鼠伤寒沙门氏菌对鼠淋巴细胞MHC—1,MHC—2,ICAM—1和CD4表达的影响

应用流式细胞仪技术，检测经口灌服１０＾３个鼠伤寒沙门氏菌，４８ｈ后迫杀的Ｃ５７Ｂ１６／Ｈ２＾ｂ鼠外周淋巴结、肠系膜淋巴结、脾和外周血中淋巴细胞ＭＨＣ－１、ＭＨＣ－２、ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４ ４种受体的变化。结果表明，鼠伤寒沙门氏菌使外周血淋巴细胞ＭＨＣ－１、ＭＨＣ－２和ＩＣＡＭ－１的表达显著升高（Ｐ〈０．００１），肠系膜淋巴结中淋巴细胞ＭＨＣ－２、ＣＤ４和外周血淋巴细胞ＣＤ４的表达也有升高。     

雏鸡鼠伤寒沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌 混合感染的诊断

为对发病雏鸡群进行确诊,通过流行病学调查、病雏剖检观察及细菌分离鉴定,并对分离菌进行小白鼠接种观察,证实鸡群发生了由鼠伤寒沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌混合感染引起的禽副伤寒和禽伤寒,其中鼠伤寒沙门氏菌是主要病原,感染率高于鸡伤寒沙门氏菌。药物敏感试验结果表明,分离菌对多种常见抗生素表现敏感。     

鼠伤寒沙门氏菌IsrB基因的克隆及其同源表达

为同源表达鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)的lsrB基因,本研究通过PCR扩增得到S.typhimurium SL1344株的lsrB基因,其全长1020 bp,编码340个氨基酸.通过序列分析,该基因与S.typhimurium LT2的neA基因同源性为100％,与克雷伯氏菌(Klebsiella) A...     

细菌重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗研究进展

鼠伤寒沙门氏菌 ( St)是一种肠道致病菌 ,通过基因突变可构建许多鼠伤寒沙门氏菌减毒株 ,例如 :X40 72、X42 17、X45 5 0、X4989、X4990、 X40 64、 SL 3 2 61、 GID10 1、 GID10 5、GID10 6和 BRD5 0 9等 ,它们均是两个或多个基因的精确突变 ,其基因型和表型均很稳定 ,可用作构建细菌性疫苗的表达载体。国内外学者相继研制了肺炎链球菌、结核杆菌、百日咳杆菌、产单核细胞李斯特菌、鼠疫耶尔森菌、土拉弗郎西斯菌、铜绿假单胞菌、淋病奈瑟菌、牛布氏杆菌、破伤风梭菌、炭疽芽孢杆菌、沙眼衣原体和猪肺炎支原体等细菌的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗。文章着重讨论了这些疫苗的构建及其免疫机制等方面的研究进展 ,从而为新型菌苗的研制提供一种新的思路     

鼠伤寒沙门氏菌致突变试验的方法学研究

本文对鼠伤寒沙门氏菌致突变试验在国内实验条件下方法标准化进行了研究。国产试剂配制的营养肉汤可满足试验菌株的营养需求,烧瓶振荡培养10小时即可达1～2×10~9存活菌/ml,肉汤培养物稀释后测定OD650可监测细菌密度。国产五氯联苯和Aroclor 1254诱导的Sprague-Dawley及Wistar大鼠肝S9活化苯并(a)芘及2-乙酰氨基芴的能力相似(P>0.05)。本文还提出以点试验估计受试物毒性及以参比物减小或消除多次实验间的误差。     

黄芩苷对鼠伤寒沙门氏菌活性的影响

为研究黄芩苷对鼠伤寒沙门氏菌活性的影响,并为黄芩苷应用于防治鼠伤寒沙门氏菌疾病提供试验依据。采用最小抑菌浓度、抑菌圈和细菌生物膜测定等体外试验,检测体外黄芩苷对鼠伤寒沙门氏菌活性的影响;通过建立鼠伤寒沙门氏菌感染模型,将ICR小鼠腹腔注射鼠伤寒沙门氏菌1 010 CFU/ml·只,同时腹腔注射黄芩苷按1 g/kg连续给药7 d,观察黄芩苷对鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠的治疗效果。结果表明,黄芩苷的浓度在1.6、8、40、200μg/ml时,对鼠伤寒沙门氏菌的生长无抑制作用;浓度为1.6、8、40、200μg/ml时,均无抑菌圈生成;浓度为1.6、8、40、200μg/ml时,可以显著抑制鼠伤寒沙门氏菌生物膜的形成;黄芩苷按1 g/kg连续给药7 d,可以明显延长鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠的存活时间。结论：黄芩苷可以降低鼠伤寒沙门氏菌活性,可以应用于防治鼠伤寒沙门氏菌疾病。     

黄芩素对感染鼠伤寒沙门氏菌小鼠的影响

试验研究黄芩素对感染鼠伤寒沙门氏菌(STM)小鼠的影响.将80只小鼠分为空白组、STM组、黄芩素+STM组和黄芩素组.结果 显示:STM使感染小鼠的存活率明显下降,小鼠血清中炎性因子水平明显增高,脏器指数降低,肝脏和脾脏组织呈现明显的病理改变.黄芩素可使感染STM小鼠的存活率明显升高,小鼠血清中炎性因子水平降低,脏器指...     

鸵鸟鼠伤寒沙门氏菌的分离与鉴定

某鸵鸟场共饲养２５０余只非洲鸵鸟,自１９９８年１１月开始零星死亡,病鸟临床表现排便不畅,粪便呈卵石状;以胃,肠消化道粘膜充出血为主要病变特征。从送检的两只病死鸟鸟分离到两株细菌,经生化试验,血清学试验证实两株细菌均为鼠伤寒沙门氏菌,其抗原为４,５,１,２：ｉ：１,２。     

小灵猫鼠伤寒沙门氏菌的分离与鉴定

2只从市场收购的野生小灵猫急性发病死亡，病变为肝肿大、坏死、心内外膜出血、肠炎、肠外膜有出血斑点。经实验室检查，分离到1株致病力强的鼠伤寒沙门氏菌，抗原模式为1，4，5，12：1；1，2药敏试验结果表明对多种药物具有较强耐药性。     

减毒沙门菌介导的apo-tPA融合基因在鸡体组织的分布与表达

探讨以减毒沙门菌为载体,介导外源基因在动物体内的组织分布和表达的可行性。将编码人t-PA功能区的基因片段与鸡VLDLy组装前体apo-B100基因融合,定向克隆到荧光蛋白表达载体SV40启动子下游,构建pApo-tPA-GFP表达质粒。应用电转化法将pApo-tPA-GFP表达质粒转化减毒沙门菌,阳性减毒沙门菌经翅下静脉注入鸡体内,分别于注射后第1、2、3、4、5周随机剖检试验用鸡,无菌取内脏器官,经组织细菌培养、RT-PCR检测各脏器中基因分布,涂片荧光镜检基因表达情况。结果显示,在肝脏、脾脏和十二指肠均分离到沙门菌,PCR鉴定均为减毒沙门菌载体;RT-PCR检测在肝脏、脾脏、十二指肠中有目的基因存在;荧光检测在肝脏、脾脏中有荧光蛋白。结果表明,减毒沙门氏菌能够作为载体将目的基因有效的转入到动物体内,这一方法有望为动物转基因提供便捷、有效的途径。     

鸡体内减毒鼠伤寒沙门氏菌的繁殖和免疫反应

初步研究了cya和crp双基因突变减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)在鸡体内的繁殖和免疫反应。1、4或7日龄肉鸡分别经口感染10^8或10^9CFU减毒S．typhimurium X4550，接种后3—4周鸡体内特异性细胞和体液免疫达到最高峰。4日龄口服10^9CFu组免疫效果最佳，但1日龄高剂量组表现增重降低及免疫抑制。28日龄每鸡口服攻击10^10CFU强毒S．typhimurium 50333，各免疫组保护率为100％。同时免疫鸡还能全部或部分阻止沙门氏菌在肝脏和脾脏的繁殖。接种后病毒S．typhimurium在泄殖腔的检出时间为4周左右。     

表达破伤风毒素C片段的重组鼠伤寒沙门菌的构建与鉴定

为构建表达破伤风毒素C片段基因的减毒鼠伤寒沙门菌，将编码破伤风毒素C片段的基因插入到asd^＋的组成型表达载体pYA3333，转化asd基因突变的E．coli X6212。获得重组质粒pYA3333-TetC，再将重组质粒通过电穿孔法转入宿主菌，构建成表达破伤风毒素C片段基因的平衡致死的鼠伤寒沙门菌X4550（pYA3333-TetC）。免疫印迹试验证实，该重组菌表达的蛋白与预期的目的蛋白一致。重组菌X4550（pYA3333-TetC）的稳定性试验表明，在体外培养100代后，随机挑选的重组菌落全部都能生长，重组菌X4550（pYA3333-TetC）的生长曲线测定表明，X4550（pYA3333-TetC）和X4550（pYA3333）的生长状态基本一致。动物试验证明，该重组菌是安全的，破伤风毒素攻击后能提供良好的保护作用。     

EnMIC2重组减毒沙门氏菌的构建及免疫保护效果研究

成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株(GD)微线蛋白-2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌，在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达，SDS-PAGE分析表明，表达产物约占菌体总蛋白的8．6％，分子量大小约为35ku，与抗E．necatrix的高免血清进行Western Blotting，结果为阳性。将重组减毒沙门氏菌以10^8和10^9 CFU／鸡免疫4日龄岭南黄肉鸡，免疫后2周血清中可检测到特异性IgG，3周时抗体水平达到峰值，同时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫接种后3周，试验鸡分别经口攻击感染500个E．necatrix(GD)孢子化卵囊，结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线；但10^8和10^9CFU免疫组的卵囊总产量分别能降低26．62％和48．92％。     

鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白与新城疫病毒F蛋白的融合表达及免疫原性分析

应用PCR技术分别扩增鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白fliC基因以及含有新城疫病毒F蛋白部分表位的基因片段,通过柔性肽(Gly4Ser)2编码序列将二者串联并克隆到质粒pET30a+上,获得重组原核表达质粒pET-fliC-F,将其转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。Western blot证实重组菌表达的fliC-F融合蛋白能与小鼠抗fliC和抗F蛋白两种多抗血清发生特异性反应。动物试验显示,fliC-F融合蛋白能够刺激C3H/HeJ小鼠产生针对F蛋白的特异性血清抗体,说明原核表达系统表达的fliC-F融合蛋白具有较好的免疫原性。     

碳量子点应用于鼠伤寒沙门菌检测的初步研究

旨在制备基于碳量子点(carbon quantum dots,CDs)的免疫荧光探针,初步建立鼠伤寒沙门菌的快速检测方法,以柠檬酸和尿素作为碳源,利用微波法对碳量子点制备的微波时间、透析袋规格等条件进行了优化,再使用化学偶联法将碳量子点与鼠伤寒沙门菌抗体结合制备免疫荧光探针C-IgG,使之借助抗原抗体特异性结合和荧光实...     

减毒沙门氏菌为载体传递鸡球虫DNA疫苗的安全性、稳定性与免疫原性

将携带鸡柔嫩艾芙耳球虫5401基因的真核表达质粒pcDNA3—5401的减毒沙门氏菌ZJ111菌株（ZJ111／pcDNA3—5401）口服接种于3日龄非免疫鸡，2周后进行第2次接种。结果表明．利用该减毒沙门氏菌作为戴体具有相对安全性，用限制性酶切分析和PCR鉴定证实，体内试验和体外培养的重组质粒在受体菌ZJ111菌株内比较稳定。用ZJ111／pcDNA3—5401（10^4cfu）口服接种非免疫鸡．2周后用相同剂量加强免疫1次，二免后2周用柔嫩艾笑耳球虫孢子化卵囊攻击，观察其免疫效果。结果表明，重组ZJ111／pcDNA3—5401菌既能诱导产生抗鸡柔嫩艾芙耳球虫抗体，也能显著增强淋巴细胞增殖水平（P〈0．05）；其抗球虫指数为164．98。试验结果显示，利用减毒沙门氏菌为戴体传递DNA疫苗具有良好的安全性、稳定性和免疫原性。     

白色念珠菌和鼠伤寒沙门氏菌的荧光标记及其对细胞粘附作用的影响

比较了几种荧光染料标记白色念殊菌和鼠伤寒沙门氏菌的效果及其对病菌生长和与Hela细胞粘附能力的影响，旨在为建立简便有效的荧光标记方法奠定基础。将2种致病菌分别在添加了罗丹明B、荧光素Na盐或吖啶橙的LB培养液，37℃条件下培养1d，结果发现这2种致病菌都可以被荧光素Na盐标记，鼠伤寒沙门氏菌还可以被罗丹明B标记，但这2种致病菌都不能在吖啶橙中生长。测定致病菌荧光强度发现，随罗丹明B标记剂量的增加，致病菌荧光强度增强，而荧光素Na盐小剂量组处理的致病菌荧光强度最强。此外还发现，致病菌与Hela细胞的粘附不受荧光标记的影响。