火炬松胚性愈伤组织的诱导及体胚的形成

实验表明，火炬松以种胚诱导愈伤组织，一年中７月份是球果的最佳采集期。５月份获得的种胚未诱导出愈伤组织，６、７、８月份的诱导率分别为５５．０％、８８．０％和６６．０％。愈伤组织进行悬浮培养，观察到体胚形成。     

菊花胚性愈伤组织诱导及分化研究

以12个菊花品种为试材,采用三步培养法研究了胚性愈伤组织诱导、分化的特点。结果表明：胚性愈伤组织共有4种类型,其中黄绿色致密颗粒状胚性愈伤组织最好;‘玉人面’、‘铺地金’、‘紫妍’、‘杭白菊’间接体细胞胚发生的效果较好。     

兴安落叶松的胚性愈伤组织诱导与体胚发生研究

对兴安落叶松合子胚诱导胚性愈伤组织及体细胞发生进行研究,旨在解决落叶松无性系快速繁殖问题,对于遗传改良以及人工种子生产有重要意义。研究结果表明:1/4LP(改良)培养基最适宜诱导胚性愈伤组织,同时添加激素6-BA 5×10~(-6) M、NAA 5×10~(-8) M的培养基中体胚诱导率较高,诱导效果较好。     

马尾松幼胚胚性愈伤组织诱导的研究

利用马尾松未成熟胚为外植体,在预备实验的基础上,通过对不同时期不同家系马尾松幼胚的采集、接种,诱导产生胚性愈伤组织,计算实验数据,利用SPSS13进行数据分析。结果表明:以LP为基本培养基,最易诱导出胚性愈伤组织的采种时期是4月中旬至5月下旬;在这一时期不同家系对诱导率影响的差异不显著;随着幼胚成长,胚性愈伤组织的诱导率也逐步下降;马尾松幼胚的胚性愈伤组织诱导过程需在暗培养条件下进行;在初步试验中,诱导胚性愈伤组织最佳的是第③号激素处理。     

思茅松胚性愈伤组织的诱导

以思茅松成熟胚和不同发育时期的未成熟胚为外植体,在DCR、1/2LM和1/2P6培养基上分别添加不同种类及质量浓度组合的植物激素,进行胚性愈伤组织诱导试验.结果表明:一定激素质量浓度范围内的DCR和1/2LM培养基上,成熟胚可以诱导愈伤组织,但都为非胚性愈伤组织;思茅松不同发育时期的未成熟胚在含2,4-D 1.1 mg.L-1、BA 0.45 mg.L-1和KT 0.43 mg.L-1的1/2P6培养基上也可以诱导产生愈伤组织,但只有用处于顶端分生组织原基还不能明显可见时的未成熟胚为外植体进行诱导,才可以得到胚性愈伤组织,诱导率为1.8%;思茅松未成熟球果在普文林场思茅松种子园内最佳采样时期为7月下旬.     

白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。     

沙地云杉胚性愈伤组织诱导的研究

<正>针叶树种在世界上分布广泛,在林木类群中也有着非常重要的作用。云杉属植物在全球有40余种,是松科植物中比较重要的一个属。我国云杉属植物资源较为丰富,种类也很多,集中分布于东北、西北、华北、西南地区,一般垂直分布。以四川西部和云南西北部以及西藏东部最为丰富,主要有鳞皮云杉、油麦吊云杉、紫果云杉、丽江云杉、青杄等。沙地云杉生长在土质松软、贫瘠的恶劣环境中,气候冬     

人心果成熟胚离体培养及愈伤组织诱导

对越南人心果的成熟种胚进行离体培养诱导无菌苗．最佳培养基是MS,最佳激素配比是NAA0．2mg／L BA5．0mg／L。再以无菌苗的茎为外植体进行不定芽的诱导试验,其结果表明．不定芽诱导的最佳培养基及其激素配比为MS NAA0．2mg／L 2．4-D5．0mg／L．最佳环境条件是光照13h／d．光强2000lx．温度30℃。而以无菌苗的幼叶为外植体进行愈伤组织诱导和继代培养的最佳培养基为MS 6-BA2．5mg／L 2．4-D1．0mg／L 1AA0．5mg／L。在继代培养过程中,5mg／L或10mg／L的AgNO3和2000mg／L PVP可抑制愈伤组织褐变。     

杂种落叶松胚性愈伤组织诱导的研究

以杂种落叶松兴7×日77-2、日12×兴9、日3×兴9、日3×兴2、日5×兴9未成熟合子胚为外植体,初步建立杂种落叶松胚性愈伤组织诱导体系。结果表明:不同杂种落叶松在不同培养基和蔗糖浓度下的诱导情况不尽相同,基本培养基中MSG与MS培养基的诱导效果比较好,激素浓度的差异对杂种落叶松也有影响,2,4-D浓度为2.0 mg/L时,诱导率高,蔗糖浓度为30 g/L能诱导出胚性愈伤组织,高浓度的蔗糖反而抑制了胚性愈伤的形成。ABA分别为0、5、10、20、30 mg/L的5个处理中,除对照及ABA30 mg/L时没有诱导出体细胞胚,其他试验组均有一定数量的体细胞胚,但诱导率较低。几种杂种落叶松胚性愈伤组织诱导最适合的采样时间是7月中旬。     

丽格海棠胚性愈伤组织的诱导与胚状体发生

将丽格海棠叶片接种于含有不同种类和浓度生长素的培养基。结果表明，诱导叶片胚性愈伤组织发生的最适培养基为MS＋6-BA0．5＋2，4-D1．5，最佳黑暗培养时间为10d。组织切片观察表明，胚状体起源于胚性愈伤组织表层的部分胚性细胞。     

水曲柳不同外植体胚性愈伤组织诱导及植株再生

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料,在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明,附加了5.0 mg·L^-1 NAA和2.0 mg·L^-1 6-BA的激素配比的MS培养基,为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基;在5种不同的外植体中,成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体;在诱导胚性愈伤组织中,成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中,WPM为最佳基础培养基,附加0.1 mg·L^-1 6-BA和0.15 mg·L^-1 2,4-D的激素配比,胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中,MS培养基内添加1.0 mg·L^-1 ABA时,体胚的诱导率最高,达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L^-1 IBA和1.0 mg·L^-1 IAA的激素配...     

长白落叶松胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生

【目的】以长白落叶松的未成熟合子胚为外植体,进行胚性愈伤组织的诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的相关研究,揭示影响长白落叶松胚性愈伤组织诱导的关键因素,并探讨继代培养过程中添加不同种类、浓度的生长调节剂对胚性愈伤组织增殖及体胚发生的影响。【方法】采集长白落叶松3个家系优良单株的种子,诱导胚性愈伤组织,比较外植体采集时间、家系、2,4-D浓度及基本培养基对胚性愈伤组织诱导的影响。诱导出的胚性愈伤组织继代于含不同种类、浓度生长调节剂的增殖培养基,通过体胚发生途径获得体细胞胚。选取发育正常的体胚进行萌发,待体胚生根后移栽。【结果】不同时间采集的未成熟合子胚,其胚性愈伤组织诱导率存在较大差别,授粉后63天的合子胚诱导率为5.61%,授粉后70天诱导率为22.35%,而授粉后80天未诱导出胚性愈伤组织;‘长77-22’、‘长77-37’和‘长73-50’3个家系胚性愈伤组织的平均诱导率分别为6.69%,11.17%和3.11%;2,4-D浓度对长白落叶松胚性愈伤组织诱导具有一定影响,在一定范围内胚性愈伤组织的诱导率会随2,4-D浓度升高而升高,当其浓度为1.5 mg·L~(-1)时胚性愈伤组织的诱导率最高,达到11.11%,而当2,4-D浓度超过1.5 mg·L~(-1)时,胚性愈伤组织的诱导率则开始下降;BM,MS,S培养基均能诱导出胚性愈伤组织,其中,BM培养基的诱导率最高,S培养基的诱导率次之,MS培养基的诱导率最低。胚性愈伤组织在含2,4-D 0.3 mg·L~(-1)、6-BA0.1 mg·L~(-1)及KT 0.1 mg·L~(-1)的BM培养基上增殖15天可获得相对较多的胚性愈伤组织,增殖率为345.93%;在含2,4-D 1.5 mg·L~(-1)、6-BA 0.5 mg·L~(-1)及KT 0.5 mg·L~(-1)的BM培养基上培养14天,再经诱导可获得较多的体细胞胚胎,每克愈伤组织平均诱导179.87个体胚,并且这些体胚的萌发率及植株再生率相对较高,分别为75.00%,66.67%;再生植株移栽成活率为27.08%。【结论】不同长白落叶松家系的胚性愈伤组织诱导率不同,散粉后70天的合子胚适合诱导胚性愈伤组织,基本培养基为BM,添加2,4-D 1.5 mg·L~(-1)。胚性愈伤组织长期继代在含高浓度生长调节剂的培养基上易丧失胚性,且增殖速度慢,但体胚的发生量及萌发率相对较高;适当降低生长调节剂浓度利于愈伤组织保持胚性及增殖,但体胚的发生量及体胚的萌发率有所下降;当培养基中生长调节剂浓度较低时,不利于愈伤组织的增殖,但仍能使其胚性长期保持;采用浓度为0.5 mg·L~(-1)的NAA代替0.15 mg·L~(-1)的2,4-D有助于胚性愈伤组织的增殖,并能在一定程度上提高体胚的萌发率。因此,可根据不同阶段的培养目的,选择添加不同种类和浓度生长调节剂的增殖培养基进行继代。     

火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究唐巍欧阳藩（中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京１０００８０）郭仲琛（中国科学院植物研究所北京１０００９３关键词火炬松,体细胞胚胎发生,植株再生本文于１９９６年１０月２８日收到。国家“８６３”资...     

华北落叶松胚性愈伤组织诱导影响因子的研究

以成熟合子胚为外植体,用完全随机、正交设计等试验方法加之组培技术来研究影响华北落叶松(Larix princi-pis-rupprechtii)胚性愈伤组织诱导的几种主要因子。结果表明:诱导胚性愈伤组织过程中的最佳灭菌方式为2%Na-ClO灭菌30 min,剥皮、去胚乳处理。其中污染率和NaClO的灭菌时间呈负相关:NaClO灭菌时间越长,污染率越低。诱导胚性愈伤组织的最佳琼脂浓度为4 g·L-1,且过高和过低的琼脂浓度不仅降低了其诱导率,提高了愈伤组织的褐化水平,也影响了外植体的发育形态。外源激素的正交试验结果表明:2,4-D是主要影响因子,对诱导率的影响显著,其次是KT,最后是6-BA。最佳的植物外源激素配比是2,4-D 1.8 mg·L-1+6-BA 0.3 mg·L-1+KT 0.3 mg·L-1。     

云南松成熟合子胚的胚性愈伤组织诱导条件探究

利用DCR培养基,采用正交设计,诱导云南松(Pinus yunnanensis)成熟合子胚的愈伤组织,并根据实验进展,进一步精确激素浓度配比.结果表明,用5%的次氯酸钠溶液消毒,在DCR培养基中添加10 mg/L 2,4-D与1.5 mgrL6-BA为最佳诱导激素浓度配比,用此方法较可以高效地诱导出云南松成熟合子胚的胚性愈伤组织.     

桂花幼胚培养及愈伤组织增殖诱导

采用不同培养基对桂花胚的培养进行了试验研究,结果表明:MS 1-1.5 mg.L-16-BA有利于桂花幼胚的萌发;MS 2 mg.L-16-BA 0.3 mg.L-12,4-D有利于幼胚苗的幼叶愈伤组织的诱导,诱导率高,且质地致密;B5 1.5 mg.L-16-BA 0.05 mg.L-1NAA有利于幼胚苗基部产生的愈伤组织的增值诱导,所形成的新愈伤组织呈淡绿色,且质地致密,生长很好,并能分化出根。     

激素对诱导湿地松成熟胚胚性愈伤组织影响的初步研究

本实验以湿地松(Pinus elliottii Engelm.)成熟合子胚为外植体在LP培养基上诱导胚性愈伤组织。研究2,4-D和6-BA对诱导胚性愈伤组织的影响。结果表明高2,4-D浓度对诱导形成胚性愈伤组织非常必要。不同激素配比对实验的结果影响较大,其中培养基组合为LP 2,4-D 12 mg.L-1 6-BA 4 mg.L-1可产生少量类似胚性愈伤组织的培养物。     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的研究

以红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)成熟合子胚为基准试验材料,对红松愈伤组织诱导的影响因素进行了初步研究。结果表明,不同的培养基对有效愈伤组织的诱导效果不同,初始诱导应选用LM培养基使外植体完全脱分化,反复继代后可以产生有效愈伤组织,供试的其他培养基继代后则极少产生有效愈伤组织;不同的激素组合和浓度配比对有效愈伤组织的诱导率影响不同,2,4-D是愈伤组织启动的不可或缺的植物生长调节剂,其作用远远大于NAA。在LM+2mg.L-1 2,4-D+0.5mg.L-16-BA的诱导培养基中加入0.5mg.L-1 KT或0.5mg.L-1 TDZ,可明显提高有效愈伤组织的诱导率(可达75.7%)。