鳜鱼虹彩病毒病

正病原鳜鱼是我国名贵的经济鱼类,价格高,肉质鲜美,养殖面积一直比较稳定。近年来由病毒引起的鳜鱼虹彩病毒病发生趋于严重,病原主要是鳜传染性肝、肾坏死病毒。临床症状感染虹彩病毒的鳜鱼:体表症状不明显或者口腔周围、鳃盖、鳍条基部、尾柄处充血。有的病鱼眼球突出,     

“一种大鲵虹彩病毒LAMP检测试剂盒及检测方法”获国家发明专利授权

<正>日前,由中国水产科学研究院长江水产研究所申请的"一种大鲵虹彩病毒LAMP检测试剂盒及检测方法"获国家发明专利授权。发明人为曾令兵、孟彦、徐进、张辉、周勇、范玉顶。大鲵虹彩病毒(GSIV)是目前感染我国人工养殖大鲵的唯一病毒病原,其致死率高、传染性强,严重威胁着我国大鲵养殖业的健康可持续发展。     

中国大菱鲆虹彩病毒主要衣壳蛋白基因的PCR扩增及序列分析

应用同源PCR技术，从被一种球状病毒感染的患病大菱鲆（Scophthalmus maximus）脾脏和肾脏组织中扩增出了一段长度为620bp的DNA片断。序列测定和Blast分析表明，该DNA片断与鱼类虹彩病毒主要衣壳蛋白（MCP）C末端编码区的DNA序列高度相似，由此证实感染养殖大菱鲆的这种球状病毒为一种鱼类虹彩病毒，暂命名为大菱鲆红体病虹彩病毒（TRBIV）。多序列比对和分析发现，TRBIV MCP C末端的205个氨基酸序列与GenBank中20种虹彩病毒相应序列的相似性分别为99．47％（韩国大菱鲆虹彩病毒）、97％～98％（待指定病毒属的7种病毒），以及50％以下（蛙病毒属、淋巴囊肿病毒属、虹彩病毒属的12种病毒），由此绘制出了包含TRBIV在内的21种虹彩病毒的系统发育树。研究结果表明，感染中国养殖大菱鲆的TRBIV属于虹彩病毒科待指定病毒属，位于该属ISKNV亚群和RSIV亚群之间，是该病毒属的一个新成员。     

鳜鱼脾肾坏死病毒功能基因研究

鳜鱼脾肾坏死病毒（ISKNV）是引起养殖鳜鱼大量死亡的传染性疾病的病原体,经研究证实其为虹彩病毒科中的一种.概括了近年国内外有关鳜鱼脾肾坏死病毒分子生物学的研究进展,重点论述了病毒功能基因及调控的相关研究,同时介绍了目前采用的几种特异的病毒检测方法,并指出其各自的优缺点.     

蛙虹彩病毒巢式 PCR检测方法的建立

蛙虹彩病毒属(Ranavirus)病毒宿主广泛,可以感染爬行类、鱼类和两栖类,大部分病毒对宿主都有较强的致病性和致死性.为建立一种快速高效的蛙虹彩病毒的检测方法,本研究利用中华鳖虹彩病毒(soft-shelled Turtle Iridovirus,STIV)核衣壳蛋白(Major Capsid Protein,MCP)基因保守区设计内引物和外引物,建立了特异性检测流行性造血器官坏死病毒(Epizootic Haematopoietic Necrosis Virus,EHNV)、中华鳖虹彩病毒和虎纹蛙虹彩病毒(Tiger Frog Virus,TFV)的巢式PCR(巢式PCR)检测方法,并制备了重组质粒pGem-T-S作为阳性对照标准品.检测限试验结果显示,该方法可以检测102拷贝的病毒粒子.而且与传染性造血器官坏死病毒、鲤春病毒、病毒性出血性败血症病毒、斑点叉尾(鱼回)病毒、传染性胰脏坏死病毒、真鲷虹彩病毒、牙鲆弹状病毒以及锦鲤疱疹病毒等其他非蛙虹彩病毒无交叉反应.该体系具有简便、快速、敏感、特异性高、低成本等特点,为诊断与预防蛙虹彩病毒提供了一项重要的技术手段.     

鳜脑组织细胞系的建立及其病毒敏感性研究

鱼类细胞是开展鱼类病毒分离鉴定、功能基因分析以及生物制品制备等研究的重要物质基础。鳜(Siniperca chuatsi)是深受养殖者和消费者欢迎的养殖品种。随着鳜鱼养殖产量的逐年增加,其病害问题尤其是病毒病问题也日趋严重,但是,可用于鳜鱼病毒分离和基因功能分析的鳜细胞系缺乏。本研究采用组织块消化法,对来源鳜脑组织的细胞进行原代培养,建立了鳜脑组织细胞系,命名为MFB。MFB细胞在28℃含10%胎牛血清的L-15中已稳定传代超过70次,第25代鳜脑组织细胞的染色体众数为56。采用免疫荧光细胞化学技术(β-tubulin和Neu-N)鉴定MFB细胞的神经元纯度,结果显示,培养的MFB细胞为神经元类细胞。病毒敏感性实验结果显示,鳜蛙虹彩病毒(MFRaIV)、大口黑鲈蛙虹彩病毒(LMBRaIV)和大鲵虹彩病毒(GSIV)均可在MFB细胞中产生典型细胞病变效应,病毒滴度分别为108.68±0.12、108.36±0.15、1010.15±1.85 TCID50/mL。使用脂质体Lipofectamine®2000将pEGFP-N1转入MFB细胞,转染效率可达20%。本研究建立的鳜脑组织细胞系不仅对多种蛙虹彩病毒敏感,而且转染质粒效率较高,为鳜病毒性病原的分离及基因功能研究奠定了前期基础。     

一株大黄鱼虹彩病毒的分离鉴定及多克隆抗体的制备

2021年7月,浙江省象山某养殖场养殖的大黄鱼（Larimichthys crocea）出现类似大黄鱼虹彩病毒引起的疾病。采用鲤上皮瘤细胞培养和病毒主要衣壳蛋白测序分析的方法,从患病的大黄鱼中分离到一株病毒。该病毒接种到鲤上皮瘤细胞（EPC）后出现空斑、脱落的细胞病变症状。根据虹彩病毒MCP和ATPase基因保守序列设计特异性引物对病毒组织样本进行PCR扩增,得到分别为1 367 bp和740 bp的目的基因片段。将MCP基因扩增片段测序,经BLAST对比及系统发育树聚类分析,确定该分离的病毒属虹彩病毒科细胞肿大病毒属。通过蔗糖密度梯度离心纯化,用透射电镜观察该病毒粒子呈正六边形,直径为120～150 nm。用纯化病毒作为抗原免疫小鼠获得抗大黄鱼虹彩病毒的多克隆抗体,效价为1∶7 000;通过SDS-PAGE和Western blotting初步确定3个免疫蛋白。本研究为大黄鱼虹彩病毒纯化提供一种新方法,并初步分离出免疫蛋白,为该病毒相关分子生物学研究、蛋白研究以及疫苗制备等提供理论依据。     

鳜鱼病毒性败血症综合预防措施

鳜鱼(Mandarin Fish)又名桂花鱼,在广东珠三角地区的主要养殖品种,因其肉质鲜美、细嫩,很受消费者欢迎.目前在全国各地均有推广养殖,使很多养殖户都尝到养殖鳜鱼致富的甜头.在佛山市南海区鳜鱼养殖面积鼎盛时期达40000多亩,占全区养殖面积的25%.但随着品种的退化、养殖密度的提高、生态水环境的恶化、气候异常、对鱼药的使用不规范等因素,自1994年起,鳜鱼的病害变得多而难治,大批养殖户蒙受极大的损失,甚至血本无归,整个养殖业受到严重的打击.1996年南海区水产技术推广总站与中山大学生命科学学院联合对鳜鱼暴发性病进行深入研究,发现了病原体是虹彩病毒(暂命名ISKNV),并对该病毒的致病原理、流行情况、传播途径等作了更细致的研究,为对该病的防治提供了理论依据.我们根据这理论依据和实际情况,在全区进行推广应用,至今效果甚好.……     

两种检测方法对高邮地区常见病毒病的比较

<正>鲫造血器官坏死病毒(CYH-2)、鳜鱼虹彩病毒(ISKNV)和白斑综合征病毒(WSSV)是危害高邮市水产养殖生产的三种重要病毒,严重制约我市水产养殖健康发展,目前常用的检测方法为聚合酶链式反应(PCR),此检测方法精确性较高,但用时较长。为了更好地服务于养殖生产,更快速、方便地检测这三种病毒,试验采用恒温荧光PCR仪快速检测方法进行检测,并用聚合酶链式反应(PCR)进     

鳜鱼池套养罗氏沼虾技术总结

<正>近年来,随着鳜鱼养殖业的迅猛发展,鳜鱼养殖规模逐步扩大,苗种放养密度越来越高,水产病害频发,养殖风险迅速增加,严重限制了鳜鱼养殖业的健康发展。为了探索鳜鱼健康养殖新模式,2016年江苏省扬州市江都区渌洋湖水产养殖场鳜鱼养殖户樊荣社在江苏省水产三新工程项目"鳜鱼池套养罗氏沼虾模式研究与示范"的支持下开展了鳜鱼池套养罗氏沼虾模式试验与示范,实现产值171080元,亩纯效益6522.5元,套     

养殖银鲳虹彩病毒感染的组织病理学分析及分子检测

2018年7月,宁波象山某养殖场内银鲳出现集中死亡现象,累积死亡率高达80%以上,为探究此次疾病暴发的原因,本研究通过对患病银鲳进行组织病理学分析、透射电镜观察、病原的分子生物学检测及分析来对其病原进行鉴定,以便制定合理的防控措施。患病银鲳临床表现为厌食、身体失衡、脾脏肿大、肝脏颜色异常等病征。组织病理学观察发现,患病银鲳肝脏、脾脏和肾脏均出现直径10～15μm、细胞质嗜碱性的肿大细胞。进一步的透射电镜观察则在脾脏、肾脏等组织细胞内发现了病毒包涵体结构以及大量的病毒粒子,直径为140～160 nm。通过虹彩病毒特异性PCR检测发现,患病组织样品为虹彩病毒阳性。此外,通过病毒主要衣壳蛋白基因(MCP)序列分析,发现银鲳源病毒与大黄鱼虹彩病毒(GenBank登录号:AY779031.1)MCP同源性最高为99.76%,认为此分离病毒属于虹彩病毒科、肿大细胞病毒属、真鲷虹彩病毒(Red sea bream iridovirus, RSIV)类群。本实验首次报道了全人工养殖环境下银鲳感染虹彩病毒的病例,该研究将为养殖银鲳虹彩病毒病的诊断和防治提供重要的参考依据。     

十足目虹彩病毒1的研究进展

虾虹彩病毒病是一种感染甲壳类的急性、传染性疾病,其病原为虹彩病毒科的一个新属即十足目虹彩病毒属的十足目虹彩病毒1 (Decapod iridescent virus 1,DIV1)。DIV1传播速率快、宿主范围广、致死率高,近年来在对虾养殖过程中广泛流行,给我国对虾养殖业造成巨大经济损失。目前,对DIV1引发的虾虹彩病毒病的病原学、病理学、流行病学、检测诊断等方面已开展了部分研究,但对病毒感染的分子机制、宿主的应答规律等还知之甚少。本文对DIV1的发现过程、分类地位、形态特征、感染特性、机体响应机制、基因组信息、宿主范围、传播途径及检测方法等方面的最新研究进展进行了综述,阐述了疾病防控及未来展望,以期为虾虹彩病毒病的深入研究及有效防控提供参考。     

虎纹蛙病毒主要衣壳蛋白基因的克隆及其序列

从新分离感染虎纹蛙的病毒培养细胞中提取病毒DNA作模板，用分别对应于蛙病毒－3型（FV3）主要衣壳蛋白（Major Capsid Protein,MCP）基因读码框两侧的寡核苷酸片段作引物进行PCR扩增，得到预期大小基因片段，进一步将此基因片段插入到pGEM-T载体中，进行全长片段的序列测定和分析。结果表明，编码虎纹蛙病毒的MCP基因的读码框核苷酸数为1392bp，编码463个氨基酸；基因的核苷酸序列与其他脊椎动物虹彩病毒的MCP基因序列比较结果显示，该病毒与蛙病毒属的FV3的同源性（98％)明显高于囊肿病毒属的FLDV－1（52％），并且与虹彩病毒科其他成员的MCP基因序列均有所不同，说明该病毒株是虹彩病毒科蛙病毒属的新成员。     

金鸡湖网箱养鳜技术

鳜（Ｓｉｎｉｐｅｒｃａｃｈｕａｔｓｉ）属鲈形目　科鳜属。它营养价值高,生长快．是名贵经济鱼类。随看人工育苗规模生产的形成,苗种供应充沛,促进了养殖业的发展。网箱养鳜生长快、捕捞方便．相较池塘养殖有明显优势。由于鳜鱼终身摄食活饵料,提供足够的饵料鱼是养鳜成功的关键。近年来金鸡湖利用一部分野杂鱼．加上网箱培育鲤鱼种作为鳜鱼配套饵料进行规模养殖,年产鳜鱼５０００公斤、创造了良好的经济效益。１材料与方法１．１网箱与环境养殖用网箱有三种：面积４０ｍ２／只用密眼网布制作用于培育鳜鱼种（１２ｃｍ）;２０ｍ２／…     

鳜鱼暴发性病毒传染病防治技术

<正>鳜鱼暴发性病毒传染病是一种以脾、肾坏死为主要病理特征的病毒性疾病,其主要病原是鳜传染性脾肾坏死病毒。该病可引起鳜集中爆发性死亡,死亡率高达90%,给鳜养殖业带来严重危害。目前,尚无针对该病的特效药物或治疗措施,本文介绍了在实际生产中如何防治此病。     

扬州地区鳜鱼池塘精养的调查分析

正鳜鱼又名桂花鱼、季花鱼,隶属鲈形目、鮨科、鳜属,是淡水名贵鱼类。扬州地区的鳜鱼养殖起步于上世纪90年代,但因长期局限于低密度混(套)养而在当地被列为"小品种"。近年来,随着养殖产业结构不断调整,扬州地区鳜鱼养殖发展迅猛,其精养规模已居全省各地区的前列。为了解扬州鳜鱼养殖产业的现状和存在问题,促进鳜鱼养殖业可持续发展,2015年初我们在高邮、江都和宝应开展了专项调查,本文为这次调查中鳜     

EM菌在池塘鲮鱼养殖中的应用试验分析

<正>EM菌(Effective Microorganisms)中文译为有益微生物菌群,其主要成分为酵母菌、乳酸菌、放线菌及发酵性丝状真菌等80多个菌种,已推广应用于农业、畜牧业、养殖业、环境净化等方面[1-3]。鲮鱼(Cirrhinus molitorella),属鲤形目、鲤科、鲮属,其体形修长,鳍条柔软,具有食性杂,抗病力强,产量高等特点,是鳜鱼理想的饲料鱼[4]。2010年至今,笔者所在单位组织实施了"鳜鱼生态高效养殖试验示     

大口黑鲈病毒性溃疡病病原的分离和鉴定

对广东省佛山地区2008年夏季高温时期暴发的大口黑鲈溃疡病的病原进行分离,从患病鱼的病灶肌肉组织中分离到5株嗜水气单胞菌,人工感染健康大口黑鲈,均未出现溃疡暴发病的典型症状病鱼体表大片溃烂,裸露肌肉坏死并有出血,尾鳍、胸鳍和背鳍基部红肿溃烂。制备病灶肌肉组织的除菌过滤液,背部肌肉注射感染健康大口黑鲈,7 d后出现典型的溃疡病症状。取自然发病鱼和人工感染的患病鱼病灶肌肉组织制作超薄切片,经电镜观察,均发现组织中有大量病毒颗粒,病毒粒子有囊膜,呈六角形,为正20面体对称结构,大小约为145.5 nm。根据已知虹彩病毒主要衣壳蛋白（MCP）基因序列设计特异引物,提取人工感染发病鱼病灶肌肉组织的DNA进行PCR扩增,将扩增片段进行序列测定与分析,结果表明该序列与已报道的虹彩病毒MCP基因有着较高同源性（39.5％～100％）。从电镜观察和MCP基因测序分析结果确认该病毒为虹彩病毒科蛙病毒属中的一种病毒,与国外报道的大口黑鲈病毒（LMBV）在分子特性和引起的疾病特征上有一定差异。研究结果表明引起大口黑鲈溃疡性暴发病的病原是虹彩病毒,将该病暂命名为大口黑鲈病毒性溃疡病。     

大口黑鲈肝脾肿大病病原研究

为了查明2009年10月广东省佛山地区养殖大口黑鲈(Micropterus salmoides)中暴发的传染性疾病的病原,对病鱼的肝脏、脾脏和腹隔膜进行切片电镜观察,发现细胞质中有大量病毒颗粒,切面为六角形,直径约145～150 nm,病毒为二十面体对称结构、无囊膜、似虹彩病毒的病毒粒子.用除菌的病鱼组织滤液感染健康大口黑鲈,被感染鱼死亡率达90%以上.根据已知虹彩病毒主要衣壳蛋白(MCP)基因序列设计特异引物,提取人工感染发病鱼的肝脏、脾脏、肾脏组织的DNA进行PCR扩增,将扩增片段进行序列测定与分析,结果表明该序列与已报道的鳜(Siniperca chuatsi)传染性脾肾坏死病毒(Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus,ISKNV)MCP基因同源性为98%.电镜观察和MCP基因测序分析结果显示,该病毒的分类地位为虹彩病毒科(Iridoviridae)细胞肿大病毒属(Megalocytivirus).     

翘嘴鳜“华康1号”

正鳜鱼又名桂花鱼、季花鱼等,是淡水鱼类中的名贵鱼类,肉质纯白细嫩,味道鲜美可口。鳜鱼在我国养殖已有三十几年历史,养殖主要品种有大眼鳜、翘嘴鳜、斑鳜等,其中以翘嘴鳜养殖最为普遍,养殖效果最好。近年,鳜鱼养殖业面临的主要问题是养殖水源污染严重以及病害频发。在广东地区,自从1993年以来,每年5~10月都有鳜鱼疾病流行;其中1996~1998年间爆发鳜鱼传染性脾肾坏死病毒病,给养殖业带来了巨大的经济损失,严重阻碍了鳜鱼养殖业的正常发