水杉同工酶遗传变异的研究

应用聚丙烯酰凝胶电泳技术，以种子胚乳为材料，对水杉原产地３个小群体的６种同工酶的遗传方式进行了研究，确定了由１６个基因座位编码６５个等位基因。ＧＯＴ，ＭＤＨ，ＰＧＩ和ＥＳＴ分别受３个多态座位控制，α－ＡＭＹＭＥ分别受个２个多态座位控制，所有座位均为多态。各种同工酶的遗传表达基本稳定。     

云南红豆杉天然群体的遗传多样性和群体分化

利用云南红豆杉Taxus yunnanensis种子的单倍体胚乳，采用水平淀粉凝胶电泳技术，对分布于金沙江流域的云南红豆杉天然群体的遗传多样性和群体分化进行了研究。对8个酶系统15个酶位点的分析结果表明：该地区的云南红豆杉天然群体遗传变异水平较高，多态位点比率P＝0．933，等位基因平均数A＝2．90，平均期望杂合度He=0.290；4个小群是遗传分化很小，基因分化系数GST＝0．071。云南红豆杉天然群体具有明显丰富的遗传变异和较小的群体间分化，其原因是云南红豆杉寿命长、风媒异花授粉、种子传播、基因交流频繁。     

矮慈姑一个自然居群的遗传多样性

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和等位酶分析方法，研究了矮慈姑一个自然居群的遗传多样性。根据9个酶系统16个等位酶位点的检测结果，表明矮慈姑的遗传多样性属中等水平。矮慈姑自然居群的多态位点百分率P=25．0，平均每位点等位基因数A=1．4375，平均多态位点等位基因数Ap=2．500，等位基因有效数Ae=1．3093，平均预期杂合度He=0．1327，平均观察杂合度Ho=0．1948，固定指数F=-0．4684。实际观察到的杂合体比率高于理论预期杂合体比率，居群表现为杂合体过量。     

獭兔Tyr基因外显子3多态性检测及序列分析

以不同獭兔群体为研究对象,采用PCR-SSCP技术检测了Tyr基因外显子3的多态性,针对獭兔Tyr基因外显子3中的碱基突变,进行了生物信息学预测比较分析,以期为獭兔毛色形成机制提供分子生物学基础。结果表明,外显子3存在2个等位基因、3种基因型,A1118C的突变导致编码的赖氨酸变成了苏氨酸。白色和青紫蓝色獭兔各基因型和基因型频率的卡方适合性检验结果显示,BB基因型频率在青紫蓝色獭兔和白色獭兔中均较高,说明等位基因B是青紫蓝色獭兔群体和白色獭兔中的优势等位基因。Hardy-Weinberg平衡检验结果表明,两个群体均处于平衡状态。青紫蓝色獭兔群体的多态信息含量为中度多态(0.25PIC0.50),白色獭兔群体的多态信息含量为低度多态(PIC0.25)。青紫蓝色獭兔杂合度较高,白色獭兔杂合度较低。生物信息学分析结果表明,外显子3中A1118C的突变未改变TYR蛋白质的理化性质、二硫键、跨膜结构、信号肽、磷酸化位、二级结构和三级结构,但改变了TYR蛋白质的糖基化位点,从而有可能影响到TYR蛋白质的功能。     

寿光鸡×斗鸡杂交后代的蛋白质(酶)多态分析

以著名的地方特色品种鸡纯系寿光鸡和斗鸡组合杂交、筛选优化出的杂交后代鸡为试材 ,采用(SDS) PAGE技术对杂交后代鸡及亲本的血液蛋白质、酶蛋白和 EST(酯酶同工酶 )进行多态分析。结果表明 ,在还原条件下 ,全血样品更能显示出蛋白质 (酶 )的多态变化 ,优化杂交后代母鸡的蛋白质结构出现新的亚基组分 S1 ～ S5,存在丰富的多态、酯酶 (EST)同工酶快区 Es-1位点 ,由多等位基因支配 ,新出现 Es-1 F、Es-1 C、Es-1 A2 等位基因 ,其差异变化的频率很可能直接或间接调控影响后代品系的生产性能。提示蛋白质和EST多态的遗传变异 ,是动物群体遗传分析和种质评估、保存利用及杂交亲本选配的有效遗传标记     

添加圆葱寡糖对肉鸡代谢功能调控的研究

在肉鸡饲粮中添加圆葱寡糖(1.5％),对山东地方特色保种白羽鸡进行饲养试验,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)PAGE技术,分析血液中酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、蛋白质的多态。结果表明,试验组蛋白结构新出现>100Ku亚基组分,存在多态变化。EST同工酶快区Es-1位点,由多等位基因控制,酶带着色程度显著减弱,其活性下降45.8％,LDH同工酶出现4条酶谱带,酶带着色的程度明显增强,其活性增加2.5倍。提示圆葱寡糖直接或间接影响基因表达水平,调控生化生理代谢功能。     

利用遗传标记基因分析蛋鸡5个亲本的遗传差异

本文根据血浆蛋白质多态和血型抗原标记基因分析，对５个亲本的杂交组合提供选配信息，预测杂交优势。血浆蛋白质多态５个位点、１２个等位基因，血型用平板凝集方法测定４个位点、１４个等位基因。对所得数据进行群体遗传分析。结果表明，杂交组合的实际结果与利用遗传标记基因对亲本测定提供的选配信息大体吻合。     

我国部分地方鸡种血浆蛋白质(酶)多态性分析

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳和淀粉凝胶电泳法，检测我国12个地方鸡种淀粉酶、酯酶、运铁蛋白及碱性磷酸酶等4种血浆蛋白质(酶)结构基因座的多态性。12个地方鸡种中所测的4个座位均表现出多态。根据检测座位的基因频率，计算群体平均基因杂合度。并用模糊聚类法对所研究的12个地方鸡种进行聚类。结果表明：泰和乌骨鸡和白耳鸡在λ为0．996时首先聚在一起，然后再与狼山鸡、仙居鸡、河南斗鸡、萧山鸡、固始鸡和藏鸡等依次聚为一大类，表明泰和乌骨鸡和白耳鸡有较近的亲缘关系，而北京油鸡与其他鸡种距离较远。     

徐闻黄牛和海南黄牛血液蛋白的遗传多样性

采用淀粉凝胶电泳技术和组织化学染色方法，研究徐闻黄牛、海南黄牛和荷斯坦牛血液蛋白的遗传多样性。在分析的３６种血液蛋白（酶）共计４０个遗传座位中，徐闻黄牛和海南黄牛有相同的１３个多态座位，荷斯坦牛有１１个多态座位。徐闻黄牛和海南黄牛的多态座位百分比均为Ｐ＝０．３２５，徐闻黄牛的平均杂合度Ｈ＝０．１４１，海南黄牛的平均杂合度Ｈ＝０．１３２；荷斯坦牛的多态座位百分比Ｐ＝０．２７５，平均杂合度Ｈ＝０．０９９，研究结果表明这３个品种的遗传多样性相当丰富，多态座位百分比和平均杂合度随着品种选育程度的提高而降低。研究结果为把徐闻黄牛和海南黄牛合称为雷琼黄牛的观点提供了佐证。     

鹌鹑脏器、肌肉蛋白质多型座位电泳技术

将应用于家畜血液蛋白质多型座位的电泳技术加以改进，成功地应用于鹌鹑脏器、肌肉蛋白质多型座位的检测，使可检测的鹌鹑蛋白质多型座位数从国内报道的３个增至３２个。详细介绍了检测３２个鹌鹑脏器、肌肉蛋白质多型座位的淀粉凝胶电泳技术，为客观评价鹌鹑遗传资源提供了科学的研究方法。     

云南主要地方鸡种及土杂鸡生长性能的研究

对云南3个主要地方鸡种及土杂鸡生长性能研究,结果表明,整个饲养阶段,土杂鸡生长速度和产肉性能明显高于地方鸡种。盐津乌鸡、武定鸡的各项生长指标没有显著差异,茶花鸡生长速度最差。但经济效益分析中,由于不同鸡种市场价格存在差别,地方鸡单价高,其经济效益反而高于土杂鸡,经过综合比较,茶花鸡为最好,其次分别为武定鸡、盐津乌鸡,土杂鸡最差。另外,全价配合饲料、舍饲等条件下,几个地方鸡种生长速度都得到了较大的提高。     

仙居鸡与黄羽鸡杂交鸡的生长发育规律研究

以仙居鸡为母本,与国内优质黄羽鸡杂交,对其杂交1代(简称杂交鸡)与仙居鸡进行生长性能、饲料转化率和屠宰品质的比较.结果表明,90日龄平均日增重杂交鸡为14.41 g,仙居鸡为11.35 g,差异极显著;杂交鸡的饲料报酬和成活率均高于仙居鸡;屠宰性状中全净膛率杂交鸡为66.63%,仙居鸡为63.24%,差异也达极显著.     

浅谈肉鸡品质改善

介绍了改善肉鸡鸡肉品质的几种方法,探讨了怎样从饲料的角度来改善鸡肉品质.     

Molecular cloning of the chicken progesterone receptor

To define the functional domains of the progesterone receptor required for gene regulation, complementary DNA (cDNA) clones encoding the chicken progesterone receptor have been isolated from a chicken oviduct lambda gt11 cDNA expression library. Positive clones expressed antigenic determinants that cross-reacted with six monospecific antibodies derived from two independent sources. A 36-amino acid peptide sequence obtained by microsequencing of purified progesterone receptor was encoded by nucleotide sequences in the longest cDNA clone. Analysis of the amino acid sequence of the progesterone receptor deduced from the cDNA clones revealed a cysteine-rich region that was homologous to a region found in the estrogen and glucocorticoid receptors and to the avian erythroblastosis virus gag-erb-A fusion protein. Northern blot analysis with chicken progesterone receptor cDNA's indicated the existence of at least three messenger RNA species. These messages were found only in oviduct and could be induced by estrogens.     

珍禽贵妃鸡与三黄鸡肌肉品质比较研究

采集相同条件下饲养的贵妃鸡、三黄鸡的同侧胸肌、腿肌,分别测定并比较其肉质感官品质、常规化学组分和肌肉组织学指标,为贵妃鸡肉品质评价、育种及品种推广工作提供参考.结果显示,贵妃鸡的肌肉贮存损失、胸肌剪切力和肉色显著低于三黄鸡;贵妃鸡肌肉熟肉率、pH值、肌纤维密度、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量均高于三黄鸡,而腿肌和胸肌的肌纤维直径、水分含量、腹脂率和皮下脂厚均低于三黄鸡,但差异不显著.总体上比较,贵妃鸡的肉品质优于三黄鸡,但肉色在今后的改良中应该重点突破.     

浙江和上海地区生产及零售端鸡肉源沙门氏菌特性研究

对2016年7—10月采集自浙江和上海部分地区肉鸡屠宰端、零售端鸡肉样品及屠宰场环境样品中的沙门氏菌进行分离,研究102株分离株的血清型及其对常用抗生素的药敏性。使用世界卫生组织(world health organization,WHO)指定的泰国S&A公司沙门氏菌诊断血清,采用玻片凝集法确定沙门氏菌的血清型。使用临床实验室标准化委员会(clinical laboratory standard institute,CLSI)推荐的纸片扩散法测定沙门氏菌的药敏性。研究发现,204份样品中,85份检出沙门氏菌,阳性样品平均检出率为41.67%。脱羽、净膛、清洗、包装、整鸡和预冷检出率依次降低,而冷藏检出率回升到70.00%。102株沙门氏菌共涵盖15个血清型,以德尔卑沙门氏菌(Salmonella Derby,23.53%)、阿贡纳沙门氏菌(Salmonella Agona,17.65%)、印第安纳沙门氏菌(Salmonella Indiana,12.75%)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhimurium,11.76%)和达布沙门氏菌(Salmonella Dabou,7.84%)较为常见。屠宰端德尔卑沙门氏菌最为流行,零售端则主要为阿贡纳沙门氏菌。所有菌株对阿莫西林/克拉维酸和头孢西丁敏感,75株(73.53%)菌对四环素产生抗性;对氯霉素、氨苄西林、萘啶酮酸、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、链霉素、环丙沙星、头孢曲松、头孢哌酮、卡那霉素、庆大霉素和阿米卡星耐药的菌株比例分别为49.02%、41.18%、38.24%、37.25%、28.43%、23.53%、22.55%、22.55%、20.59%、19.61%和17.65%。零售端样品源沙门氏菌对大部分供试抗生素的抗性显著低于屠宰端和环境样品源沙门氏菌。102株菌中,97株(95.10%)可抗至少1种抗生素,17株(16.67%)可抗10种或10种以上的抗生素。不同地区采集的样品中,源于绍兴的样品沙门氏菌检出率最高(78.95%),且极显著高于湖州及上海地区的阳性样品检出率(P<0.01)。沙门氏菌阳性样品在不同月份的检出率存在极显著差异,9月份检出率最高(80.00%)。研究结果表明,在整个肉鸡生产消费链条中,沙门氏菌检出率、血清型和耐药率、耐药谱呈现明显的变化,即沙门氏菌不是单纯来源于该批次肉鸡携带菌,各环节固有存在和人员携带的菌株也加入了其中,造成终端产品的现状。本研究揭示了沙门氏菌在鸡肉产品中分布的状况和来源,为采取合理的干预措施,预防该省肉鸡生产全产业链中沙门氏菌的污染及耐药菌的出现、确保食品安全提供了相应的数据和理论支持。     

鸡瘦蛋白基因克隆中的若干问题研究

根据GenBank中鸡的LeptinmRNA序列(AccessionNo.AF012727)设计12对引物,用RT-PCR方法从不同品种(系)、不同时期及不同处理鸡的脂肪、肝脏和卵巢组织总RNA中没有扩增出鸡的Leptin基因片段;根据鸡的EST数据库中查到的一条鸡Leptin基因前体序列设计4对引物,用RT-PCR方法在包括卵巢在内的多个组织的cDNA中没能扩增出正确序列。为提高鸡Leptin基因的表达水平,通过给鸡注射胰岛素,利用RT-PCR方法对肝脏、卵巢和脂肪组织的总RNA进行扩增,没有得到目的序列。根据已发表的哺乳动物的Leptin基因序列设计兼并引物对鸡基因组DNA和脂肪、肝脏组织的cDNA进行PCR,结果没有特异性扩增条带,但在小鼠的基因组中可以获得稳定的扩增条带。用扩增长片段LATaq酶从鸡基因组DNA中也没有扩增出Leptin基因片段,而从小鼠的基因组DNA中,可扩增出小鼠Leptin基因片段;以小鼠LeptincDNA片段为探针,对鸡脂肪组织和肝脏组织来源的总RNA进行NorthernBlot分析,并未获得杂交信号;以猪的LeptincDNA片段为探针,对鸡基因组DNA进行SouthernBlot分析,并未获得特异性的结果。研究结果表明,在鸡的脂肪、肝脏和卵巢组织中不存在与小鼠Leptin基因同源性如此高的mRNA序列,在鸡的基因组中也不存在与小鼠、猪等哺乳动物Leptin基因序列同源性如此高的基因?     

Germline transmission of exogenous genes in the chicken

Difficulties associated with in vitro manipulation and culture of the early chicken embryo have restricted generation of transgenic chickens to approaches that use replication-competent retroviruses. The need to produce transgenic chickens in the absence of replicating virus prompted development of a new method of gene transfer into the chicken. Microinjection of the replication-defective reticuloendotheliosis virus (REV) vector ME111 beneath unincubated chicken embryo blastoderms results in infection of germline stem cells. This vector contains genetic information exogenous to the chicken genome, including both the herpes simplex virus type 1 thymidine kinase gene and the Tn5 neomycin phosphotransferase gene. About 8 percent of male birds hatched from injected embryos contained vector DNA in their semen. All four positive males tested passed vector sequences onto their progeny. Analysis of G1 offspring showed that gonads of G0 male birds were mosaic with respect to insertion of vector provirus. Thus, primordial germ cells present in the unincubated chicken embryo blastoderm are susceptible to infection by defective REV vectors.