超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽

利用食源蛋白制备具有抗氧化能力的天然活性肽是当前的研究热点。为了优化超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽工艺,本研究以茶渣为原料,以酶解液DPPH清除率为指标,在单因素逐级优化基础上,选定酶解pH值、温度、时间、加酶量进行4因素3水平正交试验设计和分析。结果表明,碱性蛋白酶较好,在p H值为7.5、温度50℃、时间20 min、加酶量为400 U/g、超声功率为105 W的优化条件下酶解,酶解液对DPPH清除率达为85.36%,比对照活性提高了为31.87%。可见,在本试验条件下低功率超声能有效提高碱性蛋白酶酶解茶渣蛋白效率,增加抗氧化活性肽得率,为开辟茶渣高值化利用的新途径提供实验依据。     

超声对酶解反应的影响

超声对酶解反应的影响与超声时间、温度、功率、频率等因素有关,适宜的超声可提高酶解反应速度,提高酶的活性,而施加超声时间过长、功率过大、超声的频率不合适等则会降低酶解反应速度甚至使酶失活。     

酶解猪皮胶原蛋白制备抗氧化产物的研究

以猪皮为原料,首先对猪皮胶原蛋白进行高温变性处理,再通过胃蛋白酶降解,用硫代巴比妥酸法(Thiobarbituric acid reactive substances assay,TBA法)评价酶解产物的抗氧化活性,并用SDS-PAGE电泳测定产物的分子量.结果表明,高温处理猪皮5 min,胃蛋白酶用量为底物的1.5%,酶解时间为0.5 h,酶解产物的抗氧化活性最强.但与抗坏血酸相比,酶解产物没有表现出还原能力.     

酶解法制备玉米蛋白抗氧化肽的工艺研究

我国为玉米种植大国,玉米年产量达2.5×10~8t。在食品行业中,玉米目前主要用来生产玉米淀粉和玉米油,而副产物玉米蛋白却被丢弃掉,造成蛋白资源的极大浪费。以玉米蛋白粉为原料,首先超声预处理玉米蛋白(超声功率500 W,超声时间10 min),然后以超声预处理过的玉米蛋白为原料,采用酶解法,以水解度及体外抗氧化活性为考查指标,通过单因素试验和正交试验优化酶解法制备玉米蛋白抗氧化肽的工艺参数。最终得到制备玉米蛋白抗氧化肽的最佳工艺参数为超声功率500 W,超声时间10 min,碱性蛋白酶[E]/[S]为10%,胰蛋白酶[E]/[S]为6%,酶解温度60℃,pH值9.0,酶解时间2 h。其中,酶解温度和pH值对玉米蛋白抗氧化肽的ABTS·清除活性影响最大。     

沙海蛰ACE抑制肽制备酶解条件研究

对用碱性蛋白酶酶解新鲜沙海蜇制备ACE抑制肽的酶解条件进行研究。先后以水解度(DH)和ACE抑制率为指标,经单因素试验和正交试验得到最佳的酶解条件为酶解温度50℃,加酶量5%,酶解起始pH值9.5。采用改进的高效液相色谱法测定ACE抑制率,发现新鲜沙海蜇在以上条件下酶解7 h时所得多肽的ACE抑制率最大。所得ACE抑制肽脱盐冻干后,测定质量浓度0.5 mg/mL时ACE抑制率为54.53%。最后,通过排阻色谱法测得其平均分子量约为500 Da。     

菌酶联合反应制备兔血抗氧化低聚肽

以兔血为原料,依次采用枯草芽孢杆菌发酵和碱性蛋白酶水解制备兔血抗氧化低聚肽,选取ABTS⁺·清除率和多肽含量作为评价指标,通过响应面试验优化发酵工艺和酶解工艺,确定最优发酵工艺参数和最优酶解工艺参数。结果表明,最优发酵工艺参数为:接菌量5.5 CFU/mL,底物浓度10 g/mL,发酵温度35℃,发酵时间3.5 d,此条件下,兔血低聚肽ABTS⁺·清除率为84.42%,多肽含量为2.84 mg/mL;最优酶解工艺参数为:酶底比200 U/g,酶解时间2.5 h,pH 10.4,酶解温度60℃,此条件下制备得到的兔血低聚肽的ABTS⁺·清除率为87.22%,与单一发酵工艺比较,差异不显著,而多肽含量为3.81 mg/mL,较单一发酵提高了1.34倍。综上,菌酶联合反应制备兔血抗氧化低聚肽法优于传统单一发酵法。     

微波预处理超声辅助酶解大豆秸秆条件优化

为提高油料作物秸秆酶解效率,对大豆秸秆进行微波预处理,然后进行超声辅助酶解。经扫描电镜分析,大豆秸秆的致密结构经微波预处理后,得以明显破坏,可以更利于为纤维素酶水解。采用正交实验对微波预处理条件进行优化,结果表明微波预处理大豆秸秆最优条件为：微波辐射功率400W,辐射时间40min,辐射温度60℃。经微波预处理、超声辅助酶解条件优化后,水解7 h 酶解率达到11.06%,与常规条件酶解48 h 的酶解率（11.77%）基本相当,酶解效率显著增加。     

杂色蛤酶解制备ACE抑制肽的工艺优化

杂色蛤酶解产物对ACE活性的抑制作用采用马尿酸法测定。以ACE抑制率和水解度为指标,通过单酶筛选,得出对杂色蛤肉酶解效果最佳的酶是木瓜蛋白酶。通过单因素试验和正交试验,确定木瓜蛋白酶酶解杂色蛤肉制备ACE抑制肽的最优工艺为料液比1∶10,加酶量1.5%,酶解温度45℃,p H值6.0,酶解时间1.5 h。酶解产物(10 mg/m L)对ACE的抑制率为86.7%,水解度为27.75%。酶解液经超滤,小于6 k Da部分(2 mg/m L)抑制率最高为52.3%,IC50为1.738 mg/m L。     

酶解鹰嘴豆蛋白制备ACE抑制肽的研究

ACE抑制肽对血压调节起重要作用,对抑制ACE活性发挥着重要作用。为开发降血压多肽,以鹰嘴豆分离蛋白为原料,在碱性蛋白酶作用下水解,选择温度、pH值、酶与底物浓度比和水解时间4个因素,以ACE抑制率为评价指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面分析法优化酶解鹰嘴豆分离蛋白制备ACE抑制肽的条件。结果表明,最优水解条件为:温度50℃,pH值8.0,酶底比4%,水解时间4.0 h,在此条件下,ACE抑制率可以达到58.84%,验证试验ACE抑制率为(59.01±0.58)%,与理论值相符合。     

Protamex酶解玉米蛋白质制备生物活性玉米肽的研究

利用Protamex蛋白酶控制玉米蛋白水解,制备有利于消化吸收,具有降血压和抗氧化等特定生理功能的玉米肽。适度变性的玉米蛋白易被Protamex蛋白酶水解,热处理的时间和温度均影响玉米蛋白的变性程度,经温度85℃热处理60min的玉米蛋白的水解度最大。相同的水解时间,在pH值为9.0,温度60℃时,该酶对变性玉米蛋白的水解度最大,在此条件下酶解60min,消耗NaOH（5mol/L）16.3mL,玉米的水解度为32.5%,肽的得率为51.2%。SephadexG-25对玉米蛋白水解产物的分离结果表明,Protamex蛋白酶水解玉米蛋白可生成分子量不同的5个组分。     

Protamex~酶解玉米蛋白质制备生物活性玉米肽的研究

利用Protamex~蛋白酶控制玉米蛋白水解,制备有利于消化吸收,具有降血压和抗氧化等特定生理功能的玉米肽。适度变性的玉米蛋白易被Protamex~蛋白酶水解,热处理的时间和温度均影响玉米蛋白的变性程度,经温度85℃热处理60min的玉米蛋白的水解度最大。相同的水解时间,在pH值为9.0,温度60℃时,该酶对变性玉米蛋白的水解度最大,在此条件下酶解60min,消耗NaOH(5mol/L)16.3mL,玉米的水解度为32.5%,肽的得率为51.2%。SephadexG-25对玉米蛋白水解产物的分离结果表明,Protamex~蛋白酶水解玉米蛋白可生成分子量不同的5个组分。     

酶量和酶解时间对玉米多孔淀粉制备效果的影响

选择玉米淀粉为材料,探讨糖化酶酶量和时间对多孔淀粉效果的影响。酶解时间为18,24,30 h,酶量分别为306.67,377.00,495.39,754.88,1 486.17,2 948.75 U/g;以吸水、吸油率为判定标准,结合电镜扫描和显微测量淀粉表面的孔数和孔径,得到最佳酶量和酶解时间分别为754.88 U/g和24 h,且单位多孔淀粉颗粒表面的平均孔数为44,孔径为1.64～1.76μm。其他条件相同,在最佳酶量下,吸水率和吸油率达到118.83%,98.47%;在最佳时间下,吸水率和吸油率达到119.45%,98.34%;吸水和吸油率均最高。     

山药抗性糊精的微波预处理-酶解制备及其性质研究

抗性糊精属于水溶性膳食纤维范畴,可以作为益生元添加到食品中。以山药淀粉为原料,通过微波预处理-酶解的方式制备山药抗性糊精,并对其溶解性、热性质、相对分子质量和体外消化性进行分析测定。结果表明,在山药淀粉经过微波功率60 W,微波时间6 min预处理后,再通过添加β-淀粉酶20 U/g,转苷酶35 U/g,在酶解温度75℃的条件下酶解时间20 min,可得到含量为40.33%的山药抗性糊精。该山药抗性糊精分子量约为4 000 Da,具有较好的溶解性和热稳定性,对人造胃液和小肠液具有很强的抗消化性能。该方法制备的山药抗性糊精分子量小、溶解性好、热稳定性高,适用软饮料的配制。     

复合菌共生发酵法酶解甘薯蛋白制备生物活性肽的研究

以甘薯蛋白为原料,采用复合菌共生发酵法制备生物活性肽。通过Sephadex G-25型色谱柱对发酵产物进行分离,并利用高效液相色谱法做进一步的分析验证,测定了产物的DPPH自由基清除能力及还原能力。结果表明,甘薯蛋白在枯草芽孢杆菌与黑曲霉比例1.5∶1.0,以10%的接种量在5%甘薯蛋白发酵培养基中发酵48 h后,可水解为具有一定DPPH自由基清除能力以及还原能力的小分子肽类物质。     

海马抗氧化活性肽制备工艺研究

旨在建立海马寡肽的制备工艺,探究寡肽的抗氧化活性。采用酶解法将海马原料制备成海马蛋白酶解肽,将游离氨基酸含量、DPPH·清除率及还原力作为考核指标,在获得制备海马酶解寡肽的最佳蛋白酶的基础上,选取酶添加量、pH、酶解温度及时间为因素,通过单因素和正交试验设计制备海马蛋白酶解肽,对其酶解工艺进行优化。最终获得海马抗氧化活性肽的最佳工艺条件为:风味蛋白酶添加量6000 U/g,酶解温度45℃,酶解时间9 h;在此工艺条件下,酶解产物的游离氨基酸含量为4.198 mg/m L,DPPH·清除率为92.758%,还原力为1.091。试验获得制备海马抗氧化活性肽最优酶解工艺,为进一步研发成保健食品提供坚实的基础。     

蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备及其纯化

以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化Alcalase酶解蚕蛹蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、DEAE-52纤维素柱层析,以及Sephadex G-50柱层析分离纯化蚕蛹蛋白抗氧化肽。试验结果表明,酶解液制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为:酶解温度30℃,pH值7.5,时间20min,底物质量分数3%,加酶量3.5%。Mr≤5ku时,组分有很强的体外抗氧化活性,从Mr≤5ku组分中获得了5个抗氧化肽组分,它们的体外抗氧化活性大小依次为:组分Ⅱ>组分Ⅲ>组分Ⅰ>组分Ⅴ>组分Ⅳ。     

固定化酶制备大豆肽的研究

应用固定化碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白,并对制备大豆肽的工艺条件进行正交试验,结果表明,应用固定化碱性蛋白酶制备大豆肽的最佳工艺条件的底物浓度为3.8 mg/mL、温度60℃、pH值为8.8、时间为3 h,制得的大豆肽的水解度为39.20%,可溶性蛋白溶解指数（NSI）为0.995 7.     

鸡血红蛋白抗氧化肽的制备工艺研究

以新鲜鸡血为原料,研究[E]/[S]、时间、温度和pH值对鸡血红蛋白抗氧化肽制备的影响,实验结果表明鸡血红蛋白抗氧化肽制备的最佳工艺条件为[E]／[S]3．0％、时间3h、温度41℃、pH值为1．5,此条件下制备的鸡血蛋白抗氧化肽的还原力最强为0．948。     

制备乳清抗氧化肽的水解条件优化

采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶3种酶对乳清蛋白进行酶水解试验,研究了不同酶解产物、水解时间、水解温度和pH值下的乳清抗氧化肽的水解度和TBARS值,确定了制备乳清抗氧化肽的最佳水解参数。结果表明,乳清蛋白水解物具有抗氧化活性,最佳复配条件是碱性蛋白酶的水解时间5 h,最佳水解温度为65℃,pH值8.5;胰蛋白酶的水解时间1 h,最佳水解温度为45℃,pH值8.0。当水解度达到32.28%时,乳清肽具有较强的抗氧化能力。