中国对虾孵子激活过程的形态学研究

报道了对中国对虾孵子激活反应的形态学研究。中国对虾孵了皮层中有由卵黄膜下陷形成的与卵表垂直的皮层囊,内有棒状结构称棒状周边体,其内物质为凝胶前体。对虾孵子的激活并不需要精子的发动,而是在卵子与海水接触后即开始进行。在孵了激活过程中,棒状周边体向外放出形成花冠状的凝胶层,然后从基部开始逐渐消失并向远端扩展,最后完全消失 ,同时卵子进行成熟分裂放出第一,第二极体,并举起受精膜,完成激活反应。还对中国对     

中国对虾精子入卵过程的观察

利用光镜和电镜对中国对虾精子入卵过程进行了观察。结果表明，精子的核物质籍胞吐作用穿过卵黄膜到达卵膜，其余部分则留在卵黄膜外。只有在卵子激活前到达卵膜的精子才能参与受精作用，其余的精子将被卵子激活所形成的胶质层推离卵子。中国对虾精子激活过程，没有发现顶体丝的形成。精子的入卵开始于卵子的皮层反应后期，此时精卵的接触逐渐密切，首先接触部位的卵膜稍有突起，然后开始下陷，同时这一部位的卵膜变得粗糙不平，随后卵膜解体，精子由此进入卵子。中国对虾精子的入卵位置是随机的，有多精入卵的现象。     

中国对虾受精过程的细胞学研究

通过光镜和电镜切片技术,对中国对虾的受挤过程进行了观察。结果表明,中国对虾成熟卵子处于第1次成熟分裂前期,卵子激活后产生胶质层,精子在卵子的诱导下产生顶体反应后进入卵子。中国对虾为多精入卵、单精受精。精子入卵后,卵子完成成熟分裂并举起围卵膜,但精子的存在并非此过程所必需。在卵子进行第1次成熟分裂时,其纺锤体旋转90°。卵子完成成熟分裂后,精卵原核原核化并向卵子中央移动,最后,精卵原核结合形成合子核,卵子完成受挤过程。     

锯缘青蟹卵膜变化与卵子附着研究

利用光镜和电镜观察了锯缘青蟹成熟卵及其受精后卵膜变化和卵子附着特征。锯缘青蟹成熟卵子卵膜有三层即外层、内层和质膜。卵子产出后,无论受精与否,外层和内层卵黄膜形成壳膜,与卵子附着有关。刚产出的卵子卵膜具有溶胶性和延展性,卵子与刚毛表面之间或卵子之间接触便粘在一起,由于刚毛摆动和卵子的重力作用,形成卵柄或卵索。卵子受精后,发生皮层反应形成受精膜。由壳膜和受精膜构成的孵化膜为初级卵膜,保护胚胎发育,直至     

中国对虾产卵前后卵巢的形态和结构变化

采用解剖和组织切片等方法研究了中国对虾产卵前后其卵巢的结构变化,排卵以及卵子遇海水后的激活情况。对虾卵巢可分为头前叶,侧叶和由腹部端向后延伸至尾节并于末端愈合的腹叶。     

栉孔扇贝（♀）×虾夷扇贝（♂）精子入卵过程的电镜观察

采用扫描电镜和透射电镜技术对栉孔扇贝(Chlamys farreri,)×虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis,)的精子入卵过程进行观察。结果表明,这2种扇贝杂交与亲本自交的精子入卵过程没有本质的区别。成熟的精卵相遇时,相互激活,产生一系列胞间反应,卵子的激活集中表现为皮层反应、受精膜举起、成熟分裂重新启动;精子激活集中表现为顶体反应和受精锥形成。在16～18℃条件下,精子入卵的时间集中在精卵混合后的第6 min。8 min后,精子的线粒体随精核一起进入卵子中。精子入卵后精核略微膨胀,卵细胞中的线粒体在精核附近出现聚集现象。杂交中有多精入卵现象。本研究目的旨为优化扇贝种间杂交技术及探讨种间受精生物学过程提供基础依据。     

拟穴青蟹受精膜形成过程中线粒体的变化及功能

采用透射电子显微镜研究了拟穴青蟹受精膜形成过程中线粒体的变化及其功能。结果显示,大量线粒体首先高度密集于即将发生胞吐的皮质中;随着胞吐的发生,线粒体也随之快速分散到皮层反应部位,线粒体通过分裂、出芽等方式而迅速增多,内质中的线粒体大量向皮质迁移,参与皮层反应;当受精膜开始举起时,线粒体多聚集在新质膜下,参与新质膜的修复和形成;受精膜完全举起后,皮质中的线粒体迅速减少。线粒体在形态、数量及分布等方面的变化,能够反映受精膜形成不同阶段生理活动的旺盛程度以及需能情况,并从细胞水平阐释受精膜形成机制。     

拟穴青蟹受精膜形成过程中环形颗粒的发生与胞吐

为了揭示拟穴青蟹受精膜形成机制,采用透射电子显微镜研究了其受精膜形成过程中环形颗粒的形成与胞吐。结果显示,拟穴青蟹精子入卵后,发生皮层反应而形成受精膜。皮层反应包括致密颗粒首先胞吐以及环形颗粒的相继多轮胞吐。每轮环形颗粒的胞吐参与到受精膜的平缓期、增厚期和举起期3个阶段。环形颗粒的形成主要发生在受精膜的增厚期,受精卵的皮层和靠近皮层的内质中都在形成大量的环形颗粒,并且迅速移至皮层质膜附近发生爆发性胞吐,参与到受精膜的快速形成中。环形颗粒的形成与2种卵黄颗粒以及脂滴密切相关,在皮层中发现了线粒体参与其中,推测在拟穴青蟹受精卵的皮层和内质中可能存在环形颗粒合成的两套不同机制。研究表明,卵黄颗粒、脂滴及环形颗粒在拟穴青蟹受精膜形成过程中发挥重要作用。     

四川华鳊卵子发生的显微结构观察

为探究四川华鳊(Sinibrama taeniatus)卵子的发生规律,对其卵子发生进行了显微结构观察和描述。将卵子发生分为卵原细胞(Ⅰ时相)、单层滤泡时相(Ⅱ时相)、卵黄泡出现时相(Ⅲ时相)、卵黄充满时相(Ⅳ时相)和成熟卵子(Ⅴ时相) 5个时相。观察发现,四川华鳊卵原细胞存在2种形态,分别为早期卵原细胞和有丝分裂过程中的卵原细胞;同时将早期初级卵母细胞划入Ⅱ时相,此阶段细胞核膜边缘出现多个小核仁,将其作为小生长期开始的标志;Ⅲ时相卵黄泡出现,当卵黄泡积累至3～5层时,卵黄物质即开始积累,此时多以卵黄颗粒的形式存在;进入Ⅳ时相后,卵黄物质沉积形成卵黄小板,卵黄泡被挤压至卵周,形成皮层小泡,卵子成熟后,原皮层小泡所在区域呈块状或颗粒状,经苏木精-伊红(HE)染色后呈橘红色。     

渤海湾对虾产卵场调查

1964—1981年每年5—6月在渤海对虾的主要产卵场渤海湾连续进行了大面积调查。用9XX 周弟网垂直拖取对虾卵子、幼体定量标本,同时观测水温、盐度和饵料生物(微型浮游植物)等,研究对虾卵子、幼体数量分布和变动规律及其与外界环境条件的关系。渤海湾对虾产卵期一般从5月初到6月初持续一个月左右的时间。开始产卵时间的年间变化较大,与对虾性腺发育状况和5月份产卵场水温的高低有关。产卵期的底层水温为13—23℃。对虾产卵场卵子、幼体数量分布的年间变化较大,中心产卵场位于渤海湾水深3—10米,幼体的饵料生物密集在低盐度的海区,适盐范围为23—29‰。卵子、幼体悬浮在整个水体中,定点取样观察表明,卵子、幼体的数量随潮汐的周期性涨落而变动。卵子、幼体数量变动与产卵场产卵亲虾和饵料生物的数量以及平均盐度显著相关。渤海湾对虾世代补充量即幼对虾的相对数量与卵子、幼体数量变动无关。     

凡纳滨对虾卵子发生的超微结构

利用透射电镜研究凡纳滨对虾卵子发生过程中细胞内部结构的变化。结果显示,卵原细胞结构简单,代谢水平低,核孔稀少,通过核周池来完成核、质之间的物质交换。卵黄发生前晚期和卵黄发生初期的卵母细胞变化显著：核膜凹凸不平,核仁数量多,核孔密集,大量核仁外排物经核孔输送到卵质中;卵质中胞器极为丰富和发达,代谢活性极强。卵黄发生旺盛期是卵黄大量形成的阶段,卵质边缘还呈辐射状排列了一圈椭圆形皮质棒,细胞出现微吞饮活动并形成卵黄膜。卵黄发生晚期卵质中充满了粗大的卵黄粒和脂滴,胞器锐减。另外,探讨了卵细胞内部结构的变化和卯黄形成的关系以及皮质棒的来源与功能。     

Histological examination of final oocyte maturation and atresia in wild and domesticated Penaeus monodon (Fabricius) broodstock

Oocyte maturation and gonadosomatic index (GSI) of eyestalk ablated Penaeus monodon females collected from the wild and from two first‐generation domesticated lines were assessed. Frequency and diameter of the different oocytes, and the intensity of oocyte atresia, were compared among groups through histological assessments of the sections of the middle ovarian lobe. Digitized images from ovary sections were used to record the frequency and diameter of different oocyte types. Spawning performance of the three groups were expressed in terms of the percentage of females that spawned at least once (productive females), time from eyestalk ablation to first spawning (latency period) and the number of spawnings per female stocked. Final ovarian maturation was attained in all groups, as indicated by the presence of mature oocytes with cortical rods (cortical oocytes), dark‐green ovarian colour and high GSI values (5.83–6.86%). However, domesticated groups presented significant larger immature oocyte types (previtellogenic and yolky oocytes) and smaller cortical oocytes compared with wild females, indicating a reduced vitellogenic activity during final oocyte maturation. Additionally, the frequency of atresia was comparatively higher for both domesticated groups, which could be related to their inferior spawning performance. The implications of these results on the reproductive potential and development of domesticated P. monodon are discussed.     

中国对虾杆状病毒垂直传播途径的初步探讨

中国对虾杆状病毒垂直传播途径的研究对切断病毒的传播途径,培育健康的对虾种质资源,具有重要的理论和实践意义。本文利用电镜技术,对中国对虾亲虾的卵巢,卵细胞和无节幼体,溲状幼体,糠虾,仔虾,幼成虾进行病毒检测,结果发现卵巢和卵细胞中有似病毒粒子,无节幼体,糠虾,仔虾,幼成虾有杆状病毒感染,并初步探讨了中国对虾杆状病毒垂直传播的可能性。     

中国对虾败血病病原菌（气单胞菌）的致病性与生物学性状

本文从患败血病的中国对虾的血淋巴中分离到嗜水气单胞菌和豚鼠气单胞菌，经人工感染试验证实为此败血病的病原菌。两种病原菌均为革兰氏阴性，极生单鞭毛能运动的短杆菌，在ＴＣＢＳ上不生长，对０／１２９不敏感，在不含ＮａＣｌ的基础培养基能生长。氧化酶，过氧化氢酶阳性，利用蔗糖，麦芽糖和淀粉产酸不产气，利用果糖，甘露醇，半乳糖和密二糖产酸产气，不发酵乳糖，肌醇，山梨醇，木糖，蕈糖等，精氨酸水解，色氨酸脱氨阳性。     

中国对虾（Penaeus chinensis）精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测 １０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在 １％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

Annual reproductive cycle of the greasyback shrimp Metapenaeus ensis in Ise Bay,Japan

The greasyback shrimp Metapenaeus ensis is widely distributed along the coast of India and the West Pacific where it is an important fisheries species. We have examined seasonal changes in ovarian development, spermatogenesis, and mating of Me. ensis in histological studies and by external observations on specimens collected in Ise Bay, its northernmost habitat. Ovaries were found to be previtellogenic from February to May, with the first signs of development being the accumulation of yolk in oocytes in late May. Ovarian shadow ratios were high during the period late July to mid-September. The formation of cortical rods in the peripheries of oocytes and germinal vesicle breakdown were observed in ovaries from late June to September. Male shrimps had sperm in the testes during the period early June to early October, and female shrimps had spermatophores in spermatheca after early July. In late July, some post-spawn female shrimps had exogenous vitellogenic oocytes in their ovaries, indicating that ovarian development had been repeated in preparation for the next spawning. Ovarian shadow ratios, which were positively correlated with gonadosomatic indices and ovarian development, seem to be a useful marker to determine ovarian development. Our results indicate that mating in Me. ensis started in early July and that the spawning season ranged from July to September with more than two cycles of spawning in Ise Bay.

     

太平洋牡蛎二倍体和三倍体卵母细胞发育的超微结构

本文利用电子显微镜比较研究了太平洋牡蛎二倍体和三倍体卵母细胞发育过程中细胞和各细胞器的超微结构变化。结果表明,在卵黄形成期,二倍体卵母细胞呈椭圆形,细胞器发达,细胞外布满微绒毛,卵黄粒多并均匀分布于细胞质中,卵母细胞生物合成旺盛,代谢活动强;而三倍体卵母细胞呈长条形或不规则形,细胞器少,不发达,细胞外未观察到微绒毛,卵黄粒少,有些细胞的卵黄粒畸形,卵母细胞生物合成及代谢弱。     

中国对虾人工受精技术的研究

首次探讨了中国对虾人工受精的方法。干法、湿法、半湿法和滴管法都可获得一定比例的受精卵,其中滴管法的受精效果最佳,最高受精率为77.8％。受精卵经过培养,能够进行正常的卵裂和胚胎发育。通过对这几种方法受精效果的分析和比较,认为,在精卵未丧失受精能力的前提下,尽可能地使精卵充分混合,才能得到较高的受精率。还对这四种方法的人工受精和自然受精对受精率的影响进行了比较和分析。     

显微注射生长激素基因导入中国对虾（Penaeus chinensis）受精卵的研究

本实验采用显微微量注射方法，交羊生长激素基因导入中轻地虾受精卵，受精卵发育到蚤状幼体第三期后采样检测。ＰＣＲ检测结果表明：７个样品共９３尾幼体，有３个样品呈出阳性信号，基因转移比率至少在３％以上。同时斑点杂交结果也证明有两个明显阳性斑点。