麻黄愈伤组织诱导及其倍性鉴定

以草麻黄幼苗的幼茎和下胚轴为外植体,采用不同激素组合及浓度配比的MS培养基进行愈伤组织的诱导。结果表明:草麻黄幼茎愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1．1mg／L 2,4-D+0．2 mg／L KT。在MS+2 mg／L 6-BA +0．2 mg／L IAA的培养基上,下胚轴的诱导率高于幼茎。愈伤组织继代增殖的最佳培养基为MS+0．5mg／L 2,4-D +0．2 mg／L 6-BA,在其上继续生长,形成淡绿色、致密的愈伤组织,愈伤组织细胞主要为二倍体,也有少量的亚二倍体细胞和其它倍性细胞产生。     

灰绿藜愈伤组织的诱导·继代及植株再生研究

［目的］通过诱导愈伤组织分化,建立灰绿藜植株再生方法。［方法］以灰绿藜茎和叶为材料,研究不同种类、不同浓度的植物生长调节剂对灰绿藜愈伤组织诱导和继代、不定芽分化及再生植株生根与移栽的影响。［结果］NAA、2,4 D、IAA在单独使用时,一定浓度范围内均有愈伤组织产生,利用不同的外植体,最佳的诱导组合培养基分别是茎为MS＋NAA 4.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L,叶为MS＋2,4-D 4.0 mg/L＋6-BA 0.2 mg/L,光照有利于愈伤组织的诱导。在优化灰绿藜愈伤组织继代培养条件时,发现5.0 mg/L的抗坏血酸（VC）对于灰绿藜愈伤组织的褐变有良好的抑制作用,继代培养基中较好的组合为MS＋2,4 D 0.5 mg/L＋6 BA 0.5 mg/L。愈伤组织不定芽分化培养基为MS＋6 BA 2.0 mg/L＋NAA 0.05 mg/L,根分化的培养基为1/2 MS＋NAA 0.2 mg/L。［结论］该研究为灰绿藜组织培养中适宜的培养基选择提供了科学依据。     

不同基因型甜高粱愈伤组织与丛生芽诱导条件优化

【目的】探讨不同培养基类型和激素配比对不同基因型甜高粱的愈伤组织和丛生芽诱导的影响,为建立高效稳定的甜高粱遗传转化体系奠定基础。【方法】以不同基因型甜高粱辽甜三号和北甜三号的成熟种子为外植体,在MS培养基中添加不同浓度2,4-D及2,4-D与NAA、6-BA或KT配比组合,对愈伤组织和丛生芽进行诱导;分别在B5、N6、MS和1/2MS培养基中添加不同2,4-D、NAA、6-BA组合,对愈伤组织进行诱导。【结果】适宜北甜三号愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2.0mg/L2,4-D＋0.1mg/LNAA,辽甜三号为MS＋2.0mg/L2,4-D＋0.2mg/LNAA,可获得质量较好的愈伤组织,愈伤组织块大且色泽鲜艳。适于两个基因型甜高粱丛生芽诱导的最佳基本培养基为MS＋1.0mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA＋0.5mg/L2,4-D,但不同基因型的诱导率有明显差异,以辽甜三号的诱导效果较好。【结论】不同浓度2,4-D与其他激素配比对两个基因型甜高粱的愈伤组织诱导有明显影响,以对辽甜三号的诱导效果较好;在MS、B5、N6、1/2MS基本培养基中,MS可作为愈伤组织诱导的最佳基本培养基。     

药用植物草麻黄细胞的悬浮培养

[目的]对草麻黄的子叶诱导出的愈伤组织,进行悬浮培养。[方法]采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导、愈伤组织继代和悬浮培养研究。[结果]MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA为诱导子叶形成愈伤组织的理想培养基;MS+1.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L6-BA是愈伤组织的适宜继代培养基;2.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+300 mg/L水解酪蛋白(CH)是愈伤组织悬浮培养的适宜培养基,愈伤组织干重增加量为0.80 g。[结论]初步选择出草麻黄愈伤组织细胞的悬浮培养条件,为麻黄细胞扩大培养及有效成分提取奠定基础。     

不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响

[目的]寻求代替ZT提高猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的最佳激素组合。[方法]以美味猕猴桃离体茎段为外植体,以MS为基本培养基,附加2,4-D0.5、1、2.0mg/L和NAA0.1、0.3、0.5mg/L与6-BA0.5mg/L分别组成诱导愈伤组织的6个激素组合,并以同样浓度的2,4-D和NAA与6-BA1.0mg/L分别组成分化芽的6个组合激素,研究不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响。[结果]6种不同浓度的激素组合对猕猴桃茎段愈伤组织均有一定的诱导作用,其中2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L的组合有利于愈伤组织诱导,诱导率达86.1%;绿色愈伤组织在MS培养基附加激素2,4-D+6-BA组合中芽的分化率很低,而在附加NAA+6-BA组合中芽的分化率较高,其中,NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L的组合有利于芽分化,芽分化率为75.2%。[结论]2,4-D与6-BA组合对猕猴桃绿色愈伤组织的芽分化有一定抑制作用。     

杜鹃红山茶愈伤组织诱导的初步研究

以杜鹃红山茶嫩茎、叶柄以及叶片为外植体,研究不同激素组合及不同外植体对愈伤组织诱导效应的影响,研究结果表明:MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA是杜鹃红山茶愈伤诱导的最佳培养基,MS+1.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L6-BA+1.5 mg/L IAA是最佳的继代培养基。叶柄在愈伤诱导率及生长状况上优于其他外植体。     

不同激素配比对大豆子叶愈伤组织诱导的影响

[目的]研究不同激素配比对大豆子叶形成愈伤组织的影响。[方法]以高蛋白大豆东农42号子叶为供试外植体,以6-BA2.0mg/L＋NAA0.2 mg/L和2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L的激素对其进行诱导,研究不同激素对大豆子叶愈伤组织的诱导效果。[结果]以添加6-BA2.0 mg/L＋NAA0.2 mg/L培养基培养的材料诱导率为71.4%;以添加2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L培养基培养的材料诱导率为78.6%,诱导产生的愈伤组织大部分呈绿色、质密;未添加激素组诱导率为85.7%,但无生长迹象。所加激素均能诱导大豆子叶形成愈伤组织,但不同激素种类诱导愈伤组织能力有差异,以添加2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L的效果最好。[结论]不同种类的外源激素对外植体的诱导作用不同,大豆子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L。     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

不同培养基对鸡骨草愈伤组织的诱导

[目的]研究影响鸡骨草愈伤组织形成的条件,为鸡骨草的组织培养及悬浮培养提供参考。[方法]从鸡骨草的大田植株和种子发芽后的幼芽中合适部位选取外植体,在附加不同浓度、不同组合的外源激素2,4-D和6-BA的MS培养基上,对鸡骨草愈伤组织进行诱导,计算诱导率,观察愈伤组织生长情况。[结果]单独使用一种激素时对愈伤组织的诱导能力大致相同,2,4-D比6-BA对鸡骨草茎段愈伤组织的诱导能力稍强一些。培养基中添加2种激素时愈伤组织褐变程度稍轻,最适合的培养基为MS附加2,4-D2．0mg／L＋6-BA1．5mg／L。[结论]多种激素组合比单种激素有利于愈伤组织的形成,培养基中适宜的激素组合可降低愈伤组织褐变率。     

长寿花叶片愈伤组织培养及植株再生的研究

以长寿花幼嫩叶片为材料,以2,4-D,6-BA,NAA为主要研究因子,研究不同激素配比对长寿花愈伤组织生长、分化及其芽增殖情况的影响。试验表明,当叶片在MS＋2,4-D2mg/L＋6-BA0.2mg/L的培养基中培养,有利于愈伤组织的形成,在MS＋6-BA1.0 mg/L＋NAA0.1mg/L的培养基中培养利于愈伤组织的分化和芽的增殖,1/2MS＋IBA0.2mg/L培养基利于生根。     

影响益母草愈伤组织诱导的因素

[目的]研究影响益母草愈伤组织诱导的因素。[方法]以益母草种子萌发的真叶为外植体,MS为基本培养基,研究了不同浓度的植物激素和蔗糖以及不同的培养方式和光照条件对益母草愈伤组织诱导的影响。[结果]培养基中2,4-D为0.5或1.0mg/L和6-BA为2.0mg/L时,益母草愈伤组织诱导率相对较高,可达93.3%;愈伤组织诱导率随培养基中蔗糖含量的增加而增加,在蔗糖含量达到30g/L时达到最高,为86.7%,超过30g/L时则下降;在3种培养方式中,固体培养的诱导率是液体培养的1.63倍;3种光照中,全光条件下的愈伤组织诱导率可达到92.8%,全暗条件下的愈伤组织诱导率仅有43.6%。[结论]培养基添加合理的植物激素组合、蔗糖,并采用合适的培养方式和光照条件有利于益母草愈伤组织的诱导。     

马铃薯愈伤组织诱导中激素浓度配比优化研究

[目的]对马铃薯愈伤组织诱导中的激素浓度配比进行优化研究。[方法]以鲁引1号马铃薯的幼嫩茎段、叶片和叶柄为外植体,通过在基本培养基中添加不同浓度的6-BA和2,4-D,来筛选出马铃薯愈伤组织诱导的最适的培养基。[结果]叶柄和茎段的最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D,叶片的最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D,愈伤组织的诱导率均可达95%以上。[结论]为鲁引1号马铃薯脱毒研究提供了技术支持。     

多年生黑麦草成熟种子愈伤组织的诱导和植株再生研究

[目的]探索多年生黑麦草的愈伤组织诱导和植株再生,为多年生黑麦草的转基因研究奠定基础。[方法]以多年生黑麦草成熟种子为外植体,施以浓度不同的外源激素,探讨不同激素组合对愈伤组织诱导、继代培养以及植株分化的影响。[结果]在附加了8,ooomg／L的2,4-D．0．025mg／L的6-BA的MS培养基中诱导率最高,达56．42％。愈伤组织经过2～3次继代后分化,分化培养附加了2．0mg／L的6-BA的培养基中分化率最高为34．14％,且愈伤组织继代后的状态明显影响分化率。在大量元素减半的MS培养基中附加0．5mg／LNAA进行生根培养,生根率达98％。[结论]建立了高频的遗传再生体系。     

加拿大披碱草×肥披碱草杂种F1幼穗组培再生体系的研究

[目的]筛选适宜加拿大披碱草×肥披碱草种间杂种F1愈伤组织诱导、幼苗分化和生根的最适培养基。[方法]以加拿大披碱草×肥披碱草种间杂种F1幼穗为外植体,以MS为基本培养基,添加不同的激素和营养物,探讨了2,4-D、6-BA、NAA与IBA4种激素不同浓度对杂种F1愈伤组织的诱导、分化及生根的影响,建立了组培再生体系。[结果]激素2,4-D对杂种F1愈伤组织诱导起决定性作用。适宜杂种F1愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+2,4-D2.0 mg/L,诱导率达100%;适宜幼苗分化的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+6-BA2.0 mg/L+NAA0.4 mg/L,分化率达73.3%;适宜生根的最佳培养基为:MS+CH300.0 mg/L+IBA0.5 mg/L,生根率达86.7%;组培苗经过炼苗移栽得到了完整植株。[结论]杂种F1组培再生体系的建立为新种质的保存奠定了基础。2,4-D适宜浓度为2.0 mg/L。     

红掌组织培养再生体系的建立研究

[目的]建立红掌的组织培养再生体系。[方法]以红掌幼嫩叶柄为材料,筛选红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根时的最佳激素配比。[结果]红掌叶柄愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,此时愈伤组织诱导率可达80.0%;不定芽分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT,此时分化率可达96.7%;生根的最佳培养基为MS+1.0mg/L IBA,此时生根率可达86.7%。[结论]为红掌的快速繁殖提供了技术依据。     

白皮松成熟合子胚的胚性愈伤组织诱导研究

[目的]建立白皮松体细胞胚胎发生快速繁殖体系,诱导出胚性愈伤组织。[方法]以白皮松成熟合子胚为外植体,以DCR作为基本培养基,研究不同浓度激素对外植体发育和胚性愈伤组织得率的影响。同时在不同激素浓度下对培养4周的外植体外形以及胚性愈伤组织进行了观察与分析。[结果]培养基中加入2,4-D可以使得外植体生长减慢,并出现愈伤组织,6-BA则使外植体的子叶变长,膨大并玻璃化。当2,4-D浓度为8mg/L、6-BA浓度为2mg/L时,胚性愈伤组织的诱导效果较好,诱导率平均为40.625%,该愈伤组织为白色半透明状,细胞小而细胞质浓,说明高浓度2,4-D和低浓度6-BA有利于白皮松成熟胚的胚性愈伤组织的获得。[结论]合适的激素种类和浓度是诱导白皮松成熟胚产生胚性愈伤组织的关键因素。