脂多糖对猪肺泡巨噬细胞分泌IL-1β及TNF-α的影响

研究了脂多糖的浓度、刺激时间对猪肺泡巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α的影响。分别用不同浓度的脂多糖和不同的刺激时间处理猪肺泡巨噬细胞,收集细胞,提取RNA,用实时荧光定量PCR方法检测IL-1β、TNF-αmRNA表达水平;同时收集培养上清,用ELISA检测试剂盒检测IL-1β、TNF-α蛋白表达水平。结果表明,脂多糖浓度(1~1000ng/mL)对IL-1β、TNF-α影响显著(P<0.05);刺激时间(1~24h)对IL-1β、TNF-α影响显著(P<0.05),且蛋白的表达水平迟于mRNA的表达水平。脂多糖诱导猪肺泡巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α具有剂量、时间依赖性。     

刺五加对巨噬细胞产生NO与肿瘤坏死因子-α的抑制作用

用不同浓度刺五加提取物培养RAW264.7巨噬细胞,采用LPS与IFN-γ作为诱导剂,37℃培养24h,Griess试剂检测培养上清液中的NO含量,ELISA法检测培养上清液中的TNF-α含量。结果表明:刺五加提取物在浓度10～1000mg/L内对RAW264.7巨噬细胞分泌的NO具有极显著抑制作用(P<0.01),且呈剂量和时间依赖关系;刺五加提取物对TNF-α的分泌没有影响。这表明刺五加提取物可以显著抑制RAW264.7巨噬细胞产生的NO,而对肿瘤坏死因子-α的产生无明显抑制作用。     

板蓝根对脂多糖致HL-60细胞产生TNF-α及TACE的影响

目的：探讨板蓝根对脂多糖（Lipopolysaccharide．LPS）致HL-60细胞释放肿瘤坏死因子α（TNF-α）及肿瘤坏死因子α转换酶（TACE）的影响。方法：采用ELISA方法及RT—PCR技术。观察板蓝根对LPS诱导HL-60细胞分泌炎性细胞因子一TNF-α及TACEmRNA表达的影响。结果：板蓝根能有效抑制LPS诱导HL-60细胞释放的TNF-α（抑制率92．59％）。并对LPS刺激TACEmRNA表达增加具有明显的抑制效果。结论：板蓝根能通过抑制TNF-α过度释放和TACE表达增加发挥其抗炎作用。     

板蓝根对脂多糖致HL-60细胞产生TNF-α及TACE的影响

目的:探讨板蓝根对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)致HL-60细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)及肿瘤坏死因子α转换酶(TACE)的影响。方法:采用ELISA方法及RT-PCR技术,观察板蓝根对LPS诱导HL-60细胞分泌炎性细胞因子--TNF-α及TACEmRNA表达的影响。结果:板蓝根能有效抑制LPS诱导HL-60细胞释放的TNF-α(抑制率92.59%),并对LPS刺激TACEmRNA表达增加具有明显的抑制效果。结论:板蓝根能通过抑制TNF-α过度释放和TACE表达增加发挥其抗炎作用。     

金钗石斛多糖的研究进展

金钗石斛是我国的名贵中药,化学成分主要有多糖类、生物碱类和酚类等,其中多糖为主要成分之一.现代药理学研究表明,金钗石斛多糖具有调节免疫、抗肿瘤和抗氧化等功能,引起了众多专家学者的广泛关注.文中分类综述了金钗石斛多糖的含量、结构分析及生物活性等方面的研究工作,为金钗石斛多糖的开发应用提供参考.     

不同叶面肥对金钗石斛幼苗生长和药用成分含量的影响

为明确不同叶面肥对金钗石斛幼苗生长和药用成分的影响,在金钗石斛幼苗栽培基质上设置不同小区,喷施不同种类的叶面肥后,测定金钗石斛幼苗形态指标、多糖和石斛碱的含量.结果表明：不同叶面肥对石斛幼苗生长效果不同,喷施沼液肥效果最好,与不施肥相比,茎粗增加33％、根长增加67％、株高增加29％、分蘖数增加75％、叶片数增加79％、茎节数增加54％、产量增加67％,根多糖含量增加93％、茎多糖含量增加110％、叶多糖含量增加68％、茎部石斛碱含量增加156％.无机性叶面肥1、叶面肥2和多元素复合肥的施用效果差于沼液肥.所以喷施沼液肥能够显著促进金钗石斛幼苗的生长和药用成分含量的提高.     

不同附生树种对金钗石斛石斛碱含量的影响

[目的]测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。[方法]以贵州赤水仿野生3年苗为试验材料,不同树种继续附生生长1年,采用气相色谱内标法,测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。色谱柱:DB-1(30 m×0.25 mm×0.25μm);程序升温:初始温度80℃,10℃/min升温至250℃,保持5 min;进样口温度250℃;FID检测器温度250℃。[结果]不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量有明显差异,其中,杉木附生金钗石斛的石斛碱含量最高,为0.932%,枇杷、杨梅、龙眼附生金钗石斛石斛碱含量分别为0.825%、0.790%和0.601%。[结论]不同附生树种的金钗石斛石斛碱含量均符合2015版《中国药典》限量要求,该研究为确定适宜的附生树种提供参考依据。     

TNF-α对下丘脑神经元的影响研究进展

介绍了肿瘤坏死因子TNF-α的发现、结构及其作用的信号通路,并从神经元的发育、生存、离子平衡和神经递质释放等方面综述了近年来TNF-α对下丘脑的影响研究进展.     

金钗石斛复方对小鼠免疫功能的影响

为了研究金钗石斛复方对小鼠免疫功能的影响,将实验小鼠随机分为对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组;采用Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验及迟发性变态反应试验测试试验组小鼠的细胞免疫功能;采用抗体生成细胞检测及溶血试验测试其体液免疫功能;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验测试其特异性免疫功能.结果表明,与对照组比较,金钗石斛复方能够明显提高脾淋巴细胞增殖能力、溶血空斑数、小鼠抗体积数、巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力;金钗石斛复方对提高小鼠NK细胞活性能力无显著影响.金钗石斛复方对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫及巨噬细胞功能均有明显的增强作用.     

3种内生真菌诱导子对金钗石斛部分生化指标的影响

以石斛内生真菌菌丝体为诱导子,在不同浓度下对金钗石斛进行诱导,测定不同浓度诱导子对金钗石斛植物体内SOD、POD、PAL酶活性等生化指标。结果:不同内生真菌菌丝体对植物生理效应不同,菌株A菌丝体随着浓度的增大SOD活性逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降,POD、PAL随着菌丝体浓度的增大则逐渐减小;菌株B菌丝体随着浓度的增大SOD活性则逐渐减小,POD、PAL逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降;菌株C菌丝体随着浓度的增大SOD、POD活性逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降,PAL随着菌丝体浓度的增大则逐渐增大。研究表明,不同类型不同浓度诱导子对植物体内酶生理生化代谢产生不同影响。     

猪苓多糖对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮生成、iNOS活性和细胞内还原型谷胱甘肽含量的影响

目的 :观察猪苓多糖 (PPS)对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮 (NO)生成及其免疫调节作用和抗肿瘤作用机制。方法 :采用Griess反应、荧光法和DTNB比色法分别测定不同剂量的PPS作用小鼠腹腔巨噬细胞的NO生成量、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)活性及细胞内还原性谷胱甘肽 (GSH)含量的变化。结果 :PPS能使小鼠腹腔巨噬细胞NO生成增加 ,i NOS活性增高 ,并呈作用剂量依赖关系 ;PPS在刺激小鼠腹腔巨噬细胞NO合成同时 ,伴有细胞内GSH水平的降低 ,呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论 :PPS能提高小鼠腹腔巨噬细胞iNOS活性 ,增加NO合成 ,消耗细胞内的GSH。提示细胞内GSH可能起到调节巨噬细胞NO生成和保护宿主细胞免受NO介导的细胞毒作用     

干旱胁迫对金钗石斛幼苗生理生化的影响

用加有不同浓度聚乙二醇(PEG6000)(0,5%,10%,15%,20%,25%)的MS培养液模拟干旱胁迫,胁迫时间分别为3 d9、d和15 d,并测定干旱胁迫对金钗石斛幼苗生理生化特性的影响。结果表明:干旱胁迫可以引起金钗石斛幼苗脯氨酸、可溶性糖的积累,降低可溶性蛋白质相对含量,增大细胞质膜的相对透性;随着胁迫强度和时间的增加,各生理生化特性变化明显。     

种质与环境对金钗石斛药材品质的影响

将7个不同种质的金钗石斛苗分别在3个栽培基地进行多点栽培试验,测定多点栽培金钗石斛的外观性状、产量及活性成分含量,并结合各栽培基地的气象资料,采用数理统计软件分析种质与环境对金钗石斛药材品质的影响。结果表明,在同一栽培基地中,不同种质金钗石斛外观性状、产量、活性成分含量均存在差异,根据联合方差分析可知金钗石斛茎长、茎直径、产量及石斛碱含量主要受种质因素影响,叶长、叶宽、多糖含量主要受种质与环境因素交互作用影响。影响金钗石斛的主要气候因子是相对湿度、1月均温、平均最低气温、年平均温度;直径短边与年平均温度呈显著负相关,生长在年平均温度较低的地区金钗石斛直径短边较粗壮;叶长与1月均温呈显著负相关,1月均温较低的地区适宜金钗石斛叶片长度的生长;叶宽与年平均温度呈显著正相关,年平均温度较高的地区适宜金钗石斛叶片宽度的生长;多糖含量与年平均温度呈显著负相关,年平均温度较低的地区适宜金钗石斛多糖含量的积累。     

油菜花粉多糖对荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α产生及其mRNA表达的影响

 【目的】研究油菜花粉多糖（LBPP）对荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α的诱生及其mRNA表达的影响。【方法】通过动物抑制性肿瘤法制备肿瘤模型,采用双抗体夹心ELISA法检测IL-2、TNF-α含量,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测IL-2、TNF-α mRNA的表达。【结果】LBPP有明显抗肿瘤作用,200 mg•kg-1高剂量组抑瘤率可达51.26%,明显优于环磷酰胺46.22%;LBPP可显著促进荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α分泌（P＜0.01）,提高荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α mRNA的表达（P＜0.01）,高剂量组提高率分别达56.37%、105.24%、1364%和1289%。【结论】LBPP通过提高机体IL-2、TNF-α mRNA的表达而发挥抗肿瘤作用。     

内生真菌分泌物对金钗石斛酶活性的影响

测定了3株内生真菌分泌物对金钗石斛SOD、POD和PAL活性的影响。结果表明,随菌株37分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD活性呈先减小后增加趋势,POD和PAL活性逐渐增加;随菌株117分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD活性呈先增加后减少趋势,POD和PAL活性呈先下降后上升趋势;随着菌株120分泌物浓度的增加,金钗石斛SOD和PAL活性逐渐增强,POD活性先降低后升高。     

天然有机物添加对金钗石斛快繁的影响

为研究兰科植物组织培养常用有机添加物香蕉和马铃薯对金钗石斛快繁的影响,以云南临沧野生金钗石斛蒴果为材料,比较金钗石斛在添加不同类型或不同浓度添加物的种胚萌发培养基、原球茎分化培养基、幼苗扩繁培养基、生根培养基上的生长情况,结果表明,在MS培养基基础上添加马铃薯汁和香蕉汁均可促进金钗石斛种胚萌发和原球茎形成,最佳萌发培养基为MS+马铃薯汁30 mL/L+3%蔗糖;MS+马铃薯汁40～60 mL/L+3%蔗糖适于金钗石斛原球茎分化成苗培养,在MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+马铃薯汁60～80 mL/L+3%蔗糖条件下幼苗的扩繁系数为4.8～5.1;MS+NAA 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L+香蕉汁60～100 mL/L+3%蔗糖可用于金钗石斛生根培养。在金钗石斛组培快繁过程中,添加马铃薯汁可促进金钗石斛的种胚萌发、幼苗分化和扩繁,添加一定浓度的香蕉汁对金钗石斛生根具有较好的促进作用。     

迭鞘石斛所含多糖对小鼠免疫细胞影响的研究

[目的]研究迭鞘石斛（Dendrobinm chryseum Rolfe）所含多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的影响。[方法]分离提取小鼠脾脏淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,通过添加和不添加迭鞘石斛所含多糖进行体外培养,以MTT法检测这些免疫细胞增殖的变化情况。[结果]石斛多糖在中、高浓度时可极显著提高小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的增值（P﹤0.01）,低浓度时没有增强作用。[结论]迭鞘石斛所含石斛多糖在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖以及腹腔巨噬细胞的增殖有增强作用,说明对小鼠具有免疫增强作用。     

MIκBα对TNF-α诱导的大鼠肝星状细胞凋亡的影响

目的:探讨MIκBα对TNF-α诱导的大鼠肝星状细胞生长抑制和凋亡的影响。方法:首先用不同剂量的TNF-α对培养成功的MIκBα稳定转染组细胞和未转染大鼠肝星状细胞进行诱导,并使用间接免疫荧光法检测细胞中NF-κB/P65蛋白的表达,应用MTT法测定细胞生长率,然后用Annexin V-FITC和PI试剂分别进行双标记利用流式细胞仪对两组细胞的凋亡情况进行检测。结果:转染MIκBα的大鼠肝星状细胞的组NF-κB蛋白的表达明显被抑制,转染组较未转染组的细胞生长明显受到抑制,两者比较有统计学差异性。转染MIκBα的大鼠肝星状细胞有较高的凋亡率,而未转染MIκBα的大鼠肝星状细胞只有少许细胞发生凋亡,两者比较差异有统计学意义。结论:MIκBα表达可以抑制NF-κB蛋白的表达,从而提高大鼠肝星状细胞对TNF-α的敏感性,通过诱导肝星状细胞的凋亡,可能寻找到一条治疗肝纤维化的途径。     

不同移栽基质对金钗石斛试管苗成活和生长的影响

[目的] 研究4种移栽基质对金钗石斛试管苗成活率和生长的影响。[方法] 以苔藓、锯木屑、树皮、腐殖土为移栽基质,观测移栽试管苗的成活率、株高、茎粗、根数、根长、干重并比较其差异性。[结果] 移栽30 d的试管苗的成活率在锯木屑中达94.7%,在苔藓和树皮中达90%以上,在腐殖土中为77.7%;其株高在锯木屑中增加0.250 cm,在腐殖土中增加0.080 cm,其茎粗在苔藓中增加0.086 cm。移栽60 d的试管苗的株高在锯木屑中增加0.370 cm;其茎粗在腐殖土中增加0.210 cm,在苔藓中增加0.132 cm,在锯木屑中增加0.086 cm,在树皮中增加0.047 cm;其单株平均根数在苔藓中为5.1条,在腐殖土中为2.7条;其根长在锯木屑、树皮、苔藓和腐殖土中分别为4.6、4.2、3.7和3.5 cm,其全株干重在锯木屑中达16.33 mg,在树皮中为10.60 mg。[结论] 锯木屑是用于金钗石斛种苗生产的最佳移栽基质。