹诺酮大肠杆菌的耐药特点

为了解淄博地区鸡源耐氟喹诺酮大肠杆菌的耐药特点及其耐药基因携带特点。本研究于2016年5月对淄博地区两个鸡场粪便棉拭子采集,分离耐头孢噻肟大肠杆菌,并对15种抗生素进行药敏检测。PCR检测qnr A、qnr B、qnr S、aac-(6’)-Ib-cr耐药基因。共收集34份粪便棉拭子,分离14株耐喹诺酮大肠杆菌,分离率47%。所有耐喹诺酮大肠杆菌呈现多重耐药,但都对碳青霉烯类药物敏感。12株菌携带qnr S基因,携带率最高为85.7%。鸡源耐喹诺酮大肠杆菌分离率高耐药谱广,给临床中应用抗生素的治疗带来困难。     

包头地区仔猪源致泻性大肠杆菌进化分群、生物被膜形成能力及耐药性检测

为分析包头地区仔猪源致泻性大肠杆菌进化分群情况、生物被膜形成能力(BF)及耐药性情况。试验采用PCR法、结晶紫微孔板法和K-B药敏纸片法对48株仔猪源致泻性大肠杆菌进行进化分群、生物被膜形成能力及耐药性检测。结果显示,48株仔猪源致泻性大肠杆菌中以B2群和D群流行为主,分别占分离菌株的35.4%和25.0%;48株仔猪源致泻性大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等7种药物耐药率在58.3%以上,对其他药物的耐药率在11.9%～31.3%;48株仔猪源致泻性大肠杆菌中强形成膜能力菌株有20株、中形成膜能力菌株有16株、弱形成膜能力菌株有7株、不形成BF菌株的有5株,分别占分离菌株的41.7%、33.3%、14.6%、10.4%。经分析,48株仔猪源致泻性大肠杆菌的BF形成能力与多黏菌素、新霉素、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、恩诺沙星、氨苄西林、阿莫西林7种药物耐药性存在一定的相关性。本试验为临床中合理用药及该病的防控提供科学依据。     

屠宰前鸡、猪源大肠杆菌耐药性调查

本试验旨在了解屠宰前鸡、猪源食品动物体内大肠杆菌耐药情况,分析潜在的食品安全问题。从广州市畜禽交易市场随机采集待屠宰鸡和猪的粪便样品,分离鉴定大肠杆菌,并采用琼脂稀释法检测大肠杆菌对15种抗菌药物的敏感性。结果显示,从658份猪源样品和133份鸡源样品中共分离鉴定出731株大肠杆菌,其中猪源606株,鸡源125株。药敏试验结果显示,731株大肠杆菌均表现出不同程度的耐药,耐药谱广且多重耐药现象严重。对复方新诺明和四环素的耐药率为90.0%以上,仅对头孢西丁、黏菌素和阿米卡星较敏感(耐药率均低于3%)。鸡源大肠杆菌对头孢噻肟、头孢曲松、新霉素、阿米卡星、萘啶酸和环丙沙星的耐药率显著高于猪源大肠杆菌(P＜0.05)。鸡源大肠杆菌中3耐及3耐以上的菌株占97.60%,猪源大肠杆菌占94.72%。结果表明,屠宰前畜禽体内大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性非常严重,以多重耐药为主,且耐药谱丰富多样。提示屠宰前畜禽携带的耐药菌对食品安全和人类健康存在较大的安全隐患。     

禽源耐碳青霉烯大肠杆菌耐药基因的鉴定及其耐药性分析

为了解湖南省长沙地区禽源碳青霉烯耐药大肠杆菌携带基因blaNDM及耐药情况,试验通过PCR方法对不同来源的大肠杆菌进行耐药基因检测。结果显示,采集的152份样本中分离出84株耐碳青霉烯大肠杆菌,其中24株携带耐药基因以blaNDM-1为主。同时应用肉汤稀释法分析24株大肠杆菌对8种抗菌药物的敏感性。结果显示,24株大肠杆菌对阿莫西林的耐药率高达83.3%,对其他抗生素的耐药率分别为林可霉素70.8%、氯霉素37.5%、噻孢霉素37.5%、庆大霉素33.3%、氧氟沙星12.5%、头孢吡肟8.3%、替加环素4.2%,且50%(n=12)的菌株至少3种药物耐药,表现为多重耐药表型。试验结果为了解该地区禽源耐碳青霉烯类药物情况及临床上用药提供参考依据。     

长春地区猪源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

为了解吉林省长春地区猪源大肠杆菌的耐药情况,于2013年采集318份猪源样品,分离鉴定大肠杆菌275株。以氨苄西林、头孢噻肟等15种药物进行了药物敏感性实验,多重 PCR 方法进行系统进化分群。结果表明,大肠杆菌分离株对四环素、氨苄西林和磺胺甲基异恶唑耐药最严重（83.63%、52.72%、51.27%）,全部菌株对美洛培南、多粘菌素敏感,其中176 株菌表现为对3类以上抗生素的多重耐药（64.00%）。从仔猪腹泻样品分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素、喹诺酮类抗生素、四环素、氯霉素及磺胺甲基异恶唑的耐药率显著高于健康猪和猪肉样品分离株的耐药率。大肠杆菌分离株主要为 A 群和 B1群。研究获得了吉林长春地区猪源大肠杆菌耐药性的基本流行病学数据,为指导养殖业的临床用药及耐药性监测提供了依据。     

水禽源大肠杆菌耐药基因和质粒的相关性研究

为了探究水禽源大肠杆菌的耐药性、耐药基因携带情况及其与质粒的相关性，试验用纸片扩散法检测62株水禽源大肠杆菌对14种抗菌药物的耐药性，用PCR方法对13种耐药基因和18种质粒进行扩增，并对质粒检出率较高的阳性菌株进行耐药基因的检测。结果表明：62株水禽源大肠杆菌对阿莫西林、美洛西林和链霉素的耐药性较高，耐药率分别为88.7%、74.2%和51.6%;对丁胺卡那和头孢哌酮耐药性较低，耐药率分别为3.2%和1.6%。aac(6′)-Ib、TEM、qnrD及qnrS基因的检出率较高，分别为66.1%、59.7%、46.8%和29.0%;共检出6种质粒IncFIA、IncFIB、IncY、IncI1、IncHI2、IncN,其中质粒IncFIB的检出率最高，为80.6%。IncFIB阳性菌株的aac(6′)-Ib基因检出率为72.0%,qnrS基因检出率为22.0%。说明水禽源大肠杆菌耐药性高，常见耐药基因以aac(6′)-Ib为主，常见质粒以IncFIB为主，质粒IncFIB介导的aac(6′)-Ib基因传播较为流行。     

1997—2010年上海市猪源大肠杆菌耐药性和产ESBLs菌的基因型检测

[目的]了解1997—2010年上海市猪源大肠杆菌的耐药情况和产ESBLs大肠杆菌的基因型分布。[方法]采用K-B法对199株猪源大肠杆菌进行药敏试验,采用PCR方法对TEM、CTX-M、SHV和OXA等4种基因型进行检测。[结果]199株猪源大肠杆菌对20种抗菌药物均表现出不同程度的耐药性。耐药率最低的为大观霉素（7.04%）,其次为头孢曲松（10.55%）、头孢哌酮（12.56%）,最高的为林可霉素（100%）,对阿莫西林和复方新诺明的耐药率分别高于80%和93.33%。5~15耐的菌株占88.94%。15种抗菌药物之间均存在不同程度交叉耐药性。共检出15株产ESBLs菌株（7.54%）,其中2株TEM型,5株CTX-M型,7株同时携带TEM、CTX-M型。[结论]上海市猪源大肠杆菌分离株耐药谱广、耐药率高;对抗菌药物的交叉耐药现象严重,交叉耐药率有的相似,有的差异大。猪源大肠杆菌ESBLs基因型主要以TEM型和CTX-M型为主,尚无SHV型和OXA型。     

大肠杆菌耐药基因定位及耐药质粒消除

对采集的9株野生型大肠杆菌在药敏试验的基础上,进行了耐药基因定位。结果表明,4个菌株的氨苄青霉素耐药基因位于质粒上,不同畜群来源菌株之间耐氨苄青霉素质粒存在差异。用中草药艾叶的乙醇提取物和蒸馏提取物对大肠杆菌庆大霉素耐药性及耐药质粒进行了消除试验,结果艾叶乙醇提取物的消除率最高可达69.4%。     

四川宜宾地区规模猪场腹泻仔猪大肠杆菌耐药性监测及血清型鉴定

为有效监测四川宜宾地区规模化猪场仔猪大肠杆菌耐药性及优势血清型变化,对采自该地区腹泻仔猪的38株大肠杆菌进行药物敏感性检测和O抗原血清型鉴定。结果表明,菌株对14种药物存在不同程度的耐药性,其中对氨苄西林、林可霉素、四环素和磺胺嘧啶极度耐药,耐药率分别为100%、100%、92.11%、89.47%;敏感性最高的是庆大霉素,敏感率为68.42%,氧氟沙星、丁胺卡那、环丙沙星和氟苯尼考相对比较敏感;所有菌株至少对4种药物耐受(4耐),最高达14耐。通过血清型鉴定,确定了15种血清型,共27株大肠杆菌,其中以O60、O101和O8为优势血清型。     

吉林省部分地区猪源大肠杆菌磺胺耐药基因Sul2的分布研究

对吉林省部分地区分离的20株猪源大肠杆菌进行药物敏感性检测的结果表明:20株猪源大肠杆菌对磺胺类药物均耐药;耐药菌株的质粒检出率达100%。应用Sul2基因的特异性引物,以检出的质粒为模板,均成功地扩增出特异性目的条带。随机抽取3株猪源大肠杆菌的目的片断,克隆、测序的结果表明:3株猪源大肠杆菌的质粒上均含有磺胺耐药Sul2基因,且基因序列与文献报道相一致。含Sul2基因的质粒在吉林省部分地区分离的20株猪源大肠杆菌中广泛存在,且在吉林省部分地区猪源大肠杆菌对磺胺类药物的耐药性方面起到较为重要的作用。