应用鸡胚法氏囊原代细胞培养鸡IBDV的研究

试用鸡胚法氏囊奈代细胞传代，增殖鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），均不同程度地产生特征性细胞病变效应，采用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ和细胞毒回归鸡试验证实，ＩＢＤＶＨ株组织感毒适应于鸡胚法氏囊细胞，并随传代次数增加，病毒增殖能力增强，而在鸡胚成纤维细胞上盲传２代之后才开始出现细胞病变效应，比较了ＩＢＤＶ在鸡胚法氏囊细胞和鸡胚成纤维细胞上增殖能力的差异，讨论了培养基ＰＨ值，小牛血清浓度对鸡胚法氏囊细胞培     

应用鸡胚法氏囊原代细胞培养鸡IBDV的研究

试用鸡胚法氏囊原代细胞传代、增殖鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），均不同程度地产生特征性细胞病变效应。采用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ和细胞毒回归鸡试验证实，ＩＢＤ－ＶＨ株组织毒适应于鸡胚法氏囊细胞，并随传代次数增加，病毒增殖能力增强；而在鸡胚成纤维细胞上盲传２代之后才开始出现细胞病变效应。比较了ＩＢＤＶ在鸡胚法氏囊细胞和鸡胚成纤维细胞上增殖能力的差异，讨论了培养基ＰＨ值、小牛血清浓度对鸡胚法氏囊细胞培养及病毒增殖的影响。     

传染性法氏囊病超强毒致弱株的一些特性

某些传染性法氏囊病强毒株（ＨＶ－ＩＢＤＶ）通过鸡胚连续传代适应于鸡胚，鸡胚适应的ＨＶ－ＩＢＤＶ成功地在鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞上生长，表现致细胞病变作用，鸡胚－细胞适应株对实验感染雏鸡的致病性大大降低，无一只死亡，法氏囊病变与标准株的相似，交叉病毒中和试验表明，细胞培养适应与标准株的抗原性有差异，免疫学试验表明，适应株免疫鸡后，对ＨＶ－ＩＢＤＶ强毒感染有很好保护作用，特别是免疫接种后３天攻强毒，适     

鸡传染性法氏囊病Vero细胞弱毒疫苗（VCV－901）兔疫鸡的抗体检测

鸡传染性法氏囊病Ｖｅｒｏ细胞弱毒疫苗（ＶＣＶ－９０１）兔疫鸡的抗体检测马兴树（河北邯郸农专牧医系）近年来，国内外养鸡生产者对鸡传染性囊病（ＩＢＤ）的防制工作极为重视，我国对ＩＢＤ的疫苗研究也取得了一定进展，但ＩＢＤ弱毒疫苗的生产均由鸡胚或鸡胚细胞制备...     

河南省鸡传染性法氏囊病病毒株的分离及其某些生物学特性

应用鸡胚培养、电镜观察、血清学试验及病理组织学检查,分离与鉴定了来自河南省鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）免疫鸡群Ｈｅ１、Ｈｅ２、和Ｈｅ３三株ＩＢＤＶ毒株。鸡胚传代试验表明,Ｈｅ１和Ｈｅ２株连续传代到第４代出现规律性死亡和ＩＢＤ病变,而Ｈｅ３株在第１代时鸡胚即全部死亡,且出现ＩＢＤ典型鸡胚病变。Ｈｅ１、Ｈｅ２和Ｈｅ３毒株对易感鸡致病力有一定的差异。病死率分别为２０％、１０％和４０％,多数为弱毒株。免疫保护试验证明,用常规的ＩＢＤＶ血清Ｉ型病毒株Ｂ２疫苗对Ｈｅ１、Ｈｅ２和Ｈｅ３毒株的免疫保护试验,与对照组相比保护率分别为０％、０％和１０％。未死亡扑杀的免疫试验鸡法氏囊有不同程度的病理组织学病变,表明Ｉ型毒株疫苗对ＩＢＤ基本上无免疫保护作用。所分离的毒株可能是ＩＢＤＶ的变异株。     

新城疫病毒在不同的细胞上增殖特性的研究

研究新城疫病毒（Ｎｅｗｓｃａｓｔｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ Ｖｉｒｕｓ,ＮＤＶ）可,弱毒株在不同的传代细胞的生物学特性。Ｆ４８Ｅ８强毒株在ＢＨＫ、Ｖｅｒｏ和ＣＥＦ中都能增殖并产生细胞病变,而Ｖ４生弱毒株不能在ＢＨＫ和Ｖｅｒｏ中增殖,当ＭＥＭ含１０ｕｇ／ｍＬ胰蛋白酶时,ＮＤＶ弱毒株在Ｖｅｒｏ中能较好地复制,将Ｖ４株在Ｖｅｒｏ中传代培养后,Ｖｅｒｏ中传代的Ｖ４毒株的ＨＡ较低,但毒力增强,ＢＨＫ中传代的Ｖ４毒     

鸡传染性法氏囊病河北野毒株的分离研究

采用血清学方法、鸡胚培养、病理组织学检查方法,从河北省不同年份鸡ＩＢＤ免疫鸡群中分离和鉴定了ＨＥ９３,ＨＧ９６,ＸＮ９８和ＨＱ９９ ４个毒株,４个毒株回归鸡的死亡率分别为５０％,４０％,０％和１０％,从年份上看,ＩＢＤＶ毒力有逐渐减弱的趋势。接种鸡胚并传代,前２个毒株均在第一代时鸡胚全部死亡,且出现典型的鸡胚病变,而后２个毒株,初代培养鸡胚不死亡,当传至第４代才出现大部分死亡和鸡胚病变。ＨＥ９３、     

鸡传染性法氏囊病病毒适应于Vero细胞的初步研究

将国内６个省市（广东、巾东、河北、辽宁、、新疆和北京）的７株鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）的法氏囊组织处理后，直接在Ｖｅｒｏ细胞上盲传３～４代，均能不同程度的产生特征性细胞病变效应（ＣＰＥ），并通过选用具有广谱性的抗法氏囊病病毒的单克隆抗体（ＩＢＩ）Ｖ－ＭｃＡｂ）采用间接免疫荧光（ＩＦＡ）和碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶桥联酶显色技术（ＡＰＡＡＰ）的方法对７株分离毒的Ｖｅｒｏ第８代细胞进行鉴定，又用逆转—聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对７株分离毒的第１４代Ｖｅｒｏ细胞毒进行进一步证实，结果表明这７株ＩＢＤ囊毒均适应于Ｖｅｒｏ细胞上，这是国内首次报道将组织毒直接适应于Ｖｅｒｏ传代细胞上。     

传染性法氏囊病病毒Vero细胞培养条件优化的研究

鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）在Ｖｅｒｏ细胞上增殖条件的优化研究结果表明，ＩＢＤＶ在Ｖｅｒｏ细胞上敏感性有所提高；降低轿清含量，中性ｐＨ环境，适当高的细胞密度有利于ＩＢＤＶ的增殖。     

IBD野毒株的培育

由国内ＩＢＤ高发地区分离到一株ＩＢＤ野毒,使现地鸡群发病率９６％,死亡率６０％以上,为一株超强毒。将该毒株分离,纯化,经鸡胚及鸡胚成纤维细胞传代,得到一株ＩＢＤ超强毒的细胞适应株,毒价高达２．０×１０＾８ＰＦＵ／ｍｌ以上。回归本动物,经免疫原性试验,致病性试验及返祖试验,证明该毒株免疫原性较好而致病力降低。     

IBD野毒株的培育

由国内ＩＢＤ高发地区分离到一株ＩＢＤ野毒，使现地鸡群发病率９６％，死亡率６０％以上，为一株超强毒。将该毒株分离，纯化，经鸡胚及鸡胚成纤维细胞传代，得到一株ＩＢＤ超强毒的细胞适应株，毒价高达２．０×１０８ＰＦＵ／ｍｌ以上。回归本动物，经免疫原性试验，致病性试验及返祖试验，证明该毒株免疫原性较好而致病力降低。     

鸡胚气管环纤毛对不同类型AIBV毒株的敏感性

以鸡胚气管环纤毛运动作指示系统,应用鸡胚气管环组织培养不同血清型的７个标准ＡＩＢＶ毒株及５个不同致病型的分离毒株。采用５０ＣＤ５０病毒量ＩＢＶ毒株感染鸡胚气管环培养物,观察感染后不同时间气管环纤毛的存活率。结果表明,鸡胚气管环纤毛对不同血清类型的ＡＩＢＶ毒株敏感性各具特征。     

鸡病毒性关节炎病毒适应Vero细胞的研究

５株已适应鸡胚细胞的ＡＶＡＶ在Ｖｅｒｏ细胞上传２～５代后各毒株均能产生明显的ＣＰＥ和较高的病毒滴度，而２株非鸡胚细胞适应株（分别为鸡胚毒和野外组织毒）在Ｖｅｒｏ细胞上盲传７代，仍无明显的ＣＰＥ出现。这一结果初步表明Ｖｅｒｏ细胞能用于已适应鸡胚细胞的毒株的增殖。而不能用于病毒的分离。吸附时间与冻融次数明显影响病毒的适应进程，以吸附１小时、冻融２次以上为佳。ＡＶＡＶＪＮ－１株能在Ｖｅｒｏ细胞上产生蚀斑，大小为２．７～４．４ｍｍ，出斑时间为接种后４～５天，Ｖｅｒｏ细胞用于中和试验，测得Ｓ（１１３３）株免疫鸡血清的小和效价为１：８０。     

间接免疫荧光检测禽脑脊髓炎病毒抗体

ＡＥＶＶａｎＲｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚神经胶质细胞（ＣＥＢ）传代,用盲传至第６代的ＣＥＦ、ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法,确定了待检血清稀释度１∶１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释度１∶１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ、ＭＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＩＶ、Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验,证实该法特异性强,且简单、方便、经济,适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。     

间接免疫荧光检测禽脑脊髓炎病毒抗体

ＡＥＶ Ｖａｎ Ｒｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞和鸡胚神经胶质细胞传代，用盲传至第６代的ＣＥＦ，ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法，确定了待检血清稀释度１：１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释率１：１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ，ＭＤＶ，ＩＢＤＶ，ＡＩＶ，Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验，证实该法特性强且简单，方便经济，适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。     

猪伪狂犬病病毒鄂A株的分离鉴定

从湖北省某些猪场大批死亡的新生仔猪的脑及内脏中分离到的多株病毒,并用其中一代表毒株进行了全面鉴定。该病毒株在仓鼠肾传代细胞上连传１５代均出现典型细胞病变,用适应ＢＨＫ－２１细胞的病毒接种鸡胚成纤维细胞,Ｈｅｌａ细胞,Ｖｅｒｏ细胞,犊牛睾丸原代细胞,猪肾传代细胞ＩＢＲＳ－２均出现典型细胞病变,在电镜下可见到典型的伪狂犬病毒病粒子,病毒对５－碘脱氧尿核苷,氯仿,胰蛋白酶,乙醚敏感,在ｐＨ５．０～９．０     

鸡,鸭体内传染性法氏囊病病毒的分离及理化性质比较

从疑似传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病鸡及同群饲养的鸭体内各分离到１株病毒，用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ试验证明两病毒均为ＩＢＤＶ，病毒血清型为Ⅰ型。病毒可致死鸡胚，适应于鸡胚成纤维细胞并产生细胞病变（ＣＰＥ）。理化性质比较表明，两病毒为同源ＩＢＤＶ。研究表明，鸭可成为ＩＢＤＶ的携带者或传染源。     

表达传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组鸡痘病毒的构建及其免？…

以脂质体转染技术构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）ＶＰ２基因的重组鸡痘病毒ＦＰＶ－ＶＰ２,该病毒性在鸡胚成纤维细胞及鸡体内均能稳定产生子代病毒,经翅皮下５×１０＾５ＰＦＵ／羽免疫１日龄ＳＰＦ鸡,免疫后４周以１００ＬＤ５０／羽ＩＢＤＶ超强毒株Ｇ株攻毒,获得了５／６的保护,但不能有效预防临床发病及法氏囊受损萎缩,实验结果证明了ＶＰ２是ＩＢＤＶ的宿主保护性抗原,提示Ｔ细胞介导的免疫可能在ＩＢＤＶ     

表达传染性法氏囊病病毒VP2基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫保护性研究

以脂质体转染技术构建了表达鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）ＶＰ２基因的重组鸡痘病毒ＦＰＶ－ＶＰ２，该病毒在鸡胚成纤维细胞及鸡体内均能稳定产生子代病毒，经翅皮下５×１０５ＰＦＵ／羽免疫１日龄ＳＰＦ鸡，免疫后４周以１００ＬＤ５０／羽ＩＢＤＶ超强毒株Ｇ株攻毒，获得了５／６的保护，但不能有效预防临床发病及法氏囊受损萎缩。实验结果证明了ＶＰ２是ＩＢＤＶ的宿主保护性抗原，提示Ｔ细胞介导的免疫可能在ＩＢＤＶ的免疫中起着较为重要的作用。本研究为ＩＢＤＶ重组病毒疫苗研制进行了有益探索。     

传染性法氏囊病病毒的生态学与流行病学研究

血清学调查结果表明,麻雀、鸭、鹅等均可自然感染传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）,其血清阳性率分别为７．４％（４／５４）,９５．５％（３６３／３８０）和９．４％（１１／１１７）。从鸭和麻雀分离到的ＩＢＤＶ可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞,并产生ＣＰＥ,对ＳＰＦ鸡有致病性。病毒核酸和结构蛋白的电泳分析结果表明,鸡源、鸭源和麻雀源ＩＢＤＶ均有２条核酸带,５条蛋白带,毒株间的病毒核酸及结构蛋白电泳迁移率无显著差异,但其结构蛋白的相对含量不尽一致。经鉴定,鸡源、鸭源和麻雀源ＩＢＤＶ均属血清Ⅰ型,为同源病毒。本研究结果提示,鸡并非是ＩＢＤＶ的唯一自然动物宿主,非鸡禽鸟类宿主的存在可引起ＩＢＤ的传播和续源流行,也为ＩＢＤＶ的变异提供了特殊的生态条件,成为诱导ＩＢＤＶ变异的另一重要因素。