一种马尾松菌根辅助细菌--短芽孢杆菌的筛选及鉴定

【目的】菌根辅助细菌与菌根真菌是林木根际重要的微生物菌群，为探讨二者互作关系，采集马尾松人工林中有外生菌根真菌彩色豆马勃子实体的菌根根际土壤，对分离获得的74株细菌进行菌根辅助细菌的筛选。【方法】通过干皿对抗法筛选获得1株能高效促进外生菌根真菌彩色豆马勃(Pt2)和红绒盖牛肝菌(Xc)生长的菌根辅助细菌 MPt17。【结果】MPt17菌株对 Pt2和 Xc菌丝生长的平均增长率分别为48.6%和25.0%，其胞外代谢产物对 Pt2和 Xc菌丝生长也有明显的促进作用，平均增长率分别为129.6%和29.5%，该菌株的胞外代谢产物对Pt2和 Xc的生物量也有相一致的影响，生物量增长率分别为124.2%和34.2%。盆栽试验结果表明，双接种 Pt2－MPt17处理、双接种 Xc-MPt17处理、单接种 Pt2、单接种 Xc 和单接种 MPt17较未接种处理的马尾松苗高分别提高78.0%，68.2%，32.7%，39.2%和53.4%，地径分别提高46.3%，57.5%，17.5%，23.8%和25.0%。由此可以确定MPt17既是菌根辅助细菌又是根际促生细菌。通过对 MPt17菌株的菌落形态观察、BIOLOG 细菌自动鉴定仪鉴定及16SrDNA序列测定，初步鉴定该菌株为短芽孢杆菌(Brevibacillus reuszeri)，在 GenBank 数据库中的登录号为KF891383。【结论】MPt17菌株与外生菌根真菌 Pt2和 Xc 双接种马尾松幼苗对苗木的生长都具有明显的促进作用，而且 MPt17菌株单接种马尾松幼苗也能在一定程度上促进苗木的生长。通过外生菌根真菌( EMF)－菌根辅助细菌( MHB)－植物三者互作机制进行植物生长研究的方法，对类似研究具有重要意义。     

菌根化马尾松苗木根际土壤浸提物有效成份及其对种子萌发的影响

【目的】对比分析接种外生菌根真菌对马尾松苗木根际土壤浸提物种类及其含量的影响,阐明根际土壤浸提物对马尾松种子萌发的影响,为菌根化育苗及马尾松天然更新研究提供科学依据和理论指导。【方法】以接种和未接种外生菌根真菌的1年生马尾松苗木为研究对象,采用乙醇和甲醇两种浸提剂分别萃取分离接种和不接种苗木根际土壤,气相色谱-质谱(GC-MS)进行物质鉴定,研究不同马尾松苗木根际土壤浸提物化学成分和含量的差异,再运用生物测定方法研究浸提物对马尾松种子的化感效应。【结果】采用乙醇浸提,接种Sl12和Sl13菌株苗木根际土壤浸提物中物质种类分别比非菌根化苗木多22和23种,其中酸类是数量最多且比例较大的一类化合物,两种接种苗木酸类所占比例分别为51.20%和48.80%,非接种苗木酸类所示比例为34.17%;采用甲醇浸提,未接种苗木根际土壤浸提物中物质种类23种,两种接种苗木物质种类分别为34和32种,其中酸类、酯类相对含量较大,两种接种苗木酸类所占比例分别为39.06%和34.86%,酯类分别为32.01%和38.91%,非接种苗木酸类所示比例为33.96%,酯类所示比例为39.59%;菌根化苗木根际土壤乙醇、甲醇浸提物均能检测出棕榈酸、硬脂酸、2,4-二叔丁基苯酚;非菌根化苗木只能检测出棕榈酸;菌根化苗木根际土壤乙醇浸提物对马尾松种子的发芽率、发芽势、活力指数、胚根长、胚轴长具有一定的抑制作用,化感效应指数为负值。【结论】接种外生菌根真菌影响苗木根际土壤中分泌物的化学组成成分,增加分泌物的种类和数量;3种苗木根际土壤浸提物对种子的萌发具有一定抑制作用。     

盐碱胁迫下AM真菌对沙枣苗木生长和生理的影响

【目的】研究盐碱胁迫下丛枝菌根(AM)真菌对沙枣苗木的生长和生理的影响,以期探索AM真菌提高沙枣苗木耐盐碱机制,为菌根化沙枣苗木在盐碱地推广应用提供理论基础。【方法】采用盆栽法研究了4种不同土壤盐碱度下分别接种根内球囊霉和摩西球囊霉对沙枣苗木的生长影响,并对沙枣苗木的光合特性、Na+和K+含量、丙二醛含量、脯氨酸含量等各项生理指标进行测定。【结果】2种AM真菌均能与沙枣苗木建立共生关系,且GI处理对苗木的侵染率显著高于接种GM处理,但随着土壤中盐浓度增加,沙枣苗木菌根侵染率有所降低。在同一盐碱度下接种AM真菌可显著促进沙枣幼苗的生长,在中度盐碱胁迫下(含盐量1.56%,p H 9.52),接种GI和GM的沙枣苗木株高分别较未接种AM真菌植株增加了20.07%,9.68%,植株干生物量显著增加;AM真菌可显著提高盐碱胁迫下沙枣幼苗叶片叶绿素含量和光合生理特性,其叶片净光合速率Pn、蒸腾速率Tr、气孔导度Gs、胞间二氧化碳浓度Ci均显著高于未接种AM真菌处理的幼苗(P0.05)。接种GI和GM处理植株叶片组织内SOD,CAT和POD酶活性显著高于对照处理,但根系及叶片组织内丙二醛含量显著低于对照处理的植株,而其脯氨酸含量却都表现出显著提高。接种AM真菌沙枣根系和叶片中Na+含量较未接种处理植株显著下降,K+含量和K+/Na+比值显著提高。【结论】接种AM真菌能显著提高沙枣苗木耐盐碱能力。接种根内球囊霉的沙枣苗木的生长及抗盐碱胁迫能力的各项生理指标均显著高于接种摩西球囊霉处理的苗木,表明根内球囊霉在盐碱地改良方面具有很好的推广应用前景。     

红菇菌根食用菌接种马尾松苗期的共生效应研究

为筛选与马尾松高效共生的红菇菌根食用菌组合体,利用红菇属7个菌株对马尾松苗木进行苗期接种试验。研究结果表明:参试的红菇菌株均可在马尾松苗木根系上形成菌根,菌根感染率达79.6%以上,其中0807菌株达到99.1%,其次0551和07234菌株分别达到96.3%和95.8%。在苗木接种后的苗高生长方面,接种2个月后,接种红菇菌处理的苗高都显著高于对照,接种12个月后,不同菌株对马尾松苗高生长的促进作用有增强也有减弱,其中0807菌株表现最优,苗高达到56.33 cm,其次是0005和07242菌株分别达到52.96 cm和52.88 cm。在生物量方面,来自广东郁南县桂圩镇的0807菌株在苗高、地径、植株地上干重和地下干质量指标中,均优于其他接种处理。综合比较而言,供试的红菇菌株0807接种马尾松苗木,无论在菌根合成还是促进苗木生长方面都表现最优,为7个红菇菌株中对马尾松苗木生长效应最佳的菌株。研究筛选的红菇菌根食用菌与马尾松高效共生组合,可为南方地区马尾松林下经济发展和培育红菇菌提供技术支撑。     

接种菌根油松苗与非接种菌根油松苗根际土壤酶比较

土壤酶是土壤的组成成分之一,参与完成土壤中的生物化学反应,其活性反映了土壤生物化学的方向和强度.本文通过对接种油松苗木和非接种苗木根际土壤酶的研究试验,旨在探索接种菌根真菌对油松幼苗的生长和养分吸收的影响. 一、材料与方法 1.材料 供试土壤采自呼和浩特市园林局第二苗圃培育菌根苗木的基地,不施加任何肥料.供试植株为经过菌根化处理的油松苗和未经菌根化处理的油松苗.     

3株外生菌根真菌对红松苗木的接种效应

采用盆栽法研究了细粉绒牛肝菌(Xerocomus pulverulentus)、黄绿蜜环菌(Armillaria luteovirens)和灰鹅膏菌(Amanita vaginata)3种外生菌根真菌对红松苗木的接种效应。结果表明:菌株X.pulverulentus能够与红松苗木形成良好的菌根共生体,侵染率高达61.5%,能够显著提高红松的苗高、地径和干生物量,菌根贡献率分别是50.39%、40%和69.94%;X.pulverulentus能够显著提高苗木根际土壤磷酸酶的活性,积极促进土壤全磷转化为速效磷,从而提高根际土壤中速效磷的含量。X.pulverulentus菌株对红松菌根化苗木培育具有重要的应用潜力。     

稳态营养与Pt菌根化在湿地松育苗中的应用

在苗圃地培育湿地松苗木 ,分别进行 4种处理 :①稳态营养 Pt菌剂 ;②不施肥 Pt菌剂 ;③稳态营养 松林土 ;④常规施肥 松林土。生长季末测定苗木的高度和地径。测定各小区标准木的叶、茎、根鲜重及干重 ,侧根条数和总长。按“十分法”目测吸收根外生菌根感染率。观测结果表明 ,湿地松苗木形成外生菌根的能力较强 ,无论是人工接种还是天然感染 ,菌根感染率均超过 85 % ,其中稳态营养下 ,人工接种Pt菌剂感染率最高 ,可达94 8%。稳态营养人工接种Pt菌剂处理的苗木生长最佳 ;稳态营养下松林土处理的苗木其次 ;人工接种Pt菌剂但不施肥处理的苗木再次 ;常规施肥 松林土处理最差。如稳态营养人工接种Pt菌剂处理与人工接种Pt菌剂但不施肥处理相比较 ,苗木的株高、地径分别提高 2 0 5 %、14 0 % ;侧根条数及总长分别提高 2 5 6 %、4 0 9% ;叶、茎、根、整株鲜重分别提高 34 6 %、4 3 7%、38 8%、37 0 % ;各部分干重分别提高 2 5 7%、38 6 %、4 2 4 %、32 7%。稳态营养人工接种Pt菌剂处理与常规施肥松林土处理相比较 ,各项指标的差异更加明显。充分体现了稳态营养与Pt菌根化的综合效应 ,同时说明稳态营养条件下 ,靠松林土感染真菌形成菌根也能获得较好的生长结果。但是 ,仅靠人工接种优良菌剂 ,不科学     

蓝桉和尾叶桉混合菌根研究Ⅱ.混合菌根的接种效应

接种苗木在生长量和生物量上均表现出极其显著的生长优势,ECM真菌蜡蘑菌单接种及其与4种VA菌根菌剂混合接种,对苗木生长的促进作用尤为显著。在接种后16周时,与对照苗相比,蓝桉和尾叶桉接种苗木的高生长量最大增幅分别为28.86%(LS)和86.65%(LG);两种桉树地上部分平均干质量最大增幅分别为129.93%(LS)和133.34%(L),地下部分分别为119.93%(LF)和174.83%(LG)。桉树对不同菌根菌及其组合的菌根依赖性表现出很大的差异,对混合接种的真菌组合有相对高的菌根依赖性,而对土壤菌剂依赖性很小。菌根感染与苗木生物量间有显著的相关性。试验结果还证实了P素对桉苗生长的促进作用,P素水平对菌根的接种效应有一定的影响。     

外生菌根菌对油松苗木生物产量的影响

本试验验证了菌根化能促进油松苗木早期生长,对其生物产量有明显提高。优良菌种可使苗木干物重提高40％。试验筛选出Boletus sp.(林)、Suillusgrevillei(林)、Pisolithus tinctorius及“火炬松”、“欧洲赤松”等五个菌种在促进苗木生长方面有良好效果。经温室生物测定,不论是从菌根组织还是直接从子实体上分离到的菌种,接种后均能与油松根很好地形成菌根。用生长优良的固体纯培养物接种后,油松苗形成菌根的能力很强,多数产生茂盛的珊瑚状菌根组织,苗木的菌根化程度与其对生长的促进作用(包括干物重、高及粗生长)基本上呈正相关。在碱性及接近重碱性土壤中苗木均形成了菌根,并较好地起到促进生长作用,扩大了菌根菌抗逆性的筛选内容。试验筛选出适合菌根菌生长的培养基以及用于接种的纯培养物的载体。     

怎样带菌根和菌根土接种造林

怎样带菌根和菌根土接种造林许多树木的幼苗期皆有菌根,培养菌根的土为菌根土,松树、桦树、柳树等都有菌根和菌根土。采用菌根、菌土造林和用菌根菌土接种育苗是一个道理,使苗木能适应瘠薄中生长,有效地利用土壤养分。在立地条件相同的情况下,多菌根比少菌根的苗木成...     

深色有隔内生真菌与褐环乳牛肝菌双接种对樟子松生长及抗立枯病的影响

通过测定樟子松苗木生物量、抗逆生理指标及立枯病发生率,探讨单接种与双接种深色有隔内生真菌Phialocephala fortinii D575和褐环乳牛肝菌Suillus luteus N94后对樟子松生长及抗病性的影响。结果表明:双接种处理对樟子松苗木促生效果最好,苗高、地径、鲜重和干重比对照分别提高11.18%,14.11%,24.13%,41.09%。接种内生真菌和外生菌根菌可提高樟子松苗木对立枯丝核菌的抗性,在接种立枯丝核菌后,双接种处理的樟子松苗木保护酶CAT、POD和SOD酶活性比对照分别提高32.65%,10.96%和19.39%,丙二醛含量降低23.42%,β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性分别提高33.97%和36.92%,内生真菌和外生菌根菌的存在可以降低苗木立枯病的发生率,提高苗木成活率。     

褐环乳牛肝菌对马尾松幼苗根际土壤微环境的影响

为探索菌根-土壤-植物共生体系原理,以马尾松为供试植物,研究褐环乳牛肝菌Sl12、Sl13对苗木根际和非根际土壤pH值、酶活性和可培养微生物数量的影响。结果表明:(1)褐环乳牛肝菌接种处理会使苗木根际土壤的p H值降低0.13。(2)褐环乳牛肝菌在不同程度上增加根际土壤过氧化氢酶、蔗糖酶、脲酶、磷酸酶的活性,与CK相比,Sl13菌株根际土壤酶活性分别增加47.14%、8.86%、5.91%、22.38%。(3)接种褐环乳牛肝菌能显著增加根际土壤细菌、放线菌、真菌的数量。其中,Sl12菌株能显著增加土壤中可培养真菌数量,提升效果优于Sl13。与CK相比,接种组Sl12菌株根际真菌数量增加63.75%,Sl13菌株增加39.06%。研究表明褐环乳牛肝菌通过改变马尾松苗木的根际土壤微环境,从而促进植物生长发育,提高植物抗逆性。     

混合接菌对马尾松苗木生长的影响

许多研究证明,菌根菌混合接种对宿主植物生长具有正效应。本试验中发现,504、EG、HX和Pt2四种菌根菌混合接种能显著促进幼苗生长,与单一接种相比有显著性提高。在促进幼苗生物量的积累上,四种菌根菌混合接种分别比504、EG、HX和Pt2单一接种增加了379.68%、184.84%、126.21%和38.21%,比对照增加了467.79%。     

河北省果树内生菌资源调查与研究

自2003年4月开始,对河北省主要果树苹果、葡萄、梨树、桃树、杏树、核桃等6个树种的VAM菌根资源进行了调查,测定其侵染率及其根际土壤中真菌孢子含量。同时进行苹果幼苗接种实验,探讨了接种方法,观测接种苹果苗根系生长情况。观测发现:在苹果、葡萄、梨树、桃树、杏树、核桃等6个树种的根际土壤中分布着球囊霉属、无轴孢囊霉属、巨孢囊霉属等3个菌属;通过对苹果组培苗接种后4周的观察,发现根系生长接种的与不接种的有显著差异;从不同地区、不同树种分离出的菌种,在苗木上接种后其生长状况有显著差异,同一树种上菌种接种后,苗木生长效果最好。     

在不同PH土壤上接种菌根对湿地松幼苗生长的影响

用红壤、黄棕壤和石灰性冲积土进行了接种菌根和培育湿地松的盆栽试验。二年的试验表明,不同土壤对湿地松苗高、根径、地上和地下部分鲜重的影响达到极显著水平。黄棕壤上生长的苗木最好,红壤次之,石灰性冲积土最差。土壤理化分析资料表明,导致这种差异的关键因素是土壤的PH 值。红壤上苗木生长不如黄棕壤可能与土壤缺磷有关。菌根有助于幼苗对磷的吸收,但菌根的发育要求酸性环境。因此,在酸性缺磷的红壤上接种菌根对促进湿地松幼苗生长有最显著的效果。石灰性冲积土因 PH太高,湿地松幼苗生长不良,叶黄化,菌根发育差。     

马勃类真菌对桉树苗木生长效应的研究

采用10个马勃类真菌菌株对桉树幼苗接种并对苗木生长进行测定,其结果表明:10个不同菌株对桉树苗木生长均有促进效果,与对照相比,苗高增加14.5%～68.1%,苗木地径增加8.1%～49.7%,苗木生物量(干重)增加5.3%～58.8%.因此,利用马勃类真菌对桉树幼苗进行接种形成菌根可有效促进桉树生长.     

喜树育苗和接种菌根菌试验

用苏格兰球囊菌 [Glomuscaledonium (Nicol&Gerd .)Trappe&Gerd .]和地表球囊 [Glomusversiforme (Karsten)Berch]菌种接种喜树幼苗。试验结果表明 :喜树幼苗根均可与两种菌种菌形成菌根 ,接种前者的苗木菌根感染率为 5 3% ,接种后者的苗木菌根感染率为 4 0 % ,非接种苗木 (对照 )的感染率 6 .7%。接种菌根菌后的苗木总生物量、根茎比及根系长度和地径有所提高 ,反映了 2个菌种均促进了喜树幼苗的生长 ,但对幼苗高生长的促进作用不大。     

虎榛子几种菌根苗抗旱机制的研究

选用6个外生菌根菌株为接种体,分别对2个月龄虎榛子实生苗进行接种,培养4个月菌根感染率均超过40.8%.测定各处理苗木生物量、膜透性、SOD活性、MDA含量、叶绿素含量等指标,结果表明:彩色豆马勃、土生空团菌是以提高植物组织水势、SOD活性、降低MDA含量、减轻膜伤害程度、增加根冠比等机制来增强苗木的抗旱性,从而推迟苗木的萎蔫时间与延长干旱临界致死时间;厚环粘盖牛肝菌及点柄粘盖牛肝菌是通过提高苗木SOD活性和脯氨酸含量、降低MDA含量等机制来提高苗木的抗旱性;而卷边桩菇则是通过促进苗木的生长、增强苗木的生长势、降低苗木膜伤害程度、提高SOD活性和脯氨酸浓度、降低MDA含量等多种机制提高苗木的抗旱性.     

翻白叶树田间接种VA菌根菌效果

在田间自然条件下(非灭菌条件下)应用VA菌根菌对翻白叶树幼苗进行人工接种,接种苗木3个月后,接种苗生长速度明显大于对照苗,3个月时高于对照40.1%,至6个月时接种苗高生长高于对照苗的59.1%,9个月时高于对照53.7%;对苗木根系进行镜检,发现接种苗与对照苗均有VA菌根菌感染,接种苗感染率为100%,对照苗感染率为10%,接种苗的VA菌根菌感染程度远大于对照苗。试验证明,在田间自然条件下对翻白叶树幼苗接种VA菌根菌,能显著促进其高生长。     

菌根菌接种对樟子松高生长影响的研究

针对红花尔基沙地樟子松Pinus sylvestris var.mongolica天然林出现的生长衰退现状而开展了通过外生菌根菌接种促进生长的试验。采用传统的植物病理学和统计学方法,采集菌根菌、分离培养,接种樟子松苗木。结果显示:蘸根处理后3年生樟子松苗生长最好,用30 m L浓度稀释液蘸根处理的苗木促生效果好于其他,随着稀释菌液浓度的增高,平均高生长不再继续增高;其次是灌根,最差的是对照组,平均苗高分别为21.4 cm,19.2 cm和17.1 cm。经差异显著性T检验,三者之间差异显著。