苦马豆抗盐愈伤组织突变系的筛选

为获得苦马豆抗盐愈伤组织突变系及筛选抗盐系的适合盐浓度,采用苦马豆子叶外植体在添加1.79 mg/L 2,4-D和1.15 mg/L Kt的MS培养基上诱导的愈伤组织为材料,经不同盐浓度(100,200,280 mmol/L)条件下胁迫,并测定其在不同时间(0,3,6,9天)胁迫处理后的可溶性蛋白含量、SOD和POD活性及丙二醛与脯氨酸含量等生理指标,以确定筛选抗盐系的适合盐浓度.验证性试验显示,200 mmol/L NaCl胁迫下比100 mmol/L胁迫获得的抗性愈伤组织的数量多,而280 mmo儿胁迫下无抗性愈伤组织产生,表明获得苦马豆抗盐愈伤组织突变系的适宜盐浓度为200mmol/L NaCl.     

γ射线辐射诱变培育杨树耐盐新品系

本研究以"加引"组培苗茎段培养获得的胚性愈伤组织为辐射诱变材料,研究了用γ射线(60Co)辐射诱变并在含盐培养基上定向筛选耐盐变异体的方法。试验比较了茎段、叶片和叶柄等不同器官材料诱导胚性愈伤组织的效果,发现以茎段的胚性愈伤诱导率最高,达到100%;愈伤分化培养48 h后开始有胚性细胞分化,72~96 h有大量胚性细胞形成,是进行γ射线辐射处理的最佳时期;通过不同辐射处理剂量比较分析发现30 Gy较接近半致死剂量;经过辐射后的胚性愈伤分别在附加NaCl 0.4%、0.8%、0.5%的培养基上进行分化、继代、生根培养来定向筛选耐盐变异体。本试验通过诱变筛选得到生根试管苗460株,通过在含盐量0.4%~0.5%的人工盐池里进一步筛选获得1个既耐盐又速生的优系——"耐盐碱光兆1号杨"。其植株水平的试管内耐盐性检测的结果表明,耐盐碱光兆1号杨比亲本的耐盐性明显提高;在山东盐碱地上立地试验结果显示在相同含盐量的盐碱地上其速生性超过了中天杨和107杨两个对照品种。     

北海道黄杨叶片离体培养及其细胞耐盐性

以北海道黄杨叶片为材料进行愈伤组织诱导及细胞增殖培养试验,同时开展不同浓度NaCl胁迫下愈伤组织培养,探讨外源激素对叶片离体培养的影响及其愈伤组织的耐盐性。结果表明,北海道黄杨叶片诱导愈伤组织最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.3 g/L,有利于愈伤组织增殖的激素为2,4-D0.5 mg/L;0.2%NaCl胁迫对愈伤组织生长影响较小,NaCl浓度高于0.4%时,随盐浓度升高愈伤组织脯氨酸含量增加,生长量急剧降低。     

金娃娃萱草组培苗耐盐性研究

以金娃娃萱草茎段诱导出的愈伤组织和丛生苗为外植体,在不同Na Cl浓度的培养基上进行增殖和生根培养,观察盐胁迫对其影响。结果表明:不同盐浓度对外植体根系生长发育的影响大于对地上部分的影响;外植体在盐胁迫下多代转接后,耐盐性均得到提高,这说明盐胁迫下的多代转接是一条获得优良耐盐突变体的有效途径。     

EMS诱变处理定向筛选猕猴桃耐盐突变体研究

用EMS(甲基磺酸乙酯)诱变处理海沃德与红阳猕猴桃叶片,进行定向筛选耐盐突变体研究.结果表明,在相同EMS浓度处理下,胚性愈伤组织随着处理时间的增加发生的比率降低;在同一处理时间下,胚性愈伤组织随着EMS浓度增加发生的比率降低.当诱变率达50%致死剂量时,EMS处理浓度为6%、处理时间为2 h时,对海沃德与红阳猕猴桃的处理效果最佳,其后代的分化率可达到70%以上;在含NaCl 1.0 g/L的培养基上通过胚性愈伤组织诱导出海沃德和红阳的组培苗,海沃德11株,红阳组培苗10株,经继代培养筛选鉴定,诱变处理所得植株与正常培养植株相比,其耐盐性明显提高.     

绿豆耐盐愈伤组织的诱导

为探讨绿豆品种的耐盐性,利用离体培养技术,将吉绿3号绿豆种子在MS培养基中培养获无菌苗,然后将其子叶,下胚轴,胚根分别做为外植体放入诱导培养基产生胚性愈伤组织,培养基中放入的不同浓度NaCl。对愈伤组织盐胁迫处理,结果表明:当NaCl浓度由0.2%增加到1.0%时,愈伤组织的体积减小,颜色加深,由绿色变至黑褐色至死亡。在含有1.0%NaCl诱导培养基上的愈伤组织逐渐变成褐色,最终枯死;将经过0.6%NaCl诱导培养存活的愈伤组织、子叶、下胚轴、胚根分别转入含有0.6%、0.8%、1.0%NaCl的选择培养基(MS+6-BA 0.2mg·L-1+NAA 0.6mg·L-1)上,进行比较,鉴定愈伤组织的耐盐性。结果显示:胚根、下胚轴、子叶愈伤组织的最佳盐胁迫浓度分别为0.4%、0.8%、0.6%。因此,下胚轴的耐盐性最好,子叶一般,胚根最差。     

栽培番茄耐盐突变体的离体筛选

栽培番茄品种“矮黄”的子叶作为外植体诱导愈伤组织 ,用 Na Cl进行直接高盐胁迫筛选。结果表明 ,2 2 5 mmol/LNa Cl直接高盐胁迫获得了耐盐突变体 ,1 0株完整的再生耐盐植株 ,在 1 5 0 mmol/L Na Cl的盐胁迫下 ,成活率可达 70 % ,而未经胁迫筛选过的原始株成活率则为零。其中 ,1株耐盐突变株能正常开花、结果。对其后代离体培养的茎尖和下胚轴外植体耐盐性进行比较 ,表明其后代仍然保持耐盐性     

盐胁迫对航天诱变向日葵生理生化指标的影响

[目的]探究盐胁迫下航天诱变向日葵生理生化指标的变化。[方法]选用航天诱变向日葵作为试验材料,用不同浓度(0、0.3%、0.6%、0.9%、1.2%)Na Cl进行处理,分别测定其SOD活性、POD活性、MDA含量、可溶性蛋白含量、脯氨酸含量,分析盐胁迫对航天诱变向日葵生理生化指标的影响。[结果]随着盐浓度的增加,SOD活性随之上升,当盐浓度为0.6%时,SOD活性下降;POD活性随盐浓度的升高而上升;MDA、可溶性蛋白、Pro的含量随盐浓度的上升而下降,当盐浓度为0.9%时其含量呈增加趋势。[结论]航天诱变向日葵能在0.9%的盐浓度下正常生长。该研究结果可为筛选抗盐的向日葵新材料提供理论支持。     

60Co-γ辐射对马铃薯耐盐愈伤组织诱导的影响

[目的]为马铃薯辐射诱变育种研究提供科学依据。[方法]测定不同剂量60Co-γ辐射与不同浓度NaCl对马铃薯愈伤组织生长的影响,并在组织培养过程中定向筛选耐盐变异体。[结果]在辐射处理与盐胁迫的双重作用下,马铃薯的愈伤组织发生了一定程度的变异,使得愈伤组织对盐胁迫的耐受力有了大幅度的提高。[结论]当辐射剂量为40J/kg,NaCl浓度为2.0%时,对马铃薯愈伤组织的诱导效果最好。     

EMS诱变马铃薯抗寒突变体筛选

【目的】定向选择马铃薯抗寒突变体。【方法】以马铃薯品种费乌瑞它为材料,用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理费乌瑞它愈伤组织,结合添加L-羟脯氨酸(L-Hyp)培养筛选,定向选择抗寒突变体。【结果】诱变费乌瑞它愈伤组织的最佳EMS浓度是0.8%,处理时间4 h;L-Hyp最佳浓度为0.5%。经检测诱变后代再生苗脯氨酸含量明显高出对照,而电解质渗出率均低于对照。【结论】用EMS诱变处理马铃薯愈伤组织可获得抗寒突变体。     

马铃薯耐盐突变体的离体筛选

以4个马铃薯栽培品种的叶片为外植体进行耐盐突变体筛选,结果表明:不同品种愈伤组织的耐盐性存在差异,东农303、鄂1号两品种在细胞水平对NaCl的最大耐受质量浓度为8g/L,费乌瑞它为6g/L,夏波帝为4g/L。当继代次数低于10次,叶片耐盐愈伤组织在无盐胁迫诱导分化培养基上才有进一步诱导再生植株发生的能力;而在盐胁迫诱导分化培养基中,愈伤组织继代次数超过8次即很难继续分化再生。     

盐胁迫下耐盐苜蓿松散型愈伤组织生理生化特性变化

为了解盐胁迫下耐盐突变苜蓿的生理生化变化,以青睐苜蓿耐盐突变体的松散型愈伤组织和青睐苜蓿松散型愈伤组织为试材,用2%Na Cl溶液浸泡1 h,分析了该组织在盐胁迫下细胞中的可溶性糖、丙二醛、可溶性蛋白、游离脯氨酸等的含量,以及细胞膜透性、离子浓度和SOD、POD酶活性。结果显示:盐胁迫下耐盐松散型愈伤比对照组织的可溶性糖含量、POD酶活性、游离脯氨酸含量、K~+/Na~+分别高出0.757倍、0.266倍、6.525倍、0.700倍,SOD酶活性、丙二醛含量、细胞膜透性、Na~+、K~+浓度分别低1.807倍、0.878倍、0.553倍、2.903倍、1.296倍。所以,耐盐松散型愈伤组织在盐胁迫下表现出可溶性糖含量、POD活性、游离脯氨酸含量、K~+/Na~+增加,丙二醛含量、细胞膜透性、Na~+浓度降低,可溶性蛋白无明显变化。试验结果表明苜蓿耐盐突变愈伤组织具有更强的耐盐性。     

EMS诱变巨峰葡萄愈伤组织筛选抗寒突变体的研究

用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理巨峰葡萄愈伤组织,结合添加L-羟脯氨酸(L-Hyp)培养筛选,定向选择抗寒突变体。试验结果表明:诱变巨峰抗寒突变体的最佳组合为EMS浓度3%～5%,处理时间2h。经检测诱变后的再生苗愈伤组织的游离脯氨酸含量均有增加,丙二醛含量均有下降,酶活性均有增强。试验表明用EMS诱变处理巨峰葡萄愈伤组织可获得抗寒突变体。     

百合离体抗盐变异体的筛选及生理特性研究

用甲基磺酸乙酯(EMS)对百合离体叶片进行了处理。结果表明,随着处理浓度和处理时间的增加,叶片的分化率和存活率均下降,并筛选出其半致死浓度(0.6%)和处理时间(3 h)。利用筛选的EMS浓度和处理时间对离体叶片进行处理,在1%盐浓度胁迫下进行抗盐性突变体筛选,得到抗盐性诱变植株。经鉴定,其超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性增强,丙二醛(MDA)含量减少,细胞膜透性减小,可溶性蛋白含量增加,表明筛选的百合突变体比对照具有更强的抗盐性。     

披碱草属野生种质资源苗期耐盐性评价及相关生理机制研究

【目的】对披碱草属野生种质资源进行苗期耐盐性评价,并对其生理机制进行初步研究,用以发掘和利用具有优良耐盐性状的披碱草野生种质资源,并为利用生理生化指标进行苗期快速准确鉴定提供依据。【方法】设置对照（0）、0.4%、0.6%、0.8%和1.0%等5个土壤盐浓度水平,对披碱草属20份野生种质材料的苗期生长参数进行测定,在此基础上采用极差分类进行种质材料的耐盐性排序。测定不同盐浓度胁迫下的游离脯氨酸含量和细胞膜透性,以及抗坏血酸过氧化物酶（APX）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性的变化。【结果】随着盐浓度的增加,各供试材料的株高、分蘖、存活率及植株干重均呈现下降趋势,但不同材料对盐胁迫的响应有较大差异。随着盐浓度的升高,参试材料叶组织中游离脯氨酸含量呈上升趋势,在0.8%和1.0%盐浓度胁迫下,耐盐材料G5和G13的相对游离脯氨酸含量显著高于其它材料（P＜0.05）;而相对细胞膜透性显著低于其它材料（P＜0.05）;APX和SOD酶的活性也随着盐浓度的升高而升高,在0.8%和1.0%盐浓度胁迫下,耐盐材料G5、G13叶组织中APX和SOD的活性显著高于其它材料（P＜0.05）。【结论】20份野生披碱草种质材料在耐盐性上存在较大差异,耐盐性强的披碱草可作为耐盐性种质资源加以利用。植株苗期的游离脯氨酸、细胞膜透性、APX酶和SOD酶活性对盐胁迫浓度的变化响应灵敏,且在耐盐性不同的材料中变化差异显著,可以作为快速鉴定披碱草野生种质材料耐盐性的生理生化指标。     

大叶蒲公英愈伤组织耐盐突变体诱导与鉴定

为获得大叶蒲公英耐盐突变体,以其叶片为外植体,进行了愈伤组织耐盐突变体的筛选。结果表明,愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基分别为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.04 mg/L与MS+6-BA 0.4 mg/L+2,4-D 0.02 mg/L+NAA 0.2 mg/L。将继代培养5次的愈伤组织接种在含有不同质量浓度盐的诱导培养基上,经过4次耐盐胁迫,筛选出了耐盐的愈伤组织突变体。通过RAPD检测发现,在NaCl质量浓度为8、10、12 g/L的培养基上愈伤组织扩增条带与不含NaCl的培养基(对照)有差异,证明耐盐的愈伤组织中确实产生了DNA的突变。     

盐胁迫对半夏组培苗生长及生理指标的影响

采用组织培养方法,在培养基中添加Na Cl提供盐环境,分别用盐浓度0、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%处理3种半夏,处理后60 d测定各指标。结果表明,随着盐浓度升高,3种半夏组培苗生长情况总体表现为速度缓慢、增殖系数下降、生物量减少;细胞内有机渗透物质总体表现为可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、丙二醛含量升高;总生物碱表现为先下降再升高;SOD酶活性呈上升趋势;确定Na Cl浓度为0.8%为半夏组培苗盐胁迫的临界浓度;低盐浓度(0.2%)不影响半夏组培苗生长,半夏属于轻度耐盐植物;半夏耐盐性筛选的直接指标为生长状态、增殖系数、生物量、干物率,间接指标为可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、丙二醛、超氧化歧化酶活性;高盐浓度(0.8%、1.0%)胁迫下,生物碱可作为半夏的耐盐性筛选指标;耐盐性大小顺序为柳叶型半夏多倍体桃叶型半夏野生桃叶型半夏。     

源于大麦小孢子突变体的苗期耐盐性研究

以诱变结合小孢子培养获得的6份大麦突变体及其野生型亲本'花30'为供试材料,采用营养液盐胁迫水培方法,测定了苗期的形态指标(株高、分蘖数、干重)和不同部位(根、茎叶)钠/钾离子的含量,并对其耐盐性进行了评价。结果表明:盐胁迫下6份大麦突变体及其亲本苗期生长受到严重影响,株高、分蘖数和干重等形态指标均呈不同程度下降;不同突变体间以及突变体与亲本间在多个测定指标上存在差异,形态指标耐盐性综合评定3份突变体(A7-6、A7-12和A7-20)耐盐性优于亲本'花30',地上部K~+/Na~+含量比例表明2个材料(A7-6和A7-20)耐盐性优于亲本'花30',综合比较认为1份突变体(A7-20)苗期耐盐性优于亲本'花30'。     

盐胁迫提高金盏菊和万寿菊的耐盐性

金盏菊和万寿菊分属菊科金盏菊属和万寿菊属,为园林常用地被花卉。为研究其耐盐性,采用3种浓度的Na Cl溶液对2种菊花的种子进行盐胁迫处理,并在人工模拟盐环境条件下观察其耐盐性。结果表明,盐胁迫处理会提高菊花幼苗的耐盐性,不同浓度盐胁迫处理耐盐性效果不同;金盏菊以0.6%浓度的盐胁迫处理、万寿菊以0.4%浓度的盐胁迫处理耐盐性最好;金盏菊和万寿菊的耐盐性在形态方面主要表现为根较长、植株较高和茎较粗3个方面,在生理指标方面表现为叶片POD活性比较高,研究结果为利用盐胁迫处理提高菊科植物耐盐性提供了理论依据。     

EMS诱变处理定向筛选杨树耐盐突变体研究

应用EMS(甲基磺酸乙酯)处理杨树胚性愈伤组织,通过组织培养方法定向筛选杨树耐盐变异体。对EMS处理"加引"杨树胚性愈伤组织的浓度和时间进行了研究,结果表明:在同一EMS浓度下,随着处理时间的增加,胚性愈伤组织分化芽的比率降低;处理相同时间,随着EMS浓度增加,胚性愈伤组织分化芽的比率降低;不同EMS浓度处理后的胚性愈伤组织分化芽的比率与处理时间呈线性关系。约200万胚性细胞经4‰(V/V)浓度EMS处理36 h,并经逐级耐盐定向筛选,可得在含NaCl 0.5%(m/V)的培养基上生根的组培苗40株。经筛选优系,组培成再生植株,进行植株水平的试管内耐盐性检测,结果表明:诱变处理所得植株与对照相比,其耐盐性明显提高。同时,在未经耐盐定向筛选实验中得到29株叶片颜色发生变异的畸变植株,耐盐定向筛选试验中也得到4株同类型畸变植株。